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黄蜀葵总黄酮对心脑缺氧损伤的保护作用



全 文 :Experimental Resea rch about S TZ Rats in the Functional Mechanism of
Dropping Blood Sugar by Chinese Medicine
SHI Yan, X IN Jun-zheng , ZHANG Zhen-qiu, ZHU Gou-ru, PAN G Min
(Liaoning College of Tradional Chinese Medicine 110032)
Abstract: w e designed fiv e t rea tment factors: invig orate the spleen, replenish qi , clear away pathogenic
heat , nourish essential fluid and activa te the blo od f low. And w e conducted o rthogonal test of STZ experi-
menta l diabetic rats by these fiv e factors. The resul ts suggested: simple facto r invig o ra te the spleen( P < 0.
01) ; replenish qi ( P < 0. 01) ; nourish essential f luid( P < 0. 01) and clear aw ay pathogenic hea t( P < 0. 05)can
all drop blo od suga r clearly. But the affection of dropping blo od suga r o f activa te the blo od f low have no
sta tistica l significance Invig orate the spleen combined w ith replenish qi , nourish essential fluid, activ ate the
blood f low and clea r aw ay pathogenic heat have reciprocal affection on dropping. Blood suga r ( Invig orate
the spleen wi th activa te the blood f low P < 0. 05, the others P < 0. 01) . Replenish qi have reciprocal af fec-
tion wi th invig orate the spleen, activa te the blood flow and clear away pa thogenic hea t ( invigo rate the
spleen wi th activ ate the blood f low P < 0. 05, the others P < 0. 01) . Nourish essential fluid have reciprocal
af fection wi th inv igo rate the spleen and activa te the blo od f low (P < 0. 01) ; Activa te the blo od flow have re-
ciprocal af fection w ith invig o ra te the spleen and replenish qi ( invig orate the spleen wi th activa te the blo od
f low P < 0. 05, the o ther P < 0. 01) . Clear aw ay pa thogenic hea t have recipro cal af fection wi th in w ith invig-
o ra te the spleen and replenish qi (P < 0. 01) . So using invigo ra te the spleen and replenish qi , nourish yin and
clea r aw ay pathogenic heat as the basis fa r establishing therapeutic principle have theo retical and experi-
menta l founda tion.
Key words: STZ rat; Chinese Medicine
实验研究
黄蜀葵总黄酮对心脑缺氧损伤的保护作用
周兰兰 ,岑德意 ,陈志武 ,王 瑜 ,方 明 ,江 勤 ,马传庚
(安徽医科大学药理教研室 ,安徽 合肥  230032)
  摘 要: 目的:研究黄蜀葵总黄酮 ( TFA)对心脑缺氧性损伤的保护作用。方法: 小鼠心脑缺氧模型分别
采用断头和挟闭气管术制备 ,一氧化氮 ( NO)含量用 g reen法测定 ,丙二醛 ( MDA)含量用 T AB法测定 ,结
果: T FA20、 40、 80 mg kg- 1显著延长挟闭气管后小鼠心电图的时间和断头后喘气时间 ,并呈量效关系 ,在 20
~ 80 mg kg- 1范围内 ,黄蜀葵总黄酮显著降低心脑组织中 MDA和 NO含量。结论: T FA对心脑缺氧有显著
保护作用 ,其作用可能与抗自由基及减少 NO有关。
