全 文 ：荆芥穗炭及其有效部位对大鼠凝血系统影响的实验研究
曹琳琳， 李 娴， 张 丽*
(南京中医药大学 江苏省方剂研究重点实验室，江苏 南京 210046)
收稿日期:2009-03-19
基金项目:国家药典委员会项目(YS-131)
作者简介:曹琳琳(1985 －)，女，硕士研究生，研究方向为中药炮制与质量控制。Tel:13605178372 E-mail:cll19850614@ tom. com
* 通讯作者:张 丽(1971 －)，女，硕士生导师，研究方向为中药炮制与质量控制。Tel:13851472740 E-mail:zhangliguanxiong@ 163. com
关键词:荆芥穗炭;凝血系统;止血作用
摘要:目的:考察荆芥穗炭及其有效部位对大鼠凝血系统的影响，筛选荆芥穗炭的止血活性部位并初步探讨其止血作用
的机理。方法:以 SD大鼠为研究对象，观察荆芥穗炭及其提取部位对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间
(APTT)、凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)的影响。结果:荆芥穗炭品组、荆芥穗炭品鞣质组均可缩短实验动物
凝血酶原时间(PT)(P < 0. 01、P < 0. 05)、活化部分凝血活酶时间(APTT)(P < 0. 05、P < 0. 05)、凝血酶时间(TT)(P <
0. 05、P < 0. 05)，同时均能提高血浆中纤维蛋白原(FIB)的含量(P < 0. 05、P < 0. 05)，荆芥穗炭品乙酸乙酯组能缩短实验
动物活化部分凝血活酶时间(APTT)(P < 0. 05)，荆芥穗生品则无明显影响(P > 0. 05)。结论:荆芥穗炭品及其鞣质部位
通过影响实验动物的内、外源性凝血途径的共同发挥其止血作用，荆芥穗炭品乙酸乙酯提取物通过影响内源性凝血系统
发挥止血作用。
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)04-0611-03
荆芥穗炭为荆芥穗(Spica Schizonepetae)的炮制
加工品，其生品为唇形科一年生草本植物荆芥
(Schizonepeta tenuifolia Briq)的干燥花穗，具有解表
散风、透疹之功效。炒炭后治便血、崩漏、产后血
晕［1］。目前荆芥穗炭的止血活性部位与成分尚不
明确，从而制约了荆芥穗炭质量标准的制定。为明
确荆芥穗炭的止血部位及止血机理，本实验选用 SD
大鼠为研究对象，观察荆芥穗炭及其止血活性部位
对大鼠凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化
部分凝血活酶时间(APTT)、血浆纤维蛋白原(FIB)
的影响，筛选荆芥穗炭的止血活性部位并初步探讨
荆芥穗炭止血作用的机理，为荆芥穗炭质量标准的
进一步修订提供依据。
1 实验材料
1. 1 动物
SD大白鼠，♂性，体重 160 ～ 200 g，购自浙江省
实验动物中心，许可证号:SCXK(浙)2003 － 0001。
1. 2 试药
云南白药:云南白药集团股份有限公司(批号:
20080112);CMC-Na:中国医药(集团)上海化学试
剂公司(批号:F20010518);枸橼酸钠:天津市科密
欧化学试剂开发中心(批号:20001005)。试剂盒:
凝血酶时间(TT、批号:STG10301-27)、凝血酶原时
间(PT、批号:STG10101-38)、活化部分凝血活酶时
间(APTT、批号:ST20201-32)，血浆纤维蛋白原
(FIB、批号:STG20401-23)，均为北京世帝科学仪器
公司生产。
1. 3 仪器
凝血仪(北京世帝科学仪器公司，LG-PABER-I
型)、离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1. 4 供试品制备
云南白药临床用量为 2 g，实验动物按临床用量
20 倍给药，即 0. 667 g /kg。取云南白药 6. 67 g 加入
0. 5% CMC-Na 溶液 200 mL 研磨均匀，即得云南白
药溶液。
荆芥穗由浙江中医药大学中药饮片厂提供(产
