全 文 ：第 9 卷 第 2期 V o l . 9 N o . 2
19 9 2年
广 西 医 学 院 学 报
A T CA O F G U A N G X】 M旧D I CA L CO LI L刀E 19 9 2
采用鱼外周血红细胞微核试验和紫露草
微核试验综合评价水体污染
张丽生 黄少珍 张力图 郭建霞
(广西肿瘤防治研究所 )
匣王画 陈志刚 黄珍杨
(广西扶绥县肝癌研究所 )
摘要 采用鱼外周血红细胞微核试验(F ih s一沁寸 r)和紫屏草花粉毋细胞微核试验 (T rad
一 MN T ),联合检测了广西扶绥县肝癌高发区的水体污染 .结果表明 ,塘水具有明显的诱变
性 。它可引起紫露草花粉母细胞和鱼夕调力匡〔细胞的徽核率显著升高 ,提示塘水 ` l ,存在的
化学诱变物质 ,对动、 植物细胞均具有潜在的基因毒性作用 . 曰由一 M付 I、 和 rT ad 一NM’ r 方法简便 ,结果鉴别客观 、 可靠 ,是判定水体综合诱变作用的有效的原位测定系统 ,值得推广
应用 。
关键词 鱼夕调血红细胞徽核试验 ;特麟草微核试验 ;塘水 ;基因毒性
水与人类的生存息息相关 , 探衬饮水污
染与肝癌的关系一直是肝癌病因学研究的重
要内容〔 ,一 3 , 。 业已证实 , 广西扶绥县肝痛高发
区居 民饮用的塘水中 , 有致植物细胞染色体
损伤的化学诱变剂污染 .c4 匀 。为 了对该地区水
体污染作出全面客观的评价 , 为饮水污染与
肝癌成因的理论提供进一步的实验依据 , 本
文报道采用两种水质原位监测系统— 鱼外周血红细胞微核试验 (简称 isF h一 M N )T 和紫
露草微核试验 (简称 1丫a d 一 MN T )的检测结
果 。
l 材料与方法
1
.
1 采样点的确定与实验分组
在广西抉绥县内的四个地区 , 以左江河 、
汪庄水库以及 s 村 、 L 村的两个水塘为采样
点 。 依据以往多次进行的监测数据 ,左 江河水
收稿口期 : 1 99 2一 0 2一 1 8
基本符合卫生标准 ,水中未发现 有化学诱变
剂污染闭 ,本文将其定为实验对照组 , 并以蒸
馏水作为空白对照组 ,其余三个 采样检测 点
为实验观察组 。
L Z 测定方法
1
.
2
.
1 水样测定 : 采用 rT ad 一 M N T , 按 M .a
T
.
H 报道的程序进行`幻 。
1
·
.2 2 iF hs 一 MN T : 从水样检测 点采集的活
鲤 鱼 , 用剪刀将其鳃 部剪开 , 吸取外周血 , 迅
速涂片 , 甲醇固定后用 iG e m sa 染色 。每张片于
油镜下观察计数 5 0 0个胞膜和核膜完整的红
细胞中出现的微核 。 每尾鱼分别计数 5 0 0 和
10 0 0个红细胞 ,并将两种计数方法的结果进
行比较 。
1
.
2
.
