全 文 ：19 9
.
19 (2 )基础医学与临床B a s ie Med iea l Se ie ne e sa nd C l in ie, 8 1 (总 17 7 )
三七叶总贰对细胞内钙和外钙的影响△
谢世荣 ` 但汉雄 ’ 黄彩云 ’ 黄胜英 ` 冷 萍 ’ 医至亘}3
l( 大连大学医学院药理教研室 , 大连 116 62 ) (2 湖北医学院咸宁分院药理教研室 )
(3 北京医科大学基础医学院药理学系 )
摘要 三七叶总贰 (介 t a一: a p o n in e s 。 f L e a r 。 r pan ax n o t o g in s e n g , P N L T s ) 0 . 5一 l m gL[ 抑制异
丙肾上腺素加快豚鼠右心房自发频率的作用 , 能使量效反应曲线右移 。 P N L T s l m留L 也能抑制大
鼠主动脉螺旋条由高+K 去极化和去甲肾上腺素 30n m of 几诱发收缩张力增加的作用 。 NP L T S l m妙
与呱克昔林 37 .5 林m 。比作用相似 , 都有拮抗作用 , 能拮抗受体控制性钙通道 ( R O C ) 和电位依赖性
钙通道 ( PD C ) , 并证明 PN L T S 与派克昔林对内 C a +2 释放和外 C a +2 内流诱发主动脉螺旋条的收缩都
有抑制作用。
关键词 三七叶总贰 电位依赖性钙通道 受体控制性钙通道 主动脉螺旋条 右心房
三七叶总贰是三七茎叶中提取的总贰 ,
我们曾发现有抗心律失常的作用川 。 本文进一
步研究其抗心律失常作用机制 。
1 材料与方法
L l 动物
5 0 大鼠 2 5 0~ 2 5 0 9重 , 豚鼠3 5 0~ 4 009 ,
由北京医科大学实验动物部提供 , 雌雄兼用 。
1.2 药品
P N L T S 为云南省药用植物研究所提供 ,
为黄色粉末 , 水溶。 呱克昔林 ( P e hr i x i li n e , P e r )
由北 京大学化 学系提供 。 异 丙肾上 腺素
( 150 )
, 去甲肾上腺素 ( N A )为北京制药厂产品 。
1
.
3 大鼠右心房标本
将豚鼠击头处死 , 取出心脏 , 分离右心
房 , 使窦房结保持完整 . 右心房一端与张力换
能器相联 , 另一端固定于盛有 2 0m L K r e bs -
H e n s e le i r液 , pH 7 . 4的浴管中 , 保持温度在 3 0
士 l oC 。 通以 9 5% 0 2+ 5% C o Z , 静息张力 19 ,
平衡 l h , 右心房 自发搏动频率稳定后进行实验 。
1
.
4 大鼠主动脉螺旋条
取处死后 的大 鼠主动脉并剪成螺旋条 。
条件同上实验 。
1
.
5 豚鼠结肠带
取处死后的豚鼠结肠并剪成结肠带 。 条
件同上实验 。
2 实验结果
2
.
1 P N L T S 对 15 0 加快离体豚鼠右心房自发
频率的影响 1zI
测定对照组累积给 15 0 后增加右心房自
发频率峰值的变化 。 两次加入 15 0 的间隔为
Zm in
。 作出对照组量效曲线 。 另外三组分别加
入 o . s m妙 、 l m叭的 PN L T S和 已知钙拮抗剂
P e r 3 7
.
5林m o l /L 。 10 m in 后同样测定 15 0 的量
效曲线 。 结果见图 1 。
NP L T S和 P e r相似 , 使 15 0 量效曲线右移 。
2
.
2 P N L T S 对平滑肌收缩张力的影响 13 1
.2 2
.
