全 文 ：确诊癌症时就已经存在瘤细胞的远处播散 ,控制癌
转移的早期步骤已失去最佳时机 ,较为现实可行的
手段是抑制瘤细胞在靶器官的生长 。
中医药治疗恶性肿瘤有其独特的理论基础 ,积
累了丰富的实践经验。祖国医学认为 ,癌(积)的形
成和转移多由正虚而致 , 《灵枢·百病始生》篇曰:“虚
邪之中人也 ……留而不去……息而成积。或著孙
络 , ……或著输脉 ,或著于伏冲之脉 ,或著于膂筋 ,或
著于肠胃之募原 , 上连于缓筋 , 邪气淫氵失 ,不可胜
论。”表明癌症转移的病机是由于正气不足 ,病邪由
浅入深 ,循孙络 —输脉 —伏冲之脉—膂筋—肠胃之
募原—缓筋而传布 ,终致“邪气淫氵失”而变证百端 。
治疗上提倡以扶正为主 ,辨证论治结合辨病用药 。
脾为后天之本 、气血生化之源 ,培补后天之本是“扶
正”关键 ,笔者根据肝癌多见脾虚证候 ,临床运用益
气健脾冲剂治疗原发性肝癌 ,取得了较好疗效 。该
方能显著改善肝癌病人临床症状 ,延长生存期 。初
步实验研究发现 ,益气健脾冲剂具有调节荷瘤动物
免疫功能 ,降低 HBV 转基因小鼠 AFB-白蛋白加成
物水平 ,抑制肿瘤细胞端粒酶活性 ,诱导肿瘤细胞凋
亡等作用[ 4-7] 。近年 ,笔者用益气健脾冲剂结合介入
栓塞治疗转移性肝癌取得了进一步的效果。本实验
结果证实益气健脾冲剂能明显抑制转移性肝肿瘤的
生长 ,抑瘤率达 40.25%,与早先有关益气健脾冲剂
的观察结果一致。该方肝转移抑制率为 41.6%,提
示该方可作为抗肝转移的有效方剂应用于临床。
本研究显示 ,益气健脾冲剂可明显抑制转移性
肝肿瘤的生长 ,使肝转移灶体积缩小 、数量减少;抑
制瘤细胞 MMP-1的表达是其抗肝转移的机制之一 。
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作者简介
王新杰(1969-), 男 ,河南长葛人 , 郑州大学第一附属医
院主治医师 , 医学硕士 ,主要研究方向:中西医结合防治恶性
肿瘤的研究。
收稿日期:2006-04-25;修回日期:2006-06-30
(编辑　陶　珠)
文章编号:1001-6910(2006)08-0013-03 ·实验研究·
泡桐果总黄酮抗支气管哮喘变应性炎症的实验研究
李寅超1 ,赵宜红1 ,傅蔓华2 ,李军柯1
(1.郑州大学药学院 ,河南 郑州 450052;2.河南省中医药研究院中药研究所 ,河南 郑州 450004)
摘要　目的:通过豚鼠哮喘动物模型研究泡桐果总黄酮抗哮
喘气道变应性炎症的作用。方法:以卵蛋白致敏豚鼠为动物
模型 ,以泡桐果总黄酮大 、小剂量灌胃 ,观察各组豚鼠的引喘
潜伏期 、血嗜酸性粒细胞(EOS)数 、支气管肺泡灌洗液
(BALF)中炎性细胞总数和 EOS 数 、BALF 蛋白含量 , 并进行
肺组织病理学检查。结果:泡桐果总黄酮大 、小剂量对哮喘
豚鼠血 EOS 数 、BALF中的 EOS 和炎性细胞总数及蛋白含量
均有不同程度的抑制作用;肺组织病理学检查显示 , 泡桐果
总黄酮能明显抑制 EOS 在支气管粘膜浸润聚积 , 粘膜上皮
脱落变性减轻。结论:泡桐果总黄酮通过抑制哮喘动物外周
血及 BALF 中 EOS 聚集而具有一定的抗哮喘气道变应性炎
症的作用。
关键词:豚鼠哮喘模型　气道变应性炎症(AAI)/药物作用　
泡桐果总黄酮/药效学
中图分类号:R285.5　　文献标志码:B
　　气道炎症(AirwayAllergicInflammation ,AAI)是支
气管哮喘发病的一个重要因素 ,有多种炎症细胞 、炎
症介质和细胞因子参与其炎症过程 ,其中以嗜酸性
