全 文 ：诃子叶与诃子硬种皮中丹宁反相高效液相色谱分析
丁　岗 , 刘延泽 , 冀春茹
(河南中医学院 ,河南 郑州　 450003)
提要　用反相高效液相色谱 ( RP-HPLC)法对诃子叶、诃子硬种皮中的丹宁成分进行了分析。结果表明二者丹宁含量
均较低 ,其中叶子中诃黎勒酸的含量为 1. 56% ,具有一定的开发利用价值。
关键词　诃子叶 ;　硬种皮 ;　丹宁 ;　 RP-HPLC
中图分类号: R284. 2　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 03-0198-01
Determination of Hydrolyzable Tannins
in the Leaves and Hard Seed Coats of Terminalia chebula Retz. by RP-HPLC
DIN G Gang , L IU Yan-ze, JI Chun-ru
(Department of Phytochemistry , Henan College of
Traditional Chinese Medicine , Zhengzhou 450003, China)
Abstract　Quantitativ e analy sis of hydro ly zable tannins in the leaves and hard seed coa ts o f Terminalia chebula was
car ried out by using RP-HPLC method. The cont ents o f hydroly zable tannins in both o f th em w ere low , but the
leaves o f Terminalia chebula show ed some utilizing va lue by its higher content of chebulagic acid ( 1. 56% )。
Key words　 Terminalia chebula leav es;　 Hard seed coats;　 Hydroly zable tannins;　 RP-HPLC
　　诃子为使君子科植物诃子 Terminalia chebula Ret z.及其变种
绒毛诃子 ( T . chebula Retz. var . tomentella Kurz)的干燥成熟果
实 ,是一味临床应用广泛的收涩药 ,富含丹宁。 诃子叶具有与诃子
相似的功效 ,而诃子硬种皮多弃去不用 [1]。 我们曾利用 RP-HPLC
法对不同来源诃子中的主要有效成分诃子酸 ( chebulinic acid)等
进行了分析比较 (《中国中药杂志》待发表 )。 为进一步了解诃子叶
和诃子硬种皮的应用价值 ,充分利用诃子植物资源 ,本文报道诃子
叶和诃子硬种皮中丹宁成分的 RP-HPLC分析。
1　仪器、药品和试剂
Waters高效液相色谱仪 ,包括 Water s 510型泵 , Wa ters 486
检测器 , Rheodyne 7725 i /20μl手动进样阀 , Wa ters PC-800色谱
工作站。
组织破碎提取器 (河南中医学院等研制 ) [2] , JL-120型超声波
清洗器 (上海金棋实业公司 ) , RE-52C旋转蒸发器 (上海亚荣生化
收稿日期: 1999-09-07;　修订日期: 1999-12-03
基金项目:国家“九五”攻关项目 “中药材质量标准的规范化研究 -
诃子”
作者简介:丁　岗 ( 1967-) ,男 (汉族 ) ,江西省吉安市人 ,现任河南
中医学院植化教研室讲师 ,硕士学位 .
