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竹红菌甲素的构象异构体的晶体和分子结构



全 文 :官 。 综合上述结果得出如下结论 :在相分离
过程中 , 相区粗化长大以分形凝聚方式进行 ,
即自相似增长 , 分形维数 D 不变 ;相区的分形
结构导致了结构函数的动态标度行为。
宋 欲
(中国科学院广州化学研究所 ,广州 5 10` , 0 )
竹红菌甲素的构象异构体的晶体和分子结构
竹黄 ( s h i r a i a b a m b u s l。 o l a P . H e n n ) ` , ,
系肉座菌科真菌 , 民间用于治疗风湿关节炎 、
虚寒胃痛 、 呕吐泻泄 、 肝炎及小儿百日咳等 .
作者采用酸性薄层板分离 , 从其乙酸乙醋提
取物中分得三种芜酿类化合物 , 经理化及波
谱分析 , 其中两种分别怂竹红菌甲素 ( h y p。众
r y l l i n A
,
H A )
〔刀 和竹红菌乙素 ( h y p o c r y l l i n
B
,
H B )
t 3 , . 另一种经元素分析 , U V 、 I R 、 M S
图 . 标明原子标号的六抱素 ( .c . H ” 0 二 分子的透视图
o / H 、 ,o o / H 、 o
C H: O
`
` H o 6
C H, 0
` 月: 0
O妞
C lt 。
图 2 六抱素与竹红菌甲素的结构
1` 3 . 科 学 通 报 l , 9 2 乍
等与 H A相同 ,但 ’ H 、 . C N M R 数据明显不
同闭 , 因此作者将其命名为六抱素 ( h e xa o co -
sP or in ) 并对其进行了 x 射线结构研究 ,确定
了其晶体和分子结构 (图 l ) . X 射线结构测
定表明六抱素与 H A 为构象异构体 ,二者 cl .
位构象不同 (图 2) . H A 的 C : 。 位经基为 夕
型 , 甲基为 a 型 , 而其异构体的 C 14 位经基
为 a 型 , 甲基为 夕型 ,二者的结构见图 2 .
二r b . E . I I口 r , 1 99 0 , 冷 : 2 , 9一 2已0 ; l , , 0 ,
一1 5 8 .
[ 2 ] C h o n W
e i s h i o e , 一 1
. ,
L i , 吞i t , . 才一
l , 8 1
,
10 : 1 8 8 0一 18 8 , .
[ 3 ] 粱丽 ,科学通报 , ,双一9 8 , ) , l : s`一 5 5 .
以 ] 胡晓等 ,华西药学杂志 , 7 ( l , , 2 ) , l : l一弓.
2 , : l弓`
C汤口。 ,
, 考 文 献
胡 晓 沈联德
(华西医科大学药学院生药学教研室 ,成都
郁开 北
(中国科学院成都分院分析侧试中心 ,成都
6 10 0 . 1》
6 100 1 5》
[ l ] H e n n i n g 一 , P
. ,
F u n g i J a P o n ie i ( l 一1 1)
,
B o r
.
J 口·
利用 P C R 技术克隆家蚕丝素基因启动子片段
家蚕丝素 ( f ib r o i n ) 是由一条约 3 7 0 k D
的重链和一条约 2 5k D 的轻链 , 通过二硫键
连接而成 。 为其编码的两个基因在后丝腺内
等 t 、 同步表达 。 它们 5’ 端上游的转录调控
区同源性很强 , 说明重链与轻链受同一机制
调控 。 丝素 m R N A 在 5 龄后丝腺细胞中占
全 m R N A 的 80 一 85 多 , 发育时效性和组织
特异性异常显著 . 因此丝素基因调控系统是
研究真核基因分化 、 表达的极好模式 . 由于
丝素基因上游的调控序列仅占全基因组的 1
1 0` , 我 们 利 用 p c R ( p o l y m e r a s e e h a i n
R e a e t i o n ) 从家蚕全 n N A 中特异性地扩增
这个启动子片段 , 克隆后测定了其碱基序列 .
我们参照日蚕丝素 H链基因序列。 , 取与
其 5 , 上游一 5 5 2 至一 5 3 5 正 链 , + 5至 + 2 2
负 链 相 同 的序列 , 并加上酶切位点合成引
物 , 即 5 ` 端引物 5 ’ 必 C T G C A G T T G T c G T
G c T A A 3
’ , 3
’ 端引物 5 ` 电旦达卫茎拼G A
G A G T T G G ^ ^ e C e ^ ^ e 3 (划线部分为外
加序列 ) 。 两引物间包容了 57 4 个碱基 , 含有
全部启动子和增效子区域 . 从家蚕 D 13 (浙
第 17 期 科 学
江农业科学院蚕桑研究所提供 ) 丝腺提取的
总 D N A 被直接作为模板 ( l 科 g ) . 用 P C R
K i r ( P
e r k i n

E l m e r e e t u s ) 进行扩增 , 循环
3 0次 。 用 P s t l , N c o l 酶 ( B o e h r i n g e r ) 双切
P C R 片段和质粒 p G EM S Z f ( + ) ( 3 k b ) , 低
熔点胶分离后 , 两者即在胶上用 T 4 连接酶
(B
o e h r i n g e r ) 连接 ,转化 X L I一 b l u 。 细胞 ,经
筛选在 15 个白色菌 斑中有 3 个克隆含有 .3 6
kb 的质粒 . 用 P o lt 和 N co l 酶双切 , 均分
为 3k b 的开环质粒和 o . 6 k b 的插人片段 。
我们分别从插人片段的两端以 M 13 正
向和反 向引物用 T 7 s e q u e n c i n g K i t ( p h a -
m a 。 i。 ) 测序 ,确定了此片段的全部 , “ 个碱
基的序列 (图 1 ) , 三个克隆的序列完全相同 ,
和已发表的 日蚕相应序列相 比 , 符合 率为
9 7
.
6外 . 由此确证了这个 P C R 片段就是家
蚕丝素基因的启动子片段 , 由于该片段包含
了基本启动子区 (一 30 一十 6 ) , 体内通用增
效子区 (一 72 一一 3 2 ) 和后丝腺组织专一性
增效子 (一 23 8一一 7 3 ) , 因此对家蚕的基因
表达 、 调控以及转基因研究均 有重要意义 。
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