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PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发及幼苗生理特性的影响



全 文 :第42卷 第1期
2014年1月
西北农林科技大学学报(自然科学版)
Journal of Northwest A&F University(Nat.Sci.Ed.)
Vol.42 No.1
Jan.2014
网络出版时间:2013-12-25 13:19 DOI:10.13207/j.cnki.jnwafu.2014.01.016
网络出版地址:http://www.cnki.net/kcms/doi/10.13207/j.cnki.jnwafu.2014.01.016.html
PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发及
幼苗生理特性的影响
 [收稿日期] 2013-01-21
 [基金项目] 湖北省豆类(蔬菜)植物工程技术研究中心开放基金项目(2012-01)
 [作者简介] 张凤银(1964-),女,湖北鄂州人,副教授,硕士,主要从事园艺植物遗传育种与栽培生理研究。
张凤银,陈禅友,胡志辉
(江汉大学 生命科学学院,湖北 武汉430056)
[摘 要]  【目的】研究PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发及幼苗生理特性的影响,为研究该植物的抗旱机
理提供依据。【方法】用PEG-6000模拟干旱胁迫,研究在不同质量分数(1%,2%,5%,10%,15%,20%,25%)PEG-
6000胁迫下,宿根天人菊种子发芽率、发芽势、发芽指数及幼苗主根长、芽长、鲜质量、SOD活性和 MDA含量的变化
规律。【结果】随PEG-6000质量分数的增加,宿根天人菊种子的发芽势、发芽率、发芽指数总体呈降低趋势,其中
PEG-6000质量分数≥5%时,宿根天人菊种子的发芽势显著降低;PEG-6000质量分数≥15%时,种子发芽率极显著
降低,25%PEG-6000处理的种子不能萌发。随PEG-6000质量分数的增加,宿根天人菊幼苗的芽长、鲜质量逐渐降
低,主根长表现为先增加(1%~10%)后降低(10%~15%),SOD活性呈现先升(1%~5%)后降(5%~15%)趋势,
MDA含量则逐渐增大。【结论】PEG-6000质量分数越大,对宿根天人菊种子萌发和幼苗生长的抑制作用越强,幼苗
的细胞膜系统受伤害越大。
[关键词] PEG-6000胁迫;宿根天人菊;种子萌发;幼苗生理特性
[中图分类号] S682.101 [文献标志码] A [文章编号] 1671-9387(2014)01-0132-05
Efects of PEG-6000 stress on seed germination and seedling
physiological characteristics of Gailardia aristata Pursh
ZHANG Feng-yin,CHEN Chan-you,HU Zhi-hui
(College of Life Science,Jianghan University,Wuhan,Hubei 430056,China)
Abstract:【Objective】The research was carried out to study the effects of polyethylene glycol(PEG-
6000)stress on seed germination and seedling physiological characteristics of Gaillardia aristata Pursh.
【Method】Using PEG-6000to simulate drought stress,the change of seed germination rate,germination
vigor and germination index of G.aristata Pursh together with the main root length,stem length,fresh
weight,SOD activity and MDA content of the seedlings were studied with different weight concentrations
of PEG-6000(1%,2%,5%,10%,15%,20%and 25%).【Result】With the increase of PEG-6000concen-
trations,the germination vigor,germination rate and germination index of the G.aristata seeds decreased
generaly.When PEG-6000concentration was≥5%,the germination vigor significantly decreased.When it
was≥15%,the germination rate significantly decreased.When it was 25%,the seed could not germinate.
The stem length and fresh weight of the seedlings decreased gradualy,while the main root length increased
initialy(1%-10%)folowed by decrease(10%-15%).SOD activity increased initialy(1%-5%)and
then decreased(5%-15%),while MDA content increased gradualy throughout.【Conclusion】The larger
the PEG-6000concentration was,the more severely the seed germination and seedling growth of G.aristata
were influenced,and the more deeply the cel membrane system of G.aristata was damaged.
