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吉林人参花总皂武对 NKC一 I FN一IL 一 2调节网的
作用及其抑瘤效应
于永利 杨贵 贞
( 白求恩医科大学 , 长春 )
夭然杀伤细胞 ( N K C ) 是机体抗御肿 瘤
细胞的第一道防线 。 许多因素可以调节N K C
活性 , 其中比较受人重视的是干扰素 (I F N )
和白细胞间素一 2 (I L 一 2 ) 。 I F N 和 I L 一 2皆可增
强 N K C活性 , N K C亦能分泌 I F N 和 I L 一 2 ,
且 I L 一 2又是 一种生理性的干扰素诱生剂 , 这
样就构成了一个N K C一 I F N一 I L 一 2调节网 〔 ’ 〕。
研究这一调节网的调节因素无疑具有重要的
理论和 实 践 意义 。
人参是著名的补益类 中草药 , 其作用十
分广泛 , 已证明人参提取物可以从多方面影
响机体的免疫功能 L 之 , ” ’ , 本文仅就人参花总
皂贰对N K -C 一 IF N 一 I L 一 2 调节网的作用及其
抑瘤效应做一探讨 。
1
.
G S对正常小 鼠脾脏 N K C 活性的影
响 将不同剂量的 G S加入试验系统中 , 观
察到 G S在 1 0“ g / m l 、 2 5拼g / m l和 5 0拌g /m l 三
个剂量时皆可增强小鼠 脾 脏 的 N K C 活 性
(图 1 ) , 三者之间的作用无甚差别 , 呈平台
型曲线 。 且这三个剂量的 G S不影响 自发释
材料和方法
人参花总皂试〔 ` ’ ( G呈n s e 二 o s i d e , G S ) :
由本校化学教研室供给 。 Y A C 一 1 细 胞 : 中
国医学科学院基础所免疫 室 惠 赠 。 5 18 。 细
胞 : 北京药物研究所提供 。 M L A 一 1 4 细胞 : 得
自中国医学科学院肿瘤所 。 L 9 29 细胞及滤饱
性 口炎病毒 (I 二 id a 二株 ) : 军事医学科学院流
行病研究所赠送 。 IM D M培养基 : 美国 G r a 二 d
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a o d B i o l o g i。 a l C o m p a o y 生产 。 C o n A :
S i g m a产品 。 ` “ “ I u d R ( ` , “ I脱氧尿啥咤核普 )
和 . H T d R 均购自北京原子能研究所 。 所采
用的主要方法为 N K C 活性测定〔匕’ 。 I F N活性
测定〔 . ’和 I L 一 2活性测定 〔 ’ 1。 实验 动物: 普
通小鼠 ( S w ; 5 5 种 ) , 雌性 , 体 重 1 5~ 2 5 9 ,
本校动物室供给 。
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结果及分析
一 、 G S在体外实验中对 N K C一 I F N一 I L
绍调节网的影响
放率 , 这说明 G S的作用部位在效应细胞 ,
并非对靶细胞直接有毒性作用 。
2
.
G S 对小鼠脾细胞产生 Y 一 I F N 能力
的影响 将 G S ( 1 . 2 5拼g / m l ~ 2 0拌g / m l ) 和
C o n 一 A ( 1卯 g / m l) 一起同小鼠脾细胞作用 48
小时 , 然后取其上清测定 I F N 活性 , 发现 G S
( 10 “ g /m l ) 有诱生卜 I F N ( p H : 不稳定 ) 的
作用 ( 图 2 ) 。在另一试验中表明同样剂量的
G S 本身几无诱生卜 I F N 的作用 , 亦无直接
保护 L 。: 。细胞的作 用。
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3
.
G S 对小鼠脾细胞 产生 I L 一 2能力的
影响 将 G S ( l “ g / m l 、 2 0“ g / m l ) 和 C o 二一 A
( 5拼g / m l) 一起和小鼠脾细胞作用 48 小时 ,
然后取其上清检测 I L 一 2 活 性 。 检测细胞为
C
o u 一 A激活二天后 , 再经 M L A 一 1 4 上清驯
化三天的 T淋巴母细胞 。 结果 ( 图 3 ) 表明
.
G S 在 C O n 一 A 存在的情况下有诱生 I L 一 2 的
作用 。 另一试验表明 G S 本身则 无 这 种 作
用 。
总的看来 , G S 在体外实验中对 N K C 二
IF N
一比 一 2 调节网起正调节作用 , 其用药剂
量以 1 0拼g / m l为佳。
二 、 G S在体内实验中对 N K C一 I F N “ I乙
二 2调节网的影响
1
.