3 统 计方 法 : rT ad 一 M N T 的 微 核 率
( M N F )按百分率计算 , iF hs 一 M N 丁 的 M N F 按
千分率计算 。 数据处理采用双侧 `检验和相关
分析进行显著性检验 。
DOI : 10. 16190 /j . cnki . 45 -1211 /r . 1992. 02. 005
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2结 果
2
·
1水样测定结果
水样的 T ra d一 MN .T 测定结果见表 1。 与
蒸馏水空 白对照相比 ,左江水 (实验对照 )的
M N F 无显著性差异 , 汪庄水库水与两个对照
也无显著性差异 ; 而 S 村塘水和 L 村塘水的
M叫 F 均有极显著性差异 。
表 l 不同水源的 rT ad 一 MN F 比较
组别
M N F (% )
2士二
尸
与 C N 比 与 A 比 与 n 比 与 c 比
蒸馏水 `e N ) 5 . 4 1士 1. 02
左江水 ( A ) 5 . 6 9士 1. 08 > 0 . 05
汪庄水库水 ( )B 6 . 8 4士 1. 13 > 0 . 0 5 > 0. 05
s 村塘水 ( e ) 9 . 33士 0. 8 5 < 0 . 0 0 1 < 0 . 0 0 [ < 0 . 0 1
L 村塘水 ( D ) ! 0 . 4 8土 ! . 5 0 < 0 . 0 0 1 < 0 . 00 1 < 0 . 00 1 > 0 . 0 5
2
.
2 鱼样测定结果
四个水样检测点的 iF 劝一 M N F 以左江 ( A
组 )的鲤鱼最低 , 汪庄水库 (B 组 ) 的居次 , 两个
水塘 ( D 、 C 组 )最高 . 经双侧 ` 值检验 , B 组鲤
鱼的 M N F 与 A 组无显著性差异 , C 、 D 组 则显
著高于 A 、 B 组 (表 2) 。
表 2 不同水源的 F宜s卜一卜俐F 比较
组别 采样地点 受检鱼尾 数
M N I; (编 )
含士 、
P
与 A 比. 与 B 比 与 C 比
左 江 ! . 3 0土 0 . 刁0
B 汪庄水库 12 1. 4 7土 0 . 2 9 > 0 . 05
C s 村水塘 1 0 1. 9 0士 0 . 39 < 0 . 0 1 ( 0 . 0 1
D L 村水塘 2 . 33士 0 . 7 1 < 0 . 0 1 < 0. 0 1 > 0 . 05
2
.
3 T r a d 一 M N F 与 F is h 一 M N F 相关性 比较
将 ’ r a d 一 M N T 与 F jhs 一 M N T 两种原位
测 定系统的结果进 行相关分析 , 发现水样和
鱼样的 M N F 有 高度相关 , , ~ 0 . 哪 J , 尸 < 0 . 05
L附图 ) 。
2
.
4 F is h一 M N T 两种计数方法结果比较
每尾 鱼分别计数 5 0 0 和 10 0 0 个红细
胞 , 结果显 示 , 两种计数方法的 M N F 无显著
性差异 。 但每组观察的鱼尾 数较 少时 ( A 、 D
组 ) , 两种计数方法测定结果的差异有增大的
趋势 (表 3 ) 。
张丽生等 :采用鱼外周血全!:细胞微核试验和紫屏草微核试验综合评价水休污染
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.
5 0 ǎ。次à巨二日(次)
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川日ù引J.l司川 1. 1曰.I.lIJ
盯旧
l. rre Ls1,,`
左江 汪庄水库 S村水塘 L村水塘 〔采样地点 )
附图 T ar d一 M N F与 F ihs 一 M礴相关性比较
表 3 F访h一 M N T 两种计数方法结果比较
组别 受检负尾 数
方法 I MN F (%。 ) 方法 , M N F (%。 )
工士 s , 士 ,
1
.
3 0士 0 . 4 0 1. 0 6土 0 . 5 5 > 0 . 05
4 7士 0 . 29 . 5 2士 0 . 3 1 > 0 . 0 5
1
. 与0 上 0 . 39 8 8士 0 . 47 ) 0 . 0 5
2
.