1 PN L T S 对豚 鼠结肠带高 K + 去极化后累
加 C a 1C 2诱发收缩张力的影响 l’1 用前法将豚
鼠结肠标本放置在 -L R 氏液中 , 平衡 3Om in ,
然后用 K + ( 15 4m m o l /L ) 无 C a Z+ 液反复冲洗并
平衡 15m i n , 按等 L匕级数累加法加 C a C 12 , 测
定对照组结肠收缩张力的累积量效曲线 。 另
取结肠标本分别加 PN L T S 或 P er , 10 m in 后同
样测定量效反应曲线 。 结果见图 2 。
△本研究由国家自然科学纂金资助
82 (总 1 7 8 ) 基础医学与临床 B as i c M e d i e a ! S e ie n e e s an d C li n ie s 19 99 . 19 ( 2 )
一 g / (。 0 1 · L )
q`d\a护门向地口州p,。qe,oau,夕`厉
图 1 P N L T S 对 15 0 加速豚鼠离体右心房自发频率
的影响
F i g l E fe e t o f P N L T S o n s Po t a n e o u s l y b e a t i n g
r a t e o f i s o l a t e d g u i n e a p ig
r
ig h t h e a r t a t r ia u n d e r
is o P r o t e r e n o l (
n = 10
, x 士 s )
. - - - . 15 0
j 沪 - - -占 P N L T S
。 - - 一。 PN L T S 0 . s m g/ L
,
m g/ L
a e
-刊口 P e r 2 5协m o lL/
v s I S D . P < 0
.
0 5
, * .
P< 0
.
O I
, … P < 0 . 00 1
PN L T S 与 P er 显著降低了结肠的收缩张
力 , 使量效曲线右移 。
.2 .2 2 PN LT S 对大鼠主动脉螺旋条由高 K 十 去
极化诱发收缩张力的影响 l’, ’ 】 在 K r e bs 液浴
管中加入 K cl 60 m m o UL , 引起主动脉螺旋条
收缩的最大张力为 0 . 1 8 0 士 。 . 00 9 9 。 然后用
K沙e bs 液反复冲洗 , 平衡 hl 后 , 向浴管中加入
NP L T s l m叭或 p e r 2 5林m o lL/ , 加药后 10m i n
再加等量的 K a , 引起主动脉螺旋条收缩张力
分别为 0 . 0 0 9 士 0 . 0 6 19和 0 . 0 6 9 士 0 . 0 5 09 , 是
对照组的 50% ( P 0< . 0 1 ) 和 3 8 . 3% ( P 0< . 0 0 1 ) 。
2
.
2
.
3 PN L T S 对大鼠主动脉螺旋条由 N A 诱
发收缩张力的影响 ls] 在 K r e b s 浴管中加入
N A 3On m ol L/
, 引起主动脉螺旋条收缩的最大
张力为 0 . 141 士 .0 03 19 。 然后冲洗 , 继续平衡
l h
, 分别向浴管中加入 pN L T s 1m g /L 或 P e r
2 5卜m o l /L , 1o m i n后再加入同样剂量的 N A , 收
缩张力分别为 0 . 0 8 1 士 0 . 0 0 6 9 和 0 . 0 2 6 士
.0 0 0 2 9
, 是对照组的 56 . 7% (尸< .0 05 ) 和 18 . 4%
( P < 0
.
0 0 1 )
。
2
·
3 给 p N L T s 前后对 N A 和 C a C IZ诱发大鼠
主动脉螺旋条收缩张力影响 le, 7 ]
大鼠主动脉螺旋条平衡 hl 后 , 用无 C a +2
K er b s液冲洗并平衡 3 5m i n , 加入 N A 3 0 n m o盯
L
, 收缩张力则再次升高 。 其上升张力分别作
为给药前的对照值 。 用无 C a +2 K r eb s 液冲洗
后 , 平衡 2 0m i n , 加入 p N L T S l m岁L 或 p e r
3 7
.
