全 文 ：收稿日期:2006-10-28
作者简介:黄锁义(1964-),男 , 副教授 , 学士学位 ,主要从事医
用化学的教学和科研工作。
超声波提取小叶榕树果总黄酮及鉴别
黄锁义1 ,罗建华2 ,蒙春越2 ,冯　玲2 ,谭勇平2 ,李　琳3
(1.右江民族医学院化学教研室;2.右江民族医学院临床医学系:广西 百色 533000;3.南华大
学医学院 ,湖南 衡阳 421001)
摘要:目的:为充分利用榕树果植物资源 , 避免资源的浪费 , 探讨榕树果总黄酮的提取及鉴别方法。方法:采
用超声波乙醇浸提法从榕树果中提取黄酮类物质 ,对所提取的黄酮类物质进行验证 , 并用分光光度法测定含
量。结果:测得样品中总黄酮的含量C=0.1224 mg/ ml , 回收率为 101.5%, 其纯度和产率均较高。结论:该方
法采用全物理过程 , 无任何污染 ,是提取榕树果黄酮类物质的有效途径。
关键词:超声波提取;榕树果;总黄酮;鉴别
中图分类号:O624.42+1;O6-332　文献标识码:A　文章编号:1005-5320(2007)02-0046-02
The Total Flavanone of Flocculus Banyan Fruit Extraction and the Identification by Ultrasonic Wave
HUANGSuo-yi1 , LUO Jian-hua2 ,MENG Chun-yue2 , et al
(1.Department of Chemistry , Youjiang Medical College for Nationalities;2.Grade 03 , Department of Clinical
Medicine , Youjiang Medical College for Nationalities , Baise Guangxi 533000;3.Medical College of Nanhua Uni-
versity ,Hengyang , Hunan 421001 ,China)
Abstract:Objective:In order to make use of the resources of flocculus banyan fruit , avoid w asting and approach the ex traction of total
flavanone of banyan fruit.Methods :The flavonids w ere ex tracted by ethanol as the solvent from banyan leaves with ultrasonic wave and
e thanol ex traction .Using spectrophotometry to ex tract and check the flavanone of banyan fruit.Results:By this method getting the
density of the total flavanone of banyan fruit is C=0.1224mg/ml and the rate of recovery is 101.5%.Conclusion :This tex t provides
the ex traction and purifying methods to get the outcome and the purity of the flavanone are all very high .This method is a purely physical
process and has no t any pollution.It is an ideal way to extract the flavanone of banyan fruit.
Key Words:ultrasonic wave treatment;banyan fruit;total flavanone;identification
　　榕树(banyan),是桑科榕属无花果类植物 ,全世界有 800
多种 ,主要分布在热带亚热带地区 。小叶榕为桑科植物榕树
的果 ,异名落地金线 。我国榕属植物约 100 种 ,是热带雨林
中的关键种类 ,主要分布在福建 、广东 、广西 、海南 、台湾和浙
