全 文 ：— 46 — 现代中药研究与实践2015年第29卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.4
一条新途径。妇炎平气雾剂给药方式的突出优势就在
于药物依靠泡沫的支撑作用，达到与腔道内粘膜的充
分接触，从而促进和提高药物在作用部位的分布和
吸收。当药物在泡沫的膨胀、支撑下，药物可充盈
于整个阴道壁，增大了药物与作用部位的接触面积，
使药物吸收更迅速、充分，随泡沫的缓慢消失，药液
也基本被粘膜吸收殆尽，故不会因多余的药液从腔道
内溢出而污染衣物。因此，这一剂型的关键点就在于
泡沫生成量的多少，以及泡沫的稳定性（即泡沫的持
续时间）。每个处方由于药味不同，发泡剂和组成比
例也不相同，经实验证明 ：妇炎平气雾剂的处方为 ：
十二烷基硫酸钠 ；羟丙基纤维素 ；甘油为 4 : 3 : 20 时
发泡量适中，泡沫稳定，符合制剂的需求。
参考文献
[1]　侯伟雄 , 陈静君，李思华，等 . 气相色谱法测定妇炎平泡腾片中苦参碱
的含量 [J]. 广东药学院学报 , 2005, 21(3): 254-255.
[2]　陈美婉， 陈　昕，潘　昕，等 . 药用泡沫气雾剂的研究和应用概况 [J].
药学进展 , 2009, 33(12): 549-552.
收稿日期 ：2014-07-03
AB-8 大孔吸附树脂同时分离纯化茶树根总黄酮、
总皂苷工艺研究
余雄英1，2， 周　军1*，曹树稳2，欧阳永伟1
(1.江西中医药大学，江西 南昌 330004；2.南昌大学，食品科学与技术国家重点实验室，
江西 南昌 330047)
摘　要 ：目的　研究AB-8大孔吸附树脂纯化茶树根总黄酮、总皂苷的工艺条件。方法　以总黄酮、
总皂苷的吸附率和转移率为指标，考察吸附药液质量浓度、药液pH、药材树脂比、洗脱乙醇体积分数、乙
醇洗脱用量等影响因素。结果　吸附药液质量浓度0.3 g·ml-1，药液pH = 6，药材树脂比1 : 2，依次用12
BV水洗，10 BV 30%乙醇洗脱得总黄酮，10 BV 70%乙醇洗脱得总皂苷。结论　采用大孔吸附树脂AB-8
可较好地纯化茶树根总黄酮与总皂苷，纯化后茶树根总黄酮含量、总皂苷含量均达60%以上。
关键词 ：AB-8大孔吸附树脂；茶树根；总黄酮；总皂苷；纯化工艺
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1673-6427(2015)04-46-04
doi:10.13728/j.1673-6427.2015.04.015
Study on the Purification Process of the Total Flavonoids and Total Saponins of the
Tea Root by Macroporous Resin AB-8
YU Xiong-ying1,2，ZHOU Jun1*，CAO Shu-wen2，OUYANG Yong-wei1
(1.Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine, Nanchang 330004, China; 2. Nanchang University，Food
Science and Tenology State Key Laboury, Nanchang 330047, China)
Abstract: Objective To discuss purification technology conditions of total flavonoids and total saponins
from tea root by AB-8 macroporous resin．Methods With absorption rate and metastasis rate of total flavonoids
and total saponins as indexes，investigated concentration of sample liquid, pH, ratio of macroporous resin to
crude drug , concentration of eluted ethanol and other factors. Results Optimum purification conditions were
as follows: Concentration of sample liquid was 0.3 g • ml-1 , pH of sample liquid was 6，ratio of crude drug to
