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生物物理学报 2010年 11月 第 26卷 第 11期:
ACTA BIOPHYSICA SINICA 2010 Vol.26 No.11:
新型光敏剂分子二乙醇胺基竹红菌乙素
光诱导 HeLa细胞死亡中的氧化应激研究
张立娜, 李千千, 周志祥
北京工业大学生命科学与生物工程学院，北京 100124
收稿日期：2010-08-06；接受日期：2010-10-25
基金项目：北京市优秀人才培养资助个人项目 (20081D0501500180)；教育部留学回国人员科研启动基金
通讯作者：周志祥，电话：(010)67391668，E-mail：zhouzhixiang@bjut.edu.cn
摘要：二乙醇胺基竹红菌乙素 （ 2-ethanolamino-2-demethoxy-17-ethanolimino- hypocrellin B，
EAHB） 是一种新型的可吸收 600 nm 以上红光的竹红菌乙素衍生物。 本文研究了二乙醇胺基竹
红菌乙素 -光动力诱导 HeLa 细胞死亡的效果及其氧化应激机制。 结果发现， 红光诱导后， MTT
法检测到二乙醇胺基竹红菌乙素 - 光动力作用使 HeLa 细胞的存活率显著降低， 且存活率与光敏
剂浓度和光照剂量成反比； 二乙醇胺基竹红菌乙素 - 光动力诱导 HeLa 细胞内产生活性氧自由
基； 同时， 胞内超氧化物歧化酶和还原型谷胱甘肽水平显著降低， 细胞脂质过氧化标志分子丙
二醛显著升高， 并检测到细胞质膜损伤标志分子乳酸脱氢酶的渗出显著增加。 研究结果说明新
型光敏剂二乙醇胺基竹红菌乙素可有效光诱导肿瘤细胞死亡， 而细胞内氧化应激反应可能是二
乙醇胺基竹红菌乙素光诱导肿瘤细胞死亡的重要作用机制。
关键词：二乙醇胺基竹红菌乙素； 竹红菌素； HeLa细胞； 光动力治疗； 氧化应激
中图分类号：Q632
0 引 言
竹红菌素 （hypocrellin）是从一种寄生真菌——竹红菌 （Hypocrella bambuase）中提取
的一种天然光敏剂，属于苝醒衍生物。作为一种新型的光动力抗肿瘤分子，竹红菌素与血
卟啉衍生物 （hematoporphyrin derivatives，HPD）相比，其原料易得、易纯化，光敏剂三重
态氧量子产率和单重态氧量子产率高、光毒性高、暗毒性低，从正常组织排除速度快，且
容易进行定点化学修饰以获得纯的衍生物[1～4]，因而，是一种很有应用前景的光动力治疗肿
瘤的候选药物分子。
但是，天然的竹红菌素在光疗窗口 （600～900 nm）几乎没有吸收，极大地限制了其在
临床上的应用。另外，天然的竹红菌素是亲脂性化合物，水溶性不好，因此对成药有很大
影响。为了得到在光疗窗口有强吸收和脂水兼溶的光动力治疗药物，近年来，许多实验室
以结构修饰的方法合成了一系列竹红菌素的衍生物，其中有一些衍生物抗肿瘤效果非常
好[5]。
EAHB是以竹红菌乙素 （hypocrellin B，HB）为母体经结构修饰而获得的新型衍生物，
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张立娜等：新型光敏剂分子二乙醇胺基竹红菌乙素光诱导 HeLa细胞
死亡中的氧化应激研究 研究论文 / Research Article
其 2位和 17位被亲水性基团乙醇氨基取代[6]。与母体化合物相比，EAHB在光疗窗口区
（600～900 nm）具有波长为 629 nm的强吸收峰，且具有较高的活性氧量子产率。本研究进
一步检测了 EAHB体外光动力抗肿瘤细胞的效果，并着重研究了 EAHB介导的光动力治疗
（photodynamic therapy，PDT）诱导的 HeLa细胞内氧化应激反应。结果说明，EAHB是一
种优秀的新型光动力抗肿瘤的光敏剂分子。
1 材料与方法
1.1 材料
EAHB （分子式如图 1）为中国科学院化学所张曼华教授馈赠，HPLC检测纯度达 98%
以上。光敏剂溶于二甲基亚砜，配成 1.0 mmol/L储存液避光保存备用。
人宫颈癌 Hela细胞来自本实验室保存的细胞株。培养基 RPMI1640及胎牛血清购自
GIBCO （Gibco Invitrogen Corporation, Carlsbad, CA, USA）；3-(4,5-二甲基噻唑 -2)-2,5-二
