全 文 ：表 4　禹白附急性毒性试验
组　别 给药途径 剂量(g/kg) n 小鼠死亡只数
空白组 ip 30 10 0
水溶性部位Ⅰ ip 30 10 9
水溶性部位Ⅰ ip 25 10 0
水溶性部位Ⅰ ip 15 10 0
水溶性部位Ⅰ po 30 10 0
水溶性部位Ⅰ ib 30 10 0
水溶性部位Ⅱ ip 30 30 0
醇溶性部位 ip 30 10 0
脂溶性部位 ip 60 10 0
3　讨　论
有资料报道 ,禹白附混悬液 、水煎液有显著的镇
静作用 [ 4] 。本研究证明 ,禹白附水溶性部位有明显
的镇痛及协同戊巴比妥钠致小鼠睡眠的作用。而醇
溶性部位和脂溶性部位未见有明显的药理作用 。故
可以初步确定禹白附有效部位为水溶性部位。
通过不同给药途径小鼠镇痛药理作用比较 ,灌
胃给药后 ,镇痛作用与对照组相比 ,未见有显著性差
异 ,甚至小鼠扭体次数超过对照组 ,可能灌胃给药后
刺激胃粘膜而引起小鼠扭体反应发生 。
急性毒性实验表明 ,禹白附毒性成分存在于水
溶性部位 ,且以小鼠腹腔注射毒性最大 ,而皮下注射
次之。皮下注射后 ,仅发现小鼠前肢有明显肿胀现
象 ,均未见小鼠死亡。醇溶性部位组发现有小鼠前
足明显肿胀现象 ,显示该部位有一定毒性作用 。水
溶性部位Ⅰ灌胃给药 2d,均未发现小鼠有中毒症状
发生 ,而脂溶性部位腹腔注射剂量达到 60 g/kg(相
当于成人用量的 500倍),均未见小鼠死亡。此与
文献报道采用禹白附混悬液给小鼠灌胃 ,一次用量
达到成人用量的 100倍以上时 ,未见有明显的毒性
反应 ,表明经口给药毒性不明显的结果相一致[ 5] 。
有文献报道[ 6] ,禹白附 95%乙醇提取液大剂量
有抗肿瘤作用 ,本文主要探讨水溶性成份 ,故未对其
抗肿瘤药理作用作进一步研究。
参考文献:
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炎及毒性比较研究 [ J] .中国中药杂志 , 1991, 16(10):
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[ 6]孙淑芬 , 曾艳 , 赵维诚.禹白附抑制恶性肿瘤的实验研
究 [ J] .中医研究 , 1998, 11(6):8.
＊ 项 目 来 源:国 家 十 一 五 科 技 支 撑 计 划 (编 号
2006BAI09B06-10-3);河南省重大科技攻关课题 (编号
0422030700)
收稿日期:2007-08-28;修回日期:2007-08-30
(编辑　陶　珠)
文章编号:1001-6910(2007)10-0016-03 ·实验研究·
泡桐花精油抗哮喘气道炎症的实验研究
陈保红 1 ,李寅超2
(1.漯河医学高等专科学校第二附属医院 ,河南 漯河 462300;2.郑州大学药学院 ,河南 郑州 450001)
摘要　目的:研究泡桐花精油抗实验性 C57BL/6小鼠哮喘
气道炎症的作用。 方法:以卵蛋白致敏和引喘 C57BL/6小
鼠为模型 , 观察泡桐花精油大 、小剂量对小鼠哮喘发作程度 、
小鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数和嗜酸性粒细胞
(EOS)%、支气管黏膜 EOS计数以及哮喘小鼠肺组织病理
学改变的影响。结果:泡桐花精油能明显减轻 C57BL/6小
鼠哮喘发作程度 , 使 BALF中白细胞总数 、EOS总数与
