全 文 ：浙江大学学报(农业与生命科学版)　36(2):192～ 198 , 2010
Journal of Zhejiang University(Agric.& Life Sci.)
文章编号:1008-9209(2010)02-0192-07 DOI:10.3785/j.issn.1008-9209.2010.02.012
　　收稿日期:2009-01-16
基金项目:公益性行业(农业)科研专项资助项目(200903052).
　　作者简介:张秀云(1974—),女 , 安徽青阳人 , 博士 , 讲师 , 主要从事天然产物农药的教学和研究工作.Tel:029-87092122;
E-mail:zxy9027@163.com.
通信作者:冯俊涛 ,男 , 副教授 , 硕士生导师 , 主要从事农药学与植物保护学方面的教学与研究工作.E-mail:jtf eng
@126.com.
巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究
张秀云 , 李治伟 , 冯俊涛 , 陆德玲 , 张 兴
(西北农林科技大学 无公害农药研究服务中心/陕西省生物农药工程技术中心 ,陕西杨凌 712100)
摘　要:研究巴东醉鱼草(B ud dleja albi f lora H emsl.)95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物对 3 种
鳞翅目害虫和朱砂叶螨(Tetranychus cinnabarinus B.)的生物活性.结果表明:巴东醉鱼草 95%乙醇提
取物的石油醚和乙酸乙酯萃取物对试虫有较高的生物活性 ,其中乙酸乙酯萃取物在 24 h 对 3 龄小菜蛾
(Plute lla x y loste lla L.)幼虫的拒食率达到 94.22%, 48 h 时对 4 龄菜青虫(Pieris rapae L.)幼虫的拒
食率达到 83.94%,对 3 龄粘虫(Mythimna separata W.)幼虫的 24 h 拒食中浓度(AFC50)为 2.4185
mg m L-1 ,对朱砂叶螨(T.cinnabarinus)4 h 致死中浓度(LC50)为 0.2108 mg mL-1;石油醚萃取物 72
h 对 3 龄小菜蛾(P.xy lostella)幼虫的拒食率为 64.11%, 48 h 对 4 龄菜青虫(P.rapae)幼虫的拒食率
为 75.18%,对 3 龄粘虫(M.separata)幼虫 48 h 的 AFC50值最高(1.1392 mg mL -1), 对朱砂叶螨(T.
cinnabarinus)4 h LC50为 0.3606 mg mL-1;巴东醉鱼草 95%乙醇提取物的不同极性溶剂萃取物还抑
制试虫的生长发育 , 导致试虫化蛹和羽化不正常 , 其中石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物的作用尤为
突出.
关　键　词:巴东醉鱼草;粘虫;小菜蛾;菜青虫;朱砂叶螨;杀虫活性
中图分类号:S 482.3+9　　　文献标志码:A
ZHANG Xiu-yun , LI ZHi-w ei , FENG Jun-tao , LU De-ling , ZHANG Xing(Research and Deve lopment
Center o f B iorationa l Pesticide/ Shaanx i Research Center o f Biopesticide Technolog y and
Engineering , Northwest A &F University , Yangling , Shaan xi 712100 , China)
Insecticidal activities of extracts from Buddlej a albif lora Hemsl.against four kinds of pests.Journal of
Zhejiang Univer sity(Agric.& Life Sci.), 2010 , 36(2):192-198
Abstract:The insecticidal activities o f the ext raction fractions , w hich we re obtained by soaking the
pow der of Buddleja albi f lora H.with 95% ethano l and then treated with petro leum ether , ethy l aceta te
and butano l , against three kinds o f pe sts o f Lepidopter a and Tetranychus cinnabarinus B.w ere te sted.