  关键词: 黄蜀葵总黄酮 ;丙二醛 ;一氧化氮 ;脑缺氧 ;心脏缺氧。
  中图分类号: R285. 5  文献标识码: A  文章编号: 1006-3250( 2000) 07-0022-03
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Chines J Bas Med TCM
  2000年第 6卷第 7期
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  黄蜀葵 ( abelmoschus maniho t L. Medic, A)是
一分布广泛的植物 ,民间用其外敷治疗烫伤等症 ,其
主要成分为黄蜀葵总黄酮 ( total f lav one of A,
T FA)。目前研究表明 ,大部分黄酮类化合物对心脑
缺血损伤有保护作用 ,但未见 TFA对心脑缺血缺
氧损伤作用的研究报道。因此 ,本文就 TFA对小鼠
心脑缺氧的保护作用进行了研究。
材 料 与 方 法
1 材料
T FA: 安徽医学研究所植化室提供 ;四氧甲基
丙烷 ( Tet ramethyoxy , TM P): Sigma公司出品 ;硫
代巴比妥酸 ( Thiobarbi tuie acid, TBA):上海生化试
剂二厂出品 ; N- 1-萘乙二胺盐酸盐: 上海化学试
剂分装厂出品。
2 动物
昆明种小白鼠 ,体重 18 g~ 22 g ,♀ 各半 ,由
安徽医科大学实验动物中心提供 ,动物合格证号:皖
医实动准第 01号。
3 小鼠断头致脑缺氧模型 [1 ]
取小白鼠 50只 ,随机分为 NS对照组、 T FA三
个剂量 ( 20、 40、 80 mg kg- 1组 ,每组 10只 , ig受试
药 , 1次 d- 1× 7d,最后一次用药 2 h后 ,用大剪刀在
小鼠双耳连线处快速断头 ,记录张口持续时间秒钟 /
sec)。
4 挟闭气管致小鼠心脏缺氧模型 [2 ]
小白鼠随机分组 ,每组 10只 ,分为 TFA20、 40、
80 mg kg- 1三个剂量组和 N S对照组 , ig受试药 , 1
次 d- 1× 7d,最后一次给药 2 h后 ,以水合氯醛麻醉
( 300 mg kg- 1 , ip) ,挟闭气管 ,立即记录心电图及时
间 ,以心电消失为心脏停搏指标。
5 小鼠心、脑组织 MDA和 NO含量的测定
取小鼠 40只 ,随机分为 TFA的 20、 40、 80 mg
kg
- 1三个剂量组和 NS对照组 , ig受试药 , 1次 d- 1
× 7d,末次用药 2 h后 ,处死小鼠 ,快速取脑和心脏 ,
称重后 ,匀浆置 - 20℃待测生化指标。按 TBA法 [3 ]
以 TM P为标准 ,在 535 nm处测定 MDA含量 ,按
Green法测定 NO含量。
结 果
1  TFA对小鼠断头后喘气持续时间的影响
如表 1所示 ,与 NS对照组比较 , TFA20、 40、 80
mg kg- 1各剂量组均可显著延长断头小鼠的张口动
作持续时间。
Tab 1  Influence of TFA on cer ebral anoxia injury
induced by cutting head in mice( x-± s)
Gr oup dose( mg kg- 1 ) n The gasping time( sec)
N S - 10 16. 9± 2. 1
TFA 20 10 21. 0± 1. 9* *
40 10 22. 2± 3. 1* *
80 10 24. 8± 3. 5* *
  注: * * P < 0. 01, Compared with N S
2  TFA对挟闭气管小白鼠心脏缺氧的影响
如表 2所示 ,与溶剂对照组比较 , TFA的 20、 40、
80 mg kg- 1三个剂量组可显著延长小白鼠挟闭气
管后的心电时间。
Tab 2  Influence o f TFA on myocardial anox ia injury
after clamping trachea in mice (x
-± s)
Gr oup dose( mg kg- 1 ) n the ECG time( min)
N S - 10 7. 0± 1. 0
TFA 20 10 8. 5± 1. 25* *
40 10 9. 3± 1. 3* *
80 10 9. 8± 1. 2* *
  注: * * P < 0. 01, Compared with N S
Tab 3  Effects o f TFA on the MDA、 NO conten ts in the myoca rdium and cer ebrum in mice( n= 10, x-± s)
Group Dose( mg kg- 1 ) MDA content( nmo l g
- 1 ) NO content( umol g- 1)
Ce rbrum Myocardium Cerbrum M yoca rdium
N S — 245. 3± 50. 9 1393. 5± 136. 5 2. 6± 0. 7 6. 6± 1. 5
TFA 20 230. 9± 37. 5 967. 6± 129. 4* * 1. 2± 0. 3* * 4. 2± 0. 8* *
40 213. 1± 14. 7 1088. 9± 184. 1* * 0. 8± 0. 3* * 3. 2± 0. 7* *
80 145. 3± 16. 2* * 822. 2± 120. 4* * 1. 0± 0. 5* * 3. 3± 0. 4* *
  注: * * P < 0. 01, Compa red with NS
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   3  TFA对小鼠心、脑组织 MDA、 NO含量的