EOS%明显下降 , 显著降低细支气管黏膜 EOS的浸润和黏膜
EOS计数。 组织病理学观察 , 泡桐花精油可明显减少
C57BL/6哮喘小鼠肺间质及肺泡腔内 EOS等炎细胞浸润。
结论:泡桐花精油具有抑制哮喘鼠气道过敏性炎症反应的作
用。
关键词:哮喘 /药物作用　泡桐花精油 /药效学　疾病模型 ,
动物　大鼠
中图分类号:R285.5　　文献标志码:B
　　支气管哮喘是由嗜酸性粒细胞(EOS)活化和在
肺内募集所导致的慢性气道变应性炎(AirwayAler-
gicInflammation, AAI)[ 1] 。其作为一种常见病和多
发病 ,临床上治疗比较棘手。甾体类抗炎药糖皮质
激素 、白三烯受体拮抗剂及色甘酸钠等是目前较有
效的药物 ,但因其副作用多 ,不宜长期使用 ,导致哮
喘控制率不尽人意 ,死亡率较高 。中药治疗哮病历
史悠久。现代报道泡桐花浸膏对过敏性哮喘有明显
·16· 　　中医研究　 2007年 10月　第 20卷　第 10期　TCMRes.October2007 Vol.20No.10　　
的保护作用 [ 2] 。泡桐花主要成分为精油 、黄酮类 、
熊果酸等 [ 3] 。我们选择其所含的精油成分作为研
究对象 ,结合计算机病理图象分析技术对泡桐花精
油抗 AAI的作用进行了研究 。
1　材料与方法
1.1　动　物
采用 4 ～ 6 w龄健康 C57BL/6小鼠(清洁级)50
只 ,体质量(20±2)g,雌雄各半 ,由河南省实验动物
中心提供。
1.2　药物与试剂
卵白蛋白(OVA), Sigma公司产品;地塞米松 ,
0.75mg,广东华南制药厂产品 ,批号 061001;福氏
佐剂 , Sigma公司产品;泡桐花精油 ,郑州大学药学
院天然药物化学实验室制备。
1.3　主要仪器
富林 F980型超声雾化器 ,镇江富林医疗设备有
限公司产品;Mias-2000型图像分析仪 ,四川大学图
像图形研究所。
1.4　分　组
将小鼠观察适应 3d后 ,按体重分层随机分为 5
组:正常组 、模型组 、阳性组 、精油大剂量组 、精油小
剂量组 5组 ,每组 10只 。
1.5　造模与给药
参照文献方法造模[ 4-5] 。正常组于第 1, 13, 21d
分 3次以生理盐水代替抗原致敏;其余各组动物于
第 1 , 13, 21天分 3次 ip含 OVA20 mg与福氏佐剂
10 μL的生理盐水溶液 0.1 mL致敏 。于末次致敏
24 h后 ,正常组以生理盐水代替抗原进行雾化激
发 ,模型组以含 1%OVA生理盐水雾化激发 。
1次 /d,每次 30 min,持续 7 d。以小鼠出现明显的
呼吸急促 、发出哮鸣音 ,腹肌抽搐 ,烦躁及口唇紫绀
等作为哮喘模型建立的指标。于激发第 7天开始灌
胃给药 ,正常组及模型组给予生理盐水;阳性组给予
地塞米松 ,精油两剂量组给予泡桐花精油 ,给药剂量
见表 1, 1次 /d,共 7d。
1.6　标本采集与检测
1.6.1　支气管肺泡灌洗液(BALF)的采集与检测
动物以 2%戊巴比妥腹腔麻醉后暴露气管及肺
脏 ,钳夹右肺肺门处 ,随即以一小导管行气管插管灌
洗左肺 ,用 4℃生理盐水 1mL(抽吸 2次)×2次 ,每
次灌注后立即回吸 ,回收率达 80%以上 。合并两次
BALF离心后收集细胞作涂片 ,亚甲基蓝 -伊红染
色后计数细胞总数和 EOS数。
1.6.2　病理取材与细支气管黏膜 EOS计数
每只豚鼠经肺泡灌洗后 ,摘取右肺中叶 , 10%中