江等地 。研究表明[ 1] :榕树叶含三萜甙 、黄酮甙、酸性树脂 、
鞣质等 ,其中黄酮类和萜内酯类等有效成分对治疗冠心病 、
老年性痴呆 、脑血栓 、神经系统疾病和消除自由基 、抑菌 、抗
癌等方面有显著效果 ,无毒副作用 ,并以此开发出多种药品
和保健食品 。
当前国内外对于榕树植物中黄酮类化合物的研究还相
对缺乏 。目前有用水 、石油醚 、乙醇分别从榕树叶中提取黄
酮类化合物的报道[ 1] ,但是 ,这几种方法提取的时间长 、工艺
复杂 、提取效率较低 。近年来 ,超声技术应用于提取植物中
的生物碱 、苷类 、生物活性物质 、动物组织浆的毒质等研究已
有报道[ 2 , 3] ,表明其具有能耗低 、效率高 、不破坏有效成分的
特点 。很多研究表明 ,利用超声波产生的强烈振动 、高的加
速度 、强烈的空化效应 、搅拌作用等 ,可加速植物材料中的有
效成分进入溶剂 ,从而增加有效成分的提取率 ,缩短提取时
间 ,并且还可避免高温对提取成分的影响[ 3] 。但超声技术应
用于提取榕树果中黄酮类物质的研究尚未见报道 ,本实验报
道用超声波提取小叶榕树果总黄酮及鉴别 。
1　材料与方法
1.1　仪　器
KQ5200DB 型数控超声波清洗器(超声工作频率
40KHz 、昆山市超声仪器有限公司);UV-755B紫外可见分
光光度计(上海分析仪器总厂);ZF -I型三用紫外分析仪(上
海顾村光电仪器厂);SHB-III 循环水式多用真空泵(郑州长
城科工贸有限公司)。
1.2　试　剂
95%乙醇 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠 、三氯化铝 、盐
酸 、氨水 、冰醋酸 、乙酸乙酯(均为 AR);芦丁标准品(中国药
品生物制品检定所);榕树果(小叶榕)采自右江民族医学院
校园内 。
1.3　方　法
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　第 24 卷Vo l.24 　　第 2 期No.2 　 　　　　　　　 微 量 元 素 与 健 康 研 究S tudies of T race Elements and Health　 　　　　　　　　　2007 年　3 月Mar.　2007
1.3.1　总黄酮成分提取　取新鲜小叶榕树果 ,烘干 ,粉碎 。
称取榕树果粉末 6g ,加 80 ml 95%乙醇 ,超声波提取 2.5 h ,
抽滤 。滤渣再加 80 ml 95 %乙醇 ,超声波提取 2.5 h ,抽滤 ,
合并两次滤液 ,减压回收乙醇至滤液仅剩 25 ml左右为止 ,放
置 100 ml容量瓶中 ,用 60%乙醇稀释至刻度 ,得样品液 。
1.3.2　测定方法依据　以芦丁为对照品测定榕树果中总黄
酮的含量 ,加入铝离子试剂 ,同时控制适宜 pH值 ,使黄酮化
合物与铝盐形成络合物 ,在可见光区能获得稳定的特征吸收
峰 。
1.3.3　定量实验—总黄酮的含量测定
1.3.3.1 波长的选择　　取样品液适量 ,在 0.30 ml 5%亚硝
酸钠溶液存在的碱性条件下 ,经硝酸铝显色后 ,以试剂为空
白参比液在 420 ～ 700 nm波长范围测定络合物的吸光度 ,络
合物于 510 nm波长处有最大吸收 ,故测定时选用此波长 。
1.3.3.2 　标准曲线的绘制 　分别精密吸取芦丁对照液
(0.10 mg/ml)0.00 , 0.50 ,1.00 , 2.00 , 3.00 , 4.00 , 5.00 ml于
10.00 ml容量瓶中 ,分别加入 5%亚硝酸钠溶液 0.30 ml ,摇
匀 ,静置 6 min;再加 10%硝酸铝溶液 0.30 ml ,摇匀 ,静置 6
min;再加 4%氢氧化钠溶液 4.00 ml ,用 60%乙醇稀释至刻
度 ,摇匀 ,静置 12 min ,以试剂作空白参比液 ,于 510 nm处测
吸光度 。吸光度测定结果见表 1。
表 1　紫外可见分光光度计测定芦丁对照液吸光度
C(mg/ml) 0.00 0.005 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05
吸光度 0.00 0.041 0.102 0.238 0.371 0.509 0.648
　　根据上表得回归方程:A =-0.0311+13.5184C , r =0.