苯基四氮唑溴盐 〔3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT)〕、二甲
基亚砜、2,7-dichlorofluorescein-diacetate （DCFH-DA）和蛋白酶抑制剂购自 Sigma-Aldrich
（St. Louis, MO, USA）；人乳酸脱氢酶 （Lactate
dehydrogenase, LDH）酶联免疫试剂盒购自
Genmed Scientifics Inc. （Genmed Scientifics,
MA USA）；丙二醛 （Malondialdehyde, MDA）
酶联免疫试剂盒、人谷胱甘肽 （Glutathione,
GSH）酶联免疫试剂盒、超氧化物岐化酶
（Superoxide Dismutase, SOD）酶联免疫试剂盒
购 自 南 京 建 成 生 物 技 术 研 究 所 ； BCA
（bicinchoninic acid）蛋白浓度测定试剂盒购自
江苏碧云天生物技术研究所；其他化学试剂均
为国产分析纯。
1.2 方法
1.2.1 细胞培养
HeLa细胞在 37℃、饱和湿度、5% CO2孵箱中常规培养，培养液为含 10%小牛血清、
1%青霉素及链霉素双抗的 RPMI-1640，每 2天换液传代。
1.2.2 细胞的光照处理
光源为 KDH-150B 红光治疗仪 （北京科电微波电子有限公司），输出波长 600～
700 nm。用 SPR-4001分光辐射计 （Luzchem Research Inc., Ottawa Ontario, Canada）检测
功率，得到样品检测面的光功率密度为 0.1 W/cm2。试验中，光束均匀地垂直照射到培养板
或培养皿里的细胞上，根据光照剂量设定光照时间，其换算关系为：光照剂量 (J/cm2)=
0.1 W/cm2 ×光照时间(s)。
图 1 EAHB 的化学结构式
Fig.1 The chemical structure of EAHB
NHCH2CH2OH
CH3
CH3O
CH3O
O O
O O
OCH3
H
H
CH3
C=NCH2CH2OH
21 22
19 20
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ACTA BIOPHYSICA SINICA｜Vol.26 No.11｜Nov. 2010
生物物理学报 2010年 第 26卷 第 11期研究论文 / Research Article
1.2.3 细胞的存活率测定
将培养的对数期 HeLa 细胞用 0.25%胰蛋白酶消化，制成单细胞悬液，细胞密度为
5×104/mL，接种 5块 96孔培养板，每孔 200 μl细胞悬液，然后在 5% CO2孵箱中 37℃培养
过夜。弃去上清培养液，严格避光的条件下，在每个 96孔培养板的孔里加入用无血清和酚
红 RPMI 1640稀释配制的浓度分别为 0、0.5、2和 5 μmol/L的 EAHB工作液，每个浓度重
复 12 个孔。在 5% CO2孵箱中 37℃避光孵育 1 h。弃去上清，PBS 洗两次，每孔加入
200 μl无血清和酚红的 RPMI 1640。然后，将 5块 96孔培养板依次给予红光照射 0、30、
60、90和 180 s，接着每孔培养基中恢复 10%胎牛血清。在 5% CO2孵箱中 37℃继续避光
培养 24 h。弃掉培养液，每孔加入 200 μl新配制的终浓度为 0.5 mg/mL的MTT溶液，37℃
孵育 4 h。小心吸弃孔内液体，再每孔加入 DMSO 150 μl，振荡 10 min直至蓝色结晶完全
溶解。选择 620 nm波长，在酶标仪上检测各孔的光吸收值 （A620），以与实验孔平行的不加
细胞只加MTT的空白孔调零。
细胞存活率 =(试验组 A620 /对照组 A620)×100%。(对照组：指摄取了光敏剂但是未光照的
细胞组)。
1.2.4 细胞内活性氧 ROS检测
细胞接种于底部贴有盖玻片的特殊培养皿中，在 5% CO2孵箱中 37℃培养过夜，使细
胞处于对数生长期。弃去上清培养液，严格避光的条件下按实验设计加入用无血清和酚红
的 RPMI 1640 稀释配制的浓度为 1 μmol/L的 EAHB工作液。在 5% CO2孵箱中 37℃避光