Key words:PEG-6000stress;Gaillardia aristata Pursh;seed germination;seedling physiological char-
acteristics
  我国是一个水资源匮乏的国家,被联合国列为
世界上13个贫水国之一[1];国土面积约有50%为
干旱和半干旱地区,这些地区的耕地有50%以上缺
少灌溉条件;即使在非干旱地区,也常受到干旱的胁
迫[2-3]。干旱是影响作物生长的3大非生物因素之
一,而且还会降低作物产量,全世界由于干旱导致的
作物减产超过其他因素造成减产的总和[4-5]。室内
模拟干旱胁迫条件的方法,因其操作简单、条件易控
制、重复性好而常用于植物的抗旱性研究中[6]。目
前,PEG高渗溶液模拟干旱胁迫是鉴定植物抗旱性
的重要方法之一[5-8]。
宿根天人菊(Gaillardia aristata Pursh)属菊
科天人菊属的多年生草本花卉,具有多种用途,其既
可用于花坛或花境,也可成丛、成片地栽植于林缘和
草地中,还可以作切花。李京春等[9]报道,PEG-
6000能提高1年生天人菊(Gaillardia pulchella
Foug.)种子的发芽率。而有关PEG胁迫对多年生
宿根天人菊种子萌发及幼苗生理特性影响的研究尚
未见报道。为此,本试验以PEG-6000模拟干旱胁
迫,研究不同质量分数PEG-6000胁迫下,宿根天人
菊种子萌发指标、幼苗生长指标和生理指标的变化,
以期了解宿根天人菊种子萌发和幼苗生理特性与干
旱胁迫之间的关系,为宿根天人菊抗旱机理的研究
提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材 料
供试宿根天人菊种子购自湖北省武汉市花卉种
子市场。PEG-6000为进口分装的日本原产纯品,购
自天津市化学试剂批发部。
1.2 方 法
试验于2012年在江汉大学生命科学学院实验
中心进行。选择饱满、大小均匀一致的宿根天人菊
种子,用质量分数0.1%高锰酸钾溶液消毒5min,
无菌水冲洗干净后晾干;再分别用质量分数1%,
2%,5%,10%,15%,20%,25%的PEG-6000溶液
浸种24h,并以蒸馏水浸种作对照(CK)。浸种过程
中不断搅动,以增加氧气。浸种结束后,将种子摆放
在铺有双层滤纸的培养皿中,每个培养皿100粒种
子,加入与浸种时质量分数相同的PEG-6000溶液
15mL,放在温度为28℃、相对湿度为85%的人工
气候箱中培养;每天更换滤纸,同时沿培养皿壁加入
相同质量分数PEG-6000处理液15mL,保持各处
理液质量分数的相对稳定。每个处理重复3次,连
续培养14d。
1.3 测定项目及方法
1.3.1 种子萌发指标 从种子培养次日起每天定
时统计发芽种子数,以胚根长为种子长的1/2作为
发芽标准。发芽势、发芽率和发芽指数的计算公式
如下:
发芽势=发芽初期(3d)发芽种子数/供试种子
数×100%;
发芽率=发芽终期(7d)发芽种子数/供试种子
数×100%;
发芽指数=∑(Gt/Dt)。
式中:Gt为不同时间发芽的种子数,Dt为相应的发
芽时间。
1.3.2 幼苗生长指标和生理指标 种子培养14d
后,从每个培养皿中随机选择15株幼苗测量主根
长、芽长及鲜质量。同时测定幼苗超氧化物歧化酶
(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量等生理指标。其
中,SOD活性测定采用氮蓝四唑(NBT)光化还原
法[10],MDA含量的测定采用硫代巴比妥酸(TBA)
比色法[10]。
1.4 数据处理与分析
试验数据采用Excel 2003和DPS 2000进行统
计分析,并用邓肯氏方法进行多重比较。
2 结果与分析
2.1 PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发的影响
种子萌发活力通常用发芽势、发芽率以及发芽
指数等指标衡量。从表1可知,随PEG-6000质量
分数的增加,宿根天人菊种子的发芽势、发芽率和发
芽指数总体呈下降趋势。PEG-6000质量分数为
1%和2%时,宿根天人菊种子的发芽势与对照差异
不显著(P>0.05),5%及以上质量分数PEG-6000
处理种子的发芽势显著或极显著低于对照。质量分
数1%~10%PEG-6000处理种子的发芽率和发芽
331第1期 张凤银,等:PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发及幼苗生理特性的影响
指数与对照差异不显著(P>0.05),但当PEG-6000
质量分数超过15%时,种子的发芽率和发芽指数极
显著降低(P<0.01)。20% PEG-6000处理的种子
基本不能萌发,其发芽率仅有3%;25% PEG-6000
处理的种子完全不能萌发,其发芽率为0%。由此
可见,PEG-6000延缓了种子的萌发,降低了种子的
萌发力,且质量分数越高,抑制作用越强。
表1 PEG-6000胁迫对宿根天人菊种子萌发的影响
Table 1 Effects of PEG-6000stress on seed germination of Gaillardia aristata Pursh
PEG-6000质量分数/%
Concentration of PEG-6000
发芽势/%
Germination vigor
发芽率/%
Germination rate
发芽指数
Germination index
0(CK) 70aA  76aA  77.6abAB
1  67abAB  75aA  79.9abAB
2  65abAB  80aA  85.8aA
5  62bcAB  80aA  78.3abAB
10  56cB  76aA  70.3bB
15  21dC  50bB  35.6cC
20  1eD  3cC  2.1dD
25  0fD  0dC  0eD
  注:同列数据后标不同小写字母表示差异显著(P<0.05),标不同大写字母表示差异极显著(P<0.01)。下表同。
Note:Lowercase letters and uppercase letters indicate significant differences(P<0.05)and extremely significant differences(P<0.01)a-
mong treatments in same column,respectively.The same below.
