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九香接骨丹促进骨折愈合的动物实验



全 文 :九香接骨丹促进骨折愈合的动物实验
河南省洛阳正骨医院正骨研究所 ( 471002)
陈新宇 叶 军 1 刘德玉 2 杨富国 2 朱长庚 2
提 要 为探讨九香接骨丹促进骨折愈合的机理 ,给临床应用提供可靠依据。 取健康雄性 Labrado r犬 18只 ,造成右胫骨中段
3mm缺损骨折模型。将模犬随机分为九香接骨丹组、七厘散组和模型对照组。术后连续灌胃给药 14天 ,并进行下列观察:①一般
行为表现 ;②X线片分析 ;③伤肢墨汁灌注观察 ;④大体标本骨折愈合情况比较 ;⑤组织学观察。 结果显示九香接骨丹组与模型对
照组有比较显著的差异 ,说明了九香接骨丹能促进骨折早期愈合 ,并且其作用优于七厘散组。 表明九香接骨丹具有消炎、镇痛、改
善微循环 ,促进伤区血液循环和促进骨折早期愈合的作用。
主题词 骨折 /中医药疗法 骨折愈合 /药物作用 九香接骨丹 /治疗应用 实验研究 动物 犬
中图分类号: R289. 5 文献标识码: A 文章编号: 1001-6015( 2001) 11-0009-02
  九香接骨丹是作者在家传经验方的基础上自行开发 ,并经
临床多年使用的有效验方。为探讨九香接骨丹促进骨折愈合的
机理 ,给临床应用提供依据 ,进行了本次实验。现将结果总结报
告如下。
1 材料与方法
1. 1 实验动物 健康雄性 Labrado r犬 18只 ,年龄 6~ 8岁 ,
体重 14~ 16kg ,由中国人民解放军第四军医大学动物实验中
心提供。随机将犬分为九香接骨丹组、七厘散组和模型对照组 ,
每组 6只。
1. 2 实验药物 ①九香接骨丹:由九香虫、冬虫夏草、三七、血
蝎、土鳖虫、续断、琥珀、血余炭、麝香等药物组成 ,均购于陕西
中医学院中药房。 ②七厘散: 由北京同仁堂制药厂生产 (批号
980202)。
1. 3 实验器材 ① CBQ-Ⅱ硬质材料超薄切片机 ,北京精密仪
器厂出品。② OLYM PUS BH-2型生物显微镜 ,日本制造。③扫
描电镜: 采用日产 JSM-35型 ESM。
1. 4 实验方法 采用 846合剂 ,按 0. 1ml· kg- 1剂量肌肉注射
麻醉 ,固定四肢 ,消毒铺巾 ,取小腿内侧切口显露胫骨 ,将右胫骨
中段用线锯垂直锯断 ,形成 3mm缺损的完全性骨折。 复位 ,逐层
缝合。术后分别灌胃给药 ,九香接骨丹组用药剂量为 0. 4g· kg- 1;
七厘散组为 0. 12g· kg- 1;模型对照组给溶媒 4ml· kg- 1 ( 5%阿
拉伯胶水溶液 ) ;每日灌胃给药 1次 ,连续 14天。
1. 5 观察项目 ①骨折后动物伤肢独立支撑着地时间的比
较: 骨折数天后 ,当伤肢敢于着地支撑躯体运动时 ,即判断为独
立支撑着地时间。②X线片分析: 骨折后 14天取病理标本前拍
摄 X线片 ,采用赵志怀等〔1〕的 X线片骨痂定量打分标准。③骨
折后肢体墨汁灌注、血管观察: 第 14天处死动物前均参照
T rains and Fery方法〔2〕作血管墨汁灌注铸形。④大体标本骨折
愈合情况比较: 骨折后 14天模型送病检前观察骨折部是否坚
固 ,以判断骨折是否愈合。⑤骨折愈合组织学观察:完全横断性
骨折其骨折愈合的速度是以骨折两断端间区内各种
1 中国人民解放军第四军医大学唐都医院
2 陕西中医学院 指导者