孵育 1 h。然后弃去上清，PBS洗两次，细胞再与工作浓度为 10 μmol/L的 DCFH-DA 37℃
避光孵育 30 min。弃去孵育液，细胞经 PBS洗三次后，加入无血清和酚红的 RPMI 1640培
养基。红光照射 90 s后，细胞内活性氧成像采用 TCS SP2型激光扫描共聚焦显微镜 （德国
LEICA公司），激发波长 488 nm，发射波长 520 nm，扫描密度 1024×1024，物镜倍数 63倍，
电子图像放大倍数以标尺为准。ROS相对量用软件 Leica TCS SP2, Ver. 1.6.582分析细胞
内平均荧光强度获得。
1.2.5 细胞内MDA、GSH、SOD检测
细胞接种于 6孔培养板中，在 5% CO2孵箱中 37℃培养过夜，使细胞处于对数生长期。
然后按照与 1.2.3相同的方法，使细胞与 2 μmol/L的 EAHB孵育。弃去上清，PBS洗两次，
每孔加入 2 ml无血清和酚红的 RPMI 1640，分别给以红光照射 0、100和 200 s，然后在每
孔的培养基中恢复 10%胎牛血清。在 5% CO2孵箱中 37℃继续避光培养 24 h。收集细胞，
用预冷的 PBS洗涤，然后用 0.5 ml PBS重悬细胞。立即在 4℃超声粉碎细胞，功率 80 W，
每次超声 5 s，间隔 10 s，重复 3～4次。细胞破碎液按MDA、GSH、SOD试剂盒说明进行
操作，在 532 nm 波长处测 MDA 量，550 nm 波长检测 SOD 量，在 420 nm 波长处检测
GSH量。
1.2.6 LDH渗漏检测
光敏剂摄取方法同 1.2.3，96孔培养板中处于对数生长期的细胞与 2 μmol/L的 EAHB
孵育 1 h。弃去上清，PBS洗两次，每孔加入 100 μl无血清和酚红的 RPMI 1640，分别给以
红光照射 0、100和 200 s，每个光照剂量重复 12个孔。然后在每孔的培养基中恢复 10%胎
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张立娜等：新型光敏剂分子二乙醇胺基竹红菌乙素光诱导 HeLa细胞
死亡中的氧化应激研究 研究论文 / Research Article
2.2 EAHB-PDT诱导 HeLa细胞内产生活性氧自由基
由于活性氧自由基在肿瘤光动力治疗过程中起着重要作用，因此，利用活性氧自由基
特异性探针分子 DCFH-DA，结合激光共聚焦显微镜技术，对细胞内产生的活性氧自由基进
行了检测。如图 3所示，对于摄取 EAHB 2 μmol/L后的细胞，红光照射前，细胞内活性氧
自由基信号很弱 （图 3A）；而当给以剂量为 9 J/cm2的红光照射后，细胞内信号显著增强
（图 3B），信号强度改变有显著性差异 （P＜0.05）（图 3C）。
图 2 EAHB-PDT 对 HeLa 细胞存活率的影响
EAHB浓度分别为 a：0 μmol/L；b：0.5 μmol/L；
c：2 μmol/L；d：5 μmol/L。每组红光光照时间
分别为 0、30、60、90 和 180 s。计量数据采用
x±s表示。实验重复两次，每次实验设 12个组内
重复
Fig.2 Photocytotoxicity of EAHB to HeLa
cells a: 0 μmol/L; b: 0.5 μmol/L; c: 2 μmol/L;
d: 5 μmol/L of EAHB. Each group was irradiated
with red light for 0, 30, 60, 90 and 180 s. Data
are x±s. Samples were measured in 12 replicates
and each experiment was repeated twice
牛血清。在 5% CO2孵箱中 37℃继续避光培养 24 h。细胞渗漏 LDH的检测按照试剂盒说明
书所示步骤进行。
1.2.7 细胞总蛋白的测定
细胞总蛋白采用 BCA蛋白浓度测定试剂盒 （BCA Protein Assay Kit）测定。
1.3 统计学处理
采用 SPSS11.0 统计学软件进行结果处理，实验组与对照组的区别用 t检验，确定 P＜
0.05 为差异有显著性意义。
2 结 果
2.1 EAHB-PDT对 HeLa细胞存活率的影响
