全 文 ：◎基础研究 ◎ 中国临床药理学与治疗学中国药理学会主办
CN 34-1206 R , ISSN 1009-2501
E-mail:ccpt96@21cn.com
2008 May;13(5):526-530
2008-03-13收稿　2008-04-02修回
王雪兰 ,女 ,硕士 ,研究方向:内分泌药理。
Tel:13914707286 　E-mail:shonna520@yahoo.com.cn
巫冠中 ,通讯作者 ,男 ,副教授 ,研究方向:内分泌药理。
Tel:025-82087023 　 E-mai l:zhonghuw@sohu.com
草水提物止痒作用的实验研究
王雪兰 ,巫冠中 ,章 娟 ,郭永起 ,苏欣 ,杨红霞
中国药科大学药理教研室 ,南京 210009 ,江苏
摘要　目的:研究 草水提物的止痒作用。方法:
通过采用 4-氨基吡啶(4-AP)诱发小鼠皮肤瘙痒反
应 、氯喹诱发小鼠全身瘙痒反应 、组胺致豚鼠局部
瘙痒反应及 2 , 4-二硝基氟苯(DNFB)致小鼠右耳
廓迟发型变态反应的瘙痒动物模型 ,并用放射免
疫分析方法(RIA)测定氯喹致小鼠瘙痒后血清中
IL-4的含量 ,观察 草水提物的止痒作用 。结果:
草水提物 100 、30 mg kg 显著抑制 4-AP 和氯喹
诱发小鼠瘙痒反应的持续时间 ,其中 100 mg kg
可显著减少搔痒次数 ,并显著降低氯喹诱发小鼠
瘙痒反应后血清中 IL-4的含量; 草水提物 25 、
7.5 mg kg 显著提高豚鼠致痒阈;100 、30 mg kg 显
著抑制 DNFB致小鼠右耳廓肿胀 。结论: 草水
提物具有止痒作用 ,可能与抑制组胺和 IL-4的释
放有关。
关键词　 草水提物;止痒作用;模型 ,动物
中图分类号:R965.2
文献标识码:A
文 章 编 号:1009-2501(2008)05-0526-05
草为桑科 草属植物 草[Humulus scan-
dens(Lour.)Merr.] 全草 ,具有清热 、利尿 、消瘀 、
解毒之功[ 1] 。临床可用于治疗痔疮 、带状疱疹 、皮
肤瘙痒 、胆石胆囊炎疼痛 、肺结核 、小儿腹泻 、暑热
症 、急性细菌性痢疾及其它炎症(如盆腔炎)等。
其主要成分有黄酮类(如木犀草素 、木犀草素-7-
葡萄糖苷 、大波斯菊苷 、牡荆素)、挥发油和鞣质
等[ 1-2] 。本实验对 草水提物止痒作用进行研
究 ,为 草的临床应用及进一步开发应用提供实
验依据。
1　材料与方法
1.1　药品与试剂　 草(购自安徽亳州四方药业
有限公司)加水于 80 ℃水浴提取两次 ,经除杂 、
过柱 、浓缩 、真空干燥 ,得提取物的干燥物 ,实验所
用剂量均以干燥物计。4-氨基吡啶(4-AP),Alexis
公司 ,批号:550-141-G005 ,用生理盐水配成 0.5%
的溶液 ,临用前用生理盐水稀释成 0.05%;磷酸
氯喹片 ,上海中西制药有限公司 ,批号:060601 ,以
0.5%羧甲基纤维素钠(CMCNa)为溶剂 ,并用 pH
=7.73的磷酸缓冲液调 pH接近中性;组胺 ,上海
丽珠东风生物技术有限公司 ,批号:0307068 ,临用
前以生理盐水为溶剂配制成所需浓度;盐酸苯海
拉明注射液 ,南京第三制药厂 ,批号:040621;2 ,4-
二硝基氟苯 ,上海金山兴塔化工厂 ,临用前用丙酮
-橄榄油(1∶1)混合液配制成所需浓度 ,批号:
000611;IL-4放射免疫分析试剂盒 ,北京普尔伟业
生物科技有限公司 ,批号:071228;醋酸地塞米松
片 ,浙江仙琚制药股份有限公司 ,批号:050309;木
犀草素 ,纯度 99%以上 ,由杭州福斯特化学品有
限公司提供;其余试剂均为市售分析纯 。
1.2　仪器　RE 型旋转蒸发仪(巩义市予华仪器
有限责任公司);DZF-6020型真空干燥箱(上海精
