全 文 ：癌变 · 畸变 · 突变 1 99 4年第 4卷第 4期
紫露草雄蕊毛突变法对九种农药的检测报告
黄 宁珍 陈锐章
J一西植物研究所 桂林 5 1 4。。 6
摘要 本文以紫露草 4、 3 。号为材料 , 检测我国常用的九种农药在大田使用浓度下的诱变性 。 结果表明 , 所
检测的九种农药中 , 七种具有明显的诱变性。 此实验的另一个值得注意的结果是 ; 农药的直接伤害与 诱 变
性是不一致的 , 不表现直接伤害的 6 种农药中 , 5种具有较强的遗传毒性 。
关键词 紫露草 4 430 ; 红色突变 , 诱变性
T H E R EP O R T O F U S IN G T R A D E S C A N T IA
一
S T AM EN H A IR
M U T AT 10 N T O T E S T 9 IN S E C T IC ID E S
N i n g z h e n H u a n g
一 R u i z h a飞 C h e n
G u a飞 x i I n s t i t u t e o f B o t a n y一 G u i l i n 5 4 1 0 0 6
A b s t a c t I n t h i s s 七u d y T r a d e s e a n 七i a 4选3 0 w a s u s e d a s e x P e r im e n t a l am t
e r i a l t。
t e s t t h e m u t a g e n i e i t y o f 9 i n s e e 七i e id a l o r b a e t e r i e id a l a g e n t s i n i t s , u s u a l e o e e n t r -
a t i o n u s e d i n f i e l d
.
T h e r e s u l t s i n d i e a t e d t h a t 7 o u t o f 9 a g e n t s s h o w e d m u t a g e n i
e i t y
.
I n 七h e s a m e t im e a n o t h er r e m a r k a b l e r e s u l t w a s t h a t t h e s e a g e n t s d i r e e t d a m a g e
t o P l a p
.
t t i s s u e a n d i t s
,
m u t a g e n i e i t y w e r e p
.
o t s im i l a r
.
5 o u t o f 6 a g e n t s w h i e h
d id n
, t d a m a g e d i r e e t l y s h o w e d m a n i f e s t g e n o t o x i t y
.
K e y w o r d s t r a d e s e a n t i a 4凌3 0 ; r e d m u t a t i o n ; m u t a g e n i e i t y
农业上 , 为防止有害昆虫或微生物对农
作物的侵害 , 经常喷施大量的杀虫剂或杀菌
剂 , 每年全世界向农 田中施用农药的数量相
当可观 , 对环境一人和动物产生了不容忽视
的影响 。 通常对农药毒性的检测 , 仅局限于
其对人畜的致死毒性 , 而忽略其诱变性 。 为
此本文用国际上认为有效的紫露草雄蕊毛突
变检测法 (` )对几种常用农药的诱变性进行了
检验 。
材料和方法
水检测法供用的植物材料一紫露草 4 4 3。
号是红色紫露草与兰色紫露草杂交产生的杂
合体 , 正常情况下雄蕊毛为兰紫色 , 经诱变
剂处理产生突变后的雄蕊毛为红色 , 从而可