如图 2所示，EAHB介导的 PDT处理 HeLa细胞后，细胞的存活率呈现出与光敏剂浓
度及光照剂量双相关性，即当光敏剂浓度一定时，随着光照剂量的增加，细胞存活率减少。
图 2 中光敏剂浓度为 2 μmol/L 时，10 J/cm2 的光照剂量使细胞存活率减至 50%，而
20 J/cm2的光照剂量使细胞存活率降至 30%。同样，当保持光照剂量一定时，随着光敏剂浓
度的增加，细胞存活率也显著减少。如图 2中光照剂量为 9 J/cm2时，EAHB 0.5 μmol/L使
细胞存活率减少到 80%，EAHB 2 μmol/L时，降至 60%，而 EAHB 5 μmol/L时使细胞存
活率减少到 25%。实验所用的 EAHB浓度范围内 （小于 10 μmol/L），光敏剂的暗毒性可以
忽略 （数据未示）。而且，单独的红光剂量 （小于 20 J/cm2）对细胞存活率未产生显著影响。
110
100
90
80
70
60
50
40
30
20
10
0
2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
Red light dose (J/cm2)
Pe
rc
en
t
su
rv
iv
al
a
b
c
d
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ACTA BIOPHYSICA SINICA｜Vol.26 No.11｜Nov. 2010
生物物理学报 2010年 第 26卷 第 11期研究论文 / Research Article
图 4 EAHB-PDT对 HeLa细胞 GSH(A)和 SOD(B)水平的影响 (A)和(B)中 EAHB的浓度均为 2 μmol/L，光照时
间分别均为 0、100和 200 s。计量数据采用 x±s表示。实验重复三次，光照组与未光照组 (0 J/cm2) 相比，*P＜
0.05时有显著性差异
Fig.4 Effects of EAHB-PDT on GSH (A) and SOD (B) levels in HeLa cells EAHB: 2 μmol/L; Irradiation
time: 0, 100 and 200 s. Data are expressed as x±s from three independent experiments. *P＜0.05, compared with
0 J/cm2 of red light exposed group
*
*
35
30
25
30
15
10
5
0
0 10 20
Red light dose (J/cm2)
G
SH
( μ
g/
m
g
pr
ot
ei
n)
(A)
*
*
35
30
25
30
15
10
5
0
0 10 20
Red light dose (J/cm2)
SO
D
(U
/m
g
pr
ot
ei
n)
(B)
2.3 EAHB-PDT对 HeLa细胞内 GSH和 SOD水平的影响
GSH和 SOD均是调节细胞内活性氧自由基浓度的重要因子，细胞内激烈的氧化应激反
应往往会导致这两种因子含量减少，从而使过量的活性氧自由基无法被清除，细胞最终受
到损伤[7]。如图 4A和 B所示，EAHB-PDT使 HeLa细胞内 GSH和 SOD水平显著降低。细
胞摄取 2 μmol/L的 EAHB后，分别给以 0、9和 18 J/cm2的红光剂量照射，细胞内 GSH和
SOD水平降低呈现与光剂量负相关。尤其是光照组与不光照组相比，细胞 GSH和 SOD水
平改变具有显著性差异 （P＜0.05）。说明 EAHB-PDT破坏了 HeLa细胞内的氧化还原平衡。
图 3 EAHB-PDT诱导 HeLa细胞内产生 ROS的共聚焦显微镜检测 (A) 2 μmol/L EAHB+0 J/cm2光照剂量 （光
照时间 0 s）；(B) 2 μmol/L EAHB+9 J/cm2光照剂量 （光照时间 90 s）；(C) 共聚焦图像信号强度分析。计量数据采
用 x±s表示。实验重复两次，每次实验任意选取 8个组内细胞。光照组 B与未光照组 A相比，*P＜0.05时有显著
性差异
Fig.3 Confocal images of intracellular ROS in HeLa cells induced by EAHB and red light irradiation
