全 文 :陆英!!#$%!%& !’()*)&(& !#$%&为忍冬科接骨木属植
物#又称接骨木$八棱麻$珊瑚花$臭草$七叶金等#常用于治
疗跌打损伤#风湿疼痛#肾炎水肿#急性菌痢及肺炎等%采用
陆英煎剂$糖浆$冲剂治疗甲$乙型急性病毒性肝炎也取得
了显著疗效% 从陆英的脂溶部分已提取分离出 !’香树脂醇
!!’()*+##’香树脂醇 !’,)*+#$’谷甾醇!’-./-.0+/%$
齐墩果酸!/10,#/12 ,2$及乌索酸!3+-/12 ,2$4 种成分#经
药理和临床试验证实#陆英所含的乌索酸$齐墩果酸$’谷
甾醇是其抗肝炎的有效成分#其中乌索酸是主要有效成分!##$%
笔者对不同采收期陆英叶$茎$根中乌索酸和齐墩果酸动态
含量的测定进行了研究#为合理利用陆英资源提供参考%
! 材料与方法
!! 材料!仪器及试剂 陆英药材采自江西宜春#经鉴定
为 !#$%+%& !’()*)&(&5#6%%
7,.0+-高效液相色谱仪 !4%4泵#899: 光电二极管矩阵
检测器#;;84< 进样阀#8= #% 定量环#>)?/@0+ 中文色谱工
作站&AB8=C 分析天平 !上海天平分析仪器厂&DE7F’<’
%=G 纯水机 !杭州永洁达膜分离设备厂% 乙腈为色谱纯
!H3+62IJK(LI-/##水为高纯水#其余试剂均为分析纯% 乌
索酸$齐墩果酸对照品均由中国药品生物制品检定所提供%
!# 色谱条件 F*))0.+* FM016 NE%O 色谱柱!P&9 ))Q%4=
))#美国 7(.0+- 公司#柱温 84 R#流动相为乙腈S水 S磷酸
!体积比#:4SP4S=&%#流速 %&= )1 T )##检测波长 8%= #)#外
标法定量分析%
!$ 实验方法
!$! 药材鉴别!图 &% 多年生草本#全株高 %UP )% 叶对
生#奇数羽状复叶#暗绿色#小叶 4U9 片#长 :U%4 L)#宽 PU4
L)#边缘有锐齿#基部楔形有时偏斜#叶脉具短柔毛#总叶柄长
约 P L) #不具托叶#小叶柄短或近于无柄#质脆#易破碎#揉
之有臭气% 茎枝圆柱形#直径 =&PU%&= L)#外表褐色或黑色#
茎具 ;UO 条纵棱#节部稍膨大#节间长 4U%8 L)#中心有髓%
地下根茎横走#圆柱形#长 P=U%4= L)#直径 =&PU%&4 L)#黄
白色#具纵皱纹#节稍膨大#上生须根#质柔韧不易折断#髓
发达#气味异#味苦%花期 ;UO 月#花序呈复伞房状#顶生#直
径约 8= L)#小苞片细小#卵状披针形&花萼钟状#4 裂#裂片
三角形&花冠幅状#白色#4 裂#裂片卵形&雄蕊 4 枚#与花冠
裂瓣互生#着生在花冠筒口部#花丝短#药室内向开裂&雌蕊
一枚#子房卵珠状#柱头头状或三线裂&果实为球状浆果#熟
时红色或橙黄色#后变黑色%
!$# 标准曲线的测定%精确称取乌索酸对照品 C& O )V#齐
陆英中乌索酸和齐墩果酸动态含量的研究
邹盛勤!陈 武 !宜春学院生物工程研究所#江西宜春 PP:===
摘要 建立了反相高效液相色谱法测定不同采收期陆英叶茎根中乌索酸和齐墩果酸含量的方法# 色谱柱为 F*))0.+* FM016 NE%O
柱$P&9 ))Q%4= ))!4#)%&流动相为乙腈S水S磷酸$体积比!:4SP4S=&%%&流速为 %&= )1 T )#&二极管阵列检测器检测!检测波长 8%= #)&
柱温 84 R’ 乌索酸线性范围 =&=9:U8&P=C #V!线性回归系数大于 =&999 9!检出限为 =&P )V T 5$P$%&齐墩果酸线性范围 =&=9OU8&P48 #V!