宏实验设备有限公司);BS-124S型分析天平(北京
塞多利斯仪器系统有限公司);UP250HE 型数控
超声波清洗器(熊猫集团南京电子计量有限公
司);DFM-96型多探头智能放射免疫计数器(合肥
众成机电技术开发公司)。
1.3　动物　ICR小鼠 ,清洁级 ,体重 18 ～ 24 g ,雌
·526·
雄兼用 ,由南京医科大学实验动物中心提供[动物
合格证号:SCXK(苏)2002-0031] ;白色豚鼠 ,普通
级 ,体重 250 ～ 300 g ,雌雄各半 ,由南京市江宁区
青龙山动物繁殖场提供 [动物合格证号:SCXK
(苏)2007-0008] 。所有受试动物受试前在本室适
应 3 d ,自由摄食饮水。
1.4　方法
1.4.1　4-AP诱发小鼠皮肤瘙痒反应实验[ 3] 　ICR
小鼠 , ♂,随机分为 6组:模型对照组(等体积的
0.5%CMCNa),木犀草素组(30 mg kg),苯海拉明
组(20 mg kg), 草水提物高 、中 、低剂量组(100 、
30 、10 mg kg),每组 10只 。各组药物均用 0.5%
CMCNa 混悬 ,且以腹腔注射的方式给药 ,除苯海
拉明组为末次给药外 ,其它各组均为每天给药 1
次 ,连续 3 d。末次给药 15 min后 ,于各小鼠颈背
部皮肤皮下注射 4-AP 1 mg kg , 立即观察记录
10 min 内小鼠搔痒次数及搔痒持续时间 。以小鼠
前爪搔抓头部 、腮部 ,后爪搔抓躯干 ,嘴咬全身各
部位作为每次搔痒指征;以小鼠连续搔痒至出现
短暂停顿 ,作搔痒一次计算。短暂停顿要求:需要
有行走 、伸头 、直立或嗅东西等移动动作 ,不考虑
时间长短;反复扭头 、舔手或洗脸 ,不算停顿。
1.4.2　氯喹诱发小鼠全身瘙痒反应实验[ 4] 　ICR
小鼠 , ♀♂各半 ,随机分为 6组:模型对照组(等体
积的 0.5%CMCNa),木犀草素组(30 mg kg), 苯海
拉明组(20 mg kg), 草水提物高 、中 、低剂量组
(100 、30 、10 mg kg), 每组 10 只。各组药物均用
0.5%CMCNa混悬 ,且以腹腔注射的方式给药 ,除
苯海拉明组为末次给药外 ,其它各组均为每天给
药1次 ,连续 3 d 。末次给药 15 min 后 ,腹腔注射
氯喹溶液 20 mg kg ,以小鼠前爪搔头部 、后爪搔躯
干 、嘴咬全身各部位作为瘙痒指征 , 观察记录
30 min 内小鼠搔痒次数及搔痒持续时间 。各组小
鼠于搔痒记录结束后 ,立即采用眼球摘除法取血
直至动物死亡 ,分离血清 ,用放射免疫分析法检测
血清中 IL-4的含量 。
1.4.3　组胺致豚鼠局部瘙痒反应实验　参考文
献[ 5] 并稍作修改:白色豚鼠 , ♀♂各半 ,随机分为
6组 ,即模型对照组(等体积的 0.5%CMCNa),木
犀草素组(7.5 mg kg), 苯海拉明组(5 mg kg),
草水提物高 、中 、低剂量组(25 、7.5 、2.5 mg kg),每
组8只。实验前一天剪去各豚鼠右后足背毛 ,并
用电动剃须刀剃净 ,面积约 1 cm×0.5 cm 。将各
组药物用 0.5%CMCNa 混悬 ,以腹腔注射的方式
给药。除苯海拉明组为末次给药外 ,其它各组均
为每天给药1次 ,连续 3 d 。于末次给药 1 h 前再
仔细剃除右后足背毛 ,给药 15 min 后 ,用细砂纸
轻轻擦伤 ,使之发红 ,但以不出血为度 ,于创面处
滴 0.25%组胺液 ,以后每隔 3 min 滴一次 ,每次均
为 0.05 mL 只 ,直至豚鼠出现舔右后足为止。以
豚鼠首次出现舔右后足时所给予的组胺总量为致
痒阈 ,记录并比较各组的致痒阈。
1.4.4　DNFB致小鼠右耳廓迟发型变态反应实验
　参考文献[ 6] 并稍作修改:ICR小鼠 , ♂,随机分