The re sults show ed that the petro leum and e thy l acetate e xtr acts po ssessed considerable activities to all
testing pests. The antifeedant rates of ethy l ace ta te ex tracts ag ainst 3 rd insta r larv ae of P lutella
x y lostella L. during 24 h and 4 th insta r larv ae o f Pieris rapae L. during 48 h w ere 94.22% and
83.94%, re spectively.The median antifeedant concentra tion (AFC50)w as 2.4185 mg mL-1 against
Mythimna separata W.during 24 h and the median-lethal concentration (LC50)was 0.2108 mg m L-1
张秀云 ,等:巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究
against T. cinnabarinus.The antifeedant rates o f pet roleum ethe r ex tracts ag ainst 3 rd instar larv ae o f P.
xy loste lla during 72 h and 4 th instar larvae of P.rapae during 48 h we re 64.11% and 75.18%,
r espectively.The AFC50 w as 1.1392 mg mL-1 against M.separata during 48 h and the LC50 was
0.3606 mg mL -1 against T.cinnabarinus during 4 h. The bioassay results also show ed the ex traction
fr actions of B.albi f lora , e specially the petro leum e ther ex tracts and e thy l ace ta te one , cound inhibit the
g rowth and development of insects , leading to abnormal pupation and eclosion finally.
Key words:B ud dle ja albi f lora Hemsl.;Mythimna separata W.;Plute lla xy lostella L.;Pieris rapae
L.;Tetranychus cinnabarinus B.;insecticidal activities
　　巴 东 醉 鱼 草 (Budd leja albi f lora
Hemsl.),又名酒药花 ,为马钱科(Loganiaceae)
醉鱼草属 (Budd leja L.)直立灌木;分布于河
南 、陕西 、甘肃 、湖北 、四川等地 ,在秦岭地区尤
其多见 ,资源丰富.该植物的花蕾部分能止咳化
痰 ,具有治眼痛的功效.西北农林科技大学无公
害农药研究服务中心经过初筛发现巴东醉鱼草
对粘虫具有良好的拒食及毒杀作用[ 1] .笔者初
步试验发现 ,巴东醉鱼草不同提取方法的提取
物对粘虫生物活性存在明显差异.为探讨巴东
醉鱼草 95%乙醇提取物的杀虫作用方式 ,本研
究系统测试了巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物
的生物活性 ,旨在为巴东醉鱼草杀虫作用的进
一步研究开发奠定基础.
1　材料与方法
1.1　材　料
　　供试浸膏:用 95%乙醇分别对粉碎后的巴
东醉鱼草样品进行渗滤提取 ,提取液浓缩回收
得到乙醇浸膏 ,然后将浸膏用水捏溶分散 ,依次
用石油醚 、乙酸乙酯 、正丁醇不同极性的溶剂萃
取 ,得到相应的萃取物.将萃取的各馏分减压浓
缩得浸膏 ,并用丙酮溶解定容至合适浓度 ,置于
4 ℃冰箱中备用.
　　供试试虫:粘虫(Mythimna separata W.)
3龄幼虫 、小菜蛾(P lutel la x y lostel la L.)3 龄
幼虫均为西北农林科技大学无公害农药研究服
务中心养虫室提供.菜青虫(Pieris rapae L.):
自近期未施过药的甘蓝地采回菜青虫幼虫 ,经
室内饲养 2 ～ 3 d后 ,挑选生理发育状态一致的
健壮的 4 龄前 期 幼 虫 供试.朱 砂 叶 螨
(Tetranychus cinnabarinus B.)采自红薯田 ,
选择体色 、大小均匀一致的雌成螨作为试验
虫源.