粒细胞(EOS)在气道的浸润募集和激活为最终途
径 。因此 ,体内 EOS的异常增多是哮喘气道炎症反
应的重要原因之一 ,抑制 EOS 向气道募集 、消除气
道炎症 ,对治疗哮喘具有关键性意义[ 1] 。
在哮喘的药物治疗中 ,甾体类糖皮质激素 、白三
·13·　　中医研究　2006年 8月　第 19卷　第 8期　TCM Res.August 2006 Vol.19 No.8　　
烯受体拮抗剂等是目前较有效的药物 ,但因其副作
用多 ,不宜长期使用 ,导致哮喘的控制率不尽人意 ,
死亡率较高 。中药成分虽然复杂 ,但其具有整体调
节且毒副作用相对较小的优点。因此 ,从中药中挖
掘抗炎平喘成分是哮喘研究的重要内容 。
哮喘属中医“哮病”范畴 ,中药治哮病历史悠久 。
泡桐药用可追溯到东汉《神农本草经》 ,其列“桐叶”
于下品 ,但对泡桐果的应用没有叙述。《全国中草药
汇编》载泡桐果(Fructus Paulowniae)有祛痰止咳平喘
作用 ,中医用于治疗慢性气管炎 、气喘等[ 2] 。泡桐果
所含成分有黄酮类 、生物碱 、桐酸等 ,我们选择其中
的黄酮类成分作为研究对象 ,研究了泡桐果总黄酮
抗AAI的作用 ,现报道如下 。
1　材料与方法
1.1　动物与分组
健康白化豚鼠 ,雌雄各半 ,体重(200±50)g ,由
河南省实验动物中心提供 。随机分为空白对照组 、
模型对照组 、阳性药物组 、泡桐果总黄酮大剂量组
(下称大剂量组)、泡桐果总黄酮小剂量组(下称小剂
量组)5组 ,每组 10只。
1.2　主要药品与试剂
Ovalbumin(OA), Sigma 公司产品 。醋酸地塞米
松片 ,浙江仙琚制药股份有限公司 , 批号 0509011。
泡桐果总黄酮主要提取步骤:取新鲜泡桐果 , 用
95%乙醇加热回流 2次 ,得醇浸膏 ,稀醇分散后 ,加
等体积的石油醚和乙酸乙酯依次萃取 ,对乙酸乙酯
部位分离除杂得粗总黄酮;取粗总黄酮过聚酰胺柱 ,
收集 95%乙醇洗脱液 ,得精制总黄酮 。计算得率为
1.48%。
1.3　模型的建立与用药
参照宫兆华 ,等方法[ 3] ,豚鼠常规饲养观察 5 d
无异常后 ,予 10%OA 生理盐水溶液腹腔注射(ip),
致敏当天按表 1剂量始 ig 给药。第 15 d时 ,予 5%
OA生理盐水溶液雾化吸入诱导哮喘发作 ,记录自喷
雾开始至豚鼠腹肌痉挛 、腹部凹陷出现时间(s),作
为哮喘发作潜伏期 ,超过 6 min者以 360 s计算。选
取有哮喘发作(哮喘豚鼠表现症状为咳嗽 、呼吸困
难 、烦躁 、抽搐 、跌倒甚至死亡)的动物进行实验。
1.4　哮喘防治作用的观察
用药第5天 、12天 ,每天1次对豚鼠行激发引喘
试验:予 5%OA 生理盐水溶液吸入 10 s ,封闭时间
共20 s ,观察各组动物哮喘发作严重程度。
1.5　白细胞总数和 EOS 计数的测定
第15天激发试验 16 h后 ,用 15%戊巴比妥钠
60 mg/kg ip麻醉 ,开胸 ,心脏取血 ,置于 EDTA 抗凝
管进行白细胞总数和 EOS计数。
1.6　肺泡灌洗液(BALF)的采集与细胞计数
暴露豚鼠气管和肺 ,用丝线结扎右肺门处 ,行气
管插管灌洗左肺。灌入生理盐水 5 mL(抽吸2次)×
2次 ,灌洗回收率大于 80%,经 4000 r 离心 10 min
后 ,取上清液 0.2 mL ,用721分光光度计比色测定其
吸光度(OD),所得值乘以 0.025 g/L 即蛋白含量[ 7] ;
沉淀细胞以 Hank s液分散后即刻在显微镜下计数
细胞总数 ,细胞浓度调至 2×106/mL , 涂片 ,瑞氏染
色 ,计数 EOS 。
