全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(3)∶293 ～ 295
基金项目:广西自然科学基金创新研究团队项目(编号:2011GXNSFF018006) ;广西科学研究与技术开发计划项目(桂科能 1010027 － 1) ;广西
壮族自治区卫生厅中医药科技专项课题(编号:GZKZ10 － 034)
作者简介:马雯芳(1983—) ，女，广西南宁，正攻读中药学专业的博士学位。
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:Caiyi118@ 163． com
HPLC测定假蒟中的 α －细辛脑及其含量的动态积累
马雯芳1，2，余 娇1，3，蔡 毅1* ，闵丹丹1
(1．广西中医药大学，广西 南宁 530001;2． 成都中医药大学，四川 成都 610075;3． 安吉县妇幼保健院药剂科，浙江 安吉
313300)
摘要:目的 采用 HPLC法测定假蒟中 α －细辛脑的含量，观察其动态积累变化。方法 色谱柱为 phenomenex ODS2 柱(250
mm ×4． 60 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 05%磷酸溶液(49∶51) ，流速 1． 0 mL·min －1，检测波长 313 nm，柱温 30 ℃。结果
α －细辛脑 0． 0975 ～ 1． 9500 μg与峰面积的线性关系良好(r = 0． 9998) ，平均回收率为 101． 59%(ＲSD = 2． 10%，n = 6)。结论
所用方法简便、快捷、重复性好，可作为假蒟药材中 α －细辛脑的含量测定方法。
关键词:假蒟;α －细辛脑;HPLC;含量测定;动态积累
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)03 － 0293 － 03
Dynamic accumulation research of the content of α － asarone in Piper sarmentosum by HPLC
MA Wen － fang1，2，YU Jiao1，3，CAI Yi1* ，MIN Dan － dan1
(1． Guangxi University of Chinese Medicine，Nanning，Guangxi，530001 P． Ｒ． China;2． Chengdu University of Chinese Medicine，
Chengdu，Sichuan，610075 P． Ｒ． China;3． Maternal and Child Healthcare Hospital of Anji County，Anji，Zhejiang，313300 P． Ｒ．
China)
Abstract:OBJECTIVE To determine α － asarone in Piper sarmentosum Ｒoxb． by HPLC，and observe the changes of dynamic
accumulation of α － asarone．METHODS The chromatographic column was C18 ODS2(250 mm × 4． 60 mm，5 μm) ，and the mobile
phase was acetonitrile － 0． 05% H3PO4(49∶51)with a flow rate of 1． 0 mL·min
－1，the column temperature was 30 ℃ and the detec-
tion wavelength was at 313 nm． ＲESULTS There was a good linear relationship for α － asarone during 0． 0975 － 1． 9500 μg(r =
0. 9998)． The average recovery rate was 101． 59%(ＲSD = 2． 10%，n = 6)． The dynamic accumulation of the content of α － asarone
was higher in autumn and winter． CONCLUSION The method is simple，fast and reproducible，and can be used for determination of
α － asarone in Piper sarmentosum．
Key words:Piper sarmentosum Ｒoxb．;α － asarone;HPLC;Content determination;Dynamic accumulation
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)03 － 0293 － 03
假蒟，又称假蒌、哈蒟、假荖等，为胡椒科植物假
蒟 Piper sarmentosum Ｒoxb．的干燥全草，具有疏通龙
路火路、散淤血、止疼痛、除湿毒、通水道的功用，收
载于《广西壮药质量标准》(第二册)2011 年版，同
时又是多种中成药的原料药［1 － 3］。假蒟的生药鉴定
及挥发油分析方面已有报道，其挥发油中 α －细辛
脑的含量高达 40． 33%［4 － 6］。现采用 ＲP － HPLC 法
测定假蒟中 α －细辛脑的含量，观察其变化趋势，为
进一步开发利用提供参考依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
1100 高效液相色谱仪系统(美国 Agilent)。
α －细辛脑对照品(中国食品药品检定研究院，批
号:10298 － 0001) ;假蒟药材采自广西南宁，经蔡毅
教授鉴定为胡椒科假蒟 Piper sarmentosum Ｒoxb． 的
干燥全草;乙腈为色谱纯;水为超纯水;其余试剂为
分析纯。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 色谱条件 采用 Phenomenex ODS2 柱(250
mm ×4． 60 mm，5 μm) ，流动相为乙腈 － 0． 05%磷酸