1.2　生物活性测定
　　对粘虫 、菜青虫的生物活性测定采用小叶
碟添加法[ 2] :在直径9.0 cm 的培养皿底部铺一
层滤纸 ,并加水保湿.每培养皿内放 10头试虫 ,
试虫饥饿约 4 h.每处理设 3个重复.将待测样
品以丙酮(分析纯)稀释成一定浓度溶液 ,从近
期未施过药的玉米田(或甘蓝田)中采回新鲜玉
米叶片(或新鲜的甘蓝叶),以打孔器打成直径
1 cm 的叶碟 ,在配好的药液内浸 2 ～ 3 s ,自然
晾干(另设丙酮对照),于皿内加叶碟 1 片 ,在
(25±1)℃、70%～ 80%相对湿度下恒温饲
养 ,待试虫取食完再加叶片 ,夜晚视试虫取食情
况可以多加几片 ,记录试虫取食的叶碟数量 ,并
于 24 、48和 72 h用坐标纸统计取食总量 ,计算
拒食率 ,同时采用 Excel 2003 统计函数求出拒
食毒力曲线及拒食中浓度(AFC50).72 h 后开
始以正常叶片饲养 ,直至化蛹 、羽化 ,并检查试
虫最终死亡情况(死亡标准:不能取食 ,触之不
动),计算死亡率和校正死亡率.
　　拒食率=
　　　对照组取食面积-处理组取食面积对照组取食面积 ×100%;
　　死亡率= 死亡数供试总虫数×100%;
　　校正死亡率=
　　　处理组死亡率/%-对照组死亡率/%
1-对照组死亡率/% ×100%.
　　对小菜蛾生物活性测定同样采用叶碟
法[ 3] :使用直径 5 cm 的养虫盒 ,每养虫盒内放
10头试虫 ,试虫饥饿约 4 h ,每处理设 3 个重
复.将待测样品以丙酮(分析纯)稀释成一定浓
193　第 2期
浙江大学学报(农业与生命科学版)
度溶液.将近期内未施过药的新鲜甘蓝叶片以
打孔器打制成直径 0.5 cm 的叶碟 ,在配好的药
液内浸 2 ～ 3 s ,自然晾干(另设丙酮对照).于皿
内加叶碟 3片 ,在(25±1)℃、70%～ 80%相对
湿度下恒温饲养 ,并于 24 和 48 h 检查试虫取
食叶片量和中毒死亡情况(死亡标准:试虫不能
取食 ,触之不动),调查结果采用叶片分级法[ 5] ,
根据取食面积统计拒食率 ,并统计试虫死亡情
况 ,计算死亡率(公式同粘虫和菜青虫).
　　叶片分级标准如下:
　　0级:叶片上无取食痕迹;Ⅰ级:叶片上有零
星取食痕迹;Ⅱ级:叶片上有明显取食缺刻;Ⅲ级:
叶片被取食面积约占 1/3;Ⅳ级:叶片被取食面
积约占叶 1/2;Ⅴ级:仅留下少量残渣.
　　取食指数=
　　　 ∑(为害级别数×各级叶片数)总叶片数×最高为害级别数×参试总虫数×100%;
　　拒食率=
　　　对照取食指数/%-处理取食指数/%对照取食指数/% ×100%.
　　对朱砂叶螨的生物活性测定采用国际粮农
组织(FAO)推荐的浸玻片法[ 4] .用毛笔挑取健
康的雌成螨 ,将其背部粘在贴有双面胶的载玻
片上 ,在双目解剖镜下检查 ,剔除腹面朝下及不
活跃的个体.每种药剂用丙酮配成 5个系列浓
度 ,另设丙酮为对照 ,每个处理 3个重复.每重
复贴 30 ～ 40头.将粘有供试害螨的玻片一端置
于已配好的药液中浸 3 s后取出用吸水纸吸去
多余的药液.将处理后贴有害螨的玻片保湿在
室温(25±1)℃下 ,于 4 h 后用双目解剖显微
镜检查每种药剂各处理的死虫数和活虫数 ,计
算死亡率和校正死亡率(公式同粘虫和菜青
虫),并采用 Excel 2003 统计函数求出毒力方
程及致死中浓度(LC50).