(A) 2 μmol/L EAHB+0 J/cm2 irradiation (0 s irradiation); (B) 2 μmol/L EAHB+9 J/cm2 irradiation (90 s irradiation);
(C) The fluorescence intensity of ROS. Data are x±s of eight cells from (A) and (B), and each experiment was
repeated twice. *P＜0.05, compared with control sample (A)
(A) (B)
250
200
150
100
50
0
0 9
Red light dose (J/cm－2)
Fl
uo
re
sc
en
ce
in
te
ns
ity
*
(C)
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死亡中的氧化应激研究 研究论文 / Research Article
3 讨 论
作为一种新型的肿瘤治疗方法，近年来，PDT在国外，如美国、日本等一些发达国家，
已被批准临床应用。肿瘤光动力治疗是指机体注射光敏剂后，光敏剂可选择性地聚集在肿
瘤组织内，然后用特定波长的光照射肿瘤部位，组织细胞内的光敏剂吸收光后，发生光化
学反应，破坏肿瘤组织和细胞，从而起到治疗作用[9]。光动力治疗三要素为光敏剂、组织内
的氧和可穿透组织的特定波长的光，其中光敏剂的性能直接决定着光动力治疗的临床应用
和推广。
EAHB是以我国自主开发研制的第二代光敏剂竹红菌乙素为母体化合物，通过对母体
化合物进行结构修饰而合成的一种新的竹红菌乙素衍生物。前期的研究发现，该衍生物在
光疗窗口 （600～900 nm）有很强的吸收峰，而且红光激发时衍生物具有很高的活性氧量子
产率[6]。本研究中，进一步检测了 EAHB抗肿瘤的生物活性，结果证实，肿瘤细胞摄取
EAHB后，红光的照射可以有效地对细胞产生毒性 （图 2）。说明 EAHB可能是一种潜在
的、优良的治疗肿瘤的新型光敏剂分子。
光动力诱导肿瘤细胞死亡的机制复杂，一直是本领域基础研究的重点。由于光敏剂分
图 5 EAHB-PDT 对 HeLa 细胞渗出 LDH 水平(A)及细胞 MDA 含量(B)的影响 (A)和(B)中 EAHB 的浓度均为
2 μmol/L，光照时间分别均为 0、100 和 200 s。计量数据采用 x±s 表示。实验重复三次，光照组与未光照组
(0 J/cm2) 相比，*P＜0.05时有显著性差异
Fig.5 Effects of EAHB-PDT on the level of LDH activities (A) in cell culture medium and cellular MDA
levels (B) in HeLa cells EAHB: 2 μmol/L; Irradiation time: 0, 100 and 200 s. Data are expressed as x±s from
three independent experiments. *P＜0.05, compared with 0 J/cm2 of red light exposed group
2.4 EAHB-PDT对 HeLa细胞MDA水平和细胞渗出 LDH的影响
细胞MDA的水平及渗出胞外的 LDH量高低均可作为细胞氧化性损伤的生物学标志[8]。
图 5A所示，细胞摄取 2 μmol/L的 EAHB后，分别给以 0、9和 18 J/cm2的红光剂量照射，
细胞MDA含量与光剂量呈正相关。尤其是光照组与不光照组相比，细胞MDA水平改变具
有显著性差异 （P＜0.05）。同样，如图 5B所示，细胞摄取相同浓度的 EAHB （2 μmol/L）
时，细胞 LDH渗出量与光照剂量呈正相关，且光照使 LDH渗出水平的改变具有显著性差
异 （P＜0.05）。说明，EAHB-PDT使 HeLa细胞的膜系统受到损伤。
*
*
120
40
0 0 10 20
Red light dose (J/cm2)
LD
H
(U
/L
)
(A)
80
160
200
240
*
*