影响
如表 3所示 ,与 NS相比 , TFA20、 40、 80 mg
kg- 1均可显著降低心、脑组织自由基的脂质过氧化
产物—— MDA和心脑组织中 NO的含量 , T FA80
mg kg- 1也可显著降低脑组织 MDA、NO的含量。
讨 论
本文研究表明 ,在小鼠挟闭气管致心脏缺氧模
型上 , TFA能显著延长挟闭气管后心电活动持续时
间 ,在 20~ 80 mg kg- 1范围内呈量效关系 ,提示
T FA对小鼠心脏缺氧损伤有保护作用。
小鼠断头致脑缺血缺氧模型是一研究筛选抗脑
缺血缺氧药物的较好模型。本文发现 TFA20、 40、 80
mg kg- 1可显著延长小鼠断头后喘气时间 ,这说明
T FA对小鼠脑缺血缺氧损伤也有一定的保护作用。
大量研究资料 [5 ]表明 ,自由基和 NO与心脑缺
血损伤分子机制关系密切 ,心脑缺血缺氧后 ,细胞膜
通透性增加 , Ca2+ 内流增多 ,不仅造成脑内 Ca2+ 超
负荷 ,直接损伤细胞 ,而且激活一系列钙依赖性的酶
促反应 ,如黄嘌呤氧化酶、一氧化氮合酶等 ,使自由
基、 NO等生成增多 ,使损伤进一步加重。本研究表
明 , TFA可显著降低心、脑组织中自由基膜脂质过
氧化产物—— MDA和 NO的含量 ,说明该药作用
机制与抑制自由基膜脂质过氧化作用和 NO生成有
关。
综上所述 , TFA对心、脑缺氧损伤有显著保护
作用 ,其作用可能抑制自由基及 NO生成。
参 考 文 献
[ 1 ] 徐叔云主编 .药理实验方法学 [ M ].第 2版 .北京: 人民
卫生出版社 , 1991. 948.
[ 2 ] 陈志武 ,宋必卫 ,方明 ,等 .芸香甙的抗疲劳和耐缺氧
作用 [ J].安徽医科大学学报 , 1995, 30: 186.
[ 3 ] 陈志武 ,宋必卫 ,方明 ,等 .芸香甙抗氧化作用的初步
研究 [ J].中国药理学通报 , 1995, 11: 75.
[ 4 ]  Green LC, Tannenbaum SR, Goldman P. Nitra te syn-
thesis in the germ free and conver tional rats [ J ]. Sci-
ence, 1981, 212: 56.
[ 5 ] 冯贵友 ,汤光昭 ,王志平 ,等 .槲皮素磷酸酯钾对大鼠
急性脑缺血再灌损伤的保护作用 [ J].中国药理通报 ,
1994, 10: 204.
[ 6 ] 田恒力 .一氧化氮与脑缺血 [ J].国外医学 脑血管疾
病分册 , 1995, 3( 2): 59.
收稿日期: 2000-01-20 修回日期: 2000-02-08
作者简介: 周兰兰 ,女 , 31岁 ,安徽医科大学博士
生 ,讲师。
Pro tectiv e effects of T FA against cerebral and myocardial anoxia in mice.
ZHOU Lan-lan, CEN De-yi, CHEN Zhi-wu, WANG yu, FAN G ming , JIAN G qin, M A Chuan-geng
(Department of Pharmacology , Anhui Medical University , Hef ei , 230032) .
Abstract: Objective: To study the pro tectiv e effects of to tal flav one o f abelomoschus maniho t L. Medic
( T FA) against cerebral and myoca rdial anoxia. Methods: The cerebral and myoca rdial anoxic models in
mice w ear made by means of Cut ting head and clamping t rachea respectiv ely. The ni t ric ox ide( NO) content
w as measured wi th g reen method. The TBA method was used to measured the malondialhyde ( MDA) con-
tent. Results: T FA 20、 40、 80 mg kg- 1 markedly and dose-dependent ly prolonged the ECG time af ter clamp-
ing t rachea and the gasping time induced by cutting head. 20~ 80 mg kg- 1 TFA signi ficant ly reduced the
MDA and NO contents in the myoca rdium and cerebrum of mice. Conclusion: TFA has protectiv e ef fects a-
gainst myocardial and cerebral anoxia v ia at tenua ting oxygen free radical and NO.
Key words: T FA; cerebral anoxia; myocardial anoxia; malondia ldehyde; ni t ric ox ide.
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  2000年第 6卷第 7期
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