骨折愈合成份中骨性骨痂所占相对面积的百分率为指标。参照
夏志道等〔2〕的定量学研究方法 ,将求出的各组数据进行统计学
处理分析。
2 结 果
2. 1 一般行为表现  18只模犬术后伤肢空抬不敢着地 ,于 1
周左右始着地支撑躯体 ,渐能正常活动 (表 1)。 九香接骨丹组
与空白对照组相比有显著性差异 (P < 0. 001) ,七厘散组与模
型对照组比较无明显差异 (P> 0. 05)。
2. 2 X线评分及大体标本骨折愈合情况比较  X线评分结果
显示如表 2所示 ,九香接骨丹组与模型对照组比较有显著差异
( P < 0. 05) ,并且其效果也优于七厘散组。 大体标本骨折愈合
情况如表 3所示 ,九香接骨丹组与模型对照组比较 ,有显著性
差异 (P < 0. 05)。
2. 3 伤肢墨汁灌注观察  14天时九香接骨丹组可见血管沿
以前的哈佛氏管道爬行 ,即典型的再管道化现象 ,骨痂内有良
好血管贯通。 七厘散组、模型组均不及九香接骨丹组。
2. 4 骨折愈合观察 如表 3所示九香接骨丹对骨痂形成的促
进作用明显优于七厘散。
表 1 三组动物一般行为观察比较
组别   剂量( g· kg- 1 ) 动物数(只 ) 支撑着地时间(天 )
九香接骨丹组 0. 40 6 5. 51± 0. 52
七厘散组 0. 12 6 7. 48± 0. 95
模型对照组 溶媒 6 8. 11± 0. 00
表 2 三组动物骨折后 14天 X线片评分骨折愈合情况比较
组别 剂量
( g· kg- 1 )动物数(只 ) 评分值(分 ) x-± s 骨愈合例数(例 )
九香接骨丹组 0. 40 6 7. 32± 1. 50 6
七厘散组 0. 12 6 6. 06± 1. 12 3
模型对照组 溶媒 6 5. 02± 0. 73 0
表 3 三组动物骨折后 14天骨痂形成情况比较
组别   剂量
( g· kg- 1 ) 动物数(只 ) 骨性骨痂相对面积百分率 (% )
九香接骨丹组 0. 40 6 39. 81± 15. 00
七厘散组 0. 12 6 22. 76± 8. 65
模型对照组 溶媒 6 15. 34± 5. 30
3 讨 论
本组实验结果显示 ,在应用九香接骨丹治疗后 ,其功能恢
复快 ,伤肢支撑着地时间短 ; X线检查表现为骨痂出现早 ,骨折
·9·九香接骨丹促进骨折愈合的动物实验—陈新宇                        (总 649)  
愈合早 ;局部血液循环观察可见典型的再管道化现象 ,骨痂内
有良好血管贯通 ;大体标本观察骨折愈合例数多 ;骨组织学观
察 ,其骨性骨痂相对面积百分率高。综合说明 ,九香接骨丹对早
期犬骨骨折具有消炎、镇痛作用 ;能改善骨折病变处微循环 ,促
进伤处血液回流 ,加速消肿和骨痂形成 ;能促进骨折早期愈合。
九香接骨丹的功效是舒筋活络 ,定痛消肿 ,补肾生髓 ,续筋接
骨。 方中九香虫、土鳖虫理气止痛 ,活血化瘀 ,补肾接骨为主药
(君 ) ;三七、血竭、冬虫夏草、续断消肿定痛 ,散瘀补虚 (益气化
瘀 )为辅药 ;琥珀镇惊安神 ,活血散瘀 ,利水通淋血余炭止血消
瘀 ,补阴利水 ,既能抑制主药九香化燥伤阴之弊 ,配通利药又能
祛愈生新 ,为佐药。 本文提出的骨组织形态计量方法基本能满
足研究需要 ,骨性骨痂据所占相对面积的测量 ,也能客观反映
及量化骨折愈合的质量及速度。方中运用活血化瘀药能改善微
循环 ,纠正血液流变状态 ,具有抗凝作用 ,因而一方面能防止较