9999。
1.3.3.3　提取物含量的测定　精密吸取样品液 5.00 ml ,置
10 ml 容量瓶 , 按标准曲线的制备方法测定吸光度 A =
0.796 ,根据回归方程:A=-0.0311+13.5184C ,计算样品中
总黄酮的含量 C=0.1224 mg/ml。
1.3.3.4　回收实验　精密量取样品液 2.00 ml ,加入标准芦
丁对照品 2.00 ml(0.10 mg/ml),同前样品测定方法操作测
定吸光度 ,求出回收率为 101.5% 。
1.3.4　定性实验—总黄酮的鉴别
1.3.4.1　颜色反应　紫外光下呈色反应:取该样品溶液点
在滤纸上 ,在可见光下呈灰黄色 ,在紫外光下呈灰褐色并有
荧光斑点 。浓氨水反应:取该样品溶液点在滤纸上 ,将滤纸
在氨水上方熏 0.5 min ,立即在紫外光下观察 ,呈极明显的黄
褐色荧光斑点 。三氯化铝反应:取样品溶液点在滤纸上 ,滴
加 1%三氯化铝乙醇溶液 ,吹干 ,在可见光下呈灰黄色 ,在紫
外光下呈黄色荧光斑点 。乙酸镁反应:取样品溶液点在滤纸
上 ,滴加 1%乙酸镁甲醇溶液 , 吹干 ,紫外光下呈黄色斑点 。
盐酸—镁粉反应:取乙醇提取液 1 ml于试管中加镁粉 ,再加
入浓盐酸数滴(1次加入),在泡沫处呈紫红色 。
1.3.4.2　纸层析　取样品溶液 10 μl点在滤纸上 。用正丁
醇∶醋酸∶水=4∶1∶5(体积比)为展开剂 ,上行展开 5 h ,取出
晾干 。喷 1%氯化铝乙醇溶液 。吹干后于紫外光下 ,可见荧
光斑点 。
2　讨　论
实验结果表明 , 本实验方法工艺简单 , 回收率为
101.5%,提取效率高于传统方法 ,利用本实验所提供的超声
波提取 、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高 。超声波
可以强化乙醇浸提法 ,达到省时 、高效 、节能的目的 ,此方法
采用全物理过程 ,无任何污染 ,是一条理想的提取黄酮类物
质的途径 ,具有广阔的应用前景 。
黄酮类化合物是一大类天然产物 ,广泛存在于植物界 ,
是许多中草药的有效成分 ,具有很高的药用价值 。在自然界
中最常见的是黄酮和黄酮醇 ,其它包括双氢黄(醇)、异黄酮 、
双黄酮 、黄烷醇 、查尔酮 、橙酮 、花色苷及新黄酮类等[ 1] 。天
然来源的生物黄酮分子量小 ,能被人体迅速吸收 ,能通过血
脑屏障 ,能进入脂肪组织 ,进而体现出如下功能:消除疲劳 、
保护血管 、防动脉硬化 、扩张毛细血管 、疏通微循环 、抗脂肪
氧化 、抗衰老 、活化大脑及其他脏器细胞的功能 。
黄酮类化合物具有抗癌 、抗肿瘤 、抗心脑血管疾病 、抗炎
镇痛 、免疫调节 、降血糖 、治疗骨质疏松 、抑菌抗病毒 、抗氧
化 、抗衰老 、抗辐射等作用[ 4] 。近年来 ,世界上掀起了植物药
开发的热潮 ,植物药以其天然低毒的特点备受青睐 ,而黄酮
类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目 ,小叶榕树果分布广
泛 ,本实验结果表明 ,小叶榕树果中含有较为丰富的黄酮 。
因此 ,小叶榕树果具有广泛开发和利用价值 ,值得综合利用 ,
加强资源开发 。
参考文献:
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条件研究[ J] .食品研究与开发 ,2002 , 23(5):35-37.
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南化工 , 2003 ,30(1):27-28.
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[ J] .大豆科学 , 2004 ,23(1):74-76 ,74.
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及其鉴别[ J] .时珍国医国药 ,2006 ,17(3):395-396.
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