以获知供试药剂是否具有诱变性 。 供试的农
药有 : 敌敌畏 , 氧化乐 果 , 甲 胺 磷 , 灭 扫
利 , 敌百虫 , 巴沙乳油 ,代森按 , 托布津等 ,
所用浓度为大田常用浓度 , 见表 1。
试验基本上按照世界卫生组织国际协作
研究大纲 (2) 稍作改进 , 具体方法是 : 切取紫
露草 4 4 3。号长约 1 5一 2 0 厘米至少含有 9个花
蕾的幼嫩花序为一组 , 分别插入 待 检 溶液
中 , 待 检 溶液 用 培 养液 ( 1邝 H oa g la n d
oS lu it on )配制 。 处理时间为 8 小 时 , 之 后
插植于不含诱变剂的培养液 中 , 在 光 线 充
足 、 空气洁净的环境中恢复培养 1 。 一 1魂天 ,
表 1
组别 且花朵数
平均 突变
频率 (编 ) S
。
D
。
(编 ) 齐性差异 {t {平均数差异
对 照 2弓
敌敌畏 拐心。 1 %
氧化乐果 3 1心。 04%
甲胺磷 3 3
心。 5 0%
灭扫利 1 9
0
。
0 25 %
敌百 虫 3 0
O
。
1 %
威 灭磷 3 0
0
。
0 0 6%
巴沙乳油 4
0
。
0 2%
代森钱 3 2
0
。
0 45 %
托布津 3 2
0
。
07 %
。
3 4
一
0弓
0
。
9 3
1
。
3 6 0
。
4 4 8
1
。
6 6 2
。
4 2
1
。
1弓 1 。 2 2
。
1 4 8
。
5 8 0
1
。
7 5 4
2
。
3 9 9
3
。
5 7 1 1
。
9
2
。
45 7
1
。
3 1 3
0
。
27 0
。
7 8
。
0 0 6
。
4 2 2
0
。
9 01
。
4 4 0
。
1 47
0
。
9 6 4
1
。
4 05
1
。
7 7
2
。
2 0
4
。 邓
3
。
63
0
。
0 47
0
。
09 5
1
。
5 28
2
。
3 41
每隔两天更换一次培养液 , 且每天向培养液
中打气或摇动培养液充氧 , 使插枝得以正常
生长 。 当其开花时 , 从中随机取七朵花 , 每
朵取出相间三个雄蕊 , 置于载玻片上的甘油
(含少量酒精的 50 % 的甘油水溶液 )滴中 , 在
解剖境下数出其雄蕊毛总数 , 乘 2 除 7 所得
的数值 , 视为这一实验每朵花所具有的雄蕊
毛数 。
恢复培养第七到第九连续三天 , 观察雄
蕊毛发生红色突变的情况 。 计算红色突变次
数的方法是 : 每观察到一个或一串相连的红
色雄蕊毛细胞 , 计算为一次 , 不相连的红色
细胞 , 各计算为一次 。 每一处理至少观察 15
朵花 , 每一朵花为一个样品群 , 计算出突变
频率 (以干分率表示 )
根据观察计算得到下列各项 :
每朵花的平均雄蕊毛数 H
第 i 朵花的突变次数 E i
第 i 朵花的突变频率 x i = iE / H
各处理的突变频率 X 二叉 x i/ H
各处理突变频率的标准差
“ 二丫里二茎上 ~鑫二犷N 一
各处理与对照之间的差异 ( p < 0 . 0 5 )用 F 方
差分析和D u n en t t检验作出判断 。
结果和讨论
1
. 直接伤害
1
.
1 0
.
0 2% 巴沙乳油 : 紫露草的 浸 泡
部分全部变褐腐烂 , 剪掉腐烂部分后在十多
天恢复培养期间 , 长势一直不好 , 仅开放的
4 朵 花均畸形 。 说明该农药不仅能直接伤害
紫露草花茎组织 , 而且抑制开花 。
1
.
2 0
.
0 2 5%灭扫利 : 浸泡部分全部干
枯变褐 , 剪掉此部分后恢复培养 , 仍能象其
其实验一样生长良好 , 开花正常。 说明该农
药虽然对紫露草花茎组织有严重 的 直 接 伤
害 , 但并不影响开花 。
1
.
3 0
,
0 4 5%代森钱 : 花茎切 口约 2 厘
米部分变褐 , 剪掉后生长 良好。
1
.