5林m o lL/ , 平衡 2 0m i n 后 , 再重复加入同样
剂量的NA 和 C aC ! 2
, 其收缩张力与 P er 相似 ,
抑制大鼠主动脉螺旋条的收缩张力 。 结果见
表 1。
uj0钊”,u功
r次Juo叫。a护.曰T刁óp`00
一 g / ( m o l · 工 )
图 2 P N L T S对高 K` 去极化豚鼠结肠由钙诱发收缩
的影晌
Fi gZ E们er c t o f P N L T S o n c o n t r a e it o n o f+K d e OP la -r
i z e d 15 0班a t e d g u i n e a Pi g e o lo n ( n = 10, 万士 s )
。 - . O N S ,
~
P e r, 25 林m o lL/
~ NP LT
S l m岁L
v s N S gr o u P 二 P0<川 , … P< 0 . 00 1
3 讨论
豚鼠结肠带在高 r 无 C a +2 液中 , 使平滑
肌细胞膜去极化 , 虽使 P D C 开放 , 但因营养
液中无 C a+2 进入细胞内 , 故不能引起收缩张力
增加 。 由于累积加 C+az , 随着细胞外液 C a +2 浓
度的增加 , 进入细胞内游离 C a +2 浓度也增加 ,
而平滑肌收缩张力增高 , 直至达到最高强度 。
19 9
.
19 ( 2 ) 基础医学与临床 B sa i e Med ie a l S e ie n e e s an d C l in ie s 83 (总 17 9 )
表 1 P N LT s 对大鼠主动脉螺旋条由 N A 和 C a a :
引起收缩张力的影响
T a b le 1 E月几 e st o f P N L T S o n e o n t r a e t io n o f r a t
a o
art
s tr i p s i n d u c e d by NA 3 0 n m o lL (
n = 10
, 万土 s )
eT n s i o n d ve e lo Pm e n侧g
P N LST l m创L P e r 37 . 5林mo lL
N A B e fo er 0
.
04 9 士 0 . 0 19 0 . 0 8 3 士 0 . 0 57
A ft e r 0
.
0 2 5 士 0 . 0 20 . 0 . 02 7 士 0 . 02 5 ”
c a C I Z B e fo r e o
·
08 7 士 0 · 03 4 0 · 06 8 士 o ·0 29
A ft e r 0
.
04 6 士 0 . 0 3 3 . 0 . 02 5 士 0 . 02 0二
* 尸< 0 . 0 5 , 二尸< 0 . 0 1
给 PN L ST 或通道非选择性拮抗剂 eP r 后 , 抑
制收缩张力 , 故使量效反应曲线右移 。 同样
NP LT S 也能抑制大鼠主动脉螺旋条的收缩张
力 。 在含 C a Z+ 的正常营养液中 , 由高 +K 去极
化诱发平 滑肌 收缩张 力 增 加 。 以上 这 些
PN L T S 的作用与钙拮抗剂 P er 相似 , 都是抑
制 PD C 所致 。 高 K + 使平滑肌细胞膜去极化 ,
使 P D C 开放 , C护+ 内流 , 激发细胞内肌浆网 、
线粒体等结合 C a+2 释放 , 使平滑肌细胞内游离
C矛`增加 , 达到一定浓度时 , 导致平滑肌收缩 。
PN L T S 与 P e r 抑制 P D C 的开放 , 减少 C a Z+ 内
流 , 故能抑制平滑肌收缩张力。
豚鼠右心房自发频率 , 随着向管内递加
15 0 而频率也递增 , 直至最大 。 当管内加入
NP L T S l m g/ L 时 , 量效反应 曲线右移 。 这是
因为 15 0 使 R O C 开放 , 细胞内游离 C a Z十增加 ,
而使心率加快 , NP L T S 与 eP r 抑制 RO C 的开
放 , 减少细胞内 C a +2 游离浓度 , 而使心率减
慢 。 血管平滑肌细胞膜上的 RO C 是 a 受体控
制 。 a ,受体使细胞内贮存部位的 C+=a 游离 。 气
受体使 C a +2 向细胞内流入 l’] 两者都能使细胞
内游离 C+az 增加 , 故能降低血管螺旋条上 a ,
和 a Z受体激动药是抑制 R O C 的作用 。 PN L T s
l m g几 与 P e r 2 5m m o l /L 能降低大鼠主动脉螺
旋条收缩张力 , 故两者对 RO C都有抑制作用 。
从以上实验说明 P N L T S与 P e r对 RO C和
PD C都有抑制作用 19 ]。 另外在不含 C a Z +的 K r e b s
液中 , 加入 N A 3 0 n m of L/ , 由于主动脉螺旋条
细胞膜上 a : 受体被 N A 激动 , 细胞膜内侧 , 肌
浆网 , 线粒体的结合 C a +2 释放 l8] 。 由于细胞内
游离 C a +2 增加而诱发主动脉螺旋条收缩张力
增加 ( 由 。增至 0 . 0 4 9 士 0 . 0 19 9 ) 。 在此基础
上 , 再向浴管内加入 C a +2 .2 25 林m ol L/ , 这是由
于 C a Z十通过 RO C 而进入细胞内 , 故张力更形
增加 (由 0 增至到 0 .0 8 7 士 0 .0 3 4 9 ) 。 这充分
证明两种通道分别为膜上两种各自独立的通
道 ;l 。 NP LT S对这两种通道都有抑制作用 , 与
C a Z
+ 拮抗剂 P e r 相似 。
参 考 文 献
I 谢世荣 , 张宝恒 , 但汉雄 , 三七叶总贰抗心律失
常作用 . 北京医科大学学报 . 自然科学版 . 19 90 ,
(5 ) :3 38
2 L i ll ie C
,
k o e b ig e r w
.
