全 文 ：收稿日期：2015-01-12
2015年
第 4期
2015
№4
辽 宁 林 业 科 技
Journal of Liaoning Forestry Science＆ Technology
葡萄新品系“龙紫宝”为酿酒葡萄新品种，亲本
不详。“龙紫宝”葡萄生长势健壮，在正常管理条件
下，当年扦插的葡萄苗其新梢就能长到2 m以上，扦
插后第2年即可结果，且果实品质优良。“龙紫宝”根
系数量多、抗寒、抗冻、抗旱能力强，并具有极强的
抗霜霉病能力，在河北中北部地区可以自然越冬[1]。
在此项研究中，主要以“龙紫宝”葡萄当年生枝
条的腋芽为外植体进行组织培养，目的在于寻求建
立高效、稳定的“龙紫宝”葡萄组培工厂化育苗技术
体系。
1 材料与方法
以当年生“龙紫宝”枝条的腋芽为供试材料。
1.1 外植体诱导
选择生长健壮的“龙紫宝”1年生枝条，将叶片
剪下，枝条剪成5～6 cm长的小段，用洗涤灵水轻轻
刷洗表面，注意不要破坏腋芽，刷洗完成后置于流
动水中冲洗2 h左右。
在无菌条件下用 75%酒精浸泡茎段 30 s，无菌
水冲洗2遍，然后用0.1%升汞加几滴吐温的溶液浸
泡茎段8 min，无菌水冲洗3遍[2]。
在无菌条件下切取腋芽接种于添加不同浓度
KT（0.4、0.8、1.6、2.4 mg·L-1）和NAA（0.1、0.2 mg·L-1）
的GS培养基上进行诱导培养。每个处理接种 50
瓶，每瓶1个腋芽，30 d后统计外植体诱导率[3]。
1.2 组培苗增殖培养
以 GS 为基本培养基，添加 KT（0.6、1.2、
1.8 mg·L-1）、NAA（0.05、0.10 mg·L-1）。将高 1.5～
2.5 cm的单株无菌苗转接入增殖培养基中培养，每
个处理接种5瓶，每瓶10个嫩芽，40 d后统计增殖率。
1.3 培养条件
基本培养基中均加入35 g·L-1蔗糖、8.0 g·L-1琼
脂，pH值 5.8。培养室温度（23±2）℃，光照强度
2 000～2 500 lx，光照时间15 h·d-1。
2 结果与分析
2.1 外植体诱导
不同激素组合对外植体腋芽诱导的影响不同
（表 1），3 号培养基（GS+KT 0.8 mg·L-1 +NAA
0.1 mg·L-1）的萌芽率最高，芽生长状况也最好，其次
是 4号培养基。因此，“龙紫宝”葡萄的最适诱导培
养基为GS+KT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖
35 g·L-1+琼脂8 g·L-1。
2.2 组培苗增殖
随着KT浓度增加，葡萄组培苗的增殖倍数也
随之增加，但是当KT达到 1.8 mg·L-1时，组培苗开
始大量长出愈伤组织，增殖倍数降低，影响组培苗
的正常生长（表2）。
对表 2数据进一步做方差分析，结果表明，
F0.01（2，24）=5.61，KT（F=163.08）、KT × NAA（F=
20.76）的影响达到极显著水平。说明KT是影响葡
萄组培苗增殖的最主要因素，而NAA能够促进增
殖组培苗的高生长，并与KT存在交互作用，进而影
响葡萄组培苗的增殖效果。由表2可知，最佳增殖
酒葡萄“龙紫宝”的组织培养技术研究
王占龙
（辽宁省干旱地区造林研究所，辽宁 朝阳 122000）
摘 要：以“龙紫宝”葡萄当年生枝条腋芽为外植体，尝试对其进行诱导及增殖试验，得到最佳诱导
培养基为GS+KT 0.8 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1+蔗糖 35 g·L-1+琼脂 8 g·L-1，诱导萌芽率最高达到
88%；最佳增殖培养基为GS+KT1.2 mg·L-1+NAA0.05 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1，增殖倍数
最高达到8.7倍。
关键词：“龙紫宝”葡萄；组培育苗；增殖培养
