全 文 ：图 1　高效液相色谱图
A.对照品;B. 样品;C.阴性液;1-两头尖皂苷 D
Fig 1　HPLC ch romatograms
A. s tandard;B. sample;C. negat ive sample;1- raddeanoside D
2. 2　溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液　取在五氧化二磷减压干燥器中干燥 24
h 的两头尖皂苷 D 对照品约 10 mg , 精密称定 , 置 10 mL 量
瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 , 摇匀 ,即得。
2. 2. 2　供试品溶液　精密量取脉复生样品 10 m L , 用乙醚
振摇萃取 2 次(20 , 10 m L),弃去乙醚液。样品液再用水饱和
的正丁醇振摇提取 5 次(20 , 20 , 15 , 15 , 15 mL), 合并正丁醇
液 ,减压浓缩至干。残渣用甲醇溶解并转移至 10 m L 量瓶
中 ,并稀释至刻度 , 摇匀 ,用0 . 45μm 微孔滤膜滤过 , 即得。
2. 3　线性关系考察　精密称取干燥至恒重的两头尖皂苷 D
对照品 20 mg ,用甲醇溶解并定容至 5 mL , 作为标准贮备液。
分别量取不同体积的标准贮备液 , 稀释成质量浓度分别为
0 . 4 , 0 . 8 , 1 . 0 , 1. 4 , 1 . 8 g L - 1的标准溶液 , 精密吸取上述对
照品溶液各 10 μL ,注入液相色谱仪中测定。以标准稀释液
的浓度为横坐标 ,以两头尖皂苷 D峰面积为纵坐标进行线性
回归 ,得方程:Y =9 . 42×106 X +1 . 95×106 , r=0 . 999 8。结
果表明两头尖皂苷 D 在0 . 4 ～ 1 . 8 g L -1范围内线性关系良
好。两头尖皂苷 D的最低检测限为2 . 5 ng(S /N≥3)。
2. 4　精密度试验　上述色谱条件下 , 精密吸取两头尖皂苷
D对照品溶液 , 连续进样 6 次 , 以峰面积计算精密度 RSD为
0 . 42%。结果表明该方法的精密度良好。
2. 5　重复性试验　取同一批号脉复生 , 按“供试品溶液制
备”项下操作 , 分别制备 6 份样品 ,分别吸取 10 μL进样 , 6 份
样品的平均含量为1. 06 g L -1 , RSD为 1. 4%。结果表明 ,该
方法的重复性良好。
2. 6　稳定性试验　取同一供试品溶液 , 分别在 0 , 2 , 4 , 6 , 8 ,
24 , 48 h 依次测定 , RSD 为0. 76%。结果表明 ,供试品溶液在
48 h 内基本稳定。
2. 7　加样回收率试验　精密量取已知含量的脉复生样品 5
份 ,分别精密加入一定量的两头尖皂苷 D 对照品 , 按样品制
备与测定方法操作 ,测定结果见表 1。结果表明 , 本方法回收
率好 ,方法可靠。
[作者简介] 张营 ,女 ,硕士研究生 ,电话:027-85726063 , E-maiL:zhangying2005 si s@163. com 　[ 通讯作者] 黎维勇 ,男 , 主任药师 ,电话:027-
85726073
2. 8　样品含量测定　取样品溶液 10 μL , 注入高效液相色谱
仪测定 ,按外标法定量 , 3批样品的测定结果见表 2。
3　讨论
选择甲醇-水(70∶30) 、乙腈-水(45∶55)和乙腈-0. 1%
表 1　脉复生加样回收率实验结果
Tab 1　Results of recover y of maifushen
编
号
样品中含
量 /mg
对照品加入
量 /mg
实测值
/mg
回收率
/%
平均回
收率 /%
RSD
/%
1 5. 3 5. 03 10. 22 98. 94
2 5. 3 5. 08 10. 24 98. 65
3 5. 3 5. 01 10. 27 99. 61 98. 96 0. 42
4 5. 3 5. 14 10. 29 98. 56
5 5. 3 5. 06 10. 26 99. 03
表 2　3批脉复生样品含量测定结果
Tab 2　Determina tion results of three maifushen sam ples
批号 平均含量 / g L- 1 RSD /%
050801 1. 06 1. 7
050802 1. 02 1
050803 1. 08 1. 5
磷酸溶液(47∶53)作为流动相对两头尖皂苷 D 进行纯度测
定 ,结果一致。由于乙腈毒性大且价格贵 , 而甲醇水经考察 ,
能满足含量的要求 , 因此 , 本试验采用甲醇-水(70∶30)作为
流动相。
　　HPLC 法分离效果良好 , 线性 、稳定性 、重复性 、回收率
等指标均符合含量测定的要求。 因此采用 H PLC 法测定脉
复生两头尖中皂苷 D的含量 , 方法简便 、成本低廉 ,可为控制
脉复生的质量提供科学 、合理 、有效的手段。
参考文献:
[ 1] 　刘大有 ,李向高 ,李树殿.两头尖有效成分三萜皂苷的分离与鉴
定[ J] .中草药 , 1984 , 15(4):34.