macroporous resin was1 : 2, total flavonoids and total saponins were eluted by 12 BV water ,10 BV 30% ethanol
and 10 BV 70% ethanol respectively. Conclusion Macroporous resin AB-8 could be used to purify total flavonoids
and total saponins from tea root，the content of total flavonoid and total saponins reached more than 60%．
Key words: AB-8 macroporous resin; tea root; total flavonoids; total saponins; purification process
基金项目 ：江西中医药大学 2012 年重点学科教师培养计划资助项目 : 茶树根抗痛风活性成分的筛选研究 (2012jzzdxk018)
作者简介 ：余雄英，在读博士，讲师，主要从事生物制药技术研究。 E-mail: yxy197637@sina.com
通讯作者 ：周 军 , 在读博士，讲师，主要从事中药生产技术研究。E-mail: jessechoujun@sina.com
— 47 —现代中药研究与实践2015年第29卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.4
茶树根为山茶科山茶属植物茶的根，味苦，性
平，具有强心利尿、抗菌消炎、收敛止泻的功效。临
床上用于风湿性、高血压性及肺原性心脏病、冠心
病、心律不齐等疾病 [1]。江西民间常用茶树根来治疗
痛风 [2]。目前茶树根化学成分研究表明新鲜根含水苏
糖、棉子糖、蔗糖、葡萄糖、果糖等糖类，并含少
量多酚化合物 ( 黄烷醇等 )、萜类皂苷类成分。茶树
叶、枝、茎都含黄烷醇与咖啡碱，含量都是从叶到茎，
自上而下依次减少，茎含多量 l- 表儿茶精 [2, 3]。大孔
吸附树脂是一种广泛应用于天然产物成分提取的方
法，具有成本低、效率高、毒性低等特点，用于黄酮
类成分和皂苷类成分的富集纯化有较好的效果，但其
吸附性能及其解吸、纯化条件参数因化合物的理化性
质的不同而不同 [4]。本文采用 AB-8 大孔吸附树脂方
法同时分离纯化茶树根总黄酮、总皂苷，为确定茶树
根总黄酮、总皂苷的纯化工艺提供实验依据。
1　材料
1.1　实验药材
茶树根采自井冈山茶园，经江西中医药大学吴志
瑰讲师鉴定为山茶科山茶属植物茶 Camellia sinensis
(L.)O.Kuntze 的干燥根。
1.2　实验仪器
粉碎机、BP- Ⅱ型药物天平（上海医用激光仪器
厂），紫外分光光度计（ 上海尤尼克 ) ， DT100 电子
天平（ 江苏常熟长青仪器仪表厂 SHZ-82 ），HH-S
数显恒温水浴锅（江苏省金坛市顺华仪器有限公
司），PHS-3C 型精密酸度计（上海雷磁仪器厂）。
1.3　试剂
无水乙醇、高氯酸、氢氧化钠，冰乙酸，亚硝
酸钠、香草醛，硝酸铝均为分析纯。熊果酸（购自
中国药品生物制品检定所，批号 100080-2010 07），
芦丁（购自中国药品生物制品检定所，批号 100080-
200707），AB-8 型大孔树脂（南开大学化工厂）。
2　方法与结果
2.1　茶树根药材的提取　　茶树根粉碎，取茶树根
粗粉，加入 10 倍量 70% 乙醇，浸泡 0.5 h，回流提
取 2 次（1.5 h，1 h），合并提取液，减压回收乙醇至
无醇味，用蒸馏水稀释得到不同质量浓度的茶树根提
取液。
2.2　茶树根总黄酮、总皂苷的含量测定
2.2.1　茶树根总黄酮含量测定方法
参 照 文 献 [5, 6] 略 作 修 改， 精 密 称 取 芦 丁 对 照
品 30 mg，置 100 ml 量瓶中，加 60% 乙醇适量使溶
解，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，量取 5 ml 转移至
25 ml 量瓶中，加 60% 乙醇至刻度，摇匀，即得 60
μg·ml-1。精密量取对照品 0.5，1，2，3，5 ml 分别
置于 10 ml 量瓶中，加 5% 亚硝酸钠 0.5 ml, 摇匀放置
6 min, 加 10% 硝酸铝溶液 0.5 ml, 摇匀，放置 6 min，
加 4% 氢氧化钠溶液 4.0 ml，再加 60% 乙醇至刻度，