G S对正常小 鼠脾脏N K C 活性的影
响 每 日经皮下给小 鼠注射 0 . 2 m l 生理盐水
( 内含 5 0 0协g G S ) 连续 8 日 , 可明显提高其
N K C活性 (图 4 ) 。 采用 5 0林 g 和 5 0 0林g 剂量
的 G S 行短程给药 (每 日晨 8 时和下午 4 时
各注射一次 , 连续 2 天 , 第三天测定 ) 也观
察到 N K C 活性升高的现象 (图 5 ) 。在体内
实验中一个比较重要的问题是剂量的选择 ,
剂量过小 , 作用会不明显 , 剂量过大也可造
成不理想的结果。 另一试验表明 , 采用 2也 g
及 s m g 剂量的 G S 做此试验甚至 会 表 现 出
N K C活性受抑制的趋势 。
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.
G S 对荷瘤小鼠 N K C活性的影响及
其抑瘤效应
( 1 )
. 接种 S” 。 细胞对正常小 鼠 的 影
响 将不同数量的 S , 。 。细胞接种于小鼠腹腔 ,
然后观察其死亡率 , 结果接 受 1 x 10 “ 及 1
x l护 个 S ,。 。 细胞小 鼠的生存期分别为 16 士
3
.
9天 ( n = 1 0 ) , 1 2 . 3 土 1 . 2 5天 ( n = 10 ) 。 此外
将 1 X 10 ”个 S , 8。 细胞接种于小鼠皮下 可 使
其百分之百荷瘤 , 于种瘤后第九 日测定小鼠
的 N K C 活性发现瘤块的重量 和 N K C 活 性
呈负相关系 (图6) , 且种瘤小鼠的脾脏明显增
A了.
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生p <0 .0 5, 胸腺明显萎缩 ( P ( 0 . 0 1 ) 。
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1 0. 个 S , 。。 细胞于小鼠皮下 , 第九日解 剖 小
鼠称其瘤重并平行测定其 N K C 活性 。 结 果
受试小鼠全部荷瘤 , 用药组和对照组小鼠的
瘤重和 N K C 活性无明显差别 。 推测这可能
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(2 ) G S 对接种 5 18 。 细胞小鼠 的瘤 发
生率 、 瘤块重及 N K C活性的影响 每 日经皮
下给小鼠注射 0 . 2m l 生理盐水 (内含 5 0郎 g
G S )
, 连续 8 天 。 在给药的第一天 接 种 I X
F 19
。
6 T h
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t i v i t y a n d t u m o r w e i g h t
是因接种肿瘤细胞的数量过大 , 因此改用 1
x l 。“ 个 S , : 。 细胞接种于小鼠皮下重复这 一
试验 。 结果发现 G S 可使受试小鼠的荷 瘤
率降低 (表 1 ) 。 此外将荷瘤小鼠择出比较其
瘤重和 N K C 活性的差别 , 发现用药组小鼠
的平均瘤重低于对照组 , 且其 N K C 活性明
显高于对照组 (图 7 ) 。
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.
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( 3 ) G S对种植肿瘤小鼠 N K C 一 I F N 一 I L
二 2 调节网的影响 给受试小鼠经皮下接 种
1 x l护个 S , : 。 细胞后即皮下注射 0 . 2m l 生理
盐水 (内含 50 。件g · G )S , 每 日一次 。 之后分
别于给药后的第 4 、 8 和 12 天测定小鼠 脾 脏
N K C活性及产生 I F N 和 I L 一 2 的能力 。 结果
(图 8 ) 表明在第 8 天时给药小鼠 的 N K C
活性及 Y 一 I F N (P H : 不稳定 ) 及 1 一 2的产生
水平皆高于对照鼠 。 从图中可以看出种植肿
瘤的第 8 日可造成小鼠 N K C 活性和 Y 一 I F N
产生的扣喇 , 而恰在此时 G S 可以起到增强
N K C活性及产生丫一 I F N 能力的作用 。 至于
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I L 一 2 的产生能力在种瘤第 8 日时则不受 抑
制 , 而 G S仍可使这种能力得到增强 。
讨 论
本文的结果表明 , G S 在体外实验中可
以促进小鼠脾脏 N K C活性 , 并可在 C 。 二一A
存在情况下诱生 Y一 I F N和 IL 一 2 , 在体内实验
中G S可提高正常小鼠的N K C 活性 , 并可使
种植肿瘤小鼠的N K C 活性 、 产生卜 I F N 和
I L 一 2的能力得到增强 。 可见 G S对 N K C一 I F N