大血肿形成 ,预防和及时消除凝血块 ,并能缩小无菌性炎症的
范围 ,从而使软骨内化骨的范围减少 ,为促进骨折的早期愈合
提供了充分的物质基础。 方中加用冬虫夏草、九香虫补气行气
之品 ,可加快血循环 ,有利于离子交换及骨小梁的改建和吸收 ,
从而能更多地把骨折邻近部位的钙动员起来沉积到骨折部位
有利于骨折愈合。 根据“恶血归肝”的理论 ,在运用活血化瘀的
同时顾及体阴而用阳的特点 ,方中加用血余炭 ,既解除了血瘀
又缓解了局部缺血 ,且滋阴又可稀释血液 ,加强活血化瘀作用。
本实验证实 ,九香接骨丹具有显著的促进骨折愈合作用 ,推测
该药中可能含有某种复合骨诱导物质 ,有待以后实验证实。
4 参考文献
1 赵志怀。 X光片骨痂定量探讨与应用。 中国中医骨伤科  1995; 3
( 4): 8
2 夏志道。家兔骨折愈合中骨痂组织学定量学研究。中国中医骨伤科
1994; 2( 5): 8
3 St ringa G. Studies of the vas culari sation of bon e g raf ts. J Bone Joint
Surg( Br)  1957; 39( 2): 395
( 2001-01-17收稿  2001-02-19修回 )
平乐活血接骨止痛膏中三七和甘氨酸的薄层鉴别
河南省洛阳正骨医院正骨研究所 ( 471002)
郭 畅 刘菁菁 1 马克昌
  平乐活血接骨止痛膏是平乐郭氏正骨的传统药物之一 ,有
良好的镇痛和消炎作用 ,它由基质药物和外敷接骨丹组成。 制
法为先将基质药物与麻油、黄丹按一般黑膏药的炼制方法炼制
成基质膏陀 ,然后加入外敷接骨丹细粉摊制而成。 外敷接骨丹
中含有三七为主要活血药物 ,还含有一些动物药 ,这些动物药
中都含有甘氨酸 ,因此检测三七和甘氨酸可以作为控制其质量
的指标。
  实验材料 平乐活血接骨止痛膏 ,由河南省洛正制药厂提
供 ; R1和 Rg1由中国药品生物制品鉴定所提供 ;硅胶 G由青岛
海洋化工厂提供 ;其他试剂均为分析纯。
  三七的鉴别 取成品活血接骨止痛膏膏质 10g ,加 50g洗
净干燥的硅藻土 ,加热搅匀 ,用 100ml石油醚回流溶解酯溶性
成份 ,滤过 ,残渣中加入 95%乙醇 80ml回流提取 ,提取液浓缩
到 5ml加 5ml石油醚萃取 ,分出下层 ,下层用 5ml水饱和正丁
醇萃取 ,萃取液蒸干 ,残渣用 2ml甲醇溶解 ,为供试样。 另取三
七皂甙 R1和人参皂甙 Rg1制成 0. 5mg /ml的甲醇溶液 ,为对
照品溶液。供试样溶液与对照品溶液各取 5μl点于同一加有羧
甲基纤维素钠的硅胶 G板上 ,按薄层层析法 (中华人民共和国
药典 1995年版一部附录 )以氯仿 -甲醇 -水 ( 6. 5: 3. 5: 1)混匀静
置分层后的下层为展开剂展开 ,凉干后 ,喷以 10%硫酸乙醇溶
液 , 105℃显色 10分钟 ,在供试样色谱中与对照品色谱斑点的
对应位置上有相同的紫色斑点。
  甘氨酸的鉴别 取活血接骨止痛膏膏质 3g加入洗净的玻
璃粉 20g ,加热搅匀 ,用 20ml石油醚回流洗去酯溶性成份 ,残
渣用 80%乙醇加热至沸提取 3次 ,每次 20ml,所剩残渣
1 康强中医药研究所 (北京 )
加 6N盐酸 30ml,加热溶解药物 ,滤出盐酸溶液 ,加热回流水解
12小时 ,滤过 ,滤过液蒸发到 10ml,用 15ml氯仿萃取 ,蒸干后 ,
残渣用 1ml10%异内醇溶解为供试样。 另取甘氨酸制成 0.
