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. 材料处理 取甜
用试管苗观察甜叶菊染色体 哺撇喊髓睐清水中洗净并用流水漂
李林初 徐炳声 张王方 倪德样 洗 , 在无菌室用 70 , 酒
(复 旦 大 学 生 物 系 ) 精消毒 30 一 60 秒 , 10 外
漂 白粉滤液消毒 8一 10
甜叶菊 ( tS 。 ` 。 挥b 。 , id a 。 。 ) 是我国近年来 分钟 , 再用无菌水冲洗 3一 5次 。 在无菌条件
从国外引进的一种新型资源植物 . 它所含的甜 下将茎切成 0 . ,一 1厘米长的小段备用 。 消毒后
叶菊糖试的甜度相当于蔗糖的 30 0倍 , 但含热 的叶片可整张或切成二半 。
t 仅有蔗糖的三百分之一。 除作甜味剂而广泛 3 . 接种培养 将处理过的甜叶菊材料接种
用于食品 、轻工方面外 , 据报道还有降低血糖 、 于上述固体培养基上 , 然后在 26 士 2℃ 的室温
促进新陈代谢 、 强壮身体等作用 , 特别适于 胃酸 下培养 ,每天用 日光灯辅助光照 8一 10 小时 , 光
过多和糖尿病 、 肥胖症 、高血压患者作为甜味品 强为 l 。。0 勒克斯 。 约经 4 周培养 , 可 形 成有
食用 。在国际上甜叶菊已受到普遍重视 , 有可能 茎 、 叶的无根小苗 , 再把它转接到加人 2 毫克 /
发展成为我国主要的甜料作物之一。 升叫嗓丁酸的 1 / 2 M s 发根培养基上 , 经培养
我们在观察甜叶菊染色体的工作中 , 试用 7一 10 天即可长出根来。
甜叶菊的幼叶或嫩茎段进行组织培养 , 取得了 二 、 染色体栩片技术
试管苗的根尖 , 不仅解决了材料的困难 、 顺利地 1 . 取材 在三角瓶中取出甜叶菊 试管苗 ,
进行了染色体计数 , 而且还首次做了甜叶菊的 除去根部附着的固体培养基 , 经水洗后截取根
染色体核型分析 。 具体方法如下 : 端约 1 厘米长的根尖备用 。
一 、 甜叶菊试管苗的组织培旅 2 . 预处班 将截得的根尖材料投人 .0 0 02 M
1
. 培养基配制 在 M s 基本培养基中加人 的 8一经基咬琳水溶液中 , 在室温下预处理 ,一 6
.0 2毫克 /升的生长素蔡乙酸和 2 毫 克 /升细 胞 小时 。
分裂素 6一节基嚓吟 ,另加蔗糖 2多 , 调节声 至 3 . 固定 经预处理的材料水洗几次后用卡
.5 ,一 .6 5 , 最后加琼脂 .0 8多 , 在 1 . 0公斤 /厘米二 诺氏液 ( 1 : 3 冰醋酸一 95 % 酒精 ) 固定 2一 2 4 小
压力下灭菌消毒 20 分钟 ,取出冷却即成固体培 时 , 换人 70 务 酒精置冰箱保存备用 。
养基 。 .4 解离 固定材料经 50 沁酒精再 水 洗 几
次 , 用 IN H cl 在 60 ℃ 水浴恒温下解离 3一 5
分钟。
5
. 染色 、 压片 解离后的根尖经洗净盐酸
后用改良的苯酚品红染液在载玻片上滴染 , 加
盖片后用解剖针尖轻击使材料组 织 块散 成雾
状 。 可用酒精灯加热以加深染色体的着色并增
强反差。 用姆指均匀用力压片 , 必要时用解剖
针木柄敲击盖片 , 使染色体分散于同一平面 。
6
. 制片 镜检 选出中期染色体分散良好
的制片 ,在冰箱冰结层冷冻 1小时后揭盖片 , 自
然干燥后用中性树胶封片制成永久片。
通过试验观察 , 甜叶菊的染色体核型如左
图所示 。