[ 2] 　路金才 ,徐琲琲 ,张新艳 ,等[ J] . 两头尖的化学成分研究.药学
学报 , 2002 , 37(9):709-712.
[ 3] 　冉忠梅 , 陈金斗 , 刘宇. 两头尖抗炎活性的初步测试[ J] .中国
民族民间医药杂志 , 2000 , 46:293-294.
[ 4] 　夏忠庭 ,刘大有 ,王晓颖 ,等. 两头尖的化学成分研究(III)[ J] .
高等学校化学学报 , 2004 , 11:2057-2059.
[ 5] 　中国药典.一部[ S] . 2005:116.
[ 6] 　李勇 ,张惠 ,刘大有. HPLC法对不同产地两头尖中皂苷 D的
定量分析[ J] . 中草药 , 2000 , 31(1):15.
[收稿日期] 2006-09-28
高效液相色谱法同时测定归龙筋骨宁
胶囊中马前子碱和士的宁的含量
张营 ,黎维勇 ,陈文 ,闫国旗　(华中科技大学同济医学
院附属协和医院 ,湖北 武汉 430022)
[ 摘要] 　目的:建立高效液相法测定归龙筋骨宁胶囊中马前
子碱和士的宁含量的方法 。方法:采用 BDS-2 H ypersil(250
mm×4 . 6 mm , 5 μm)色谱柱 , 流动相为乙腈-0 . 01 mol L - 1
庚烷磺酸钠与 0. 02 mo l L - 1磷酸二氢钾等量混合溶液(用
10%磷酸调节 pH 2 . 8)(21∶79), 流速为1. 0 m L min- 1 ,检测
波长为 260 nm。结果:马钱子碱在4 . 42 ～ 88 . 2 mg L- 1范围
内线性关系良好(r=0. 999 4), 平均加样回收率为99 . 7%;士
的宁在 5 . 53 ～ 110 . 6 mg L - 1范围内线性关系良好(r=
0 . 999 7),平均加样回收率为 99 . 3%。结论:本法精密度好 ,
824 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 6期 C hin Hosp Pharm J , 2007 Jun , Vol 27 , No. 06
结果可靠 ,可作为本制剂的质量控制。
[ 关键词] 　归龙筋骨宁胶囊;马前子碱;士的宁;高效液相色
谱法
[中图分类号] R927. 2　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-
5213(2007)06-0824-03
　　归龙筋骨宁胶囊由马钱子(制)、丹参 、乳香(炒)、威灵
仙 、甘草 、红花等 15 味药材组成 , 主要用于祛风活血 ,舒筋止
痛。许多报道[ 1-3]仅测定了士的宁的含量 , 采用的是高效液
相色谱(H PLC)法[ 4] , 使用不方便 ,供试品溶液的处理操作较
烦琐。关于归龙筋骨宁胶囊中士的宁和马前子碱的含量同
时测定的方法未见报道 , 参考相关文献[ 5-6] , 本实验采用
HPLC 法 , 同时测定士的宁和马前子碱含量 , 为归龙筋骨宁
胶囊的质量控制提供了快速 、准确的测定方法 。
1　材料
Water s 510 泵 , Wate rs 486 紫外检测器(美国Water s公
司);HW 色谱数据处理工作站(上海千谱软件有限公司);士
的宁(中国药品生物制品检定所 , 批号 110705-200005);马钱
子碱(中国药品生物制品检定所 , 批号 110706-200104);归龙
筋骨宁胶囊(自制 0. 25 g /粒 , 批号 041208 , 041209 , 041210);
乙腈为色谱纯 ,其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件　固定相:BDS-2 Hyper sil(250 mm ×4 . 6
mm , 5 μm);流动相:乙腈-0 . 01 mol L- 1庚烷磺酸钠与 0. 02
mol L - 1磷酸二氢钾等量混合溶液(用 10%磷酸调节 pH
2 . 8)(21∶79);流速:1. 0 m L min-1 ;检测波长:260 nm;进样