线性回归系数大于 =&999 ;!检出限为 =&8 )V T 5$P$%’样品中乌索酸的平均回收率为 %==&P W!NFX 为 %&4 W&齐墩果酸的平均回收率为
9O&9 W!NFX为 %&8 W$)Y4%’ 该方法简便!准确!线性范围宽!重现性好!适于对含有该成分的药物和药材进行质量评价’
关键词 陆英&乌索酸&齐墩果酸&含量&ZE5B
中图分类号 ’()(*+,&*# 文献标识码 - 文章编号 ./&+011&&2../#.)0.1)#0(#
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/10,#/12 ,26&
=-) >*0(1 #$%+%& !’()*)&(&f C+-/12 ,26f D10,#/12 ,26f E/#.0#.f ZE5B
基金项目 国家(O:P)计划重点资助项目$8==8bb8gP8%;%’
作者简介 邹盛勤[%9;=h a!男!江西奉新人!副教授!从事有机化工和
生物医药研究’
收稿日期 8==4’=8’%:
安徽农业科学#K/3+#,1 /\ b#M3 bV+&FL&8==4# FF!)’1)201)F#111 责任编辑 孙红忠 责任校对 孙红忠
DOI:10.13989/j.cnki.0517-6611.2005.04.054
!# 精密度试验 以同一对照品混合溶液重复进样 ! 次!
每次 # !$!分别测定峰面积!计算得乌索酸峰面积 %&’(相
对标准差值)为 #*! +!齐墩果酸峰面积 %&’ 为 #*, +!仪器
精密度良好
!$ 重现性试验 精密称取干燥至恒重的同一批陆英样
品 ! 份#每份 *# -$!用乙醇回流提取!提取液经处理后进
样!进样量 # !$!测定峰面积 !乌索酸峰面积 %&’ 为 .*/
+!齐墩果酸峰面积 %&’ 为 .*0 +!表明样品处理方法重现
性好%
!% 回收率测定 采用加样回收法测定 精密称取已知乌
索酸和齐墩果酸含量的陆英 ! 份!每份 *# -!加入乌索酸&
齐墩果酸对照品各 ,*# 1-样品用乙醇回流法提取!提取液
经处理后进样!进样量为 # !$!用外标法计算乌索酸与齐
墩果酸含量!得乌索酸的平均回收率为 .##*, +!%&’ 为 .*!
+’齐墩果酸的平均回收率为 /2*/ +!%&’ 为 .* +
!& 陆英叶!茎!根中乌索酸和齐墩果酸的含量测定 每
份样品平行测定 !次!用外标法计算!得陆英叶&茎&根中乌
索酸和齐墩果酸的含量!测定结果见表 . 由表 . 可知!陆
英叶中乌索酸含量较高!茎次之!根中含量最低!但乌索酸
含量均远高于齐墩果酸的含量!其中又以 月陆英叶&茎中
乌索酸含量最高
!下转第 页
墩果酸对照品 3*/ 1-!分别置于 ! 1$容量瓶中!用甲醇溶解
并稀释至刻度!摇匀!制成含乌索酸 #*/0 1- 4 1$ 和齐墩果酸
#*/2 1- 4 1$ 的对照品混合溶液 分别吸取乌索酸和齐墩果
酸对照品混合溶液 !&.###&3##&0## !$ 至 ! 1$ 容量瓶
中!用甲醇定容!配制成含乌索酸 3*2&./*&,2*3&5!*2&..!*
!- 4 1$ 和含齐墩果酸 3*/&./*0&,/*&52*3&..5*0 !- 4 1$ 的标
准系列混合溶液!#*3! !1 微孔滤膜过滤!# !$ 进样! 重复
,次!求其峰面积的平均值得标准曲线
’## 样品预处理及测定精密称取过 # 目筛的陆英药材
*# -!置于圆底烧瓶中!加入 5! 1$ 浓度 /! +乙醇!水浴加
热回流提取 6提取液过滤!定量转移至 .## 1$容量瓶中!