一 I L 一 2 调节网可起到正调节作用 , 据此推想
G S 可能通过此调节网发挥十分广泛的免 疫
学效应 。
N K C 有许多重要的免疫功能 L ” 。 它 参
与抗感染免疫 , 如抗病毒 、 抗白色念珠菌 、
单核细胞增多性李斯式氏菌和流产 布 氏杆
菌 。 N K C 又是一种具有广泛免疫调节功能
的细胞 , 如 N K C 可调节骨髓干细胞 、 胸腺
细胞和 B细胞的分化 。 此外 N K C 具有重要
的分泌功能 , 如人的 N K细胞能分泌 I L 一 1 ,
I L 一 2 , a 一 I F N , 丫一 I F N , G s F (集落刺激
因子 ) 和 B细胞生长因子 。
I F N是作用十分广泛的免疫物质〔” 。 除
抗病毒活性外 , I F N 尚有抗御肿瘤细胞增生
的作用 。 I F N 可做为一种效应因子激活巨噬
细胞和 N K C 。 此外 I F N 尚可促进免疫活性
细胞如单核细胞表达组织相容性抗原 。
I L
一 2 亦是作用十分广泛的物质〔” 。 IL
褚 除可在体外维持 T 细胞生长外 , 尚可使
N K C在体外增殖 。 IL 一 2 是一种活化因子 ,
它能激活 N K C , 诱导 L A K (淋巴因子激活
的杀伤细胞 ) , 诱导 C T L的产生 , 还能刺激 T
细胞产生 Y 一 I F N 。
在 N K C一 I F N 一 I L 一 2 调节网中 , N K C
居核心的地位 , 这是因为一方面王F N 和 I L -
2 都可增强 N K C 活性使其更好地执行效应
细胞的功能 , 另一方面 N K C 又可通过分泌
I F N和 IL 一 2 实现正反馈的自我调节 。 关于
G S促进N K C活性的机理有这样几种可能 :
一 、 G S直接作用于 N K C 。 有文献报道〔 , ’ 〕人
参皂贰可以和糖皮质激素受体结合 , 据此推
论 G S增强 N K C 活性的效应可能和占据糖皮
质激素受体有关 。 二 、 G S 通过诱生竹 I F N
间接起到增强 N K C 活性的作用 。 Y一 I F N可
使N K C前体细胞加速成熟 、 N K C结合靶细
胞的速度加快。 重复杀伤靶细胞 的 周 期 缩
州
4 5
短。 三 、 G S通过诱生 I L 一 2间接 地 增 强
N K C 活性。 这又有两种可 能 , 一是 I L 一 2
诱生了 I F N , 二是 I L 一 2 直接刺激了N K C ,
纯化的 , 不含 I F N 的 I L 一 2 即可增强 N K C
活性 。 关于 G S 促进 N K C活性的机理可归
纳于下面的简图 :
贵贞等证明 G S 可以提高 T细胞和巨噬细胞
的功能 , 这都有助于说明 G S 的抗肿瘤机理 。
参 考 文 献
、GS工
了
I F N全二二二二 N K C落二二二Z I L 一 2
产
、
最后讨论一下 G S 发挥抑瘤作用的可能
机理。 一 、 G S通过促进 N K C活性而更有效
地杀伤肿瘤细胞 , 二 、 G S通过诱生 I下 N 而
发挥抑瘤作用 , I F N 除 可增 强 N K C 活性
外其本身就有抑制肿瘤细胞生 长 的 作 用 ,
三 、 G S可诱生 I L 一 2 , I L 一 2 除可诱生 I F N
外尚可诱导 C T L的分化 、 诱生 L A K细胞 。
C T L和 L A K细胞皆是重要的杀瘤细胞 。 杨
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T r e a t i n g G S ( 60 0卜 g / d a y ) 呈n t o t u m o r t r a n s p l a n t e d m 呈e e f o r s
d a y s e o u l d r e d u e e b o t h t u m o r b e a r i n g r a t e a n d a v e r a g e w e i g h t o f t u m o r
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二 i e i t y a o d p r o d u e t i o n o f I F N , I L一 2 i n t u m o r t r a n s p l a n t e d m i e e w e r e r a i s e d u p t o a
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I n e o n e l u s i o 且 , G S p l a y a p o s i t i v e r o l e o n N F C一 I F N 一 11一2 r e g u l a t o r y n e t w o r k
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