丹皮酚对照品 ,按含量测定项下测定样品中丹皮酚的含量 ,计算回
收率 ,结果平均回收率为 98. 85% , n = 5, RSD= 1. 2%。 本法具
有较好的回收率。
表 1　牡丹皮不同收期丹皮酚的含量测定结果 (% )
采收日期 丹皮酚含量
1 2 3
平均含量 RSD
01- 15 1. 428 1. 438 1. 444 1. 437 1. 18
02- 15 1. 665 1. 690 1. 675 1. 677 1. 61
03- 13 1. 852 1. 890 1. 875 1. 872 2. 19
04- 15 2. 012 2. 035 2. 041 2. 029 2. 67
05- 12 2. 465 2. 471 2. 458 2. 465 0. 53
06- 15 2. 605 2. 616 2. 620 2. 614 0. 65
07- 16 2. 050 2. 068 2. 048 2. 055 1. 22
08- 15 2. 100 2. 118 2. 112 2. 110 1. 00
09- 14 2. 534 2. 535 2. 558 2. 542 1. 22
10- 18 2. 362 2. 382 2. 376 2. 373 0. 97
11- 15 1. 766 1. 795 1. 783 1. 781 2. 30
12- 15 1. 422 1. 409 1. 418 1. 416 1. 62
2. 6　样品的测定:取本品 0. 5 g ,置 100 ml的量瓶中 ,加入甲醇 ,
超声波处理 30 min,稀释至刻度 ,作为供试品溶液。分别吸取对照
品溶液与供试品溶液各 10μl按上述的色谱条件测定 ,计算丹皮
酚的含量 ,测定结果见表 1。
3　讨论
3. 1　因不同株植物同一采收期的含量有所差异 ,实验采用同一株
牡丹采样 ,以减少实验误差。
3. 2　实验结果显示 ,不同采收期牡丹皮中丹皮酚的含量以开花期
最高 ,随后逐渐减少 , 7月份后开始又逐渐回升 , 9月份出现一个高
峰后又逐渐下降。
3. 3　实验结果显示 ,牡丹皮中丹皮酚含量在九十月份的含量较
高 ,与《中国药典》 1995年版规定秋季采挖是一致的。
参考文献:
1　房杏春 .反相高效液相色谱法测量丹皮酚含量 [ J ].中国药科大学学报 ,
1989, 20( 2)∶ 109～ 111
198
时珍国医国药 2000年第 11卷第 3期 LISHIZHEN M EDICIN E AND MA TERIA M EDICA RESEA RCH 2000 VO L. 11 NO. 3　
仙人掌茎粗多糖提取与总糖含量测定
靳丹虹 , 纪耀华 , 崔玉辉 , 李淑惠
(长春医学高等专科学校 ,吉林 长春　 130031)
提要　采用硫酸 -苯酚比色法 ,测定仙人掌茎粗多糖中总糖含量。以阿拉伯糖为标准品 ,测定波长为 482 nm。仙人掌
茎粗多糖提取收率为 0. 913% ,总糖含量 40. 66%。
关键词　仙人掌 ;　粗多糖 ;　比色法 ;　含量测定
中图分类号: R284. 2　　文献标识码: A　　文章编号: 1008-0805( 2000) 03-0199-01
　　仙人掌粗多糖系从仙人掌科植物仙人掌 Opuntia dillenii
Haw.的新鲜植物茎中提取的蛋白多糖。仙人掌作为药用已有悠久
历史 ,具有行气活血、清热解毒功能 [1]。化学成分研究证明 ,其同属
植物中含有酪胺类等几十种生物碱 [2 ]。 另有人从仙人掌果实中离
析出阿拉伯半乳糖等多糖成分 [3]。 但有关仙人掌茎粗多糖的化学
研究尚未见报道。我们从仙人掌茎中提得粗多糖 ,经药理研究证明
收稿日期: 1999-09-14;　修订日期: 1999-11-13
作者简介:靳丹虹 ( 1965-) ,女 (汉族 ) ,吉林省通化市人 ,现任长春
医学高等专科学校药学系讲师 ,学士学位 .