2.2 PEG-6000胁迫对宿根天人菊幼苗生长的影响
由表2可知,随PEG-6000质量分数升高,宿根
天人菊幼苗主根长总体呈增加的趋势。1%和2%
PEG-6000胁迫对宿根天人菊主根生长影响不明显
(P>0.05),PEG-6000质量分数超过5%时促进主
根生长,并以10%时的主根最长,几乎是对照的2
倍;15% PEG-6000 处理的主根长虽短于 10%
PEG-6000处理,但仍极显著长于对照,是对照的1.8
倍。宿根天人菊幼苗的芽长和鲜质量随PEG-6000
质量分数的增加呈下降趋势。PEG-6000的质量分
数超过1%时,宿根天人菊芽生长受到明显抑制
(P<0.05),PEG-6000质量分数为1%,2%,5%,
10%和15%时,芽长分别为对照的83%,84%,
81%,45%和31%。PEG-6000的质量分数为1%,
2%时,宿根天人菊幼苗的鲜质量与对照差异不显著
(P>0.05),但当质量分数超过5%时,幼苗的鲜质
量极显著低于对照(P<0.01),PEG-6000质量分数
为5%,10%和15%时,其幼苗的鲜质量分别为对照
的87%,70%和36%。由此可见,PEG-6000胁迫可
以抑制宿根天人菊芽的生长,且质量分数越高,抑制
作用越强;而适宜质量分数的PEG-6000胁迫可以
促进根的生长。
表2 PEG-6000胁迫对宿根天人菊幼苗生长的影响
Table 2 Effects of PEG-6000stress on seedling growth of Gaillardia aristata
PEG-6000质量分数/%
Concentration of PEG-6000
主根长/cm
Main root length
芽长/cm
Stem length
鲜质量/(g·株-1)
Fresh weight
0(CK) 2.48dC  0.90aA  0.61aA
1  2.57dC  0.75bA  0.59aAB
2  2.71dC  0.76bA  0.58abAB
5  3.22cB  0.73bA  0.53bB
10  4.91aA  0.41cB  0.43cC
15  4.44bA  0.28cB  0.22dD
  注:当PEG-6000质量分数超过20%时,由于种子萌发受到严重抑制,幼苗数量不足,故未测定其幼苗生长指标、SOD活性和 MDA含量。
下表同。
Note:Because the seed germination of G.aristata was suppressed severely,and the number of seedlings was not enough when the concentra-
tion of PEG-6000was>20%,the growth indexes,SOD activity and MDA content of Gaillardia aristata seedlings were not meas-
ured.The same below.
