全 文 ：第 卷第 期
年 月
扬州大学学报 农业与生命科学版
比
桑根活性成分反式二苯乙烯抗糖尿病作用研究
金英菩 ,` 玄永浩 , 王明铁 ”
扬州大学 生物科学与技术学院 , 江苏 扬州 , 扬州大学 广映学院 , 江苏 扬州
娜国江原大学 分子生命工学 , 江原道 春川 。。
摘 要 为探讨桑根中提取分离的 , 一`经墓反式二苯乙烯一 , ,一二尹一一毗喃葡萄精昔 仪玉 的抗糖尿病作用 , 测
定以 对 一箱萄枪昔醉和 一淀粉醉的抑制活性 , 观察 对 一巧细胞的影响。结果表明 显示很强的
奋翻萄枪昔醉的抑制作用 , 当以子 浓度为 卜 一`时 , 一有萄精昔醉抑制率为 对 淀粉醉也显示
很强的抑制作用 , 当 浓度为 科 · 一时 , 。淀粉醉抑制率为 写 , 高于 拌 · 一`的阿卡波糖 对
链脉佐菌素引起 一 细胞的损伤具有保护作用 。证明 〔 具有抗精尿病作用
关位询 桑根 反式二苯乙佛 一花萄精昔醉 淀粉醉 一 细胞 箱尿病
中圈分类号 文橄标识码 文康幼号 一 一 一
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随着对 型糖尿病研究的深人 ,现已明确 口细胞的丢失是 型糖尿病发生的决定因素 。近年来 ,许
多研究表明 ,夕细胞内增高的脂质可能从多条途径诱导细胞凋亡 ,是 型糖尿病 夕细胞功能障碍和衰竭
的重要原因 一〕 在糖尿病降糖药物家族里 一葡萄糖昔酶抑制剂和 一淀粉醉抑制剂能减慢食物的消化 ,
抑制餐后血糖水平的升高 ,却无明显的胃肠道反应卜, 〕 , 一`经基反式二苯乙烯一 , 一`二一户 一毗喃葡萄
糖昔 是从桑根中提取的一种反式二苯乙烯 。体外试验证明 , 具有明显的抗氧化活性和
抑制过氧化脂质的作用 。动物试验证明 , 具有肝保护 、抗糖尿病等作用 「`一 。在此基础上 ,本研究探
讨 对 一葡萄糖昔酶和 淀粉醉的抑制作用 ,并以体外培养的 月细胞 一 细胞株为对象 ,观
察 的抗糖尿病作用 ,为糖尿病的预防和治疗提供理论基础和科学依据 。
收稿日期 一 一
若 项目 教育部留学回国人员科研启动墓金 。。一。豹
作 , 蔺介 金英普 一 , 女 , 吉林浑春人 , 扬州大学翻教授 、博士 , 主要从事植物生理活性物质研究
, 联系作者 , 一 , · ·
第 期 金英普等 桑根活性成分反式二苯乙烯抗糖尿病作用研究
材料与方法
材料
样品按文献 「」的方法提取 、分离 、鉴定 。
啥热脂肪芽抱杆菌 瓜 有萄箱普酶抑制作用的测定
对 企葡萄糖昔酶抑制活性的测定采用文献 【〕的方法 ,以阿卡波糖为对照药品 。
猪 胰淀粉酶抑制作用的测定
将 拌 一胰淀粉酶溶于 含 · 一`抓化钠 、 · 一`抓化钙 〔含 · 一`
一 的 、 · 一` 一 , 一` 一 一 缓冲液中作
为保存液 , 。〕。反应体系由 拌 缓冲液 、 拼 样品液 、 拜 酶液 一日 ·
一` 和 拌 的 · 一可溶性淀粉溶液组成 。里 ℃水浴锅中反应 ,加 · 一
, 一二硝基水杨酸 溶液 停止反应 ,煮沸 , 冷却 ,测定 处吸光值 。以阿卡波
糖作为对照药品 。
细胞株及其细胞培养
一 细胞引自韩国细胞株银行 。该细胞株培养于含 新生小牛血清的 培养液
中 ,置 ℃、 培养箱中 ,每 传代 次 。所有试验用细胞均处于对数生长期 。
测定指标及方法
细胞存活率 采取台盼蓝排斥法检测 。以 个细胞接种于 培养瓶 ,细胞贴壁
后换液 ,加人 · 一`的链脉佐菌素培养 后 ,加人 使其终浓度分别 为 、 、
陀 · 一` 。设不进行药物干预的细胞为对照组 ,加人甲苯磺丁脉 拜 · 一`进行药物干预的细
胞为药物对照组 。各组少许细胞混悬液 台盼蓝混匀 ,按白细胞计数法在光镜下计数蓝染细
胞 。
细胞凋亡 采用流式细胞仪以 染色法分析细胞凋亡情况 。各组细胞用胰蛋白酶消化后 ,调整
浓度为 护个 一`的细胞悬液 以 ℃、 乙醇固定 后 ,用 溶液进行离心沉淀去除固定
液 ,加 · 一` 拌 , · 一`的碘化丙陡 染色液 拌 和 溶液 科 ,置于
℃冰箱中 后 ,在流式细胞仪上进行细胞周期分析 。
统计分析
应用 软件进行 检验 。
结果与分析
对 有萄精昔醉的抑制作用
