全 文 ：质 量 工 艺
HPLC法测定接骨木中莫诺苷的含量
韩华，杨炳友，杨柳，夏永刚，王秋红，匡海学
(黑龙江中医药大学北药基础与应用研究教育部重点实验室，
黑龙江省中药及天然药物药效物质基础研究重点实验室，黑龙江 哈尔滨 150040)
摘 要:目的:建立接骨木中莫诺苷的含量测定方法。方法: 采用不同色谱条件，考察接骨木中莫诺苷的
含量测定方法。结果:莫诺苷在 1 ～ 12μg间具有良好的线性关系( r = 0． 999 9) ，平均回收率为 99. 66%，
方法精密度 ＲSD为 0． 4%。结论:方法可用于接骨木中莫诺苷的含量测定。
关键词:接骨木;莫诺苷;含量测定; HPLC
中图分类号:Ｒ927． 2 文献标识码:A 文章编号:1002 － 2406(2013)04 － 0030 － 03
Determination of Morroniside in Sambucus Williamsii Hance by HPLC
HAN Hua，YANG Bing － you，YANG Liu，XIA Yong － gang，WANG Qiu － Hong，KUANG Hai － xue
(Key Laboratory of Chinese Materia Medica，Heilongjiang University of Chinese Medicine，
Ministry of Education，Heilongjiang Key Laboratory of TCM Pharmacodynamic Material Bases，Harbin 150040，China)
Abstract:Objective:To establish a method for the determination of morroniside in Sambucus williamsii Hance
by HPLC． Method:Establish a method for the determination of morroniside in Sambucus williamsii Hance by
different chromatographic conditions． Ｒesult:The linear range of irisflorentin was 1μg ～ 12μg． The average re-
covery rate was 99． 66%(ＲSD =0． 254%)． Conclusion:The method can be used for quantitative determina-
tion of the preparation．
Key words:Sambucus williamsii Hance;Morroniside;Determination;HPLC
基金项目:国家自然科学基金(81173501，2011 － 2014) ;黑龙江中医药
大学优秀创新人才支持计划(B201201) ;黑龙江中医药大学
博士创新基金(B201003)
作者简介:韩华(1975 －) ，女，副教授，博士，主要研究方向:中药及复方
药效物质基础研究。
通讯作者:匡海学(1955 －) ，男，教授，博士，博士研究生导师，主要研究
方向:中药药性理论研究、中药及复方药效物质基础研究。
收稿日期:2013 － 03 － 04
修回日期:2013 － 04 － 01
接骨木为黑龙江省道地药材，来源于忍冬科接骨
木属植物接骨木(Sambucus williamsii Hance)的干燥根
皮，具有祛风利湿，舒筋活血之功。莫诺苷是接骨木药
材中含量最大的化合物，也是其促进骨折愈合的有效
成分［1 － 3］。因此，本文拟开展 HPLC 法接骨木中莫诺
苷的含量测定方法研究。
1 仪器与试药
LC －2010 型高效液相色谱(日本 SHIMADZU 公
司，LC － 10ATVP 泵，SPD － M10AVP 检测器，Class －
VP色谱数据工作站) ;Milli － Q纯水器(密理博上海贸
易有限公司)。
接骨木采自黑龙江省帽儿山，经黑龙江中医药大
学中药资源教研室王振月教授鉴定为忍冬科接骨木属
植物接骨木(Sambucus williamsii Hance)的干燥根皮;
莫诺苷对照品(自制，纯度大于 98%) ;甲醇(色谱纯，
美国 DIKMA公司) ;其他溶剂均为分析纯。
2 方法与结果
2． 1 溶液的制备
2． 1． 1 对照品溶液的制备
精密称取莫诺苷对照品 25mg 置 5ml 容量瓶中，
加甲醇至刻度，摇匀，即得储备液(5mg /ml)。分别精
密吸取对照品储备液 0． 1、0． 3、0． 5、0． 7、0． 9、1． 2ml加
甲醇定容至 5ml，得到 0． 1、0． 3、0． 5、0． 7、0． 9、1． 2mg /
ml 6 个浓度的对照品溶液。
2． 1． 2 供试品溶液的制备
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2013 年第 30 卷第 4 期
Vol. 30，No. 4，2013
取本品粉末(过 40 目筛)约 1． 0g，精密称定，置
50ml具塞锥形瓶中，精密加入 95%乙醇 15ml，称定重
量，加热回流 1h，放冷，再称定重量，用 95%乙醇补足
减失的重量，摇匀，滤过，续取滤液，即得供试品溶液。
2． 2 色谱条件与系统适应性试验
以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;甲醇 － 水
(3∶ 7)为流动相;柱温 30℃;检测波长为 240nm;流速
0． 8ml /min。理论塔板数按莫诺苷峰计算应不低于
3 000。对照品和供试品(药材)的 HPLC色谱图见图 1。
图 1 对照品和药材的 HPLC色谱图
图 2 对照品不同流动相的 HPLC色谱图
2． 2． 1 流动相考察
考察甲醇 －水、乙腈 －水、甲醇 －磷酸水、甲醇 －
三氟醋酸水四个溶剂系统，其中乙腈 －水、甲醇 －磷酸
水、甲醇 －三氟醋酸水三个溶剂系统既不能把莫诺苷
的两个异构体很好的分开(见图 2) ，又不能把这两个