中图分类号：S663.1；Q943.1 文献标识码：A 文章编号：1001-1714（2015）04-0037-02
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表1 不同激素组合对“龙紫宝”腋芽诱导的影响
表2 不同激素组合对葡萄组培苗增殖的影响
培养基是GS+KT 1.2 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗
糖35 g·L-1+琼脂8 g·L-1，此时“龙紫宝”葡萄增殖芽
多且生长健壮，底部愈伤组织数量较少。
编号
1
2
3
4
5
6
7
8
KT/mg·L-1
0.4
0.4
0.8
0.8
1.2
1.2
1.6
1.6
NAA/mg·L-1
0.1
0.2
0.1
0.2
0.1
0.2
0.1
0.2
萌芽率/%
54
42
88
76
78
84
80
82
芽平均长/cm
1.8
1.5
2.0
2.7
1.5
1.7
1.4
0.8
芽生长状况
健康，少量愈伤组织
苗弱，少量致密愈伤组织
健壮，少量愈伤组织
健康，愈伤组织较大
节间短，愈伤组织较大
芽生长弱，愈伤组织较大
芽生长极弱，愈伤组织较大
芽生长极弱，愈伤组织较大
编号
1
2
3
4
5
6
KT/mg·L-1
0.6
0.6
1.2
1.2
1.8
1.8
NAA/mg·L-1
0.05
0.10
0.05
0.10
0.05
0.10
增值系数（倍）
1
2.3
1.8
6.2
5.6
3.4
5.2
2
2.2
1.9
8.7
4.7
2.9
5.0
3
2.5
1.5
6.8
5.1
3.7
4.9
4
1.8
2.1
7.6
6.0
3.0
4.5
5
1.7
2.0
7.5
6.4
3.7
4.1
增殖芽生长状况
芽生长良好
芽生长良好，少量生根
芽生长良好，少量愈伤组织
芽生长良好，少量愈伤组织
有效芽少，大量愈伤组织
芽相对较小，大量愈伤组织
3 结 论
以“龙紫宝”葡萄腋芽为外植体，尝试对其进行
诱导及增殖培养试验，得到最佳诱导培养基为GS+
KT 0.8 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+蔗糖35 g·L-1+琼脂
8 g·L-1，诱导萌芽率最高达到 88%。最佳增殖培养
基为 GS+KT 1.2 mg·L-1+NAA 0.05 mg·L-1+蔗糖
35 g·L-1+琼脂8 g·L-1，增殖倍数最高达到8.7倍。上
述试验的成功，为进一步探讨“龙紫宝”葡萄生根培
养及工厂化快繁研究奠定了技术基础。
参考文献：
[1] 王浩.葡萄新品系‘龙紫宝’越冬性研究[D].秦皇岛：河北
科技师范学院，2012：19-20.
[2] 曹孜义，刘国民.实用植物组织培养技术教程[M].兰州：
甘肃科学技术出版社，1999：43-44.
[3] 王艳辉，刘丽霞.金叶复叶槭组培技术研究[J].辽宁林业
科技，2014，（4）：44-45.
（责任编辑：韩素梅）
辽 宁 林 业 科 技第 4期 2015年
增加了 9.4%、20.5%和 13.0%。其中T2根系体积量
增长最快，可能是由于T2处理对拔节期根系的生
长有一定促进作用；在大喇叭口期T3根系体积量
略大于T2，而两者均大于CK和T1。从成熟期根系
体积量可以看出：T2（121.88 cm3）>T3（115.51 cm3）>
T1（102.03 cm3）>CK（99.34 cm3）。由此结果表明，
土壤的紧实度大，氧气供应就会不足，根系生长所
遇到的阻力大就会抑制根系的生长。深翻和深松
土壤都会使土壤变得疏松，减小土壤的紧实度，打
破犁底层，促进玉米根系的生长。 图4 不同整地方式对不同时期玉米根体积的影响
（上接第36页）
（下转第40页）
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