A e t io n s o f al in id in e an d A
g一
A ” o n r a t e e o n tar e t iv iyt o f g u i n e a Pig atr iu m d u r i n g
耐er n o e e P to r s ti m u la t io n . J C ar d io v a s c Ph a mr a e o l
19 8 3
,
6 : 104 8
3 崔利华 , 张宝恒 . 槐定碱抗心律失常作用及其机
理 . 中国药理学与毒理学杂志 . 19 86 , 1 :l (l )3
4 姚建安 , 张宝恒 . 槐定碱抗心律失常作用机制的研
究 . 中国药理学报 . 19 89 , 10 (4) :3 15
谢世荣 , 张宝恒 . 心喘灵舒血管作用的研究 . 基础
医学与临床 . 19 9 2 , 12 : l
JC A V an M e e l A d e Jo n g e
, e t a l
.
V as e u l ar Sm o o t h
m u s e l e e o n t r a t i o n i n i t i a t e d b y P o s t s y n P t i e
a d r e n o e e P to r a e t iv a ti o n 15 in d u e e d by a n i n fl u x o f
e x th a e e l lu lar e a l e iu m
.
E u or P J Ph ar m a e o l
.
19 8 1
,
69 :20 5
B e lt e n T B
.
M e e h an i sm o f a e t io n o f t r a n sm i tt e r s 如 d
o t h e r s u b s t an
e e s
.
P h y s io l Re v
,
197 9
,
59 : 60 6
84 ( 总 180 ) 摹础医学 一与临床 B 韶iC M C d iC a l S c ie n e e S an d C li n ie s 199 9 . 19 ( 2 )
8 孙亚丁 , 等 . 心喘灵 ( X C 。 l) 及其衍生物 ( X C -
2 ) 对肾 _ l: 腺素受体及动脉平滑肌的作用 . 药学学
报 . 19 87 , 2 2 : 8 1
9 但汉雄 , 张宝恒 , 谢世荣 . 三七中人参二醇贰对
细胞 内钙和外钙的影响 . 中国药理学报 . A ct a
P har m a e o l o g ie a S i n ie a
,
19 93
,
N o
v ; 14 S u PP I: 52 2
E fe
e t s o f oT t
a l S ap
o n in s o f L e a f o f P a n ax N
o t o g in s e n g o n I n t r a e e l l u la r
an d E
x t ar e e lu la r C a l c iu m
X i e S h i r o n g D a n H a n x i o n g H u a n g C a iy u n H u a n g S h e n gy i
n g L e n g P i n g Z h a n g B a o h e n g
(D
e P a rt m e n t o f P h a r m a e o lo g y M e d i
c a l C o lle g e o f D a li a n U n iv e r s i ty
,
D a li a n 1 1 6 6 2 2 )
A b s t r a c t T o t a l s a P o n i n s o f l e a f o f P a n ax n o t o g i n s e n g (P N L T S ) 0
.
5 a n d l m g几 i n h ib i t e d t h e
s P e e d u P e fe e t o f is o P
r e n a l i n e o n s Po n at n e o u s b e at i n g i n ht e is o l a t e d g u i n e a Pig a t r i a : t h e d o s e
一
e fe e t
er l a t io n s h iP s h i fet d t o t h e
r i g h t a n d t h e m ax im u m e fe e t w as i n h ib it e d
.