5mg /ml的 10%异丙醇溶液 ,为对照品试液。 取供试样和对照
品溶液各 2μl点于同一含羧甲基纤维素钠的硅胶 G板上 ,按薄
层层析法 (中华人民共和国药典 )以正丁醇 -冰醋酸 -水 ( 3: 3: 1:
1)为展开剂展开 ,凉干后 ,喷以 0. 5%的茚三酮丙酮溶液 ,在供
试样色谱中与对照品色谱斑点的相应位置上有相同的紫红色
斑点。
  讨论 三七和野猪皮、地龙是外敷接骨丹的主要成份 ,在
外敷接骨丹是制成细粉加入到膏药基质中的 ,没经过油炸 ,所
以选作定性鉴别的项目。 三七是外敷接骨丹的君药 ,有活血止
痛作用 ,鉴别时在膏质中加入硅藻土是为了提高分散度 ,便于
用石油醚提取膏质中的脂溶性成分。 地龙、野猪皮是平乐活血
止痛膏内外敷接骨丹中的动物药 ,这些药中都含有胶原 ,甘氨
酸是胶原的主要成分 ,占胶原氨基酸总数的 1 /3,因此易于鉴
别。鉴别甘氨酸时在膏质中加入玻璃粉 ,一是为了提高分散度 ,
二是当用热盐酸溶解时玻璃粉不受盐酸的作用。用石油醚提取
脂溶性成分 ,然后用乙醇提取草药中其他成分 ,使残渣中主要
残留胶原 ,然后用 6N盐酸煮沸水解 12小时 ,将胶原水解为游
离氨基酸 ,按混合氨基酸薄层鉴别法鉴别甘氨酸。 甘氨酸是许
多动物药的共同成份 ,鉴别甘氨酸可以作为一般动物药的鉴别
方法。本制剂中地龙、野猪皮等药中都含有甘氨酸 ,只要具有其
中 1味药 ,甘氨酸鉴别即为阳性 ,因此阴性对照必须都是阴性。
( 2001-05-16收稿  2001-07-10修回 )
·10·    (总 650) 中医正骨 2001年第 13卷第 11期
THE EXPERIMENTAL STUDY OF ASPONGOPUS JIEGUDAN ON PROMOTING UNION IN ANIMALS
Chen Xinyu陈新宇 , Yie Jun叶 军 , Liu Deyu刘德玉 , et al
Luoyang Orthopedic-Traumatological Hospital , Henan Prov ince 471002
To explo re the mechanisms o f Aspongopus Jiegudan on promo ting union and to prov ide r eliable direction fo r clinica l applica tion,
fra cture models with 3mm middle tibial defects on righ t sides w ere made in eighteen healthy male Labrado r dog s. And the models
w ere r andomly div ided into 3 g roups: Aspongopus Jiegudan g roup, Qilisan g roup, model-contro l g roup. Then they we re tr ea ted
by Aspongopus Jiegudan, Qilisan, so lv ent respectiv ely 14 day s af ter opera tion, and we re made the following observ ation: ① gen-
eral behavio r; ② r oentg enog ram ana ly sis; ③ observ ation o f the injured limbs made per fusion by prepa red Chinese ink; ④ the
comparison of the union in g ro ss specimen; ⑤ histomo rphological obse rva tion. The results show ed that ther e w as significant dif-
ference betw een the Aspongopus Jiegudan g roup and model- contro l g roup, and Aspongopus Jiegudan could improve the union in
ear ly stage , the ther apeutic effec t of Aspongopus Jiegudan was be tter than tha t of Qilisan. Ther efor e Aspongopus Jiegudan ha s
the benefits o f anti-inflammation, analg esia, improving the micro circula tion, pr omo ting the blood cir culation in injur ed region and
the union in ear ly stag e.
