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松果菊润喉片的免疫药理学研究



全 文 :·24· Chinese Journal of Information on TCM Jan.2005 Vol.12 No.1
·实验研究·
松果菊润喉片的免疫药理学研究
钱瑞琴 1,蒋文跃 1,艾铁民 2
(1.北京大学基础医学院,北京 100083;2.北京大学药学院,北京 100083)
摘要:目的 观察松果菊润喉片对小鼠免疫功能及其化痰的影响。方法 进行免疫及化痰实验。结果 松果菊润
喉片能增强小鼠腹腔巨噬细胞碳粒廓清速度,促进抗体(溶血素)水平的产生,促进二硝基氯苯所引发的迟发性变态性反
应的足趾肿胀;对气管黏膜排泄酚红有明显促进作用。结论 松果菊润喉片有促进排痰、提高机体免疫功能的作用。
关键词:松果菊;松果菊润喉片;免疫
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:1005-5304(2005)01-0024-02
Immunity of the Effects of Echinacea Compound Lozenge QIAN Rui-qin1, JIANG Wen-yue1, AI Tie-min2
(1.Modern Research Center for TCM, Beijing University, Beijing 100083, China;2.Pharmaceutical School, Beijing
University, Beijing 100083, China)
Abstract:Objective To investigate the pharmaceutical effects of Echinacea compound lozenge on
sputum-reducing and immune functions in mice. Methods The production of hemolysin, the
clearance of charcoal particle, sputum-reducing test and the delayed hypersensitivity induced by
2,4-chlorod. Results It showed that the index of phagocytosis of reticular endothelial system, and
enhance the delayed hypersensitivity induced by 2,4-chlorodinitrobenzene
and increased excretion rate of phenol red in trachea in mice. Conclusion It could obvious promote
the immunity and sputum-reducing.
Keywords:Echinacea;chinacea compound lozenge;immunological
松果菊润喉片主要成分为松果菊全草提取物的浓缩物,
含有多羟基酚类、菊苣酸和菊糖,其组成还有桔梗、甘草。我
们的实验已表明松果菊润喉片有明显的抗炎、抗菌及镇痛作
用。为进一步探讨松果菊润喉片的作用及其机理,本课题深入
观察了松果菊润喉片对小鼠非特异性、特异性免疫功能、迟
发性变态反应以及化痰的影响。
1 实验材料
1.1 药物
松果菊润喉片,北医中医药现代发展中心提供,批号 002,
含量:3.0 g 原药材/g 提取物,外观为深棕色药粉,室温干燥
保存,用蒸馏水配制成所需浓度,分别相当于 0.36、0.18、
0.09 g 原药材/ mL。乙酰水杨酸(阿司匹林)水溶片,无锡制
药有限公司生产,批号 200005018,规格:0.5 g/片。健民咽
喉片,武汉健民药业集团股份有限公司生产,批号 001325,规
格:0.9 g/片。百令胶囊,杭州中美华东制药有限公司生产,
批号:(91)卫药准字 2-81 号,规格:0.2 g/粒。印度墨汁,
批号980301,用生理盐水稀释4倍;二硝基氯苯,批号000224;
丙酮,批号 890810;氯化胺,批号 9910107,均为北京化工厂生
产。
1.2 动物
昆明种小鼠,雌雄各半,体重 18~23 g,北京大学医学部
实验动物部提供,合格证号为:医动字号 SLXK11-00-0004。
2 方法与结果
2.1 对小鼠腹腔巨噬细胞碳粒廓清速度的影响
小鼠按体重随机分成 6 组,每组 10 只,分别为对照组、西
药阳性药阿司匹林组、中药阳性药百令胶囊组、松果菊润喉
片低、中、高剂量组。连续给小鼠灌胃 7 d,模型对照组给予
同体积蒸馏水灌胃。末次喂药后 1 h,各组鼠均由尾静脉注射
印度墨汁 0.1 mL/10 g 体重,于注射 2、10 min 后在小鼠眼后
静脉丛用毛细玻璃管(肝素抗凝)取血,用微量移液器吸取 20
μL,分别加入 4 mL 蒸馏水中,在 721 分光光度计 600 nm 处测
定 OD 值,并计算清除速度。其公式为:(注射后 2 min OD 值
-注射后 10 min OD 值)/8。结果见表 1。
表 1 对小鼠腹腔巨噬细胞碳粒廓清速度的影响(—x±s,n =10)