5
3
0
0 10 20
Red light dose (J/cm2)
M
D
A
(m
m
ol
/m
L)
(B)
4
6
7
8
2
1
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ACTA BIOPHYSICA SINICA｜Vol.26 No.11｜Nov. 2010
生物物理学报 2010年 第 26卷 第 11期研究论文 / Research Article
1. 蒋丽金. 竹红菌素的结构、性质、光化学反应及反应机制( I )
——竹红菌素的结构和性质 . 科学通报， 1990, 35:
1608~1616
Jiang LJ. The structure, characteristics, and photochemical
reaction of Hypocrellins (I) —— The structure and
characteristics of Hypocrellins. Chin Sci Bull, 1990, 35:
1608~1616
2. 蒋丽金. 竹红菌素的结构，性质、光化学反应及反应机制(II)
——竹红菌素的反应. 科学通报，1990, 35: 1681~1690
Jiang LJ. The structure, characteristics, and photochemical
参考文献：
子可以吸收特定波长的光而被激发到其激发态。在有氧条件下，激发态的光敏剂将其能量
或电子传递给氧分子，产生多种活性氧自由基，包括单线态氧 （1O2）、超氧阴离子自由基
（O2·）、羟基自由基 （·OH）、过氧化氢 （H2O2）等。如果光敏剂被细胞摄取，光照射将使光
敏剂在细胞内产生活性氧自由基[10]。因此，活性氧自由基机制是光动力治疗的中心环节[11]。
图 3所示结果证实，光照摄取 EAHB的 HeLa细胞可有效地在胞内产生活性氧自由基，提
示，活性氧自由基在 EAHB介导的光动力损伤肿瘤细胞中起着重要作用。
细胞内存在自身抗氧化体系，其中 GSH是一种重要的活性氧自由基清除剂，它可以消
除 O2·、·OH等自由基[12]。而 SOD是另外一种广泛存在于生物体内与细胞氧化代谢密切相
关的蛋白质，是活性氧自由基 （O2·）的天然消除剂[13]。因此细胞内 GSH和 SOD是衡量机
体抗氧化系统性能状态的一个重要指标。本研究中，光动力作用导致细胞内 GSH含量和
SOD活性的显著降低 （图 4）。说明光动力作用诱导胞内 ROS的产生，细胞内天然抗氧化
剂被大量消耗，机体天然的抗氧化机制受到破坏。
由于生物膜是自由基损伤的常见靶位点，它攻击膜上磷酯中的不饱和脂肪酸，引发膜
脂质过氧化链式反应，放大活性氧的作用，引起细胞代谢和功能障碍，导致细胞死亡[14]。
其中MDA是脂质过氧化中的主要产物，为评价脂质过氧化程度的重要指标[15]。本研究证实
EAHB-PDT导致肿瘤细胞 MDA含量明显上升 （图 5），说明 HeLa细胞内自由基水平升高
引起了细胞膜结构的损伤。另外，由于 LDH （乳酸脱氢酶）是一种稳定的蛋白质，存在于
正常细胞的胞质中，一旦细胞膜受损，LDH即被释放到细胞外[16]。因此，LDH的释放是细
胞质膜受到损伤的重要指标。如图 5 所示，光动力作用导致细胞 LDH 的渗出。证明了
EAHB介导光动力损伤 HeLa细胞过程中细胞膜的完整性受到破坏。
光敏剂分子被细胞摄取后，常常定位在细胞质膜以及细胞的膜性细胞器，如内质网、
高尔基体、线粒体、溶酶体等的质膜上，也可能与细胞质基质成分结合分散在基质内。这
些亚细胞定位，为活性氧自由基提供了直接的作用靶点。新型光敏剂分子 EAHB被细胞摄
取后，在其介导的光动力损伤 HeLa细胞过程中，细胞内产生了 ROS，由于细胞天然抗氧
化体系遭到破坏，过量的 ROS作用于细胞膜脂成分，引起脂质过氧化，并损坏了细胞质膜
的完整性，从而对细胞产生毒性，导致细胞存活率降低。然而，对于本光敏剂在细胞内的
确切定位、动力治疗过程中细胞内产生的 ROS损伤的靶点细胞器，以及如何诱发细胞的氧
化应激、改变基因表达、改变细胞内离子平衡、改变蛋白激酶的活性、影响细胞信号传导
等等过程，还有待进一步研究。
致谢 感谢中国科学院生物物理所张志义教授和化学所张曼华教授馈赠光敏剂。