4 其他处理组未观察到直接伤害 。
2
. 诱变性
各处理的突变情况见表 1 , “ ` ” 表 示 与
对照相比差异显著。
从表 l可看出 , 0 . 0 4% 氧化乐果和 O . G7%
托布津对植物的影响与对照和比 , 齐性和平
(下转第 3 8页 )
矛考 g·
小 , 易导致假 阴性 , 所以用 50 % 细胞生长抑
制量为基准 (6) 是可取的 。 微核试验中采用 了
李寿祺 v() 推荐的染毒次数 , 从原来 的 染 毒
1一 2次增加到 6 次 , 有趣的是苔色酸丁醋随
剂 量的增加其微核率减少 , 尤 其 是 4 / 5 和
l/ Z L D
S 。组与溶剂和空白组比较有显著意义 ,
表明不 同药物所产生的效果是不同的 。 高剂
量组苔色酸丁酷的微核频率反而减少是否与
其毒性有关 , 值得研究 。
苔黑酚来源于地衣植物 , 资源丰富 , 提
取方法简便 , 经济 , 有优 良的理化性质 , 对
人精子的体外杀精实验表 明 , 抑制精子活动
最低浓度为 `二郭m l , 远远低于国际计划 生
育联合会 ( I P P )F 规定的有效杀精最 低 浓 度
不0/ m g /m l ) , 杀精活性明显 。 在寻找新型 、
安全 、 有效可应用的植物杀精剂时 , 苔黑酚
有希望成为 以植物为来源的杀精剂 。
本研究结果表明 , 两种药物在本实验的
条件下无诱发 A m e s 试验菌株的基因 (点 )突
变作用 , 对 C H L细胞染色体无损伤 , 且不诱
发小鼠骨髓 P C E微核的增加 , 即两种药物无
致突变作用 。
参 考 文 献
1
。 饶尔昌 , 等 。 石花抗 霉菌有效成份 的研究 , 中草
药 1 9 8 1 , 1 2 ( 9 ) : 8 .
2
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杀精 活性 。 西南地 区第五届药理学术会议论文摘
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3
。
M a r o n D M a n d A 切 e s BN 。 R e r i : e d 扭 e th o d s
f o r t五e s a l m o n e l l a m u t a g e n i e三t y 亡e s t . M u t a 亡
R
e t 19 8 3: 1 13
:
17 3
。
4
。
M a t s u o 友d A , e t a l 。 C五r o m o s o m a l a b e r r a t i `〕 n
t e s t s o n 2 9 e h
e m三e a ls e o m b i n e d w i t h S g m i x
i n v i t r o
。
M u t a t R e s 1 97 9 * 66
:
2 7 7
-
5
。
S
e h m i d W
。
T h
e m i e r o n u e了e u , t e s t 。 M u 她 t
R
e s 19 7 5
:
3 1 ( 1 )
:
9
-
6
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则的应用 . 遗传 1 9 8 4 : 6 ( 6 ) , 2 6 -
7
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学杂志 1 9 8 9 、 3 ( 3 ) : 1 7 4 .
(上接第 45 页 )
均数差异均显著 , 说明这两种农药产生的诱
变性从广度和深度上都比较 严 重 。 。 . 0 25 %
灭扫利 , 0 . 1% 敌敌 畏 , 0 . 06 % 威 灭 磷 和
0
.
0 4 5% 代 森钱水剂和对照比仅齐性差异显
著 , 说明其产生突变的群体数量不多 , 但产
生突变的个体所受的影响较严重 , 往往几个
突变存在于同一个体中。 0 . 05 % 甲胺磷则在
平均水平上与对照差异显著 , 从总体上其产
生突变的个体数量较多 , 但各个个体间受到
的影响较均匀 。 。 . 1% 的 敌百虫在此实验中
表现出无诱变性 ,但其是否真正无遗传毒性 ,
还须经过其它植物系统或动物试验再加以证
明 ,
以上 的结果显示出农药的直接伤害与诱
变性是不一致的 , 6种无直接伤害的农药 , 5
种都有不 同程度的诱变性 。 因此建议对农药
除了进行常规致死量检验外 , 还应增加诱变
性检验 , 为 了解农药的安全性提供更全面的
依据 。
参 考 文 献
1
。
C
o n e l u s i o 几 a n d R e e o m m e n d a t i o n s 。 M e e t i n g
o
f A D H O C S t e e r i n g G r o u p a n d I n v e s t i g
-
a t o r s f
o r IP C S ( In t e r皿 a t i o n a l P r o g r a m m e
o n
C五e m i e a l S a f t y ) C o l l a b o r a t i v e s t往 d y
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P l
a n t G e n o t o x i e i t y A s s a y s
,
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1 3 D
e e e m b
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。
2
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S t a 口 e n H a i r M u t a t i o n ( T邝 d一 S H M )
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S a f t y W
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