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HPLC法测定祖师麻药材中祖师麻甲素的含量



全 文 :要素。 在学习记忆的整个神经活动中 ,共分为获得、巩固、
再现 3个基本神经过程。学习记忆障碍是多种脑病所共有
的症状 ,发生率较高 ,舞蹈病、脑叶萎缩症、神经衰弱以及
老年期的脑血管硬化、脑供血不足、痴呆等。检测学习记忆
功能的实验方法有多种 ,如跳台法、避暗法、迷路法、穿梭
箱法等 ,这些检测方法对正常动物不易观察到药物的益智
或保护作用 ,因此 ,常依赖记忆操作模型动物对药物的促
智或保护作用进行检测来评价其活动性作用。根据学习记
忆的生理生化基础 ,常选用 M胆碱受体阻滞剂、中枢神经
系统抑制剂、脑蛋白质合成抑制剂、致脑缺氧剂等化学物
质造成各种记忆损伤动物模型 ,如训练前给以东莨菪或樟
柳碱复制学习记忆获得障碍模型 ,或训练后立即电休克或
立即吸入纯 CO或皮下注射亚硝酸钠、氯霉素等诱导脑细
胞缺氧来复制学习记忆巩固障碍模型 ,以及测试前 30分
钟灌胃给子乙醇复制学习、记忆再现缺失模型 ,从不同机
理检测药物作用 [3]。
本文采用经典实验方法 ,观察了人参及其膨化制品对
记忆获得、记忆巩固和记忆再现障碍的影响。结果发现 ,膨
化人参和人参对东莨菪碱、乙醇、氯霉素导致的小鼠记忆
获得、记忆再现、记忆巩固障碍均有明显的改善作用 ,与模
型组比较差异有显著性意义 (P < 0. 05、 0. 01、 0. 001)。 但
二者相比大多数指标差异几无显著性意义 (P> 0. 05)。提
示 ,膨化加工对人参改善小鼠学习记忆能力几无影响。
参考文献
1 史 红 ,任 娟 ,钱伯初 ,等 .健脑合剂改善小鼠学
习记忆作用及其机理初探 .中国临床药理学与治疗学 ,
2002, 7( 4): 296~ 298
2 慧 敏 ,俞晶华 ,龚 婕 ,等 .通脉益智胶囊对小鼠
记忆功能的影响 .中药药理与临床 , 2000, 16( 5): 40~ 42
3  G.沃格尔 .药理学实验指南一新药发现和药理学
评价 .杜冠华等译 .北京:科学出版社 , 2001: 444~ 449
4 王小艳 ,董 军 ,陆大祥 .中药复方对小鼠学习记
忆功能障碍的影响 .暨南大学学报 (医学版 ) , 2004, 25( 2):
140~ 143
(收稿 2006-01-09;修回 2006-03-17)
HPLC法测定祖师麻药材中祖师麻甲素的含量
党秋萍 1 周 军 2 刘建峰 1
1陕西省中医药研究院 ( 710003)  2西北政法学院 ( 710036)
  摘 要 目的:建立高效液相色谱法测定祖师麻药材中祖师麻甲素的含量。 方法:采用
高效液相色谱法测定。ODS色谱柱 ( 250mm× 4. 6mm ) ,流动相为乙腈 - 0. 4%
磷酸溶液 ( 22: 78) ,流速为 1mL· min- 1 ,检测波长为 327nm。结果 线性回归方
程 Y= 3611300x - 2049, r= 0. 9999,线性范围为: 0. 115~ 0. 920μg ,平均回
收率为 98. 61% , RSD为 1. 9% 。结论:采用高效液相色谱法测定祖师麻药材
中祖师麻甲素的含量 ,操作简便 ,结果准确。
  主题词 祖师麻 /化学 祖师麻甲素 /分析 色谱法 高效液相
  祖师麻药材为陕西名贵药材 ,主要含祖师麻甲素等
化合物。 本试验参考有关文献 ,并经试验摸索 ,建立高效
液相色谱法测定本品中祖师麻甲素的含量 ,该方法分离
效果较好 ,操作简便 ,结果准确。
1 仪器与试药 岛津 LC-2010A型高效液相色谱仪
, UV-VIS紫外 -可见检测器 ,祖师麻甲素对照品购自中国
药品生物制品检定所 (供含量测定用 ,批号: 110757-
200206) ;乙腈为色谱纯试剂 ,水为重蒸水 ,其它试剂均为
分析纯。
2 色谱条 件 色谱 柱 Shim-pack V P-ODS 柱
( 250mm× 4. 6mm, 0. 45μm ) ,柱 温 30℃ , 检测 波长
327nm,流动相为乙腈 - 0. 4%磷酸溶液 ( 22: 78) ,流速
1mL· min- 1。
在选定色谱条件下 ,测得供试品中祖师麻甲素峰理
论塔板数均大于 3000,与相邻峰的分离度大于 1. 5。
3 方法与结果
3. 1供试品溶液的制备 取本品细粉 0. 5g ,精密称
定 ,置具塞锥形瓶中 ,精密加入 65%乙醇 25m L,密塞 ,称
定重量 ,超声提取 30min,再称定重量 ,用 65%乙醇补足
减失的重量 ,摇匀 ,滤过 ,取续滤液 ,即得。
3. 2线性范围的考察 精密称取祖师麻甲素对照品
10. 32mg ,置 10m L量瓶中 ,加 65%乙醇至刻度 ,摇匀 ,精
734 陕西中医 2006年第 27卷第 6期
密吸取 1mL ,置 10m L量瓶中 ,加 65%乙醇至刻度 ,摇匀 ,
分别精密吸取 1、 2、 3、 5、 8μL,注入液相色谱仪 ,记录色谱
图 ,测定峰面积 ,并以峰面积对进样量进行回归 ,得回归
方程: Y= 3611300x - 2049, r= 0. 9999。
结果表明: 在 0. 115~ 0. 920μg范围内 ,祖师麻甲素
峰面积值与进样量呈良好的线性关系。
3. 3精密度试验 精密吸取同一供试品溶液 10μL,
重复进样 5次 ,依法测定 ,计算 ,祖师麻甲素峰面积 RSD
= 0. 82%。
3. 4重现性试验 分别精密称取同一批号样品 5份 ,
按供试品溶液的制备方法配制 ,依法测定 ,祖师麻甲素含
量 RSD= 2. 15%。
3. 5稳定性试验 精密称取同一批号样品 0. 5130g ,
按供试品溶液的制备方法配制 ,分别在放置 0, 2, 4, 8和
12小时 ,精密吸取 10μL,注入液相色谱仪 ,依法测定 ,祖
师麻甲素峰面积 RSD= 1. 38% ,试验结果表明 ,供试品溶
液在 12h内稳定性良好。
3. 6 加样回收率试验 取 3. 2项下对照品溶液 ( 0.