2.3 PEG-6000胁迫对宿根天人菊幼苗生理指标的
影响
由表3可知,随PEG-6000质量分数的增大,宿
根天人菊幼苗SOD活性呈先升高后降低的变化趋
势。其中,PEG-6000的质量分数为1%,10%时,宿
根天人菊幼苗SOD活性与对照差异不显著(P>
0.05);PEG-6000的质量分数为2%和5%时,幼苗
SOD活性极显著高于对照(P<0.01),分别比对照
431 西北农林科技大学学报(自然科学版) 第42卷
高26%和57%;而质量分数为15%时,幼苗SOD活
性显著低于对照(P<0.05),比对照降低了20%。
MDA含量可以反映植物细胞膜的受伤害程
度,两者呈正相关关系。由表3可见,随PEG-6000
质量分数的增大,宿根天人菊幼苗 MDA含量呈逐
渐上升的趋势。其中,1%PEG-6000处理宿根天人
菊幼苗 MDA含量与对照无显著差异(P>0.05);
2%及以上质量分数PEG-6000处理幼苗 MDA含
量显著或极显著高于对照,2%,5%,10%,15%
PEG-6000处理幼苗的 MDA含量分别比对照增加
了28%,89%,132%和207%。说明随 PEG-6000
质量分数的增加,宿根天人菊幼苗的细胞膜受伤害
程度加重。
表3 PEG-6000胁迫对宿根天人菊幼苗
SOD活性和 MDA含量的影响
Table 3 Effects of PEG-6000stress on SOD activity and
MDA content of Gaillardia aristata seedlings
PEG-6000
质量分数/%
Concentration
of PEG-6000
SOD活性/
(U·g-1)
SOD activity
MDA含量/
(μmol·L-1)
MDA content
0(CK) 807.7cCD  0.28eD
1  861.7cC  0.30eD
2  1 016.0bB  0.36dD
5  1 271.3aA  0.53cC
10  900.0cBC  0.65bB
15  649.7dD  0.86aA
3 讨 论
PEG-6000用作种子渗透调节处理是目前生理
学研究的热点[11]。本研究结果表明,在宿根天人菊
整个种子萌发期间用质量分数20%PEG-6000处理
几乎不能发芽,25%PEG-6000处理完全不能发芽,
5%~10% PEG-6000处理受到一定程度抑制,而
15%PEG-6000处理种子萌发受到明显的抑制,这
与杨柳等[5]对黄麻及吴丽云等[12]对八棱海棠的研
究结果,即“PEG-6000抑制种子的萌发,而且质量分
数越大,抑制越严重”相似。而李京春等[9]发现,天
人菊种子用质量分数20%PEG-6000处理4h能提
高其发芽率;王文帆等[13]发现,用25% PEG-6000
溶液浸种24h,能加快谷稗种子发芽速度,提高发芽
率;袁媛等[14]发现,用20% PEG-6000浸种1h或
10%PEG-6000浸种4h也能提高黄芩种子的萌发
率。这表明,PEG-6000胁迫对种子活力和萌发效应
的影响因植物种类、PEG-6000质量分数以及胁迫时
间而异。
根长是评价植物根系吸收功能最常用的指标,
较长的根系可以使植物在干旱胁迫时吸收更多的水
分。胡承伟等[15]认为,相对侧根数以及根长可作为
植物抗旱性鉴定的辅助指标。本研究结果表明,在
PEG-6000胁迫下,宿根天人菊幼苗的芽长随PEG-
6000质量分数增加呈现下降趋势,而在一定质量分
数范围内促进根生长,这与华智锐等[16]在商洛黄芩
及宋丽华等[17]在臭椿中的研究结果一致;但李文鹤
等[18]在野菊花的研究中发现,50~200g/L 的
PEG-6000胁迫抑制胚根的生长,PEG-6000质量浓
度越高,抑制越严重。这也表明,不同植物的根系生
长对PEG-6000胁迫的响应不同。
逆境会导致植物体内产生大量的活性氧,引起
膜脂过氧化,造成膜系统受损,而SOD是清除植物
体内氧自由基的重要保护酶,为膜保护的第一道防
线[19-21]。本研究发现,随PEG-6000胁迫程度的加
重,宿根天人菊幼苗SOD活性呈现先升高后降低的
趋势,这与段慧荣等[4]在沙冬青幼苗、左利萍等[22]
在柠条叶片中的研究结果一致。表明一定剂量范围
内的PEG诱导,可以提高细胞膜保护酶SOD的活
性,有效清除活性氧;但剂量过大时,保护酶系统会
遭到破坏,SOD活性下降,膜破坏加重。
MDA含量可以反映脂膜过氧化程度和细胞膜
系统受伤害程度。本研究发现,随PEG-6000模拟
干旱胁迫的加重,宿根天人菊幼苗 MDA含量呈逐
渐升高趋势,说明细胞膜受伤害程度增加,这与段慧
荣等[4]在沙冬青和吴丽云等[12]在八棱海棠中的研
究结果一致。
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631 西北农林科技大学学报(自然科学版) 第42卷