2　结果与分析
2.1　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对小菜
蛾幼虫的生物活性
　　从表 1可以看出:乙酸乙酯萃取物的拒食
率较高 ,24 、48和 72 h 对 3龄小菜蛾幼虫的拒
食率分别达到 94.22%、94.00%和 93.18%;石
油醚萃取物对 3 龄小菜蛾幼虫的拒食作用其
次 ,其中 24 h达到 48.55%;正丁醇萃取物和水
相及 95%乙醇总浸膏对 3 龄小菜蛾幼虫的拒
食作用较弱.此外 ,用乙酸乙酯萃取物处理过的
3龄小菜蛾幼虫在 72 h 内的死亡率达到
39.86%,其他处理的死亡率都较低.
2.2　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对菜青
虫幼虫的拒食活性
　　由表 1还可以看出:乙酸乙酯萃取物对 4
龄菜青虫幼虫的拒食率较高 , 48 h 时拒食率达
到 83.94%;石油醚萃取物和 95%乙醇总浸膏
对 4 龄菜青虫幼虫的拒食作用其次 ,其中石油
醚萃取物 48 h拒食率达到 75.18%, 95%乙醇
总浸膏在 24 h对 4 龄菜青虫幼虫的拒食率达
到 74.36%;正丁醇萃取物和水相对 4龄菜青
虫幼虫的拒食作用较弱.
表 1　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对 3 龄小菜蛾幼虫和 4 龄菜青虫幼虫的拒食活性
T ab le 1　Ant ifeedant activit ies of ext ract ions wi th dif f erent p olari ties from B.a lbi f lora agains t the 3rd in star larvae of
P. xylostel la and the 4th ins tar larvae of P.rapae %
供试样品 24 h拒食率小菜蛾 菜青虫
48 h拒食率
小菜蛾 菜青虫
72 h拒食率
小菜蛾 菜青虫
石油醚萃取物 48.55 b 69.23 c 24.81 b 75.18 b 64.11 b 45.45 b
乙酸乙酯萃取物 94.22 a 82.91 a 94.00 a 83.94 a 93.18 a 68.18 a
正丁醇萃取物 21.49 d 58.12 d 0.00 d 48.18 d 64.10 b 1.52 d
水萃取物 20.04 d 40.17 e 18.80 c 45.99 e 50.43 c 0.00 e
95%乙醇总浸膏 39.86 c 74.36 b 24.81 b 69.34 c 21.36 d 25.00 c
　　注:表中供试样品的处理浓度相当于干样 5 mg mL -1;同列数据后的不同小写字母表示在 P<0.05 水平差异显著(Ducans
多重极差检验).
194 第 3 6卷　
张秀云 ,等:巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究
2.3　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对粘虫
幼虫的拒食活性
　　由于巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对 3
龄粘虫的拒食活性较好 ,故对其进行了较为系
统的研究 ,将巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物
分别配成相当于干样浓度为0.1 、1 、5 、10和15
mg mL -1 ,对 3龄粘虫的生物测定结果见表 2.
石油醚萃取物和乙酸乙酯萃取物对 3龄粘虫幼
虫的拒食活性较高 ,乙酸乙酯萃取物在 24 h对
粘虫的拒食活性最高 , AFC50为 2.4185 mg
mL-1;48 h 时石油醚萃取物的拒食活性最高 ,
AFC50为 1.1392 mg mL-1 ;95%乙醇总浸膏对
3龄粘虫的拒食活性次之 ,而正丁醇萃取物和
水相萃取物较弱.