量:20 μL;柱温:25 ℃。
2. 2　对照品溶液的制备　精密称取马钱子碱对照品 4. 43
mg和士的宁对照品5 . 53 mg , 分别置于 10 mL 量瓶中 , 加氯
仿使溶解并稀释至刻度 , 摇匀;分别精密量取 2 mL , 置同一
10 m L量瓶中 , 用甲醇稀释至刻度 , 即得88 . 6 mg L -1马钱子
碱和110 . 6 mg L - 1士的宁对照品溶液。
2. 3　线形关系考察　精密量取马前子碱和士的宁对照品溶
液适量 , 配成质量浓度分别为 4. 42 , 8. 84 , 17. 7 , 35 . 36 ,
55 . 04 , 88. 2 mg L- 1的马前子碱对照品溶液和 5. 53 , 11 . 06 ,
22 . 1 , 44 . 24 , 66 . 36 , 110 . 6 mg L - 1的士的宁对照品溶液 ,按
上述色谱条件各进样 20 μL ,以对照品峰面积 A 对浓度 C进
行线形回归 , 分别得方程:A = 37 186 C - 11 144( r =
0 . 999 4), A =41 788C- 11 477(r=0 . 999 7)。结果表明马
前子碱在4. 42 ～ 88. 2 mg L- 1 , 士的宁在5 . 53 ～ 110. 6 mg
L -1范围内线性关系良好。
2. 4　供试品溶液的制备　精密称取归龙筋骨宁胶囊内容物
0 . 5 g ,置于具塞锥形瓶中 , 精密加入氯仿 20 mL , 氨试液 1
mL , 密塞 ,轻轻振摇 , 称定质量 , 放置 24 h , 再称定质量 ,用氯
仿补足减失的质量 , 摇匀后滤过 , 精密移取续滤液 10 mL ,置
分液漏斗中 , 用硫酸溶液(3→100)振摇提取 5 次 , 每次 20
mL , 合并硫酸液 ,用浓氨试液调节 pH 至 9 ～ 10 , 用氯仿振摇
提取 5 次(30 , 20 , 20 , 20 , 20 m L), 合并氯仿液 , 蒸干 , 残渣加
3 mL 氯仿溶解 ,转移至 10 mL 量瓶中 ,用甲醇定容。测定前
用微孔滤膜滤过 ,得澄清溶液 , 备用。
2. 5　阴性对照供试品溶液的制备与测定　按照处方比例和
工艺制成不含马前子药材的样品 ,按照供试品溶液的制备方
法制备阴性对照液测定。结果表明 ,处方中其他药材不干扰
马前子碱和士的宁的含量测定 ,见图 1。
图 1　高效液相色谱图
A.对照品;B. 归龙筋骨宁胶囊供试品;C .阴性对照
Fig 1　HPLC ch romatograms
A. reference substance;B. sample;C. negat ive cont rol sample
2. 6　精密度及重复性试验　取同一对照品溶液 , 连续进样 6
次 ,每次 20 μL , 记录马前子碱和士的宁的峰面积 , 计算
RSD ,分别为 0. 20%, 0. 06%。取归龙筋骨宁胶囊(自制 , 批
号 041208)6 份 ,按“ 2. 4”项方法制得供试溶液并按上述色谱
条件测定马前子碱和士的宁的含量 ,计算 RSD ,分别为0 . 5%
和0 . 1%。
2. 7　加样回收率试验　精密称取已知马前子碱 、士的宁含
量的样品(含马钱子碱280 . 18 μg ,士的宁376 . 03 μg)9 份 ,分
别加入一定量的对照品 , 按“ 2. 4”项方法制得供试溶液并按
上述色谱条件测定二者含量 ,计算回收率 , 结果见表 1。
2. 8　样品测定　取 3 个批号的归龙筋骨宁胶囊 , 每批取 3
份 ,按“2 . 4”项方法制得供试溶液并按上述色谱条件测定马
前子碱和士的宁的含量 ,测定结果见表 2。
2. 9　稳定性试验　取供试品溶液 , 每隔一定的时间测定一
次。结果表明供试品溶液在 8 h 内测得的结果基本一致。
3　讨论
实验中 ,对同一批样品(批号 041208)的供试品溶液制备
中分别放置 12 , 24 , 36 h和超声30 min , 测马前子碱和士的
表 1　加样回收率测定结果(n=9)