性甲醛固定 48 h,常规切片 , HE染色 ,做病理组织
学检查;用 Mias-2000型图像分析仪采集显微镜下
图像 ,中倍视野下 ,选择结构较完整 、黏膜及腔内
EOS浸润明显 、数量多的细支气管 ,然后计数 5个高
倍视野下的 EOS数 ,取均值表示哮喘小鼠细支气管
黏膜 EOS计数 。
1.7　统计学方法
所有数据均以( x±s)表示 ,使用 SPSS11.0统
计软件进行分析。
2　结　果
2.1　小鼠哮喘发作程度
正常组未观察到异常症状。造模各组出现不同
程度的呼吸急促 ,发出哮鸣音 ,腹肌抽搐 ,烦躁不安 ,
易受惊吓等症状 ,其中以模型组上述症状最为明显。
与模型组比较 ,阳性组及精油大剂量组小鼠上述症
状明显减轻。
2.2　对哮喘小鼠 BALF中细胞总数 、EOS总数与
EOS%的影响
结果表明 ,泡桐花精油大小剂量和阳性药对
BALF中细胞总数 、EOS总数及 EOS百分比均有显
著抑制作用。与模型组比较 ,阳性组 、精油大小剂量
组 EOS总数及 EOS百分比显著下降(P均 <0.01),
精油大剂量组和阳性组细胞总数显著减少(P均 <
0.01),精油小剂量组明显减少(P<0.05)。从表中
数据看 ,阳性药作用最强 ,而精油小剂量作用弱于大
剂量 。见表 1。
表 1　对哮喘小鼠 BALF中细胞总数 、EOS总数与 EOS%的影响　( x±s)
组　别 n 剂量 细胞总数(×104 /L) EOS总数(×104 /L) EOS百分比(%)
模型组 10 — 121.35±11.18 34.91±3.80 28.17±1.33
正常组 10 — 22.15±3.15 0.01±0.00 0.03±0.01
阳性组 10 3mg/(kg· d) 60.89±4.30＊＊ 3.33±2.68＊＊ 5.67±0.82＊＊
精油大剂量组 10 1.2g/(kg· d) 82.16±9.22＊＊ 11.86±4.32＊＊ 14.82±2.47＊＊
精油小剂量组 10 0.6g/(kg· d) 98.53±11.93＊ 19.64±1.57＊＊ 19.34±2.52＊＊
　注:与模型组对比 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01。
2.3　对哮喘小鼠肺组织病理学的影响
正常组 C57BL/6小鼠肺肉眼观表面呈粉红色 ,
HE染色镜下观 ,肺组织细支气管黏膜上皮细胞排
列整齐 ,可见纤毛 ,管腔及黏膜内炎细胞浸润不明
显。模型组与正常小鼠的肺脏相比 ,体积明显增大 ,
有多处形状不规则的暗红色充血区 ,切面有白色泡
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沫状渗出物 ,并可见明显的血管断面 ,组织学观察发
现 ,支气管及血管周围有大量的炎性细胞浸润 ,以
EOS为主 ,肺间质乃肺泡腔内也可见 EOS浸润 ,细
小的支气管内可见黏液栓 、气道上皮多处断裂 、脱
落 ,基底膜明显增厚且形态不规则 、细支气管平滑肌
增生明显。泡桐花精油大剂量可明显减少 C57BL/6
哮喘小鼠肺间质及肺泡腔内 EOS等炎细胞浸润 ,支
气管管壁平滑肌增生减轻 ,气管支内可见黏液栓 、气
道上皮断裂和脱落变性减轻等 ,而泡桐花精油小剂
量组肺组织病理学改善不明显 。
2.4　对哮喘小鼠细支气管黏膜 EOS计数的影响
计算机病理图象分析和 EOS计数结果表明 ,模