1.7　肺组织病理学检查
摘取右肺 ,10%中性甲醛固定 24 h ,进行病理学
检查。
1.8　统计学方法
所有数据以( x ±s)表示 ,采用 SPSS 11.0统计
软件进行分析。
2　结　果
2.1　泡桐果总黄酮对豚鼠引喘潜伏期的影响
见表 1。各造模组引喘潜伏期较空白对照组极
显著缩短(P 均<0.001);用药第 15天 ,大剂量组 、
阳性药物组引喘潜伏期明显延长 ,与模型对照组比
较具有显著性意义(P 均<0.01),小剂量组有延长
引喘潜伏期的趋势 ,无显著性意义(P >0.05);用药
第 5天及第 12天 ,各治疗药物不能预防再次吸入
OA抗原后的哮喘发作 , 疗程不足可能是影响药物
的预防作用的因素需要。需要说明的是 ,用药第 5
天 、第 12天 、第 15天在对豚鼠行激发引喘试验过程
中 ,各造模组先后有8只(大剂量组2只 、小剂量组 2
只 、阳性组 1 只 、模型组 3 只)动物因抢救不及而窒
息死亡 。
表1　泡桐果总黄酮对豚鼠引喘潜伏期的影响
( x±s)
组　别 n 剂量 第15天引喘潜伏期(s)
空白对照组 10 等体积NS 360
模型对照组 7 等体积NS 20.25±6.85■■
阳性药物组 9 0.66 mg/(kg·d) 58.75±6.13＊＊■■
大剂量 8 0.14 g/(kg·d) 52.00±34.24＊＊■■
小剂量 8 0.07 g/(kg·d) 41.00±33.75■■
　注:与模型对照组对比 , ＊ P<0.05 , ＊＊ P<0.01;与空白对照组对比 ,
■■ P<0.001。
2.2　泡桐果总黄酮对哮喘豚鼠外周血细胞总数与 EOS
的影响
见表2。泡桐果总黄酮大小剂量和阳性药对外周
血白细胞 、EOS均有抑制作用 ,表现为各治疗组与模型
对照组比较 , 外周血白细胞总数 、EOS 计数减低
(P <0.05或 P<0.01)。总黄酮大小剂量对炎细胞抑制
强度相当 ,二者比较无统计学意义(P>0.05)。ECP 测
定结果在各组中无明显差异。
·14· 　　中医研究　2006年 8月　第 19卷　第 8期　TCM Res.August 2006 Vol.19 No.8　　
表 2　泡桐果总黄酮对哮喘豚鼠外周血白细胞总数与
EOS 计数的影响　( x±s)
组　别 n 剂量 白细胞总数(×109/ L)
EOS计数
(×109/L)
空白对照组 10 等体积NS 5.56±1.33＊ 0.05±0.01＊＊
模型对照组 7 等体积NS 9.08±3.11 0.33±0.14
阳性药物组 9 0.66 mg/(kg·d) 7.21±0.86 0.08±0.22＊＊
大剂量 8 0.14 g/(kg·d) 6.15±0.79＊ 0.14±0.27＊
小剂量 8 0.07g/(kg·d) 6.25±3.39 0.11±1.02＊
　注:与模型对照组对比 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
2.3　泡桐果总黄酮对 BALF 细胞总数 、EOS 及蛋白含
量的影响
见表 3。泡桐果总黄酮大小剂量和阳性药对BALF
中细胞总数和 EOS计数及蛋白含量均有抑制作用。与
模型对照组比较 ,阳性药物组 、总黄酮大小剂量组白细
胞总数 、EOS 计数及蛋白含量差异均有显著性意义
(P<0.05或 P<0.01)。总黄酮大小剂量对 BALF 中抑
制炎细胞作用强度相当 , 二者比较无显著意义
(P>0.05)。
表 3　泡桐果总黄酮对 BALF 细胞数及蛋白含量
的影响　( x±s)