异构体很好的合并，故确定流动相为甲醇 －水(3∶ 7)。
2． 2． 2 检测波长确定
对照品的紫外扫描图谱在 241nm 处有最大吸收，
故确定检测波长为 240nm。
2． 3 方法学考察
2． 3． 1 标准曲线的制备
取上述 0． 1、0． 3、0． 5、0． 7、0． 9、1． 2mg /ml 6 个浓
度的对照品溶液，分别进样 10μl，结果见表 1。对对照
品的含量和峰面积进行线性回归，得回归方程:Y =
2. 266 2 × 106X + 11 100(Ｒ2 = 0． 999 999) ，表明对照品
在 1μg ～ 12μg范围内线性关系良好。
表 1 对照品的峰面积
序号 对照品含量(μg) 峰面积
1 1 2 277 856
2 3 6 810 412
3 5 11 346 425
4 7 15 865 502
5 9 20 408 816
6 12 27 207 963
2． 3． 2 精密度试验
取同一对照品溶液，连续进样 6 次，测定莫诺苷的
峰面积(见表 2) ，以考察仪器系统的精密度。计算相
对标准偏差，结果 ＲSD值为 0． 254%，表明仪器系统精
密度高。
表 2 精密度试验结果
测试次数 峰面积 ＲSD(%)
1 13 214 320
2 13 169 114
3 13 206 781
0． 254
4 13 122 178
5 13 194 789
6 13 186 836
2． 3． 3 稳定性试验
取放置 0、1、3、6、12、18h的供试品溶液，测定莫诺
苷的峰面积(见表 3) ，以考察其稳定性。计算相对标
准偏差，结果 ＲSD值为 0． 402%，表明供试品溶液至少
在 18h内稳定。
表 3 稳定性试验结果
测试时间 峰面积 ＲSD(%)
0 17 133 426
1 17 070 735
3 17 151 088
0． 402
6 17 198 730
12 17 013 495
18 17 056 779
2． 3． 4 重现性试验
取本品 6 份，精密称定，按 2． 1 项下的方法操作，
制备供试品溶液，测定莫诺苷的峰面积(见表 4)。计
算相对标准偏差，结果 ＲSD值为 0． 623%，表明该方法
重现性好。
表 4 重现性试验结果
试验号 峰面积 ＲSD(%)
1 15 384 400
2 15 199 268
3 15 204 635
0． 623
4 15 365 111
5 15 298 548
6 15 426 392
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Vol. 30，No. 4，2013
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2． 3． 5 回收率试验
精密称取已知含量同批样品 9 份，精密加入不同
量莫诺苷对照品，按 2． 1 项下的方法操作，制备供试品
溶液，测定莫诺苷的含量，计算回收率(见表 5)。结
果，平均加样回收率为 99． 66%，ＲSD 值为 0． 225%。
表明该方法准确、可靠。
表 5 回收率试验结果
试验号 取样量(g) 样品中对照品的量(mg) 加入对照品的量(mg) 测出对照品的量(mg) 回收率(%)平均回收率(%) ＲSD(%)
1 0． 200 03 2． 080 31 1． 664 88 3． 734 83 99． 72
2 0． 200 01 2． 080 10 1． 664 25 3． 714 65 99． 21
3 0． 200 05 2． 080 52 1． 664 12 3． 740 09 99． 88
4 0． 200 06 2． 080 62 2． 080 07 4． 140 41 99． 51
5 0． 200 03 2． 080 31 2． 080 41 4． 139 01 99． 48 99． 66 0． 225
6 0． 200 05 2． 080 52 2． 080 56 4． 151 12 99． 76
7 0． 200 08 2． 080 83 2． 496 88 4． 566 21 99． 75
8 0． 200 06 2． 080 62 2． 497 14 4． 574 22 99． 92
9 0． 200 04 2． 080 42 2． 497 01 4． 563 65 99． 70
2． 4 样品测定
按 2． 1 项下的方法操作，制备 10 批供试品溶液，
测定莫诺苷的含量(见表 6)。测定结果表明，药材中
莫诺苷含量基本稳定，平均含量为 1. 08%。
表 6 10 批药材的含量测定结果
样品批次 莫诺苷含量(%) 平均含量(%)
2011001 1． 08
2011002 1． 12
2011003 1． 01
2011004 1． 06
2011005 1． 13 1． 08
2011006 1． 04
2011007 1． 05
2011008 1． 16
2011009 1． 07
2011010 1． 05
3 讨论
接骨木药材在国家药典没有收载，只是在《黑龙
江省中药材标准》中有记载，只对其性状、性味、功能
主治、用法与用量、贮藏进行了说明。为了更好的控制
药材的质量，采用 HPLC 法进行了接骨木中莫诺苷的
含量测定方法的研究。结果表明，本方法准确度高、精
密度好，可用于接骨木中莫诺苷的 HPLC含量测定。
参考文献:
［1］ 韩华，匡海学，李振宇，等．正交试验优选莫诺苷的提取工艺［J］．
中医药信息，2011，28(4) :33 － 35．
［2］ 韩华，闫雪莹，匡海学，等． 接骨木的研究进展［J］． 中医药信息，
2008，25(6) :14 － 16．
［3］ 董培良，闫雪莹，匡海学，等． 接骨木根皮抗炎镇痛作用的实验研
究［J］．中医药学报，2008，36(5) :
欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈欈
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18 － 20．
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