表 2　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对 3 龄粘虫幼虫的拒食活性
Table 2　Ant ifeedan t activi ty of ext raction s w ith dif feren t polariti es f rom B. albi f lora
again st the 3 rd instar larvae of M. separata
供试样品 处理时间/h 毒力曲线 AFC50/(mg.mL -1) 95%置信区间 相关系数
24 y=3.3329+2.9462 x 3.6799 1.7105～ 7.9170 0.9327
石油醚萃取物 48 y=4.9326+1.1903 x 1.1392 0.5409～ 2.3993 0.9600
72 y=4.2094+1.3687 x 3.7811 3.1683～ 4.5124 0.9931
24 y=4.3301+1.7466 x 2.4185 0.7535～ 7.7630 0.9232
乙酸乙酯萃取物 48 y=4.4864+0.6852 x 5.6184 5.1293～ 6.1542 0.9990
72 y=3.2912+3.1689 x 3.4613 2.6708～ 4.4858 0.9984
24 y=0.0445+4.0622 x 16.5924 11.7112～ 23.5080 0.9942
正丁醇萃取物 48 y=1.9907+1.9924 x 35.4197 22.2092～ 56.4882 0.9945
72 y=1.9897+2.0303 x 30.3864 8.2171～ 112.3676 0.9811
24 y=1.8707+1.8973 x 44.6062 16.5003～ 120.5868 0.9906
水萃取物 48 y=2.1575+2.1642 x 20.5787 19.1676～ 22.0938 0.9999
72 y=1.7060+2.4453 x 22.2370 4.8759～ 101.4141 0.9073
24 y=2.5564+2.5183 x 9.3396 5.9543～ 14.6496 0.9962
95%乙醇总浸膏 48 y=4.5392+0.4931 x 8.6000 2.8761～ 25.7153 0.9180
72 y=4.3740+0.8893 x 5.0577 4.9211～ 5.1982 0.9999
2.4　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对朱砂
叶螨的毒杀活性测定
　　将巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物分别配
成相当于干样浓度为0.01 、0.1 、0.5 、1和5
mg mL-1 ,对朱砂叶螨的毒杀活性测定结果见
表 3.乙酸乙酯萃取物和石油醚萃取物对朱砂
叶螨的毒杀效果较好 , LC50值分别为 0.2108
mg mL-1和 0.3606 mg mL-1 ,正丁醇萃取物
和 95%乙醇总浸膏对朱砂叶螨有一定的毒杀
作用 ,水萃取物最弱.
表 3　巴东醉鱼草不同极性萃取物对朱砂叶螨的毒杀活性测定(4 h)
T able 3　Insecticidal act ivit ies of ext ract ions wi th dif f erent polarit ies f rom B. albi f lora
agains t T.cinnabar in us durin g 4 h
供试样品 毒力方程 LC 50/(mg mL -1) 95%置信区间 相关系数
石油醚萃取物 y=5.7903+1.7838 x 0.3606 0.2265～ 0.5740 0.9711
乙酸乙酯萃取物 y=6.5687+2.3205 x 0.2108 0.1800～ 0.2470 0.9974
正丁醇萃取物 y=5.1619+1.1289 x 0.7188 0.3776～ 1.3861 0.9495
水萃取物 y=4.8876+0.9639 x 1.3079 0.6040～ 2.8322 0.9398
95%乙醇总浸膏 y=5.2443+1.1560 x 0.6147 0.2717～ 1.3907 0.9516
195　第 2期
浙江大学学报(农业与生命科学版)
2.5　巴东醉鱼草不同极性萃取物对试虫生长
发育的影响
　　对上述试验中没有死亡的粘虫和菜青虫在
72 h统计实验结果后 ,以正常叶片饲养 ,直至
化蛹 ,羽化.实验结果表明 ,萃取物对粘虫和菜
青虫生长发育的抑制作用明显增强 ,个体显著
缩小 ,处理过的粘虫和菜青虫最终出现畸形蛹 ,
正常蛹则不能正常羽化(表 4 ,图 1 ～ 图 4).