型组 C57BL/6小鼠细支气管黏膜处 ,固有膜内可见
明显的炎细胞浸润 ,以 EOS浸润为主(EOS呈圆形
或卵圆形 ,核呈 2 ～ 3叶分叶状 ,胞浆内充满粗大较
均匀的嗜酸性颗粒);正常组未见 EOS浸润 。与模
型组比较 ,阳性组和精油大剂量组 EOS计数显著降
低(P<0.01, P<0.05),精油小剂量组 EOS计数呈
下降趋势 ,但差别无统计学意义 (P>0.05)。见
表 2。
表 2　对模型小鼠细支气管黏膜 EOS计数的影响　( x±s)
组　别 n 剂量 EOS(个 /视野)
模型组 10 — 19.04±3.21
正常组 10 — 　　0±0
阳性组 10 3mg/(kg· d) 7.32±2.53＊＊
精油大剂量组 10 1.2g/(kg· d) 10.12±2.67＊
精油小剂量组 10 0.6g/(kg· d) 15.46±2.39
　注:与模型组对比 , ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01。
3　讨　论
当前学术界比较一致的看法是 ,在支气管哮喘
的病理发展过程中 ,气道的炎症反应分为以肥大细
胞浸润为主的早期相炎症反应阶段和以 EOS浸润
为主的晚期相炎症反应两个阶段 [ 1] 。本实验采用
C57BL/6小鼠哮喘模型是以 EOS等炎细胞为始动
细胞引发的以晚期相过敏性炎症反应为主的动物模
型 ,浸润到气道的 EOS介导了哮喘晚期相炎症反应
过程 ,说明该模型是一典型的以晚期相反应为特点
的哮喘动物模型 ,可运用于过敏性哮喘的迟发相反
应的实验研究 。本实验采用文献方法 [ 3-4] ,以具有很
强的免疫原性的 OVA复制 C57BL/6小鼠晚期相哮
喘气道炎症模型。通过肺组织 HE染色 ,光镜下可
见细支气管黏膜上皮 、固有层以及血管周围有较多
的 EOS为主的炎性细胞浸润 ,肺间质及肺泡腔内也
可见 EOS浸润 。实验观察了泡桐花精油对晚期相
炎症反应为特征的 C57BL/6小鼠哮喘模型的影响。
结果初步显示 ,泡桐花精油可降低 BALF中白细胞
总数 ,抑制支气管黏膜 EOS等炎细胞的增加和浸
润 ,从而具有抑制哮喘鼠气道过敏性炎症反应的作
用。
参考文献:
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RespirCirtGareMed, 1996, 153:535-539.
收稿日期:2007-03-28;修回日期:2007-08-08
(编辑　陶　珠)
文章编号:1001-6910(2007)10-0018-03 ·药学研究·
小柴胡汤合煎液与单煎合并液中总黄酮的测定
张晓东
(河南中医学院第一附属医院 ,河南 郑州 450000)
关键词:黄芩　总黄酮　单煎　共煎
中图分类号:R284.1　　文献标志码:B
　　小柴胡汤始见于 《伤寒论 》,是临床常用的经典
方剂 ,有和解少阳 、疏利三焦气机之功 。在治疗各种
发热性疾病时 ,临床常采用配方颗粒剂 [ 1] 。配方颗
粒与中药合煎的化学成分是否相同 ,尤其是药效是
否接近 ,是评价中药颗粒配方能否取代中药合煎的
重要依据 。本试验通过对小柴胡汤合煎液 、单煎合
并液 、黄芩单煎液中黄芩总黄酮的含量作对比 ,从化
学成分的角度评价单煎和共煎的优劣 ,为临床应用
·18· 　　中医研究　 2007年 10月　第 20卷　第 10期　TCMRes.October2007 Vol.20No.10