33士 0 . 7 1 2 . 2 7士 1 0 4 ) 0 . 05
注 :方法 I 每尾鱼计数 10 0 0。个细胞 ,方法 , 计数 5 00 个细胞
些方法用于非工业性水体污染的研究报告不
3 讨 论 多 ,尤其是将两个检测方法联合应用者则尚
未见报道 。
用于评价水体污染的方法很 多 , 其中真 在以往的研 究中 , 作者曾首次发现 在广
核细胞 测定系统 ( E u kar yo t ic ~ y sy st 。 ,1s )更 西扶绥县肝癌高发区居 民饮用的塘水 中
, 有
受到科学工作者的重视和青睐 〔n 。 因为从理论 致植物细胞染色体损伤的化学诱变剂污染山 。
上推断 , 该系统测定的结果对于评估水体污 但水塘是一种半封闭的生态系统 ,水的 污染
染与人类的关 系可能具 有更大的价值 。 本文 与自净常常处于动态平衡的状态 。 由于其污
所采用的 T ar d 一 M N T 和 iF hs 一 M N T 均属 真 染源难以确定 , 而且水中存在的致癌 /致突变
核细胞测定系统 , 在监测工业性水体污染的 物质可能种类繁多而含量甚微 . 鱼作为水塘
应用方面 , 已有不少有价值的报道低驹 . 但将这 这个生态系统的重要成员之一 , 其终生 生活
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在这一环境中 ,水中的有害物质可能会 富集
于鱼体内 ,通过新陈代谢 , 可能会对鱼细胞的
生物学行为尤其是细胞遗传物质的代谢活动
产生不利的影响 。基于这一假设 ,本研究采用
rT ad 一 MN T 和 F ohs 一NM T
, 对流经扶绥县的
左江水 、 汪庄水库水和采自肝癌高发 区的两
份塘水以及生活在这些水系中的鲤鱼进行了
测定 。结果表明 , T ar d 一 M N T 测定阴性的左江
水和汪庄水库水 ,其水中生长的鲤鱼 , 红细胞
中的 MN F 也较低 ;而不符合水质卫生标准的
两份受检塘水 , T adr 一 M N T 测定为阳性 ,水中
生长的鲤鱼的红细胞 MN F ,也明显高于左枉
水和汪庄水库水 ,差异均有极显著意义 。 表明
塘水中存在的化学诱变物质 , 能造成鱼外周
血红细胞遗传物质的损伤 , 显示了潜在的基
因毒性 。
本研究结果还表明 , T r a d 一 M N T 和 isF h
一 M N T 的检测结果有良好的相关性 。这一结
果既提示塘水中的诱变物质对动 、植物细胞
均有明显的遗传毒性作用 , 同时也表明 ,这两
个原位监测系统用 于水体污染的研究时 , 可
作为评价水体污染综合诱变作用 的有效指
标 。 iF hs 一 M N T 和 rT ad 一入。 , T 方法简便 , 结果
鉴别客观可靠 ,值得进一步推广应用 .
参 考 文 献
1 苏德隆 . 饮水与肝癌 . 中华预防医学杂志 , 19 80 , 1月
( 2 )
:
65
2 俞顺章 ,等 . 饮水与肝府 . 肿瘤 , 19 86 , 6 ( 刁) : 14 9
3 张丽生 ,等 . 扶绥县原发性肝癌主要危险因素的研
究· 肿瘤防治研究 , 199 1 , 一s ( 2 ) : 7 7
4 张丽生 ,等. 肝癌高发区水体污染的微核效应及其
致痛危险性研究 . 府症 , 198 , 7 l( ) : 1
5 张丽生 ,等 . 肝癌高发汉饮用水中化学诱变剂的污
染调春 环境与健康杂志 , 1959 , 6( 3) : 26
6 M翻 1 1于. 洲cor n u e l口 I旧 u以刃 by X , ar 外 田记 cb c m」司
m u ta目叮姆 in 叮岭 id ic op ” m n 、 。山叮 . 山 of 介 a d a弧习旧叮-
a一 A ’ p r o n山 in g m u t叫护 n t以 s sy ct m . 栩伯 t R朋 , 197 9 ,
6 4 : 3 07
7 J比 n R . M c le r . G e n 以。心 c act i v i ty o f or 即 n 独 由。而口山
in d血 U n 吕 w a 比 r . M u t R口 , 198 8 , 19 6 : 2 11
8 陈登勤 ,等 . 青肠几个工厂废水污染监测的 C O D
指标与紫露草微核率的比较实验 . 中国环境科学 ,
198 4
,
4 ( 2 )
: 50
9 张尤恩 ,等 . 应用鱼外周血有核红细胞微核监测水
