全 文 ：滇白珠叶油抗菌活性的实验研究*
王岳峰　姚　宁　唐　波　西南交通大学药学院 (成都 614202)
　　摘　要　目的:探索民族药滇白珠叶油的抗菌活性。方法:利用药物浓度稀释培养对照
观察法确定最小抗菌浓度。 结果:滇白珠叶油有类似水扬酸甲酯的抗菌作用 ,
对大肠杆菌的抗菌浓度为 0. 3125% ,对金黄色葡萄球菌的抗菌浓度为 5% 。结
论:滇白珠叶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抗菌作用 ,但对前者的抗菌
效果是后者的 16倍。
　　主题词　中成药 /化学　滇白珠叶油
　　滇白珠 Gaultheria leucocarpa BL. Var. Grenulata
( Kur z. ) T. Z. Hsu亦称满山香、透骨草、老鸦泡、透骨香属
杜鹃花科白珠树属的常绿灌木 ,分布江南各省 ,四川、云
南为集中分布区 ,主产地气候温暖潮湿 ,生长于海拔 400
～ 3500m的向阳陡坡 ,具有治疗风湿性关节炎和止痛方
面的作用 ,为典型的民族药 [1]。 近年来对其根的化学成分
和抗菌活性的研究较为热门 [2、 3、 4]。 对其叶部挥发油的研
究仅有王岳峰等对江西井冈山产滇白珠化学成分的研究
报道 [5 ]。 本文是在笔者研究了滇白珠叶油化学成分几乎
百分之百为水扬酸甲酯的基础上 ,对其叶油进行与水扬
酸甲酯抗菌活性的比较研究的实验报道。
1　实验材料与仪器
1. 1　样品:采集四川峨眉山海拔 1200m高度的滇白
珠鲜叶 ,经植物学专家宋良科教授鉴定后 ,用水蒸汽蒸馏
法提取并分离得挥发油。
1. 2　对照品: 水扬酸甲酯 成都科龙化工试剂厂生
产。
1. 3　菌种: 大肠杆菌 ,金黄色葡萄球菌 ,四川省药品
检验所微生物室提供。
1. 4　培养基:蛋白胨 10g ,牛肉 3g , NaCl5g ,琼脂 15g ,
水 1000ml, p H= 7. 0～ 7. 2。
1. 5　主要仪器: 高压灭菌锅 血球计数板 ,生化培养
箱。
2　实验方法
2. 1　菌种培养: 分别在二个巳灭菌的琼脂培养基的
平板上 ,滴加 1ml大肠杆菌和金黄色葡萄球菌菌液 ,并将
平板放入生化培养箱中 ,于 37℃下培养 24h。
2. 2　菌液浓度的测定: 将琼脂平板固体培养基上生
长良好的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别转种于 4支盛
有刚配制灭菌过的肉汤蛋白胨液体培养基的试管中 ,于
37℃的培养箱中培养 15～ 20h,取出菌液试管 ,用血球计
数板计数法 ,显微镜下检测接种培养中的大肠杆菌和金
黄色葡萄球菌的菌液浓度 ,菌液浓度约为 9亿个活菌数 /
基金项目: 西南交通大学科技发展基金项目 ( 20041201)
ml。
2. 3　待检品浓度的稀释:取 20支洗净消毒后的试管
分二组 ,每组 10支并编号 ,精密吸取 0. 8m l滇白珠叶油和
水扬酸甲酯待检品 ,分别滴加到二组试管的第 1号管内 ,
再加入 2滴吐温 - 80,混匀后加入肉汤蛋白胨培养液 3.
2ml,其余各管分别加入培养液 2ml,其中 10号管内加 2.
1ml。然后在二组试管中 ,从第 1号试管内吸取 2. 0ml到第
2号试管内 ,依次重复进行递增稀释至第 8号试管 ,再从
第 8号试管内吸取 2. 0ml混合液弃去 ,第 9、第 10号管不加
待检品 ,从第 1号管开始 ,浓度依次为 20% 、 10% 、 5% 、 2.
5% 、 1. 25% 、 0. 625% 、 0. 3125% 、 0. 15625%。
2. 4　抗菌试验: 将浓度为 9亿个活菌数 /ml的大肠
杆菌菌液分别向二组待检品试管的第 1号至第 9号加入
0. 1m l,第 10号不加菌液作对照管 ,其中第 9号为阳性对
照管。同理再取 20支洗净消毒后的试管分二组 ,重复上述
操作 ,加入浓度为 9亿个活菌数 /ml的金黄色葡萄球菌菌
液。 将所有试管均加入 2滴吐温 - 80,摇匀后分别放入生
化培养箱中 ,于 37℃下培养 24h。 再从培养后的各试管中
分别吸取 1. 0ml混合液 ,转接到己灭菌过的固体培养基的
培养皿上 ,各培养皿均放入生化培养箱中 ,于 37℃下培养
24h后观察结果。
3　结　果　 (见下表 )。
不同浓度下的滇白珠叶油与
水扬酸甲酯抗菌效果对照表
菌种 抗菌液 　 试管号与细菌生长情况
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
大肠杆菌 滇白珠叶油 　无 无 无 无 无 无 无 有 有 无
　 水扬酸甲酯 　无 无 无 无 无 无 无 有 有 无
金黄色 滇白珠叶油 　无 无 无 有 有 有 有 有 有 无
葡萄球菌 水扬酸甲酯 　无 无 无 有 有 有 有 有 有 无
　　注:有: 表示有细菌生长 ;无: 表示无细菌生长
　　从上表的结果可知 ,第 10号管因未接菌种 ,故没有细
菌生长 ;第 9号管接入了菌种 ,但未加抗菌液 ,故有细菌生
长 ,符合对照和阳性对照的结果。抗菌液对大肠杆菌的抗
菌效果在第 8号管开始失效 ,而对金黄色葡萄球菌的抗菌
1385陕西中医 2005年第 26卷第 12期
效果第 4号管就开始失效。
4　结　论
4. 1　滇白珠叶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均
有抗菌作用 ,但对前者的抗菌效果明显优于后者 ,最低抗
菌浓度分别为 0. 3125%和 5% ,前者是后者的 16倍。
4. 2　滇白珠叶油对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的
抗菌效果 ,与水扬酸甲酯相比 ,几乎无任何差别 ,实验进
一步证明滇白珠叶油的主要化学成分就是水扬酸甲酯。
参考文献
　　 1　马小军 ,陈新磁 .民族药滇白珠资源研究 .中国中
药杂志 , 2001; 26( 2): 85- 89
2　马小军 ,陈新磁 .滇白珠地上部分化学成分研究 .