Tab 1　Results of recover y determination(n=9)
加入量 /g 测得量 /μg 回收率 /% 平均回收率 /% RSD/%
马钱子碱 士的宁 马钱子碱 士的宁 马钱子碱 士的宁 马钱子碱 士的宁 马钱子碱 士的宁
353. 6 442. 4 625. 48 817. 59 97. 9 99. 9
353. 6 442. 4 628. 95 814. 99 98. 8 99. 4
353. 6 442. 4 636. 83 816. 9 100. 9 99. 8
442 553 726. 66 932. 68 100. 3 100
442 553 722. 27 923. 73 99. 3 98. 5 99. 7 99. 3 1. 3 0. 7
442 553 724. 59 922. 62 99. 8 98. 3
530. 4 663. 6 827. 02 1039. 26 101. 7 98. 8
530. 4 663. 6 808. 35 1041. 03 98. 4 99. 1
530. 4 663. 6 820. 8 104 9 100. 6 100. 2
825 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 6期 Chin H osp Pharm J , 2007 Ju n , Vol 27 , No. 06
表 2　样品测定结果(n=3)
Tab 2　The de te rmination o f sam ples(n=3)
批号 马钱子碱 /μg /粒 士的宁 /μg /粒
041208 217. 95 266. 15
041209 219. 40 274. 38
041210 218. 59 269. 47
宁含量 ,发现放置 24 h 时含量明显高于 12 h 和超声处理的
样品含量 ,而与放置 48 h 基本一致 ,所以本实验采用放置 24
h。对同一批样品(批号 041208)的供试品溶液制备中分别用
硫酸(3→100)提取 5 次和 6 次 , 结果表明 5 次和 6 次含量相
当 ,提取完全 , 所以本实验采用硫酸(3→100)提取次数为 5
次;另外分别用氯仿提取 5 次和 6 次 , 结果显示 5 次和 6 次
含量相当 ,提取完全 , 故采用氯仿提取次数为 5 次。
归龙筋骨宁胶囊为复方制剂 , 马前子为方中主药 , 马前
子碱和士的宁是马前子的主要活性成分 , 在流动相中加入少
量磷酸二氢钾并调节适宜的 pH , 可提高柱效 ,减少色谱峰拖
尾 ,提高了分离度 , 而且可以同时测定马前子碱和士的宁的
含量。经方法学研究结果证明 , 本方法简便 、准确 、重复性
好 ,阴性对照无干扰 , 可作为归龙筋骨宁胶囊中马前子碱和
士的宁的含量测定方法。
参考文献:
[ 1] 　陈艳 ,贺英菊 ,罗巍伟 ,等. H PLC 测定平消软胶囊中士的宁的
含量[ J] . 华西药学杂志 , 2005 , 20(3):255-256.
[ 2] 　于文静 ,申玉华 ,王焕群 ,等.高效液相色谱法测定颈腰康胶囊
中士的宁的含量[ J] .药品检测 , 2003 , L2(LL):41-42.
[ 3] 　金向群 ,刘永刚 ,李莲芳 ,等. HP LC测定风湿安泰片中士的宁
的含量[ J] . 中华现代中西医杂志 , 2003 , 1(12):1070-1071.
[ 4] 　田华 ,李元宏 ,朱建成. 高效液相色谱法测定复方风湿丸中士
的宁和马前子碱的含量[ J] . 时珍国医国药 , 2005 , 1 6(9):859-
860.
[ 5] 　金红宇 ,田金改 ,张莉 ,等. 反相 HPLC法测定马钱子中士的宁
和马钱子碱的含量[ J] . 中国药事 , 2005 , 19(4):219-221.
[ 6] 　张凌云 ,张翔 ,冯慧凭. RP-HPLC法测定伸筋丹胶囊中士的宁
和马钱子碱的含量[ J] . 江苏药学与临床研究 , 2004 , 12(3):32-
34.