仪器厂 )。
3种对照品 (Ⅰ ～ Ⅲ )及 co rilag in(Ⅳ )均为作者从诃子药材中
提取、分离并经光谱鉴定。 HPLC法检测纯度均在 95%以上。
诃子叶由刘延泽教授于 1997-11采自云南景洪产绒毛诃子
T . chebula Ret z. var. tomentella Kurz ;诃子硬种皮取自 1996-11
于广西南宁所采诃子 T . chebula。
蒸馏水 ,重蒸馏水 ,甲醇 (分析醇、色谱纯 ) ,丙酮 (分析纯 ) ,冰
醋酸 (分析纯 )。 所有色谱用试剂均经 0. 45μm微孔滤膜过滤。 柱
层析用吸附剂 Toyopear HW-40( C)为日本 Tosoh公司产品。
2　含量测定
2. 1　色谱条件:色谱 Nov Pak C18 ( 3. 9 mm× 150 mm, 4μm) ,带前
置保护柱 ;流动相为甲醇 -2%冰醋酸水溶液 ( 27∶ 73, V /V ) ;柱温
30℃ ;流速 1 ml /min;检测波长: 280 nm。
2. 2　样品液的制备: 准确称取样品干燥粗粉 1 g ,置于高 17 cm、
直径 5. 5 cm的玻璃杯中 ,用 70%丙酮 ( 150 ml× 3)室温组织破碎
提取 3次 ( 20 s /次 ) ,提取液减压抽滤 ,杂质用少量 70%丙酮冲洗 3
次 ,滤液合并 ,置于 500 ml容量瓶中用 70%丙酮定容 ,从中精密吸
取 100 ml,于 60℃减压浓缩至 5 ml,上 Toyopea rl HW-40柱 ( 1
cm, L 20 cm ,吸附剂高 10 cm )进行低压柱层析 ,依次用蒸馏水 50
ml, 5%甲醇 50 ml洗脱除去杂质 ,然后用甲醇 -丙酮 -水 ( 6∶ 2∶ 2)
300 ml洗脱 (至洗脱液 FeCl3-铁氰化钾薄层显色反应为阴性 ) ,所
得洗脱液于 60℃减压浓缩至干 ,用甲醇 (色谱纯 )溶解并定容于 5
ml容量瓶中 ,经 0. 45μm 微孔滤膜过滤 ,取续滤液 5～ 10μl进行
HPLC分析。如果浓度超出或低于标准曲线的范围 ,则相应稀释或
浓缩至一定体积后 ,再进行分析。
2. 3　样品分析:取样品液 10μl进样分析 ,分别用外标两点法计算
Ⅰ ～ Ⅲ的含量 ,结果见表 1,色谱图见图 1。
表 1　诃子叶、诃子硬种皮中 3种可水解丹宁的含量 (% )
样品 含　量Ⅰ Ⅱ Ⅲ
叶 0. 12 1. 56 +
硬种皮 0. 14 0. 34 0. 17
图 1　对照品Ⅰ ～ Ⅳ ( A) ,诃子叶 ( B)和诃子硬种皮 ( C)的 HPLC图
Ⅰ .诃子酸 ( tR = 10. 38 min ) ;　Ⅱ .诃黎勒酸 ( tR = 3. 23 min) ;　Ⅲ . 1, 3,
6-三 - O- 没食子酰基葡萄糖 ( tR = 2. 01 min) ;　Ⅳ . cori lagin( tR = 2.
27 min )
3　讨论
3. 1　诃子叶中诃子酸 (Ⅰ )、 1, 3, 6-三-O-没食子酰基葡萄糖 ( 1, 3,
6-t ri-O-galloy l-β-D-g luco se, Ⅲ ) 的 含 量 较 低 , 而 诃 黎 勒 酸
( chebulagic acid,Ⅱ )含量为 1. 56% ,有一定的利用价值。
3. 2　硬种皮中Ⅰ ～ Ⅲ的总含量只有 0. 65% ,因此诃子入药时弃
去硬种皮 (即果核 )是合理的。
参考文献:
[1 ]　江苏新医学院 .中药大辞典 (上册 ) [M ].上海:上海人民出版社 , 1977
∶ 1174
[2 ]　韩建海 ,章　琛 ,袁　珂 ,等 .一种用于高速硬组织捣碎的破碎刀具
[ P] .中国专利: 94244358. 6, 1994
199
LISHIZHEN M EDICIN E AND M ATERIAM EDICA RESEARCH2000 V OL. 11 NO. 3 时珍国医国药 2000年第 11卷第 3期