溶液(49∶51) ，流速 1． 0 mL·min －1，检测波长 313
nm，柱温 30 ℃，进样量 10 μL。在上述条件下，各成
分无干扰且完全分离，理论板数按 α －细辛脑计大
于 1 × 104，α －细辛脑对照品和假蒟供试品的色谱
图见图 1。
1． 2． 2 溶液的制备 取 α － 细辛脑对照品 1． 95
mg，精密称定，置 10 mL 量瓶中，加甲醇定容，配制
成 0． 195 mg·mL －1的 α －细辛脑对照品溶液。称取
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2013.03.009
假蒟干燥粗粉 0． 3 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精
密加入 50%甲醇 20 mL，回流 3 h，放冷，用 50%甲
醇补足损失的重量，用 0． 45 μm 的微孔滤膜过滤，
取续滤液为供试品溶液。
t/min
0 5 10 15 20 25
Ａ Ｂ
0 5 10 15 20 25
图 1 α－细辛脑对照品(A)和假蒟供试品(B)溶液的色谱图
Fig 1 HPLC chromatograms of control solution(A)and sample
solution(B)
1． 2． 3 样品提取条件的正交试验 根据预试验，选
择甲醇浓度、提取时间、甲醇用量 3 个因素为考察内
容，以 α －细辛脑的量为筛选指标，选用 L9(3
4)表
安排正交实验，因素水平表见表 1。取假蒟药材干
燥粗粉 9 份，每份 0． 3 g，精密称定，置 100 mL 具塞
锥形瓶中，按正交试验表进行实验(表 2)。
表 1 因素水平
Table 1 Factor level
水平 甲醇浓度 /%(A) 提取时间 /h(B) 甲醇用量 /mL(C)
1 40 1 15
2 50 2 20
3 60 3 25
表 2 正交实验表
Table 2 The orthogonal experiment list
序号 A B C α －细辛脑 /mg·g － 1
1 1 1 1 3． 5501
2 1 2 2 3． 6136
3 1 3 3 3． 8823
4 2 1 2 3． 7711
5 2 2 3 3． 5825
6 2 3 1 3． 6939
7 3 1 3 3． 6368
8 3 2 1 3． 5834
9 3 3 2 4． 8711
k1 3． 682 3． 653 3． 609
k2 3． 682 3． 593 4． 085
k3 4． 030 4． 149 3． 701
Ｒ 0． 348 0． 556 0． 476
根据直观观察分析显示:B 因素对 α －细辛脑
提取有显著性影响，各因素作用主次为 B ＞ C ＞ A，
最佳提取工艺为 A3B3C2，即用 60%甲醇 20 mL加热
回流 3 h。因 60%甲醇回流提取液色素较多，颜色
深，直接进样对色谱柱影响大，需经溶剂萃取方可除
去部分色素，从而造成有效成分的损失;40%甲醇提
取液由于水分含量高，黏度大，过滤速度较慢;用
50%甲醇提取，叶绿素影响较小，提取率较高，滤过
时间适中，故选用。
1． 2． 4 线性范围考察 分别精密吸取 0． 5、1、2、4、
8、10 mL α －细辛脑对照品溶液，置 10 mL 量瓶中，
加甲醇定容，分别吸取上述稀释液进样 10 μL，记录
峰面积。以进样量(μg)为横坐标、峰面积为纵坐标
进行线性回归，得回归方程为:Y = 2． 065 × 103X +
18． 31(r = 0． 9998) ，α －细辛脑 0. 0975 ～ 1. 950 μg
与峰面积的线性关系良好。
1． 2． 5 精密度考察 精密吸取供试品溶液 10 μL，
重复进样 6 次，测得 α － 细辛脑峰面积的 ＲSD =
0. 09%，结果表明仪器精密度良好。
1． 2． 6 重复性试验 取同一批药材粉末 6 份，精密
称定，按“1． 2． 2”项下方法制备供试品溶液，测得
α －细辛脑含量的平均值为 3． 69 mg·g －1，其 ＲSD =
1． 84%，表明方法重复性良好。
1． 2． 7 稳定性试验 取供试品溶液，室温下放置
0、2、4、8、12、24 h后进样 10 μL 测定，α －细辛脑峰
面积的 ＲSD = 1． 68%，表明供试品液在 24 h 内
稳定。
1． 2． 8 加样回收试验 取 0． 15 g 已知含量的药材
粉末(α －细辛脑含量为 3． 69 mg·g －1)各 6 份，精密
称定，置 100 mL具塞锥形瓶中，分别精密加入与药
材相当量的 α －细辛脑对照品(0． 562 mg·mL －1)溶
液 1 mL，按“1． 2． 2”项下方法制成供试品溶液，按
“1． 2． 1”项下方法测定，计算 α －细辛脑的平均回收
率为 101． 59%，ＲSD = 2． 10%(n = 6)。
1． 2． 9 样品的测定 取不同采收时间采收的假蒟
药材 12 批，按“1． 2． 2”项下方法制成供试品溶液。
分别精密吸取供试品溶液各 10 μL，按“1． 2． 1”项下
条件进样，测定峰面积，按外标法计算 α －细辛脑的
含量(表 3)。
表 3 广西南宁地区产不同月份假蒟中 α－细辛脑的含量(mg·g －1，
n =3)
Table 3 Contents of α － asarone in Piper sarmentosum collected
from different months(mg·g －1，n =3)
采收时间 α － Asarone ＲSD /%
2012． 01 4． 0727 1． 92
2011． 02 3． 3074 0． 93
2010． 03 4． 1319 2． 50
2011． 04 2． 8153 2． 84
2010． 05 2． 3164 1． 18
2010． 06 3． 5717 1． 62
2010． 07 3． 0680 2． 52
2010． 08 2． 8728 1． 98
2010． 09 4． 1105 0． 54
2010． 10 4． 0869 2． 78
2010． 11 5． 0727 0． 60
2010． 12 4． 5713 2． 36
492 华 西 药 学 杂 志 第 28 卷