地:河北 批号:080806)，经南京中医药大学中药鉴
定教研室吴启南教授鉴定为唇形科植物荆芥 Schi-
zonepeta tenuifolia Briq的干燥花穗。
荆芥穗炭品临床用量为 5 ～ 10 g，本实验选用 9
g，根据炒炭得率(76. 22%)，计算生品用量为 30 g /
得率，即 39. 36 g。取粉碎后过 60 目筛的荆芥穗生
品粉末 39. 36 g(相当于 30 g 荆芥穗炭粉末)加入
0. 5% CMC-Na溶液 200 mL，研磨均匀，即得荆芥穗
生品供试品溶液(浓度相当于 30 g 炭品 /200 mL
CMC-Na)。
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第 32 卷 第 4 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
April 2010
Vol. 32 No. 4
荆芥穗在 220 ℃下炒制 8 min，成品外表焦黑
色，内部焦黄色，符合荆芥穗炭药典要求。实验动物
按临床用量 20 倍给药，即 3 g /kg。取粉碎后过 60
目筛的荆芥穗炭品 30 g，加入 0. 5% CMC-Na 溶液
200 mL，研磨均匀，即得荆芥穗炭品供试品溶液(浓
度为 30 g炭品 /200 mL CMC-Na)。
荆芥穗炭品中鞣质的提取方法按 2000 版《中国
药典》［2］进行:取粉碎后过 60 目筛的荆芥穗炭品
300 g，精密称定，置锥形瓶中，加水，于水浴锅上加
热 30 min，回收溶剂并浓缩至 1 g 炭品 /mL 的浓度，
然后按每 30 mL 浓缩液加入 0. 5% CMC-Na 溶液
200 mL 的量，研磨均匀，即得荆芥穗炭品鞣质部位
供试品溶液(浓度为 30 g炭品 /200 mL CMC-Na)。
取荆芥穗炭品粉末 300 g，用 70%乙醇回流提
取 2 次，第 1 次 10 倍量 2 h，第 2 次 8 倍量 1 h，提取
液抽滤，滤液减压浓缩，用乙酸乙酯萃取后，水浴浓
缩成浸膏。按每 1. 98 g浸膏(相当于 30 g荆芥穗炭
品粉末)加入 0. 5% CMC-Na 溶液 200 mL 的量，研
磨均匀，即得荆芥穗炭品乙酸乙酯部位供试品溶液
(浓度为 30 g炭品 /200 mL CMC-Na)。
2 统计学处理方法
实验结果以 x ± s 表示，采用双侧 t 检验方法检
验实验组相对于空白对照组是否具有显著性，P <
0. 05 表示具有显著性差异，P < 0. 01 表示具有极显
著性差异。
3 药理实验方法［3］及结果
取 SD大白鼠 60 只，♂性，体重 160 ～ 200 g，随
机分为 6 组，每组 10 只，分别为空白对照组(0. 5%
CMC-Na)、云南白药组、荆芥穗生品组、荆芥穗炭品
组、荆芥穗炭品鞣质组、荆芥穗炭品乙酸乙酯组。各
供试品分别按 2 mL /100 g每天灌胃给药 2 次，连续
10 d。于第 10 天给药后 1 h，按文献方法［3］，颈总动
脉插管取血 4. 5 mL，加入放有枸橼酸钠(3. 8%)溶
液 0. 5 mL的离心管内抗凝，以 1 000 r /min 离心 10
min，分离血浆备用。按各指标试剂盒的要求进行凝
血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、
凝血酶时间(TT)、血浆纤维蛋白原(FIB)的测定。
结果见表 1、2、3、4。
实验结果表明荆芥穗炭品(P < 0. 01)、炭品鞣
质(P < 0. 05)均能缩短实验动物凝血酶原时间
(PT)，说明荆芥穗炭品及其炭品鞣质均能通过影响
外源性凝血系统以及血浆中凝血因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、
Ⅹ的活性发挥止血、凝血作用。荆芥穗炭品、炭品鞣
质及其炭品乙酸乙酯组均能缩短实验动物活化部分
凝血活酶时间(APTT)(P < 0. 05)，说明荆芥穗炭
品、炭品鞣质及其炭品乙酸乙酯组均能通过影响内
源性凝血系统以及血浆中凝血因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ的
