全 文 ：广西藤茶中双氢杨梅树皮素保肝作用的实验研究
钟正贤　周桂芬　陈学芬　覃洁萍1
(广西中医药研究所·南宁 530022　1 广西中医学院·南宁 530006)
摘　要　目的:研究广西藤茶中双氢杨梅树皮素的保肝作用。方法:采用四氯化碳 、D-半乳糖胺和异硫氰酸
萘酯致小鼠急性肝损伤模型 ,观察双氢杨梅树皮素对肝损伤的保护作用;采用小鼠单核巨噬细胞吞噬作用和免
疫低下小鼠溶血素生成试验 ,观察双氢杨梅树皮素的免疫增强作用。结果:双氢杨梅树皮素能明显降低四氯化
碳 、D-半乳糖胺和异硫氰酸萘酯致小鼠急性肝损伤模型血清中 ALT、AST 活性和 T-BIL 含量 , 减轻肝组织的
变性和坏死;并提高单核巨噬细胞吞噬功能和溶血素含量。结论:双氢杨梅树皮素具有保肝降酶退黄 , 提高免
疫功能作用。
主题词　肝炎/中医药疗法　@广西藤茶/治疗应用　@双氢杨梅树皮素/治疗应用　吞噬功能　溶血素/免疫
学　小鼠
　　广西藤茶系葡萄科蛇葡萄植物显齿蛇葡萄[ Ampelopsis
grossedntata(Hand-Mazz)W.T.Wang] 的茎叶 , 其性味甘淡 ,
具有清热解毒功效 , 主治黄疸型肝炎 , 感冒风热 , 咽喉肿
痛[ 1 , 2] 。双氢杨梅树皮素(dihydromyricetin)为黄酮类化合物 ,
是从广西藤茶茎叶中提取的藤茶总黄酮的有效成分之一[ 3] 。
前文已报道 , 双氢杨梅树皮素具有止咳 、祛痰和降血糖作
用[ 4 , 5] 。前人的研究也证明 , 黄酮类化合物对心血管 、呼吸 、
消化等系统具有广泛的生理活性[ 6] 。为此 , 本文试图寻找抗
肝炎药物 ,对双氢杨梅树皮素进行了保肝作用的实验研究。
1　实验材料
1.1　药物及试剂　双氢杨梅树皮素(DMYR)为微黄粉末结
晶 ,由广西中医学院药学系提供。使用时加数滴吐温-80研
磨成乳浊液供实验用。联苯双酯 ,北京协和药厂产品。盐酸
左旋咪唑片 , 桂林制药厂产品。 D-半乳糖胺 , Sigma 公司产
品。异硫氰酸萘酯 , Sigma 公司产品。丙氨酸氨基转移酶
(ALT), 天冬氨酸氨基转移酶(AST), 总胆红素(T-BIL)等试
剂盒均为上海荣盛生物技术有限公司产品。
1.2　动物　昆明种小鼠 ,体重 23 ～ 25g , 雄性 , 由广西医科大
学实验动物中心提供。
2　方法与结果
2.1　对小鼠四氯化碳(CCL4)致急性肝损伤的保护作用[ 7]
　　取小鼠 50 只 ,分为 5 组。设对照组 , CCL4模型组 , 联苯
双酯(0.1g/kg)组 , DMYR 大小剂量(0.1g/kg 和 0.05g/ kg)组。
用药组每 d ig 给药 1 次 , 对照组和模型组给予等体积蒸馏
水 ,连续 7d。末次给药约 10h , 除对照组外 , 其他各组小鼠
ip0.1%CCL4 液体石蜡油溶液 10ml/ kg , 同时禁食 ,自由饮水。
16h后由眼眶静脉丛取血 , 分离血清 , 采用试剂盒测定血清
ALT、AST和 T-BIL , 并取肝组织按常规作病理学检查 , 结果
见表 1。
2.2　对 D-半乳糖胺(D-Gla)致小鼠急性肝损伤的保护作
用[ 7] 　取小鼠 50只 , 分组及给药见表 2 , 连续用药 8d。末次
给药 1h 后 , 除空白对照组外 , 其他各组腹腔注射 D-Gla
650mg/ kg , 20h 后 , 摘除小鼠眼球取血 , 分离血清 , 按试剂盒方
法测定 ALT、AST和 T-BIL , 并取肝组织按常规作病理学检
查 , 结果见表 2。
表 1 DMYR对小鼠 CCL4 致急性肝损伤的保护作用(n=10 , x±s)
组别　　
剂量　
(g/kg)　 ALT(u)　　　 AST(u)　　　 T-BIL(μmol/ L)　