组　别 n 白细胞总数 EOS计数(×109/ L)
蛋白含量(OD)
(×109/L)
空白对照组 10 0.98±0.46＊＊ 0.06±0.01＊＊ 0.15±0.14＊＊
模型对照组 7 2.26±0.70 0.93±0.23 0.64±0.09
阳性药物组 9 0.55±0.10＊＊ 0.26±0.20＊＊ 0.31±0.03＊＊
大剂量 8 0.68±0.20＊＊ 0.23±0.01＊＊ 0.43±0.09＊
小剂量 8 1.17±0.46＊ 0.19±0.06＊＊ 0.45±0.10＊
　注:与模型对照组对比 , ＊P<0.05 , ＊＊P<0.01。
2.4　泡桐果总黄酮对哮喘豚鼠肺组织病理学的影响
组织学观察发现 ,空白对照组豚鼠肺组织细支气
管粘膜上皮细胞排列整齐 ,可见纤毛 ,管腔及粘膜内未
见炎细胞浸润。模型组豚鼠支气管粘膜上皮部分变
性、粘膜的基底膜增厚形态不规则 ,管腔变窄 ,粘膜下
和肌层内均有较多的 EOS 、单核细胞等炎细胞浸润 、聚
集 ,管壁平滑肌痉挛。EOS 胞浆鲜红 ,胞核呈分叶状 ,
以两叶为主。泡桐果总黄酮大小剂量均可明显改善哮
喘豚鼠肺组织病理学改变 ,表现为支气管管壁平滑肌
痉挛减轻 ,炎细胞浸润明显减少 ,支气管粘膜上皮脱落
变性减轻等。
3　讨　论
支气管哮喘的发病机理复杂 ,近二十年的研究使
我们对哮喘的认识不断更新。目前医学界比较一致的
观点认为 ,哮喘是一种涉及多种炎性细胞和炎性介质
的慢性气道炎症性疾病 ,尤其是以 EOS在气道的浸润
募集和激活介导了气道炎症过程[ 5] 。气道炎症时毛细
血管通透性增加 ,炎性蛋白大量渗出。随着哮喘的发
作和持续 ,引喘潜伏期明显缩短 ,BALF 中 EOS数量显
著增多 ,BALF炎性蛋白含量增加。因此 ,本实验以引
喘潜伏期 、EOS和蛋白含量等作为观察指标 ,能够较客
观地反映所研究中药有效成分对支气管哮喘的防治作
用。
泡桐果有祛痰 、止咳平喘作用 ,中医用治慢性气管
炎 、气喘等[2] 。上世纪 70年代 ,河南省防治慢性气管炎
泡桐协作组曾先后在郑州 、开封 、新乡和商丘等地临床
观察泡桐果(煎剂 、片剂 、注射液)治疗哮喘和慢性支气
管炎患者950例 ,并对部分病例进行通宵同住观察 ,结
果发现泡桐果可显著改善气管炎患者的咳 、痰、喘及肺
部体征 ,总有效率为 85%～ 95%,显效以上为 45%～
72%;通过治疗前后监测病人的心 、肝 、肾功能 ,发现泡
桐果无明显的毒副作用。基于上述实践结果 ,我们选
择其所含的主要药效成分———总黄酮类成分为研究对
象 ,采用 ig 途径用于致敏豚鼠 ,并从不同方面观察了泡
桐果总黄酮抗哮喘气道炎症的作用。
本实验结果显示:泡桐果总黄酮给药 15 d对 OA
所致豚鼠哮喘有对抗作用 ,能显著延长过敏性哮喘豚
鼠的引喘潜伏期 ,可不同程度地减少哮喘豚鼠血及
BALF 中EOS计数 、细胞总数 ,可抑制气道炎症时毛细
血管通透性的增加 ,减少炎性蛋白的渗出。泡桐花总
黄酮大剂量作用强于小剂量;给药第 5天和12天 ,泡桐
果总黄酮大小剂量均不能预防再次吸入卵蛋白抗原后
的哮喘发作 ,这很可能与疗程不足有关。
综上表明 ,泡桐果总黄酮具有对抗卵蛋白所致豚
鼠哮喘的作用 ,其作用机制我们将做进一步的深入研
究。
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收稿日期:2006-5-17;修回日期:2006-06-12
(编辑　陶　珠)
·15·　　中医研究　2006年 8月　第 19卷　第 8期　TCM Res.August 2006 Vol.19 No.8