全 文 :社 区 中 医 药
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94 中国社区医师 2007年第 16期 (综合版) (第 9卷总第 169期)
白接骨丹体外抑菌试验研究
陈同礼
711400陕西省柞水县医院
摘 要 本文应用体外抑菌法对白接骨
丹进行了抑菌范围和敏感度的试验。结
果表明白接骨丹对金黄色葡萄球菌等外
伤性感染有较好的治疗效果。
关键词 白接骨丹 抑菌圈范围 敏感
度 外伤性感染 葡萄球菌等
资料与方法
供试品的来源及供试液制备:①自接
骨丹为多年生草木植物秋季采收 ,经晾晒
后放置 1年的全草干品。 ②取本品 100g,
置 500ml蒸馏水中 , 浸饱 20分钟煎煮 30
分钟 ,倒出药液 , 在药渣中再加入 500ml
蒸馏水 ,煎煮 20分钟。将 2次药液混合 ,
浓缩至 1∶1即为供试液。
供试菌及菌液的制备:选取普通化脓
及创伤感染中常见的细菌。 即金黄色葡
萄球菌 、链球菌 、八叠球菌 、破伤风杆菌 、
绿脓杆菌 、变形杆菌 、大肝杆菌 、枯草杆
菌 、短小芽胞杆菌等。上述菌种均由陕西
省药品检验所生测室提供。
以上各细菌临用前各取新鲜菌苔 -
白金耳于 1ml肉汤培养基中 , 置培养箱
37℃培养 6小时 , 作为原液。此时 , 菌液
浓度相当每毫升 9亿个。取上述 6小时
培养物 1ml于 9ml灭菌肉汤培养基中稀
释 1∶1000备用。
培养基及器皿:普通琼脂培养基及肉
汤培养基均按《中国药典》 2005年版及有
关资料配备。试管 、刻度吸管 、滴管 、培养
皿 、 8mm打孔器等 ,灭菌备用。
抑菌圈范围试验:①试验方法:平板
圆孔法。以各种试验菌密集划线于普通
营养琼脂平板上 , 用 8mm打孔器打孔 ,
每孔加入无菌试液 0.2ml, 置 37℃环境中
培养 18小时。 ②试验结果见表 1。
敏感度试验:试验菌液 , 供试验菌只
选用表 1中呈较强抑菌作用的菌株。 制
备方法同上。供试品稀释及接种见表 2。
试验方法:试管法:将供试品按等倍
稀释为试液 1/4、 1/8、 1/16……等不同浓
度 ,于每管中接种一定量的试验菌液 , 充
分摇匀 , 置 37℃环境中培养 18小时 , 观
察结果见表 3。
平板法:先将供试品按试管法等倍称
释为原液 1/2、1/4、1/8……等不同浓度。
将各稀释度供试品取 1ml分别注入无菌
平板内 ,然后各加已溶化的普通营养琼脂
培养基 9ml, 迅速与供试品混匀 、待冷 、凝
固。对照则用 1ml肉汤代替供试品。 此
时 ,供试液的稀释度分别为 1/10、 1/20、
1/40、1/80、1/160、 1/320等。将已知各菌
以划线法分别接种于平板内 , 置 37℃环
境中培养 18小时(见表 3)。
讨 论
中药白接骨丹通过体外对其有代表
性的革兰阳性球菌 、杆菌和革兰阴性杆菌
等抑菌试验 ,表明该中药对能引起外伤化
脓的金黄色葡萄球菌有高度的抑菌作用
(见表 1);对革兰阳性 、阴性杆菌基本无
抑菌作用。为此 ,本试验为该药用于外伤
性感染提供了选择应用的依据。
由表 1看出 , 该中药的提出液的抗菌
作用随浓度增高而增强。提出液对金黄
色葡萄球菌的抑菌表现为高度敏感 ,而稀
释为 50%供试品对金黄色葡萄球菌的抑
菌表现为中度敏感。这就为该药用于临
床提出了一定的参考依据。
通过试管法 、平板法体外抑菌试验 ,
试管法中该药对金黄色葡萄球菌的敏感
度为 1∶64,而平板法则为 1∶80, 两种试验
方法其结果均在极度范围内 ,结果基本一
致 ,表明本试验具有一定的可靠性。
由于该试品是经过直接加热浓缩而
得 ,受热温度高 、时间长 ,有可能对其抑菌
成分有所影响 , 所以 , 如果采用薄膜蒸发
等手段所得供试液 , 其抑菌效果可能更
强。
参考文献
1 周佛靖.常见中药的抑菌作用及测定方法
表 1 中药白接骨丹对常见菌的抑菌作用
金黄色葡
萄球菌 链球菌 八叠球菌
破伤风
杆菌
普通变形
杆菌
短小芽
孢杆菌
大肠
杆菌
枯草
杆菌
绿脓
杆菌
供试液(原液) +++ ++ ++ + + - + - ++
供试液(50%) ++ + + - + - - - +8
注:抑菌圈直径 <9mm抗 -:抑菌圈直径 >10 ~ 14mm,轻度敏感+:抑菌圈直径 >15 ~ 19mm,中度敏感
++:抑菌直径 20 ~ 29mm高度敏感 +++。
表 2 敏感度试验稀释及接种方法
管号 1 2 3 4 5 6 7
1.5
← 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
肉汤培养基 0.5↑ ←↑ ←↑ ←↑ ←↑ ←↑ ←↑
供试品原液(ml) 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
各管含供试品稀释度 1/4 1/8 1/16 1/32 1/64 1/128 1/256
各管加试验菌(ml) 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05 0.05
※弃去
表 3 试管法 、平板法敏感度试验结果
试管法
1 2 3 4 5 6 7
敏感度 平板法
1 2 3 4 5 6 7
敏感度
金黄色葡萄球菌 - - - - - + + 1:64 - - - - + + + 1:80
链球菌 - - - - + + + 1:3 - - + + + + + 1:40
八叠球菌 - - + + + + + 1:8 - + + + + + + 1:10
破伤风杆菌 - + + + + + + 1:8 - + + + + + + 1:10
绿脓杆菌 - - + + + + + 1:8 - + + + + + + 1:10
变形杆菌 - - - - + + + 1:8 - - + + + + + 1:10
注:“ +”表示有菌生长;“ -”表示无菌生长。