摇匀，放置 15 min。以不含对照品溶液作为空白对照，
采用紫外分光光度法，于 505 nm 处测定吸光度 A, 以
吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线
Y = 0.029 6X + 0.02(R2 = 0.996 5)，结果芦丁在 5 ~ 25
μg·ml-1 线性关系良好。精密称取总黄酮 10 mg 至
10 ml 量瓶，加入少量 60% 乙醇溶解，再补至刻度，
摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品液 0.2 ml 至
10 ml 量瓶，加 30% 乙醇至 5 ml，精密加入 5% 亚硝
酸纳 0.5 ml，摇匀，放置 6 min，加入 10% 硝酸铝溶
液 0.5 ml，摇匀，放置 6 min，加入 1 mol·L-1 NaOH
液 4 ml, 摇匀，放置 15 min，以不含对照品溶液作为
空白对照，采用 UV 分光光度法，在 505 nm 处测定
A 值 , 代入标准曲线，计算样品中总黄酮含量。
2.2.2　总皂苷含量测定
参照文献 [6, 7] 略作修改，精密称取熊果酸对照品
20 mg，加甲醇使溶解并定容至 10 ml，摇匀。精密量
取上述对照品溶液 0.0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，
置 10 ml 量瓶中，挥干甲醇，加入 5% 香草醛冰乙酸
溶液 0.2 ml，高氯酸 0.8 ml，混匀，置 60℃水浴中保
温 15 min，冰水浴中 2 min，冰乙酸稀释至 5 ml，摇匀，
在 600 nm 处测定 A 值。以对照品质量浓度 (C) 为横
坐标，A 为纵坐标，绘制相关曲线并计算回归方程 Y
= 0.033 4X + 0.039 7(R2 = 0.997 5)，结果熊果酸在 20
~ 200 μg·ml-1 线性关系良好。精密称取总皂苷 20
mg，加甲醇溶解并定容至 10 ml，摇匀，作为供试品
溶液。精密量取供试品溶液 0.4 ml，置于 10 ml 量瓶
中，水浴挥去甲醇，照标准曲线制备项下，自精密加
入新鲜配制 5% 香草醛冰乙酸溶液 0.2 ml，依法操作。
以香草醛冰乙酸高氯酸为空白对照，测定吸收度，代
入标准曲线，计算样品中总皂苷含量 [5-7]。
2.3　AB-8 大孔吸附树脂纯化分离工艺条件优化
2.3.1　树脂吸附率考察
（1）　静态吸附　　称取沥干 AB - 8 大孔树脂 1 g，
取茶树根提取液 5 ml。将树脂和上柱样品液 50 ml 倒
入 100 ml 锥形瓶中，密塞，至于水浴震荡器中，震
荡频率为 50 r·min-1 常温震荡 24 h。充分吸附后过滤，
测得 AB-8 树脂吸附量为总黄酮 0.25 mg·g-1，总皂苷
0.07 mg·g-1。
（2）　 动 态 吸 附　　 取 茶 树 根 提 取 液 50 ml， 上
— 48 — 现代中药研究与实践2015年第29卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.4
AB-8 大孔树脂柱 (10 g ，Ф2.5 cm x H65 cm)，流速
2 BV·h-1(BV 为柱床体积 )，收集流份。测定流出液
中总黄酮、总皂苷的含量，按公式 ：吸附容量 =( 上
柱液中有效成分总量一流出液中有效成分总量 )/ 干
树脂量计算吸附容量 [7，8]，结果测得 AB-8 树脂吸附
量为总黄酮 1.68 mg·g-1，总皂苷 1.00 mg·g-1。
2.3.2 　吸附药液质量浓度考察　　取相同体积不同
质量浓度的茶树根提取药液，分别加到已处理好的
AB - 8 型大孔吸附树脂柱中，以相同流速通过同样
径高比的树脂柱进行动态吸附，以茶树根总黄酮、
总皂苷吸附容量 = ( 上柱液中有效成分总量 - 流出液
中有效成分总量 ) 为指标，考察样品液的上样质量浓
度。结果表明，当样品溶液质量浓度为 0.3 g·ml-1
时饱和吸附量较高，故选上样液质量浓度为 0.3 g·ml-1
进行上柱 ( 图 1）。
图 1 AB-8 树脂分离茶树根提取液质量浓度考察
Fig.1 Study on the concentration of tea root extracts by separating with
AB-8 macroporous resin
2.3.3　药液 pH 的考察　　 取茶树根提取液，用 1
mol·L-1 盐酸和氢氧化钠调节 pH 分别为 4，6，8，