1032mg /m L ) ,作为对照品溶液。 另精密称取已知含量
( 0. 115% )的样品共 6份 ,分别置具塞锥形瓶中 ,各加入对
照品溶液 4. 0m L,按供试品溶液制备方法制成加样回收
供试品溶液 ,各精密吸取 10μL ,注入液相色谱仪 ,测定祖
师麻甲素含量 ,结果: 祖师麻甲素回收率分别为: 100. 29,
96. 90, 100. 53, 98. 11, 95. 93和 99. 32% ,平均回收率为
98. 51% , RSD为 1. 9%。
3. 7样品测定  3批药材分别精密称取适量 ,按供试
品溶液的制备方法配制 ,依法测定 ,结果 3批药材祖师麻
甲素含量分别为 0. 153, 0. 192, 0. 141%。
4 讨论:
①根据有关文献及报道 ,祖师麻甲素的 HPLC含量
测定方法有以甲醇 - 水 ,甲醇 - 水 - 冰醋酸为流动
相 [1, 2] ,本试验根据文献报道方法测定本品中祖师麻甲素
的含量 ,但结果均不理想 ,后经反复试验 ,将流动相调整
乙腈 - 0. 4%磷酸溶液 ( 22: 78) ,采用 ODS柱 ,检测波长为
327nm,结果样品中祖师麻甲素峰获得良好的分离 ,峰形
对称 ,重现性较好。 ②样品处理方法简单可行 ,可用于控
制本品中祖师麻甲素的含量。
参考文献
1 国家药典委员会编 中国药典 2000年版 [ s ].一
部 .
2 郭力弓 .中药现代化研究与临床应用 ( 1期 )学苑
出版社
(收稿 2006-01-12;修回 2006-03-15)
川芎配伍应用小议
杨 光 新疆石河子大学药学院 ( 832002)
1 川芎适应症 川芎性温主散 ,据《珍珠囊》
一书记载 ,川芎功用有四:为少阳引一也 ;治诸经
头痛二也 ;助清阳之气三也 ;去湿气在头四也。 又
说川芎“上行头目 ,下行血海” ,似有升有降 ,先升
而后降。 《本经》: 主中风入脑头痛 ,寒痹 ,筋挛缓
急 ,金疮 ,妇人血闭无子。 《别录》:除脑中冷冻 ,面
上游风去来 ,目泪出 ,多涕唾 ,忽忽如醉 ,诸寒冷
气 ,心腹坚痛 ,中恶 ,卒急肿痛 ,胁风痛 ,稳中内寒。
《药性论》:治腰足软弱 ,半身不遂 ,主胞衣不下治
腹内冷痛。 《药性本草》: “胞衣不下”。 《本草纲
目》:止泻痢 ,行乞开郁。 《日华诸家本草》: “迢众
脉 ,破症结宿血……消淤血”。 《药品化义》: “夫川
芎蓉也 ,取至高之义 ,气香上行 ,为血中之气药。以
其气升 ,主治风寒头痛 ,三焦风热 ,头面游风 ,暴赤
眼肿 ,血虚头晕 ,用之开解 ,以其辛散 ,主治胸膈郁
滞 ,胁肋疼痛 ,腰背拘急 ,腿足酸痛 ,寒痹筋挛 ,症
结瘿瘰 ,用之疏散。但也有人持相反意见 ,如有说:
“川芎能开散而不能守下 ,不宜久服 ,久服走散胆
中气 ,《沈括笔谈》有川芎不可久服 ,多令人暴死 ,
但据我们在门诊病例中 ,重用川芎续服散十剂者
均未发现毒副作用。
2 川芎与诸药配伍使用 川芎与辛温解表
药配伍如:防风、白芷、羌活、细辛等 ,可涤除外感
风寒的头痛 ;若与祛风除湿药配伍 ,如防风、桑枝、
羌活、独活等 ,可除风止痛 ,活血通痹 ,祛风湿痹
阻 ,肢节疼痛等 ;若与白芷、赤芍等同用 ,不但能收
活血止痛之效 ,并可因其通利血脉 ,有助其它治疮
疡诸药发挥作用 ;若与当归、芍药、乳香等活血行
气药配伍 ,可用于血郁气滞所致的月经病 ,产后瘀
735陕西中医 2006年第 27卷第 6期