活性发挥止血、凝血作用。
表 1 各供试品对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血
活酶时间(APTT)的影响(x ± s，n =10)
组别
剂量
/(g /kg)
凝血酶原时间
/ s
凝血活酶
时间 / s
空白对照组 — 16. 89 ± 2. 09 14. 31 ± 3. 31
云南白药组 0. 667 13. 84 ± 2. 04 10. 55 ± 1. 01
荆芥穗生品组 3. 00 15. 37 ± 4. 50 12. 89 ± 2. 13
荆芥穗炭品组 3. 00 14. 62 ± 1. 11 11. 28 ± 1. 92*
荆芥穗炭品鞣质组 3. 00 14. 68 ± 2. 31* 11. 79 ± 2. 01*
荆芥穗炭品乙酸乙酯组 3. 00 16. 02 ± 1. 59 11. 76 ± 1. 48
注:与空白对照组比较* P < 0. 05，P < 0. 01。
表 2 各供试品对大鼠凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原
(FIB)的影响(x ± s，n =10)
组别
剂量
/(g /kg)
凝血酶时间
/ s
纤维蛋白原
/(g /L)
空白对照组 — 36. 69 ± 2. 68 2. 91 ± 1. 00
云南白药组 0. 667 32. 47 ± 3. 17 4. 30 ± 1. 10
荆芥穗生品组 3. 00 35. 59 ± 4. 27 2. 57 ± 0. 78
荆芥穗炭品组 3. 00 33. 27 ± 3. 86* 3. 69 ± 0. 59*
荆芥穗炭品鞣质组 3. 00 30. 29 ± 8. 49* 3. 78 ± 0. 61*
荆芥穗炭品乙酸乙酯组 3. 00 36. 84 ± 7. 97 2. 96 ± 0. 58
注:与空白对照组比较* P < 0. 05，P < 0. 01。
实验结果表明荆芥穗炭品及其炭品鞣质均能缩
短实验动物凝血酶时间(TT)(P < 0. 05)，说明荆芥
穗炭品及其炭品鞣质均能通过提高凝血过程中纤维
蛋白原的利用度发挥止血、凝血作用。荆芥穗炭品
及其炭品鞣质均能提高血液中纤维蛋白原的含量
(FIB)(P < 0. 05)，纤维蛋白原是合成纤维蛋白的原
料，而纤维蛋白在凝血过程中具有显著的作用，说明
荆芥穗炭品、炭品鞣质通过提高血液中纤维蛋白原
的含量发挥止血、凝血作用。
4 讨论
目前国内外对荆芥穗药理作用的研究多集中于
生品，对于荆芥穗炭品止血活性部位的筛选及其止
血机理还没有深入的研究。为探讨荆芥穗炭品的止
血机理，我们首先对荆芥穗炭止血作用的主要活性
部位进行筛选研究。
本实验选择了 PT、APTT、TT、FIB 4 个指标来探
讨荆芥穗炭的止血作用机制，其中 PT 是外源性凝
血途径的常用筛选实验，APTT 主要反映内源性凝
血因子的活性和含量的变化，TT 主要反映凝血、抗
凝及纤维蛋白溶解系统情况，是内、外源凝血途径的
共同途径，FIB是纤维蛋白原，它是合成纤维蛋白的
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原料，而纤维蛋白在凝血过程中具有显著的作用。
通过上述实验结果看出，荆芥穗炭品及其鞣质
组对 4 项指标都有显著作用，说明荆芥穗炭品及其
炭品鞣质部位既能影响外源性途径也能影响内源性
途径，达到增强止血作用的效果，也均能提高血液中
纤维蛋白原的含量，能初步确定荆芥穗炭止血作用
的主要活性部位为荆芥穗炭鞣质部位;荆芥穗炭品
乙酸乙酯组能缩短实验动物活化部分凝血活酶时间
(APTT)，通过影响内源性凝血系统以及血浆中凝血
因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ、Ⅻ的活性发挥止血、凝血作用，因此
炭品乙酸乙酯组也有止血作用;荆芥穗生品组则对
4 项指标都没有影响，这与荆芥穗生品临床主要用
于解表散风而不用于止血的功效相一致。至于荆芥
穗炭品鞣质组及乙酸乙酯组中的具体什么成分发挥
了止血作用，还有待于深入地研究。
参考文献:
［1］ 中国药典［S］.一部. 2005:162.