体污染 . 环境与健康杂志 , 19 86 , 3 ( 2) : 9
A S S ES S M E N T O F P O L L U T IO D O F 丫VA T E R U S IN G
凡 S H 一M N T A N D T R A D 一M N T
Z h an s L i
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,
Ch e n Z h is an s
,
H u an g Z h e n y a n g
( nI s t it u e o f L i ve r aC
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跟 y e d us in g f is h m ie r o un e le u s et s t ( F is h一 MN T ) a n d T r a d es can 血 m ie orn u e le us est t ( T r a d一 MN T )
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第 9 卷 第 2期 V ol .9 N o . 2
1 9 9 2年
广 西 医 学 院 学 报
A C r A O FO U人N GX I 侧rE D IC A LC O L LE GE 1 9 9 2
男性绒毛膜细胞癌 l例
邝国乾 杨荣宁
(附属肿瘤医院头颈科)
男 , 4 0岁 。 1 9 8 9年 10 月 27 日因左锁骨上肿
块 10 多天入院 . 查见左 甲状腺肿大 , 扫描为
“ 冷结节 ” , B 超检查为实质性肿块 , 其余未触
及肿块 ,胸片正常 . 川 月 3日取左颈淋 巴结活
检 , 病理报告为纤维组织转移性或浸润性绒
瘤 。 1 月 1 7日开始化疗 , 用氨 甲喋吟和丝裂霉
素 ,肿块一度消退 ,但潇货决复肿 ,且发热 、 下腹
疼痛 。 12 月2 日改用 5一 F u 和更生霉素 , 肿块反
而增大 ,持续发热 ,尿童达搜一 6L / d , 腹部触及
1 0C m X 1 c0 m 以 _ L包块 , 胸片见两肺有数个肿
块 。 1 9 9 0年 1月 15 日又改用阿霉素 、顺铂 、 足叶
乙试 , 并大量补钾 , 一疗 程后肿块 明显缩 小 ,
发热消退 , 尿量明显 减少 。肺部肿块也缩 小 ,
但持续不满 3周 。 第二疗程又获同样结果 ,此
时纵隔增宽 。 4月 1 日再 改用顺铂和 5一 F u , 连续
输注 5天一疗程 ,休息 3周重复第二疗程 。 发热
消退 ,颈部肿块缩小至 4c m x 3cln 。腹部包块不
明显 ,纵隔阴影明显缩小 . 但效果持续不长 。 5
月底病情迅速恶化 , 6月 26 日死亡 。
讨论 : 男性绒癌属非妊娠性绒癌 , 罕见 。
大多为个案报道 。 非妊娠性绒癌可原发于生
殖器 (架丸或卵巢 ) , 也可原发于纵隔 、 腹膜后
等 。组织起源尚无定论 ,有认为起 源于卵黄囊
至泌尿生殖岭的生殖细胞移行中部分停留在
其间形成 , 有认为是由多能原始生殖细胞分
化 而成 。本例无皋丸肿大 , 纵隔转移在后 , 故
可能原发于腹膜后腔 。
非妊娠绒癌治疗效果较差 。 可能与细胞
来 自自身的滋养细胞 , 其免痊原性或抗原性
较低 ,以及发现多属晚期等因素有关 。本例从
确诊到死亡前后 8个 月 。 值得 一提的是 , 经典
的妊娠性绒癌化疗 方案对本例效 果较差 , 使
用 以顺铂 为主的两个方案均获得较好的缓
解 ,但缓解期不长 ,尤第二疗程以后 。
收稿日期 : 19 90 一 0 8一 30
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B o t h F is h 一M N T an d rT a d一 M N T a r e e f f ec ti v e Pr如 a r y s at t io n 翻义坦 y s ys tem f or t h e as -
s e s s 们n e n t o f ht e m u t a s e n ie a e t i o n i n w a et r
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