Key w o rds: frac ture /TCM therapy  union /drug action  Aspongopus Jiegudan /tr eatment and application  experim enta l study 
animal  dog
( O rigina l a rticle on page 9 )
THE DISTRIBUTION AND DRUG- FAST CHARACTERISTICS OF FLORA OF MIXED INFECTIONS IN ORTHOPEDICS
AND TRAUMATOLOGY
Liu Shangcai刘尚才 , Zhou Ying jie周英杰 , Song Yuhua宋玉华 , et al
Luoyang Orthopedic-Traumatological Hospital , Henan Prov ince 471002
In o rder to instruct the trea tment o f mix ed infection in o rthopedics and trauma to log y, the clinica l da ta and the results of the drug
sensitiv e tests and bacterial-type identification o f 77 cases with mixed infection we re estimated and analysed and also com pared
with the drug r esistance o f the homochronous monoinfective st rains. The results show ed that open fr actures and chronic os-
teom yelitis tended to have mixed infec tion w ith 42. 86% and 20. 78% o f the cases o f mix ed infection respectiv ely. It wa s quite
common that the oppor tunistic pathogens par ticipated in mixed infection. The mixed infections f rom verdig ris pseudomonas, Es-
che richia coli and o ther pa thogens w ere 50. 64% and 25. 87% , suggesting that the types of infections w ere changing. O f the
combined str ains o f mix ed infection, 10 strains had more than 50% o f a drug-resistance ra te to 16 common antibio tics and 12
strains had a drug-resisting rate 10% to 30% higher than monoinfectiv e strains and sever e m ultiple and asymme tric drug resis-
tances. So th e indiv idualiza tion in th e drug applica tion is v er y im po rtant. The mixed drug sensitiv e tests benefit the selection of
antibio tics fo r mix ed infection, and effectiv ely avoid o r dec rease the combined application o f antibio tics.
Key w o rds: mix ed infec tions  bacteria l-type identifica tion  drug fa st ( o rig inal ar ticle on page 11 )
THE APPLICATION OF XIAOTENGYE SPRAR IN THE EARLY STAGE OF FRACTURE
Ming Xinzhong明新忠 , Ming Xinjie明新杰 , M ing Lig ong明立功 , e t a l
Orthopedic Hospital of Hua country , Henan Prov ince 456485
Objectiv e: T o observ e the sw elling-subduing and ana lg esic effect of Xia otengye. M ethods: Tw o h undred and eigh t cases w ith
clo sed frac tures patients o f the limbs tr ea ted with bone tr action o r int ramedullary nailing , w hich w ere div ided into treatment
g roup and contr ol g roup randomly. In trea tment g roup XS were sprayed in the affected pa r t 4-6 times everyday in o rder to ob-
serv e the relieving deg ree o f sw elling and pain, the placebo s w ere used in the contro l g roup in the same way. Results: The signif-
icant effectiv e tim e and effectiv e tim e of r eliev ing swelling and pain in t reatment g r oup we re sho rter than that in contr ol g roup,
and ther e is significant difference betw een trea tment g roup and contro l g r oup (P < 0. 05). Conclusion: XS can reliev e sw elling
and pain quickly , and have good curativ e effects in swelling and pain o f frac ture.
Key w o rds: swelling / TCM therapy  Xiaotengye spray /tr eatment and applica tion  clinical study
( O rig inal ar ticle on page 13)
Eng lish Edi to r: Liang Guohui and Wang Hailing  (梁国辉 王海玲 译校 )
THE JOURNAL
OF TRADITIONAL
CHINESE OR-
THOPEDICS AND
TRAUMATOLOGY
Monthly
Established 1989
Chief Editor:
  Guo Weihuai
Managing Editor:  Qin Kef eng
Supervised by:  The Sta te Administra tion o f T raditional Chinese Medicine , THE PEO PLE S   REPUBLIC OF CHINA
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Edited by:  Th e Editorial Boa rd of The Journal of T raditional Chinese O rthopedics and
   T rauma to log y
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           Volume 13 Number 11   Publ ication Date: November 20, 2001
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