华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(3)∶295 ～ 297
2 讨论
α －细辛脑具有祛痰、舒张支气管平滑肌、抗菌
消炎等药理作用［7］，在假蒟挥发油中，α －细辛脑含
量高达 40. 33%，故考查其含量的变化具有一定的
现实意义，可作为质量控制的方法之一。文中结果
显示:同一产地，不同采收季节，α －细辛脑含量有
所差异，以秋冬季较高，但最佳采收期的确定应结合
传统习惯性、临床疗效和挥发油含量等因素综合考
虑，需进一步研究。
参考文献:
［1］ 朱华，韦松基． 壮药药材学［M］． 南宁:广西民族出版社，
2006:317 － 318．
［2］ 冼寒梅，邓家刚．广西临床常见中草药［M］． 南宁:广西科学
技术出版社，2007:107 － 108．
［3］ 中华人民共和国国家药典委员会． 中国药典［S］． 北京:中国
医药科技出版社，2010:550，附录 26．
［4］ 蔡毅，姜建萍，苏建群，等． 假蒟的生药学鉴别［J］． 中国中药
杂志，2006，5(31) :434 － 436．
［5］ 蔡毅，董栋，么春艳，等． GC － MS分析广西产 4 种栽培胡椒属
植物叶中的挥发油成分［J］． 华西药学杂志，2010，25(6) :
641 － 644．
［6］ 向同寿，梁勇．中草药假蒟挥发油的色谱—质谱分析［J］． 分
析测试学报，2004，23(5) :80 － 82．
［7］ 赵李宏，吴建梅，武凤兰． α －细辛脑近 10 年研究概述［J］．中
国中药杂志，2007，32(7) :562 － 565．
收稿日期:2012 － 06 － 02
基金项目:新疆维吾尔自治区自然基金项目(编号:2013211A055)
作者简介:孙莲，硕士，从事药物分析工作。Email:sl_yxy@ 126． com
芜菁子中 β －谷甾醇的 TLC鉴别及含量测定
孙 莲1，严 蕾2，孟 磊1，热西代姆·图尔贡1
(1．新疆医科大学药学院，新疆 乌鲁木齐 830011;2．乌鲁木齐市疾病预防控制中心，新疆 乌鲁木齐 830011)
摘要:目的 定性鉴别芜菁子中的 β －谷甾醇及含量测定。方法 采用 TLC法及 HPLC法。以石油醚 －乙酸乙酯 (7∶3)为
展开剂在硅胶 GF254板上展开。色谱柱为 YMC － PackODS － A(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，流动相为甲醇 －乙腈 －水(55∶9∶
36) ，检测波长 210 nm，流速 1． 0 mL·min －1。结果 β －谷甾醇 0． 22 ～ 8． 8 μg与峰面积线性关系良好(r = 0． 9990) ，平均回收
率为 99． 2%，ＲSD = 1． 6%。结论 所用方法简便准确，重复性好，专属性强，可用于芜菁子的质量控制。
关键词:β －谷甾醇;芜菁子;高效液相色谱法;薄层色谱
中图分类号:Ｒ917 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)03 － 0295 － 03
Identify and determine the β － sitsterol in the Brassica rapa by TLC and HPLC
SUN lian1，YAN Lei2，MENG Lei1，Ｒexidaimu·TUEＲGONG1
(1． College of Pharmacy，Xinjiang Medical University，Urumqi，Xinjiang，830011 P． Ｒ． China;2． The Center for Disease Corotrol and
Prevention in Urumqi，Urumqi，Xinjiang，830011 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To establish the quality standards of the seeds of Brassica rapa L． ．METHODS TLC and HPLC was used
to qualitatively identify and determine the content of β － sitsterol of 10 block of the seeds． Petroleum ether － ethyl acetate(7∶3)was
used as a developing solvent on Silica gel GF254 plates． The separation was performed on C18 column with methanol － acetonitrile － water
(55∶9∶36)as a mobile phase at a flow rate of 1． 0 mL·min －1 ． The detection wavelength was 210 nm at 25 ℃ ． ＲESULTS There
was a good linear relationship between the mass and the peak areas of β － sitsterol in the ranges of 0． 22 － 8． 8 μg(r = 0． 9990)． The
average recovery was 99． 2% with ＲSD of 1． 6% ． CONCLUSION The method is accurate and reproducible，and can be used to con-
trol the quality of the seeds of Brassica rapa L． ．
Key words:β － sitsterol;The seeds of Brassica rapa L．;HPLC;TLC
CLC number:Ｒ917 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)03 － 0295 － 03
芜菁子为十字花科植物芜菁 Brassica rapa L．的
干燥成熟种子，是维吾尔医常用中药，民间以芜菁子
油为药用。芜菁子具有清肝明目、利湿退黄、破积通
淋等功效［1］，现收载于《维吾尔药材标准》上册及