为6组 ,即模型对照组(等体积的 0.5%CMCNa),
木犀草素组(30 mg kg),地塞米松组(2 mg kg),
草水提物高 、中 、低剂量组(100 、30 、10 mg kg),每
组 10只 。实验前一天将各小鼠右腹背部剪毛 ,并
用电动剃须刀剃净 ,面积约 2 cm×2 cm 。实验当
日于去毛部位外搽 15%DNFB 20μL 致敏 ,并于
致敏前 2 h 、致敏后第1天和第 2天给各组小鼠腹
腔注射相应剂量的药物 ,各组药物均用 0.5%CM-
CNa混悬 。致敏后第 6天于小鼠右耳廓双面均匀
外搽 3%DNFB各 10μL 诱发迟发型变态反应 ,左
耳廓双面均匀外搽丙酮-橄榄油(1∶1)混合液各
10 μL 作为对照 ,且于诱发前 2 h 和诱发后 6 h 给
各组小鼠腹腔注射相应剂量的药物。诱发 24 h
后 ,处死小鼠 ,剪下两耳 ,用 7 mm 金属打孔器取
耳中部组织块 ,即刻称湿重 ,计算左右耳重量差
值 ,即为小鼠右耳肿胀度 。
1.5　统计学处理　实验数据用均数±标准差(x
±s)表示 ,以 t检验分析组间差异 , P <0.05 为差
异有统计学意义。
2　结果
2.1　 草水提物对 4-AP诱发小鼠皮肤瘙痒反应
的影响　与模型对照组相比 , 草水提物高剂量
组显著减少4-AP 所致小鼠皮肤瘙痒于 10 min 内
的搔痒次数(P<0.05), 草水提物中 、低剂量组
未见明显差异; 草水提物高剂量组(P<0.01)、
中剂量组(P <0.05)与模型对照组比较 ,显著减
少搔痒持续时间 ,低剂量组未见明显差异 。表明
草水提物可显著抑制 4-AP 所致小鼠皮肤瘙痒
反应(表 1)。
·527·中国临床药理学与治疗学 2008May;13(5)
2.2　 草水提物对氯喹诱发小鼠全身瘙痒反应
的影响　与模型对照组相比 , 草水提物高剂量
组显著减少氯喹所致小鼠全身瘙痒于 30 min 内
的搔痒次数(P <0.05)和搔痒持续时间(P <
0.01),并且显著降低血清中瘙痒介质 IL-4的含量
(P <0.05), 草水提物中剂量组显著减少氯喹
所致小鼠全身瘙痒于 30 min 内搔痒持续时间(P
<0.05), 草水提物低剂量组无统计学意义(P
>0.05 ,表 2)。
2.3　 草水提物对组胺致豚鼠局部瘙痒反应的
影响　与模型对照组比较 , 草水提物高剂量组
(P<0.01)、中剂量组(P <0.05)显著提高致痒
阈 ,抑制组胺致豚鼠局部瘙痒反应 , 草水提物低
剂量组未见明显差异(P>0.05)。表明 草水提
物可显著抑制组胺致豚鼠局部瘙痒反应(图 1)。
2.4　 草水提物对 DNFB致小鼠右耳廓迟发型
变态反应的影响 　 草水提物高剂量组(P <
0.01)、中剂量组(P <0.05)对 DNFB 致小鼠耳廓
肿胀有显著抑制作用 ,与模型对照组比较 , 草水
提物低剂量组未见明显差异。表明 草水提物显
著抑制 DNFB 所致小鼠右耳廓迟发型变态反应
(图 2)。
表 1　 草水提物对 4-AP 诱发小鼠皮肤瘙痒反应的影响(x±s , n=10)
组别 剂量(mg kg) 搔痒次数(次) 持续时间(s)
模型对照组 - 14±5 105±51
木犀草素组 30 13±6 79±32
苯海拉明组 20 6±2c 17±6c
草水提物高剂量组 100 10±4b 51±23c
草水提物中剂量组 30 11±5 61±26b
草水提物低剂量组 10 12±6 67±35
与模型对照组比较bP<0.05 , cP<0.01
表 2　 草水提物对氯喹诱发小鼠全身瘙痒反应的影响(x±s , n=10)
组别 剂量(mg kg) 搔痒次数(次) 持续时间(s) IL-4(ng mL)
模型对照组 - 21±6 248±55 2.9±0.4
木犀草素组 30 18±5 256±70 3.1±0.3