［2］ 中国药典［S］.一部. 2000:119.
［3］ 李家增，王鸿利，韩忠朝.血液实验学［M］.第一版.上海:上海
科学技术出版社，1997:341-386.
炮制对石榴皮中没食子酸、鞣花酸和鞣质含量的影响
崔翠翠， 张学兰， 李慧芬
(山东中医药大学，山东 济南 250355)
收稿日期:2009-04-30
作者简介:崔翠翠(1984 －)，女，山东中医药大学 2007 级硕士研究生，从事中药新药研发与中药炮制原理研究。Tel:13589134395 E-mail:
cuiatpingdu@ 163. com
关键词:石榴皮;炮制;没食子酸;鞣花酸;鞣质
摘要:目的:研究炮制对石榴皮中没食子酸、鞣花酸和鞣质含量的影响。方法:以没食子酸、鞣花酸和鞣质含量为指标，对
石榴皮生品和炒炭品进行比较。用 HPLC法测定没食子酸和鞣花酸含量，用 UV 法测定鞣质含量。结果:石榴皮经炒炭
后没食子酸和鞣花酸含量较生品依次增加 124. 76%和 122. 22%，而鞣质含量较生品降低 56. 55%。结论:加热炮制对石
榴皮中没食子酸、鞣花酸和鞣质含量有显著影响。研究结果为石榴皮饮片的炮制和质量控制提供实验依据。
中图分类号:R283 文献标识码:A 文章编号:1001-1528(2010)04-0613-03
石榴皮为石榴科植物石榴 Punica Granatum L.
的干燥果皮，具有涩肠止泻、止血、驱虫的功效。现
代对石榴皮的炮制方法主要有切块生用和炒炭［1］。
但目前石榴皮饮片的炮制工艺仍不规范，且缺乏科
学的饮片质量标准，实际生产中难以掌握。石榴皮
中富含鞣质类成分，主要有没食子酸、鞣花酸、安石
榴林、安石榴苷、石榴皮亭 A、石榴皮亭 B、没食子酰
双内酯等［2］。鞣质为石榴皮的主要有效成分，具有
收敛止血作用，《中国药典》从 1995 年版起就规定
石榴皮药材中鞣质含量不得低于 10%。但炮制对
石榴皮中没食子酸、鞣花酸和总鞣质含量有何影响，
尚未见报道。本研究以没食子酸、鞣花酸和总鞣质
含量为指标，对石榴皮生品和炒炭品进行比较，为石
榴皮饮片的炮制和质量控制提供实验依据。
1 仪器与试药
Agilent1100 高效液相色谱仪(美国 Agilent 公
司);UV3010 UV /Vis 分光光度计(HITACHI High-
Technologies Corporation，Tokyo dapan);PM PLUS 型
红外测温仪(美国 Raytek公司);KQ-250E 型医用超
声波清洗器(功率 250W，频率 40kHz，江苏省昆山市
超声仪器有限公司)。
石榴皮购自安徽新兴中药材饮片有限公司，产
地江苏，经本校中药鉴定教研室周凤琴教授鉴定为
石榴科植物石榴 Punica Granatum L. 的干燥果皮。
没食子酸对照品(供含量测定用，中国药品生物制
品检定所，批号:0831-9501);鞣花酸对照品(供含量
测定用，上海融禾医药科技有限公司，批号:
080629);甲醇为色谱纯;娃哈哈纯净水，其余试剂
均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 样品的制备
生石榴皮:取石榴皮原药材，去除杂质，洗净，润
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中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
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