组别 剂量(g/kg) 清除速度(OD 值/min)
对照组 0.0102±0.0011
百令胶囊组 1.0 0.0217±0.0052***
松果菊润喉片组(低) 4.5 0.0136±0.0020
松果菊润喉片组(中) 9.0 0.0138±0.0012*
松果菊润喉片组(高) 18.0 0.0173±0.0044***
注:与对照组比较,*P <0.05,***P <0.001(下同)
2005 年 1 月第 12 卷第 1期 中国中医药信息杂志 ·25·
2.2 对小鼠血清溶血素水平的影响
小鼠分组同 2.1。连续灌胃给药 7 d,模型对照组给予同
体积蒸馏水。于给药第 3 天每只鼠腹腔注射 10%羊红细胞悬
液 0.5 mL,免疫后 4 d 小鼠摘眼球取血,离心取血清。用生理
盐水稀释(1∶100)。取稀释后的血清 l mL 置试管内,放冰水浴
中,依次加入 10%绵羊红细胞悬液 0.5 mL,1∶10 稀释的豚鼠
血清 1 mL。另设不加补体而以生理盐水代替的空白对照管。
移置 37 ℃水浴箱中,温育 10 min。育毕,放入冰浴以终止反
应。用 2 000 r/min 离心 l0 min,取上清液在 540 nm 进行血
红蛋白比色测定。结果见表 2。
表 2 对小鼠血清溶血素水平的影响(—x±s,n =10)
组别 剂量(g/kg) OD 值
对照组 0.318±0.101
百令胶囊组 1.0 0.510±0.039***
松果菊润喉片组(低) 2.25 0.312±0.024
松果菊润喉片组(中) 4.5 0.349±0.028*
松果菊润喉片组(高) 9.0 0.360±0.017***
2.3 对小鼠迟发性变态性反应的影响
小鼠分为 5 组,模型、阿司匹林及松果菊润喉片高、中、
低剂量组,给药剂量同 2.1。各组均在注射 1.25%二硝基氯苯
丙酮溶液(0.02 mL/只)24 h 后喂药,喂药 9 d 后,左足注射
1.25%二硝基氯苯丙酮溶液 0.02 mL,右足注射同体积丙酮,38
h 后,在踝关节处剪下两足称重。结果见表 3。
表 3 对小鼠二硝基氯苯所致迟发性变态反应的影响
(—x±s,n =10)
组别 剂量(g/kg) 肿胀值(mg) 抑制率(%)
对照组 4.78±2.50
阿司匹林组 0.1 2.35±1.13* 50.8
松果菊润喉片组(低) 2.25 5.17±3.55
松果菊润喉片组(中) 4.5 5.78±2.11
松果菊润喉片组(高) 9.0 7.46±3.00*
2.4 对小鼠排痰(气管段酚红法)的影响
小鼠按体重随机分成 6 组,每组 10 只,分别为对照组、氯
化胺组、健民咽喉片及松果菊润喉片高、中、低剂量组。一
次性灌胃给药。对照组给予同体积蒸馏水灌胃。给药 45 min
后,腹腔注射 5%酚红 0.2 mL/10 g 体重,30 min 后脱臼处死小
鼠,剥去气管周围组织,剪下自甲状软骨下至气管分支处的一
段气管,放入盛有 2 mL 生理盐水培养板内,加入 NaOH (1
mol/L)0.2 mL,剪开气管,震荡 30 min,用 721 分光光度计在
546 nm 处测定 OD 值,根据绘制的标准曲线换算成酚红含量。
结果见表 4。
3 讨论
松果菊润喉片是以松果菊为主的中药复方制剂,其中
松果菊为菊科松果菊属 Echinacea植物松果菊 E.purpuea
表 4 对小鼠化痰的影响(—x±s,n =10)
组别 剂量(g/kg) 酚红含量(μg/mL)
对照组 0.399±0.093
氯化胺组 1.0 1.942±0.409***
健民咽喉片组 1.6 1.288±0.288***
松果菊润喉片组(低) 0.75 1.023±0.275***
松果菊润喉片组(中) 1.5 1.387±0.384***
松果菊润喉片组(高) 3.0 1.593±0.449***
Moench 的干燥地上部分。原产北美洲,是印地安人的传统药
材。松果菊单味药材的治疗用途十分广泛,可以治疗各种炎症
和感染,其疗效得到临床的肯定[1-2]。动物实验表明,松果菊中
所含的烷基酰胺类、链烯酮、菊苣酸能够增加粒细胞和巨噬
细胞的活性[2]。松果菊多糖类可增强巨噬细胞的吞噬作用,
对 T 细胞增殖有促进作用,松果菊醇提物刺激巨噬细胞产生
大量免疫增效因子,如肿瘤坏死因子,干扰素,白介素Ⅰ、Ⅱ、
Ⅵ、Ⅹ。由于其具有较好的免疫增强作用,现已成为国际草药
市场十大流行草药之一[3-4],现北京地区松果菊已引种成功。
我们将引种成功的国产松果菊(紫锥菊)为主药配制成松果菊
润喉片,用于治疗临床常见的急、慢性咽喉炎,并进行了系列
的基础研究。以往的实验表明其在抗急慢性炎症、抗菌和镇
痛方面有着较为显著的药理作用。由于急、慢性咽喉炎患者
临床以痰多、易反复发作为特点,为此,我们设计了松果菊润
喉片对小鼠排痰、特异性和非特异性免疫以及迟发性变态反
应的实验。实验提示松果菊润喉片治疗急、慢性咽喉炎的作
用机理是多层次和多系统的,它可通过抗炎、抗菌、促进排痰、
镇痛、促进巨嗜细胞吞噬功能、抗体形成以及对迟发性过敏
反应的调整作用从而达到治疗急、慢性咽喉炎的作用,与单纯
局部抗炎制剂比较,对急、慢性咽喉炎有整体调节的优越性,
值得进一步开发和利用。
参考文献:
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(收稿日期:2004-04-05)