苯海拉明组 20 15±4b 172±60c 2.4±0.4b
草水提物高剂量组 100 16±4b 176±47c 2.5±0.3b
草水提物中剂量组 30 18±6 189±56b 2.7±0.3
草水提物低剂量组 10 19±6 194±70 2.7±0.4
与模型对照组比较bP<0.05 , cP<0.01
图1　 草水提物对组胺致豚鼠局部瘙痒反应的影响(x
±s , n=8)
与模型对照组比较bP<0.05 , cP<0.01;Ⅰ :模型对照组;Ⅱ:木
犀草素 7.5 mg kg 组;Ⅲ:苯海拉明 5 mg kg 组;Ⅳ、Ⅴ 、Ⅵ 分别
为: 草水提物 25、7.5、2.5 mg kg 组
图2　 草水提物对 DNFB致小鼠右耳廓迟发型变态反
应的影响(x±s , n=10)
与模型对照组比较bP<0.05 , cP<0.01;Ⅰ :模型对照组;Ⅱ:木
犀草素 30 mg kg 组;Ⅲ:地塞米松 2 mg kg 组;Ⅳ、Ⅴ 、Ⅵ 分别为:
草水提物 100 、30 、10mg kg 组
·528· Chin J Clin Pharmacol Ther 2008 May;13(5)
3　讨论
瘙痒的产生是一个复杂的 、多因素作用的结
果[ 7] 。目前和瘙痒有关的分子学基础和病理生理
学机制尚不完全清楚 ,临床治疗过程中也缺少理
想的止痒药物 。在基础研究中 ,瘙痒动物模型成
为探讨 、评价瘙痒治疗方法的有力工具[ 8] 。本实
验通过选用 ICR小鼠和豚鼠 ,采用 4-AP 法 、氯喹
法 、组胺法和二硝基氟苯法建立瘙痒动物模型 ,评
价 草水提物的止痒作用。实验结果表明 , 草
水提物可显著抑制 4-AP 和氯喹诱发小鼠瘙痒反
应 ,降低氯喹诱发小鼠瘙痒反应后血清中 IL-4的
含量 ,提高致痒阈 , 抑制 DNFB 致小鼠右耳廓肿
胀 ,起到止痒的作用 。
虽然目前对皮肤瘙痒症的发病机制尚不完全
清楚 ,但大量研究表明组胺是一种可以引起皮肤
瘙痒的重要介质[ 9] 。本实验研究发现 草水提物
对用外源性组胺和 4-AP 诱导释放内源性组胺[ 10]
建立的动物瘙痒模型 ,均表现出明显的止痒作用 ,
提示 草水提物有抗组胺的作用。氯喹诱发小鼠
全身瘙痒与内源性阿片肽调节有关[ 4] , 草水提
物对此瘙痒反应显示出较好的抑制作用 ,推测
草水提物对神经性瘙痒有一定的抑制作用 。IL-4
作为一种瘙痒介质 ,可以引发类似人类特应性皮
炎的瘙痒性皮肤病[ 11] 。 草水提物可显著降低
氯喹诱发小鼠瘙痒反应后血清中 IL-4的含量 ,表
明 草水提物的止痒作用可能与抑制 IL-4的释
放有关。
木犀草素作为一种天然四羟基黄酮化合物 ,
具有多种药理活性 ,如消炎 、抗过敏 、抗肿瘤 、抗
菌 、抗病毒等[ 12] 。 草的主要成分中含木犀草
素 ,在本实验瘙痒模型中均设有木犀草素组 ,结果
显示木犀草素可抑制 DNFB 致小鼠右耳廓肿胀 ,
但对其它的瘙痒反应无明显抑制作用 ,提示 草
止痒活性成分可能是 草的其它成分。
综上所述 ,本研究通过采用多种动物瘙痒模
型证实 草水提物的止痒作用 ,为 草的临床应
用及进一步开发应用提供实验依据 。其止痒机制
可能与抑制组胺和 IL-4的释放有关 ,进一步机制
尚有待研究。
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·529·中国临床药理学与治疗学 2008May;13(5)
Experimental study on antipruritic effect of Humulus scandens extract
from water
WANG Xue-lan ,WU Guan-zhong , ZHANG Juan ,GUO Yong-qi ,SU Xin ,YANG Hong-xia