PN L T S l m留L h a d an i n h ib i t o yr e fe e t o n ht e e o n tr a c t i l e fo cer o f t h e ao rt ic istr sP in d u ce d by K C I
6 0m m o l/ L a n d n o ar d er n a l in e 30unr
o l /L
.
It im P l ie d th at th e m o d e o f ac t io n o f NP L T S l m留L o n ao rt i c
s t r iP s w a s t o b lo e k t h e r e e e P t o r
一
o P e r a te d e a l c i u m e han n e l a n d Po et nt i a l刁 e pe n d e n t e a le i u m c h a n n e l .
In C a Z
+
fr e e K r e b
’
5 s o lu t i o n
,
PN L T S l m g/ L a n d Pe
r h e x i li n e 3 7
.
5拼m o l /L d e Pesr s ed ht e e o n lt . c t i le
fo r c e a o rt i e o f th e r at i s o l a t e d ao rt i e st r iP s in d u c e d by n o r ad er a n a l i
n e 3 0 nm o lL an d
e a 1e iu m 2
.
2 5m m o 盯
L
.
T h e r e s u l t s s u g g e s te d th a t p N L T s a n d p e r h e x i l i n e n o t o n l y i n h ib i et d t h e er le as e o f i五t ar e e l l u lar
C a Z
+
b u t a ! s o b! o c k e d t h e i n fl u x o f e x t ar e e l ! u l a r C a Z
+ .
K e y w o r d s to at l sa p o
n in e s o f l e af o f Pan ax n o ro g in se n g (pN L T S ) p
o te n t ial 刁e ep n d e n r因e i u m e h an e l (P I〕C )
r e c e Pto r
一 o Pe r a te d e a le iu m e han n e l (RO C ) a o rt i e s t r iP s r ihg t au ir e le
( L接第 80 页 )
E fe
e t o f P e n t a g a s tr i n o n I nt e r l e u ik n
一
1 p Ihn ib it
e d In s u l in S e e er t io n
i n C u lut r e d N e o n a t a l R a t l s l e t B
一 e e l l s
X u J it ia n
(D e P a r tm e n t o f P h y s io lo g y
,
Y a o Y u n w e i W u R e n
H e n a n M e d i e a l U n iv e r s it y
,
Z h e n g z h o u 4 5 0 0 5 2 )
T h e e fe
c t o f P e n t a g a s t r in (G
一
5 ) o n i n t e
r l e u k i n
一
l p ( IL
一
l p ) i
n h ib i t e d i n s u l i n s e e r e t i o n i n e u lt u r e d
n e w b o r n r a t i s l e t B
一
e e l ls w e r e o b s e vr e d
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t IL
一
l p d o s e
一
d e P e n d e n t ly i n h ib i t e d
b o t h g l u e o s e
一
s t im u lat e d a n d b a s a l i n s u li n s e e r e t io n
.
T h e i n h ib it o ry e fe c t o f IL
一
l p w as a n t a go n ize d
w h e n G
一
5 w as g i v e n t o g at h e r w i t h IL
一
1p s im u lt a n e
o u s ly
.
G lu c o s e
一
s t im u lat e d i n s u l i n s e e re t io n o f G
-
5 t r e a t e d gr o
u p s w e re s ign i if e a
n t ly h ig h e r t h a n t h o s e t re a t e d w it h IL
一
l p a lo n e
.
In I L
一
l p t re at e d i s le t s
,
a d m i n st iart
o n o f G
一
5 Pa rt ia l ly r e v e r s e d t h e in h ib i t io n o f i n s u li n s e e er t io n i n a d o s e a n d t im e d e P e n d e n t
m a n n e r
·
hT e r e s u l t s i n d ie a t e t h a t G
一
5 m i g h t h a v e a P r o t e e t iv e e fe e t a g a i n s t t h
e t o x ie iyt o f I L
一
l p o n
i s o lat e d is le t B一e l l s .
K e y w o r d s i n te r le u k in
一
1 p e n ta g
astr
in is le t o f L an g e r h a n s i n s u l in