乙醇定容 摇匀后取滤液 1$于离心机(, ### 7 4189$中离心
! 189!取上清液用 #*3! !1 微孔滤膜过滤!得样品溶液% 进
样 #!#测定乌索酸和齐墩果酸峰面积!用外标法计算含量%
! 结果与分析
!( 测定波长的选择和峰纯度检测 取乌索酸和齐墩果酸
对照品混合溶液!在 ./# :!## 91 进行光谱扫描!流动相中
乌索酸最大吸收波长为 #* 91! 齐墩果酸最大吸收波长
为 #,*3 91(图 $!但流动相在短波长处有吸收!为了减少干
扰!又尽量不降低灵敏度!提取不同波长的色谱峰对比!选
择 .# 91 作为检测波长!基线平稳!峰形好$%&%
在乌索酸和齐墩果酸色谱峰顶点& 起始点和终止点分
别进行光谱采集!经归一化及光谱叠加!, 点光谱曲线完全
重合!可判断色谱峰为单一组分吸收峰$’&%
!! 标准曲线 按!(#!测定标准曲线得乌索酸线性回
归方程为)!;.*!<.#!=.*.<.#3!#;#*/// /’齐墩果酸回归
方程为)!;.*,,<.#!=*..<.#3!#;#*/// 5% 表明当乌索酸进
样量在 #*#/0:*,#3 !-! 齐墩果酸进样量在 #*#/2:*,! !-
时!线性关系良好!按 ,倍基线噪音计算得乌索酸检出限为
#*, 1- 4 >!齐墩果酸检出限为 #* 1- 4 >(即 ,$% 对照品和样
品的 ?@>A 谱图见图 ,%
采收期 部位 乌索酸含量 %&’ 齐墩果酸含量 %&’
,月 叶 #*50 #*! #*#/ #*3
茎 #*./ #*, #*#! #*3
根 #*.0 #*! #*#./ #*,
0月 叶 ()’* +)+ ()(%, ()!
茎 ()-.+ ()/ ()(-+ ()0
根 ()++* +)( ()(+, ()!
/月 叶 ()-(/ ()0 ()(-+ ()
茎 ()*!, ()! ()(*0 ()!
根 ()+( ()0 ()(+* (),
.月 叶 #*,. #*3 #*## #*5
茎 #*#, #*! #*#.! #*/
根 #*.! #*3 #*#.# #*0
表 ( 陆英中乌索酸与齐墩果酸含量 +
邹盛勤等 陆英中乌索酸和齐墩果酸动态含量的研究--卷 ’ 期 ’-
!上接第 !#页
! 结论
!#建立了同时测定陆英中乌索酸和齐墩果酸含量的高
效液相色谱定量分析方法! 并利用二极管阵列检测器对乌
索酸和齐墩果酸峰纯度进行了检测 样品经预处理后可直
接进行 $%&’分析! 乌索酸平均回收率为 (()* +!,-. 为
)/ +#!0/$% 齐墩果酸平均回收率为 12)1 +!,-. 为 )3 +
#!0/$&该方法简便’准确’线性范围宽’重现性好!适于各种
含有乌索酸和齐墩果酸药用植物的检测及质量控制
(3$陆英在 !月时地上部分乌索酸含量最高!为最佳采
收期& 此时采收地上部分入药!保留地下根系!既可充分利
用药材资源!也有利于药材来年的生长繁殖&
参考文献
陈武4李开泉4熊筱娟4等)陆英抗肝炎活性成分的研究!5)南昌大
学学报!理科版643((43/73689/:9;)
3 熊筱娟4陈武4李开泉4等)乌索酸防治大鼠实验性肝损伤作用的
研究!5$宜春医专学报43((#*!36839:3;)
* 袁珂4李根林4李俊芝4等)车前草中熊果酸$齐墩果酸的 $%&’ 测
定<5=)中草药41114*(!3681(:1(*)
> 田尚衣4魏春雁 4周道玮 4等)高效液相色谱法测定瑞香狼毒根$
茎$叶$花中 ;42:二羟基香豆素的含量<5=)分析化学43((>4*37368
93;: 9*()
钾含量平均为 );( +!居全市第 * 位!主要集中在第 # 和第
级!分别占 39)*3+’92)>3+& 土壤速效钾含量平均为 //)23
?@ A B@!较罗山稍低!居全市第 * 位!主要分布在 3’*’> 级!
分别占 9)(; +’*;)/( +和 *()*9 +!另外!还有 9 +左右的
烟田土壤速效钾含量在临界值以下!应引起重视&
#$%! 淮滨烟区&该区地貌多为低洼平原地!全钾含量平均
为 )11 +!居全市第 3位!土壤全钾含量全部集中在第 * 和
第 > 级!其中绝大多数集中在 )2 + C 3)> +之间!占 29)9;
+&速效钾含量平均为 2)/ ?@ A B@!居全市烟区的第 位!
其中第 3 和第 * 级所占比例相同!均为 *>)22 +!第 级占
3()1* +!第 级极少!另外约 9)12 +的烟田土壤缺钾&
#&%’ 固始烟区&固始烟区为平原烟区!烟田土壤多为水稻
土& 全钾含量平均 );( +!全部集中在第 * 和第 > 级!分别
占 9)9; +和 2*)** +& 速效钾含量为 /*)(> C 3*()32 ?@ A B@!