通过 AB-8 树脂，先用 12 BV 水洗脱，继用 30% 乙
醇洗脱，再用 70% 乙醇洗脱，洗脱液分别蒸干，称重，
分别测定茶树根总黄酮和总皂苷的含量，以 pH 为横
坐标，质量分数为纵坐标，绘图见图 2。
图 2 pH 对样品吸附量的影响
Fig.2 Effects of pH on adsorption capacity of tea root sample
从测定结果可以看出，pH = 6 左右处茶树根总黄
酮和总皂苷的质量分数最高。
2.3.4　最佳上样量考察　　将 0.3 g·ml-1 茶树根提
取液用 1 mol·L-1 盐酸调 pH = 6，以流速 2 BV·h-1
通过 AB-8 大孔树脂的吸附柱（Ф2.5 cm x H65 cm)
110 ml 进行动态吸附，分段收集流出液。每 30 ml 收
集 1 份，每份流出液蒸干，按茶树根总黄酮含量测定
的方法测定 A。以 A 为纵坐标，累计上样体积为横
坐标绘制泄漏曲线，见图 3。
图 3 茶树根提取液总黄酮泄露曲线
Fig.3 Leaking curve of total flavonoids in tee root extracts by Macroporous
resin AB-8
由图 3 可以看出，当上样 210 ml 茶树根提取液，
总黄酮开始明显泄漏，故确定上样量为 80 mlAB-8
大孔树脂上样 180 ml。说明药物的最佳上样量为 54 g,
最佳上样量与树脂体积比约为 1 : 2。
2.3.5　洗脱乙醇体积分数的确定　　取 0.3 g·ml-1
茶树根提取液，加至大孔树脂中，用水洗至流出液
Molish 反 应 阴 性， 然 后 分 别 用 20%，30%，40%，
50%，70% 乙醇洗脱，洗脱液分别蒸干，称重，测定
茶树根总黄酮、总皂苷含量，计算总黄酮和总皂苷的
转移率，以转移率为纵坐标，洗脱乙醇体积分数为横
坐标，绘制图见图 4。
图 4 洗脱乙醇体积分数与转移率的关系
Fig.4 The relationship between eluting ethanol content and metastasis rate
从图 4 可知，30% 乙醇洗脱茶树根总黄酮，70%
乙醇洗脱总皂苷为最优洗脱乙醇体积分数。
2.3.6　乙醇洗脱用量考察　　取茶树根提取液 120
ml( 药液浓度为 0.3 g 生药 /ml)，调节 pH = 6，过树脂
柱 60 ml 大孔树脂，先用 12 BV 水洗，再用不同体积
的 30% 乙醇、70% 乙醇洗脱，分别收集洗脱液，将
乙醇洗脱液分别蒸干，称重，分别测定茶树根总黄酮
和总皂苷含 [9]，以转移率为纵坐标，乙醇用量为横坐
标，绘制洗脱曲线（图 5）。从洗脱曲线可知，当乙
— 49 —现代中药研究与实践2015年第29卷第4期Chin. Med. J. Res. Prac., 2015 Vol. 29 No.4
醇为 10 BV 时，总黄酮、总皂苷转移率均有 85% 以
上，从成本和时间上考虑，解析洗脱溶媒用量均为
10 BV。
图 5 乙醇用量与转移率的关系
Fig.5 The relationship between volume of eluting ethanol and metastasis rate
2.4　分离纯化工艺验证试验
经过对 AB-8 型树脂纯化分离工艺条件考察，在
最适条件下分离纯化得到样品，样品冻干后按总黄
酮、总皂苷的测定方法进行含量测定，结果 30% 乙
醇洗脱物总黄酮含量 79.14%，总皂苷含量 18.3% ；
70% 乙醇洗脱物总皂苷含量 62.31%，总黄酮含量
4.38%。可见上述优选的 AB - 8 型树脂纯化分离工艺
条件可以较好地分离茶树根总黄酮和总皂苷。
3　讨论
本文通过对 AB-8 型树脂纯化分离工艺条件考
察，得出 AB-8 型大孔树脂分离纯化茶树根总黄酮、
总皂苷的最佳条件为药液 pH = 6，依次用 12 BV 水
洗，10 BV 30% 乙醇洗脱总黄酮，10 BV 70% 乙醇洗
脱总皂苷。本实验通过调节提取液的 pH，实现了茶
树根总黄酮、总皂苷的同步分离，且茶树根总黄酮、
总皂苷的得率较高，纯化后茶树根总黄酮含量、总皂
苷含量均达 60% 以上。质量稳定可靠，工艺科学合
理，简便易行，为同类研究提供研究思路。
参考文献
[1]　中药辞海组编 . 中药辞海 [M]. 北京 : 中国医药科技出版社，1999: 1287.
[2]　余雄英 , 周　军， 唐　科，等 . 茶树根提取物对高尿酸血症小鼠的影响 [J].
中国实验方剂学杂志，2012, 2(18): 193-194.