中国中药杂志 , 2001; 26( 12): 844- 846
3　马小军 ,陈新磁 .滇白珠及其同属植物研究进展 .
中草药 , 2001; 32( 10): 945- 949
4　张治针 ,果德安 .滇白珠抗菌抗炎和镇痛活性的
实验研究 .西北药学杂志 , 1999; 14( 2): 60- 61
5　王岳峰 ,李晓芳 ,俞志雄 ,等 .滇白珠叶油的化学
成分 .江西农业大学学报 , 1992; 13( 4): 250- 255
(收稿 2005- 04- 23;修回 2005- 08- 05)
漏芦对实验性 Ig A肾病小鼠治疗作用的研究
全红梅　尹秀梅　延边大学药学院 ( 133000)
张学武* 　延边大学医学院 ( 133000)
　　摘　要　目的: 与强的松作用比较 ,观察中药漏芦对 Ig A肾病的治疗作用。方法: 给小
鼠口服牛血清白蛋白 ( BSA)加尾静脉注射葡萄球菌肠毒素 B( SEB)的复合造
模方法 ,建立 IgA肾病模型。 定期观察镜下血尿 ,测定血肌酐 ( Scr)、尿素氮
( BUN)的含量。结果: 与模型组比较 ,漏芦提取物组、强的松组小鼠血尿、及
Scr、 BUN含量明显下降 ( P < 0. 01)。结论:中药漏芦对 Ig A肾病有一定的治疗
作用。
　　主题词　肾变病 /中医药疗法　@漏芦
　　漏芦 ( Radix Rhaponticl)属菊科植物 ,分布在陕西、辽
宁、山西及吉林等省 ,其主要成分为挥发油 ,有清热解毒、
消痈、下乳及消筋通脉等功效。 IgA肾病是常见的原发性
肾小球肾炎 ,据统计本病约占我国原发性肾小球肾炎的
36. 9%。目前对 IgA肾病尚缺乏特效治疗药物 ,我国自 20
世纪 80年代开始运用中医药治疗 IgA肾病以来 ,取得了
显著的成效 ,许多研究表明中药在治疗 Ig A肾病有其独特
之处。 本研究采用给小鼠口服牛血清白蛋白加尾静脉注
射葡萄球菌肠毒素 B的复合造模方法 ,建立 Ig A肾病的实
验模型 ,与强的松作对照观察漏芦对其病变的影响。
1　材料和方法
1. 1　材　料　 ( 1)漏芦采集于吉林省延吉市市郊。
水提取物: 漏芦根加水煎煮 3次 ,做成水煎液 ,浓缩成 1m L
含有生药 4g。 ( 2)动物: 一级健康雌性 BALB /C小鼠 , 6～ 7
周龄 ,体重 16～ 18g (长春生物制品研究所 ) ,牛血清白蛋
白 ( BSA) (天津市川页生化制品有限公司 ) ,葡萄球菌肠毒
素 B ( SEB) (军事医学科学院微生 物流行病研究
* 通讯作者
所 )。
1. 2　方　法
1. 2. 1　实验分组及模型的建立　实验小鼠回购后
进行 1周适应性喂养 ,选取尿红细胞为阴性者作为观察对
象 ,随机分为 4组: 模型组、漏芦提取物、强的松组和正常
对照组各 20只。 Ig A肾病模型的制作参照刘志红 [11]等报
道的造模方法加以改良。第 1～ 6周 ,隔日按 200mg /kg体
重口服 BSA。第 6周开始尾静脉注射含 1% BSA2mmol /L
磷酸缓冲液 0. 2ml(每日 1次 ,连续 3次 ) ,第 8周起定期附
加尾静脉注射葡萄球菌肠毒素 b(每周 1次 ,连续 3次周 ,
剂量分别为 0. 5mg /kg、 0. 6mg /kg、 0. 8mg /kg )。
1. 2. 2　实验给药　漏芦提取物组、强的松组于第 8
周出现血尿后分别用漏芦 40g /kg· d、强的松 30mg /kg· d
灌胃。模型组不给予任何治疗药物。空白对照组除隔日口
服酸化水外不再进行其他处理。 以上个组动物进食、进水
不限 ,饲料中粗蛋白占 21% ,粗脂肪占 8. 2% ,粗纤维 3.
4%。
1. 2. 3　观察项目及测定方法
1. 2. 3. 1　尿液检查　联苯胺血尿定性测定和定期
1386 陕西中医 2005年第 26卷第 12期