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张立娜等：新型光敏剂分子二乙醇胺基竹红菌乙素光诱导 HeLa细胞
死亡中的氧化应激研究 研究论文 / Research Article
Oxidative Stress Contributes to The Photocytotoxicity
of EAHB as a Novel Photosensitizer to HeLa Cells
ZHANG lina, LI Qianqian, ZHOU Zhixiang
College of Life Science and Bio-engineering, Beijing University of Technology, Beijing 100124, China
This work was supported by grants from The Beijing Talents Training Project (20081D0501500180) and The Scientific Research
Foundation for the Returned Overseas Chinese Scholars, State Education Ministry
Received: Aug 6, 2010 Accepted: Oct 25, 2010
Corresponding author: ZHOU Zhixiang, Tel: +86(10)67391668, E-mail: zhouzhixiang@bjut.edu.cn
Abstract: 2-ethanolamino-2-demethoxy-17-ethanolimino-hypocrellin B (EAHB), a novel derivative of Hypocrellin
B， was used here as a photosensitizer to probe its photocytotoxicity to the tumor cells and the intracellular
oxidative stress. The survival rate of HeLa cells induced by EAHB mediated Photodynamic therapy (PDT)
was decreased significantly as measured by MTT assay, and shown a negative dependence on both the
concentration of photosensitizer and red light dose; Exposure to EAHB mediated PDT increased intracellular
reactive oxygen species (ROS) levels and reduced intracellular glutathione levels. The increased production of
malondialdehyde and lactate dehydrogenase release from the cells indicated lipid peroxidation and membrane
damage. In summary, EAHB mediated PDT results in both the concentration of photosensitizer and the
dose-dependent cytotoxicity in cultural HeLa cells that is closely correlated to increased oxidative stress.
Key Words: EAHB; Hypocrellins; HeLa cells; Photodynamic therapy; Oxidative stress
reaction of Hypocrellins (II)——The reaction of Hypocrellins.
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