[3]　南京中医药大学编著 . 中药大辞典 [M]. 上海 : 上海科学技术出版社 ,
2006: 165-169
[4]　梁少玲，蔡　宇，杨燕霞 . 大孔树脂吸附在黄酮及皂苷类成分分离纯化
中的应用 [J]. 时珍国医国药 , 2006(2): 34-36.
[5]　国家药典委员会编 . 中华人民共和国药典（一部）[S]. 北京 : 中国医药
科技出版社，2010: 372-373
[6]　冯素香，苗明三，苗晋鑫，等 . AB-8 大孔吸附树脂同时分离纯化毛冬
青总黄酮、总皂苷工艺 [J]. 中国实验方剂学杂志 , 2012, 2(18): 5- 7.
[7]　王金元 , 费学谦 , 罗　凡 . AB-8 大孔树脂纯化油茶皂苷工艺的研究 [J].
广东农 业科学 , 2011(9): 435-436.
[8]　蔡碧琼，吴逸萍，蔡珠玉，等 . AB 一 8 大孔吸附树脂对稻壳黄酮的分
离 纯化工艺研究 [J]. 甘肃农业大学学报 , 2010, 10(5): 152-156.
收稿日期 ：2014-07-17
E. 酒制品骆驼蓬子
图 1 样品 HPLC 图谱
Fig.1 HPLC chromatograms of samples
3　讨论
骆驼蓬是维吾尔医常用中药，全草和种子均可以
入药，由于目前骆驼蓬的质量标准仅有性状和显微鉴
别，不能有效的控制骆驼蓬的质量，本文通过测定骆
驼蓬中去氢骆驼蓬碱的含量，为建立新的骆驼蓬质量
控制方法提供了依据，为进一步开发骆驼蓬奠定物质
基础。
骆驼蓬在维医中的炮制方法是取全草红酒制 [8]。
本文根据《中国药典》炮制通则 [9] 和文献 [10]，确定
了骆驼蓬种子的炮制方法，并考察了不同的炮制品在
炮制前后去氢骆驼蓬碱的含量变化，为临床应用提供
依据。在炮制过程中，我们发现了不同的炮制品中去
氢骆驼蓬碱含量的增减情况 ：生品骆驼蓬 ＜ 酒制骆
驼蓬 ＜ 炒制骆驼蓬 ＜ 醋制骆驼蓬，醋制后骆驼蓬种
子中去氢骆驼蓬碱的含量最高。
参考文献
[1]　中华人民共和国卫生部药典委员会编 . 中华人民共和国卫生部药品标准
维吾尔药分册 [S]. 乌鲁木齐 ：新疆科技卫生出版社，1998: 80.
[2]　刘勇民 . 维吾尔药志 ( 上册 ) [M]. 乌鲁木齐 ：新疆科技卫生出版社 ,1999:
430-435.
[3]　俞腾飞 , 朱慧珍 . 骆驼蓬的研究概况 [J]. 国外医药·植物药分册 , 1992,
7(3): 103-107.
[4]　樊峥嵘 , 姚新生 . 骆驼蓬属植物成分及药理研究 [J]. 沈阳药学学院学报 ,
1992, 9(2): 144.
[5]　赵　婷 , 王长虹 , 王峥涛 . 骆驼蓬属植物中生物碱类化学成分及其药理
活性研究进展 [J]. 国际药学研究杂志 , 2010, 37(5): 333.
[6]　王长虹 , 刘 军 , 郑立明 , 等 . 不同产地骆驼蓬不同药用部位生物碱的含
量分析 [J]. 中国药学杂志 , 2002, 37(3): 211.
[7]　俞腾飞 , 朱惠珍 . 骆驼蓬的研究概况 [J]. 国外医药 ( 植物药分册 ), 1992,
7(3): 104.
[8]　新疆维吾尔自治区食品药品监督管理局 . 新疆维吾尔自治区中药维吾尔
药饮片炮制规范 [M]. 乌鲁木齐 ：新疆人民卫生出版社 , 2010: 12.
[9]　国家药典委员会 . 中华人民共和国药典 [S]. 北京：中国医药科技出版社 ,
2010: 附录 20.
[10]　刘　军 , 王长虹 . 不同炮制方法对骆驼蓬子总生物碱浸出率的影响 [J].
现代应用药学 , 1996, 13(1): 25-26.
收稿日期 ：2014-10-18
（上接第 36 页）