平均 3)3 ?@ A B@!是全市土壤速效钾含量最低的烟区& 从
速效钾分级看!% 至 & 级分别占 ()(( +’/)(( +’>()(( +
和 */)(( +!约 ;/ +的土壤速效钾含量在第 和第 & 级!意
即绝大部分烟田土壤速效钾含量处在中偏下和临界值以下
的状态!应引起高度重视&
综上所述! 一方面信阳烟区土壤速效钾含量远高于非
植烟区土壤速效钾含量&其原因)一是烟草施钾量高于其它
作物%二是植烟区土壤一般一年一季!复种指数低于非植烟
区!作物从土壤中吸收的钾相对较少&另一方面信阳烟区土
壤钾素分布因植烟区域不同而有一定差异! 出现这种现象
也有 3个原因)一是成土母质和土壤类型分布的复杂性%二
是不同烟区的种植制度和施肥方式不同&
% 不同类型植烟土壤的钾素含量 信阳市主要植烟土
壤类型为岗坡地和水稻土等! 这些主要土壤类型的速效钾
含量7见表 36与丰缺程度对烟叶生产有重要影响&
由表 3可知! 信阳市植烟土壤速效钾含量岗坡地明显
大于水稻土& 据鲁如坤 <>=研究!土壤速效钾(D3E$含量F((
?@ A B@ 时就有较大可能缺钾& 因此!全市有可能缺钾的烟田
占 > +!而水稻田则高达 *9)2 +!应引起高度重视& 岗坡地
速效钾含量相对丰富! 其中含量大于 (()(( ?@ A ’@ 的占
表 信阳市烤烟主产区主要土壤类型速效钾()*+ 含量
土壤类型
含量范围
?@ A B@
平均值
?@ A B@ 标准差
变异系数
+
各含量范围所占比例!+
F(()( (()(C/()( /()(C3(()( G3(()(
水 稻 土 ;1)3(C33)3( 3;)*; **)9 *)9; *9)2 >;)> /)* ()/
岗 坡 地 32)3C*9*)3( 9*)13 >9)/1 *>) 2)9 31)9 >3)( 1)2
全市平均 32)3C*9*)3( /9)1; >/)29 */)(9 >)( **)( */)( 2)(
1)> +!大于 /()(( ?@ A ’@ 的占 9)2 +&
! 讨论与小结
($ 信阳市烤烟主产区土壤钾素资源因地区和土壤类
型不同而具有不同的特点) !植烟土壤速效钾平均含量远
高于非植烟区耕作土壤速效钾含量!这与烤烟属喜钾作物!
其耕作过程中大量施用钾肥关系较大& 不同烟区和土壤
类型之间供钾水平差异较大& #信阳市烤烟主产区土壤钾
含量并不低!钾肥用量亦呈上升趋势!但烟叶中钾含量并未
显著提高!说明钾的利用率较低&$信阳市烤烟主产区岗坡
地的土壤钾素含量明显高于水稻土! 其中 A * 强的水稻土
速效钾含量在临界值以下(尤其是固始烟区$!应重视适当
补钾!平衡钾素营养&
(3$ 调节土壤供钾能力和改进钾肥施用技术是提高烟
叶钾含量的主要途径&具体措施为)! 合理轮作!增施有机
肥!改善土壤钾素供应能力& 钾肥施用方法应以集中深
施为主!同时积极推广使用造粒钾肥或包衣钾肥& # 钾肥
的基追比例以 ;H* 为好!即将全部钾肥的 ;(+作基肥(底肥
和窝肥$!其余 *( +作追肥于团棵前施用& $ 有研究认为!
当氮 H钾达 H 3后!烟叶中钾的增幅已很小&因此钾肥的适
宜用量应根据土壤供钾情况和信阳市降水量较大’ 钾肥易
淋失的特点科学确定! 不宜盲目提高用量& 建议速效钾
(D3E$含量G/( ?@ A B@ 的烟田施钾量为施氮水平的 3 C 3)/
倍!速效钾(D3E$含量在 (( C /( ?@ A B@ 的烟田施钾量为
施氮水平的 3)/ C * 倍!速效钾(D3E$含量F(( ?@ A B@ 的烟
田施钾量为施氮水平的 * C *)/倍&
参考文献
信阳市史志研究室) 信阳市情3 鲁如坤 )土壤农业化学分析方法社#3((()
* 叶学春#郑义#程道全#等)河南省土壤钾素变化状况与对策<5=)
华北农学报#112#*7专集#%*2:>)
> 鲁如坤 )土壤植物营养学原理和施肥 社#112)
安徽农业科学 %()&年!!!