Department of Pharmacology , China Pharmaceutical University , Nanjing 210009 , Jiangsu , China
ABSTRACT　AIM:To study the antipruritic effect
of Humulus scandens extract from water.METHODS:
The animal models of mice skin-scratching response in-
duced by 4-Animopridine(4-AP),mice body-scratching
behavior induced by chloroquine , guinea pig partial
itching reaction induced by histamine , and the right ear
auricle delayed type hypersensitivity of mice induced by
2 ,4-dinitrochlorobenzol(DNFB)were utilized , and the
content of IL-4 in mice serum after the body-scratching
behavior induced by chloroquine was determined by ra-
dio immunoassay(RIA)to observe the antipruritus ef-
fect of Humulus scandens extract from water.RE-
SULTS:100 , 30 mg kg of Humulus scandens extract
from water inhibited mice scratching duration induced
by 4-AP and chloroquine remarkably;100 mg kg of
Humulus scandens extract from water decreased
scratching frequency induced by 4-AP and chloro-
quine , and reduced the content of IL-4 in mice serum
after the body-scratching behavior induced by chloro-
quine significantly;25 ,7.5 mg kg of Humulus scandens
extract from water improved itch threshold of guinea pig
obviously;100 ,30 mg kg of Humulus scandens extract
from water depressed the right ear auricle of mice
swelling induced by DNFB markably.CONCLU-
SION:Humulus scandens extract from water possesses
antipruritic effect ,which may be attributed to the action
of suppressing release of histamine and IL-4.
KEY WORDS　Humulus scandens extract from wa-
ter;antipruritic effect;model , animal
本文编辑:江思艳　李 娟
·530· Chin J Clin Pharmacol Ther 2008 May;13(5)