[ 收稿日期] 2006-02-15
[作者简介] 孟令疆 ,男 ,主管药师 ,电话:0933-8613578 , E-mail:djfygj@163. com
护妇搽剂的制备和临床应用
孟令疆　(平凉市人民医院 , 甘肃 平凉 744000)
[ 摘要] 　目的:研究护妇搽剂的制备 、质量标准以及临床疗
效的观察。方法:采用水蒸气蒸馏法和煎煮法制备护妇搽
剂 ,对 440 例妇科外阴疾病患者进行了临床观察。结果:本
制剂对阴道非特异性炎症效果显著 , 使用方便 , 质量可控 ,无
不良反应。结论:可作为妇科炎症治疗药物。
[ 关键词] 　护妇搽剂;制备;质量控制;临床疗效
[ 中图分类号] R943　　[ 文献标识码] A　　[ 文章编号] 1001-5213
(2007)06-0826-02
　　外阴 、阴道炎症是妇科常见病 , 多发病 。护妇搽剂(批准
文号:甘药制字 Z04271062)是我院自制制剂 ,用于妇科炎症
的治疗 , 尤其对非特异性外阴 、阴道炎 , 疗效显著 ,现报道如
下。
1　处方与配制
1. 1　处方　苦参 8 kg , 黄柏 8 kg , 苍术 6 kg ,蛇床子 6 kg ,明
矾 2 kg ,樟脑 60 g ,制成40 000 mL。
1. 2　制备[1] 　取苍术 , 蛇床子 ,按蒸馏法提取12 000 mL ,残
渣加入苦参 ,黄柏 , 按煎煮法提取 2 次 , 第 1 次 2 h , 第 2 次
1 . 5 h ,合并 2 次滤液 , 浓缩至25 000 mL , 将浓缩液放至室温
与蒸馏液合并 ,加入 80 m L 0. 2%聚山梨醇酯 80 , 滴加 5%樟
脑乙醇液1 200 mL , 0. 1%羟苯乙酯乙醇液 400 mL , 加入明
矾 2 kg 搅拌使溶解 , 补加纯化水至全量 , 分装成每瓶 100
mL。
2　质量控制
2. 1　性状　本品为棕黄色澄清液体 , 有特臭。
2. 2　鉴别
2. 2. 1　明矾　取本品 10 mL , 加氯化钡试液 3 滴即生成沉
淀 ,将沉淀分离后加 1 mL 盐酸 ,沉淀不溶解。
2. 2. 2　蛇床子　取本品 15 mL , 乙醚提取 2次 , 每次 20 m L ,
合并醚液 , 将乙醚挥干后 ,残渣加乙醇使溶解 , 加等量 3%碳
酸钠溶液 ,加热 5 min ,放冷 , 再加新配制的重氮对硝基苯胺
试液 1～ 2 滴 , 即显樱红色。
2. 2. 3　苦参碱　取本品 20 mL , 加氨水 0. 5 m L , 氯仿 10
mL , 振摇提取 1 h , 取氯仿液蒸干 , 残渣加甲醇 1 mL 使溶解
作供试品溶液。另取没苦参碱对照品加甲醇制成每 1 mL 含
1 mg 的溶液 ,作为对照品溶液。照薄层色谱法试验 , 取上述
两种溶液各 5μL ,分别点于硅胶 G 薄层板上 ,以甲苯-醋酸乙
酯-甲醇-水(2∶4∶2∶1)的上层溶液为展开剂 , 展开 , 取出 , 晾
干 ,喷稀碘化铋钾试液和亚硝酸钠乙醇溶液 。供试品色谱
中 ,在与对照品色谱相应的位置上 , 显相同的棕红色斑点。
2. 3　检查　相对密度在1 . 03以上 , pH 3. 0～ 5 . 0。
3　临床应用
3. 1　资料　所有病例均系我院妇科患者 , 均为列入统计的
随访病例 ,共 440 例。 随机分组为护妇搽剂治疗组 256 例 ,
对照组 184例 ,各组中分别为淋病 12 , 20 例 , 滴虫性阴道炎
40 , 35 例 , 念珠性阴道炎 42 , 30 例 , 尖锐湿疣 12 , 13 例 ,外阴
瘙痒症 52 , 28例。年龄 9 ～ 68 岁 , 以 25 ～ 45 岁居多。以上
病例均符合临床诊断标准。
3. 2　治疗方法　护妇搽剂治疗组(A 组),对照组(B 组),两
组治疗期 1～ 2 周 , 见表 1。用药方法①坐浴法:将护妇搽剂 ,
加温开水稀释至 10%,坐浴 15 ～ 20 min;②阴道冲洗法:在阴
道冲洗器内加入药液 10 mL , 再将温开水加满 , 患者取合适
的体位 ,将冲洗器喷头插入阴道 , 压缩瓶体 , 药液冲入阴道后
保持 5～ 10 min;③湿敷或泡洗法:10%护妇搽剂 , 湿敷或泡
洗患处 10 ～ 15 min;④涂擦法:皮肤湿润后涂擦护妇搽剂 ,揉
搓 3～ 5 min ,然后洗净。
3. 3　疗效判断　痊愈:自觉症状和体征完全消失 , 淋菌 , 真
菌 ,滴虫等病原体镜检阴性[ 3] ;显效:自觉症状和体征明显控
制 ,病原体镜检阳性;有效:自觉症状和体征减轻 ,但病原体
仍为阴性;无效:自觉症状 ,体征 , 化验与治疗前无变化。
3. 4　治疗结果　见表 2。
4　讨论
826 中国医院药学杂志 2007年第 27卷第 6期 C hin Hosp Pharm J , 2007 Jun , Vol 27 , No. 06