对嗜热脂肪芽抱杆菌 一葡萄糖昔酶抑制作用的测定结果见图 。由图 可知 , 对 一葡
萄糖昔酶有明显的抑制作用 ,随着浓度的增大 , 对 一葡萄糖昔酶的抑制作用更加明显 ,浓度达
拼 · 一`时 ,抑制率超过 。这与 拌 的对照药品阿卡波糖的抑制率相近 。
对 胰淀粉酶的抑制作用
对猪 企胰淀粉酶抑制作用的测定结果见图 。由图 可知 , 兀 对 淀粉酶有明显抑制作
用 ,随着浓度的增大 , 对 企淀粉酶的抑制作用更加明显 。
对 一 细胞增殖活性的影晌
为了观察 〕 对用链脉佐菌素 预处理的 一 细胞的保护作用 ,先用 · 一
处理 后 ,分别用终浓度 、 、 拌 · 一`的 心 作用 、 、 。结果 图 表明 ,处
理 时 ,细胞随着浓度的增加而增加 。而甲苯磺丁脉 拌 · 一`组处理 时反而对细胞有毒性
作用 ,随着作用时间的延长 ,细胞逐渐恢复活力 。
扬州大学学报 农业与生命科学版 第 卷
对 一 细胞凋亡的作用
采用 染法 、流式细胞仪检测了 】〕 对 一巧 细胞的保护情况 。结果 图 表明 ,正常对照
组 一 细胞凋亡率为 处理组凋亡率为 写 拌 · 一的 升 作用
后 ,其凋亡率为 ,处理组凋亡率明显降低 。
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圈 】 对 一佑蔺箱普醉抑侧作用
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阿 杆波糖用量 用量 卜
圈 对 小淀粉阵抑翻作用
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时间 组别
圈 幻成铭 对 一 细胞增殖活性的影晌
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圈 铭 对 一 细胞胭亡中的作用
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讨论
一葡萄糖昔酶抑制剂是一组通过延缓糖的消化和吸收而降低餐后高血糖的口服降糖药 ,其作用特
点是在糖消化的最后一步抑制双糖降解为单糖 。 一淀粉酶的抑制剂也能减慢食物淀粉在肠道中的消
化 ,抑制吸后血糖水平的升高 。阿卡波糖主要抑制胰脏 一淀粉酶及肠内 葡萄糖昔酶 ,从而抑制碳水
化合物在肠道内分解及吸收 ,有效地降低饭后血糖及胰岛素浓度 。本研究发现 , 对 葡萄糖昔酶
和 一淀粉醉具抑制作用 ,并且随着浓度的增高 ,这种抑制作用更明显 ,呈一定的剂里依赖关系 图 、 。
对 一淀粉酶的抑制作用比 一葡萄糖昔酶更明显 。
随着对 型糖尿病研究的深人 ,现已明确夕细胞的丢失是 型糖尿病发生的决定因素 因此保护 夕
细胞 ,防止其凋亡是防治 型糖尿病的根本 。 对动物的胰岛夕细胞有选择性破坏作用 ,而使许多
动物发生搪尿病 。观察 洲 对用 预处理的 一 细胞保护作用的结果 图 表明 , 处理
时 , 细胞随着浓度的增加而增加 而甲苯磺丁脉 拌 · 一`处理 时反而对细胞有毒性作用 , 随
第 期 金英善等 桑根活性成分反式二苯乙烯抗糖尿病作用研究
着作用时间的延长 ,细胞才逐渐恢复活力 。甲苯磺丁脉虽然是第一个选择性地作用于胰岛的夕细胞 ,促
进腆岛素的分泌 ,增强外源性胰岛素的降糖作用 ,但是本研究发现甲苯磺丁脉对 一 细胞具毒性
作用 。采用 染法 、流式细胞仪检测用 处理的 一 细胞经 作用 后发现 , 心
一定程度上可以恢复被 损伤的月细胞 。
是从桑根中提取出来的一种反式二苯乙烯闭 。体外试验证明 , 对 自由基和超氧
化阴离子显示出明显的清除活性 ,并且具有抑制过氧化脂质的作用闭 。桑树是药食兼用植物 , 含有生物
碱 、黄酮 、多糖蛋白等化学成分 ,具有抗炎 〕`、抗动脉粥样硬化 〕等生物活性 。本研究结果显示 ,从桑根
中提取分离的 对 一葡萄糖昔酶和 一淀粉酶有明显的抑制作用 ,并且对 一 细胞具有保护
作用 。
参考文献
「 陈璐璐 脂代谢紊乱与夕细胞调亡 〕 国外医学 内分泌学分册 , , 一
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责任编辑 刘明寿