表 4　巴东醉鱼草不同极性溶剂萃取物对 3 龄粘虫幼虫和 4 龄菜青虫幼虫生长发育的影响
Table 4　Inf luence of ex tract s f rom B.a lbi f lora on grow th and developmen t of the 3 rd instar larvae of
M.separa ta and the 4th instar larvae of P. ra pae %
供试样品 幼虫期死亡比例粘虫 菜青虫
畸型蛹比例
粘虫 菜青虫
畸型成虫比例
粘虫 菜青虫
正常羽化比例
粘虫 菜青虫
石油醚萃取物 20.00 60.00 20.00 10.00 30.00 3.33 30.00 26.67
乙酸乙酯萃取物 26.67 66.67 30.00 20.00 30.00 10.00 13.33 3.33
正丁醇萃取物 10.00 53.33 0.00 0.00 10.00 0.00 80.00 46.67
水萃取物 6.67 50.00 0.00 0.00 0.00 0.00 93.33 50.00
95%乙醇总浸膏 13.33 60.00 0.00 0.00 0.00 0.00 86.67 40.00
CK 3.33 6.67 0.00 0.00 0.00 0.00 96.67 93.33
　　注:所有处理的供试虫数为 30头;浓度同表 1;CK 为丙酮处理.
196 第 3 6卷　
张秀云 ,等:巴东醉鱼草提取物对几种害虫的生物活性研究
3　结论与讨论
　　巴东醉鱼草的提取物对试虫具多种作用方
式.试验结果表明 ,巴东醉鱼草 95%乙醇提取
物的石油醚 、乙酸乙酯和正丁醇萃取物对粘虫 、
小菜蛾 、菜青虫和朱砂叶螨均具有生物活性且
作用方式不同 ,其中以石油醚萃取物和乙酸乙
酯萃取物的活性最为显著.石油醚萃取物和乙
酸乙酯萃取物对 3龄小菜蛾幼虫 、4 龄菜青虫
幼虫 、3龄粘虫幼虫具有良好的拒食活性;除此
之外 ,在低剂量下 ,乙酸乙酯萃取物对供试试虫
具有较强的毒杀活性;石油醚萃取物和乙酸乙
酯萃取物同时对粘虫和菜青虫具有显著的生长
发育抑制作用 ,与本课题组前期研究的巴东醉
鱼草不同提取方法提取物对粘虫的生物活性测
定结果相一致 ,包括在蜕皮时 ,中毒幼虫不能蜕
去头壳 、胸部或胸腹表皮 ,或是最终出现畸形蛹
(不能蜕去整个预蛹表皮或只突破预蛹胸背部
表皮等),或者是蛹羽化不正常(短翅 、卷翅等),
最终试虫由于生长发育受抑制而死亡.
　　巴东醉鱼草的多种作用方式值得进一步研
究.其中 ,拒食作用机制可能是昆虫的嗅觉感受
器受到干扰 ,胃毒作用机制可能与消化系统受
到破坏有关[ 5] ,而对试虫生长发育抑制作用的
机制尚不明确.已有研究报道 ,川楝素可能通过
干扰菜青虫的内激素平衡 , 从而出现畸形虫
体[ 6] ,并且有人认为前胸腺受影响后 ,血淋巴中
蜕皮激素的滴度降低将会延长幼虫期[ 7-8] .另
外 ,萃取物中的活性物质有可能抑制酪氨酸酶
等重要酶的合成 ,使酪氨酸不能发生一系列的
变化 ,不能形成蜕皮后新表皮所需的硬化物质 ,
影响了试虫的正常蜕皮和生长发育 ,使试虫发
育为超龄幼虫 ,而多数的超龄幼虫不能形成蛹
197　第 2期
浙江大学学报(农业与生命科学版)
而死亡;并且据观察 ,处理的蛹质量与对照相比
有降低的趋势 ,而一般蛹质量与羽化率成显著
正相关[ 9-10] .由此推断巴东醉鱼草提取物对试
虫的生长发育抑制作用机制可能与内分泌系统
有关 ,需进一步对试虫的前胸腺 、脑 、咽侧体进
行显微观察和电镜观察以及对体内激素滴度变
化进行测定研究.另外 ,巴东醉鱼草不同极性萃
取物对多种供试害虫均具明显生物活性 ,对其
他害虫是否亦具生物活性及其杀虫活性成分均
有待进一步研究.
References:
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