对照组 - 24.3±7.3＊＊＊ 122.6±25.3＊＊＊ 2.51±1.18＊＊
模型组 - 203.0±18.3 259.5±33.6 6.01±1.91
联苯双酯 0.1 126.5±54.1＊＊ 212.3±52.4＊ 4.65±2.83
DMYR 0.1 166.6±36.7＊ 202.5±33.6＊＊ 4.86±2.56
DMYR 0.05 180.3±35.8＊ 216.4±35.5＊ 4.35±2.31
　　与模型组比较＊P<0.05, ＊＊P<0.01 , ＊＊＊P<0.001(下同)
表 2　DMYR对 D-Gla致小鼠急性肝损伤的保护作用(n=10 , x±s)
组别　　 剂量　
(g/kg)　
ALT(u)　　　 AST(u)　　　 T-BIL(μmol/ L)　
对照组 - 25.6±6.4＊＊＊ 121.6±22.2＊＊＊ 2.43±1.21＊＊＊
模型组 - 232.2±22.8 252.6±17.7 6.15±3.81
联苯双酯 0.1 60.2±39.5＊＊＊ 215.4±47.6＊ 2.60±2.36＊＊
DMYR 0.1 185.6±37.5＊ 210.2±26.3＊ 2.56±1.39＊＊
DMYR 0.05 205.5±29.8＊＊ 225.6±32.2＊ 3.26±2.44＊
2.3　退黄试验　取小鼠 50 只 ,分组和用药剂量同 2.1 , 连续
ig 给药 6d , 第 7d 除对照组外 , 其余各组 ig 0.6%异硫氰酸萘
酯(ANIT , 90mg/kg)中毒 , 中毒后继续给药 2d , 模型组和对照
组给予同体积蒸馏水。各组于中毒 48h 后摘眼球血 , 分离血
清 , 按上述方法测定 ALT和 T-BIL, 结果见表 3。
表 3 DMYR对小鼠 ANIT 致急性肝损伤的保护作用( x±s)
组别　 剂量(g/kg)
动物数
(只) ALT(u)　　　　 T-BIL(μmol/L)　
对照组 - 10 23.4±5.8＊＊＊ 2.34±1.16＊＊＊
模型组 - 10 428.4±46.3 119.74±23.16
联苯双酯 0.1 10 158.0±73.4＊＊＊ 87.80±25.68＊＊
DMYR 0.1 10 320.4±85.3＊ 62.45±40.05＊＊
DMYR 0.05 10 364.2±57.3＊ 88.35±36.52＊＊
2.4　对单核巨噬细胞吞噬功能的影响　取小鼠 40 只 , 分组
及给药见表 4。连续 ig 给药 7d ,末次给药 1h 后 , 于尾静脉注
入印度墨汁 0.1ml/10g体重 , 分别在注射后 2min 和 10min , 从
·155·2002年第 9 卷第 3 期 中国中医药科技　　　　　　　　
眼眶静脉丛取血 20μl , 置于 2.0ml 0.1%Na2CO3 溶液中摇匀 ,
722 型分光光度计 600nm 处比色测定 OD值 , 按公式:K=lo-
gOD1-logOD2/ t1-t2计算吞噬指数 K值 ,结果见表 4。
表 4 DMYR对单核巨噬细胞吞噬功能的影响( x±s)
组别　　 剂量(g/ kg)
动物数
(只) 吞噬指数K 值　
对照组 　- 10 0.031±0.009
左旋咪唑 　0.05 10 0.052±0.008＊
DMYR 　0.1 10 0.046±0.007＊
DMYR 　0.05 10 0.034±0.006
　　与对照组比较＊P<0.05
2.5　对免疫功能低下小鼠溶血素生成的影响[ 9] 　取小鼠 50
只 ,分组及给药见表 5。连续 ig 给药 10d , 第 5d 每鼠 ip5%鸡
血红细胞混悬液 0.2ml/只 , 同时 ,除正常对照组外 , 其他 5 组
均皮下注射环磷酰胺(CY)20mg/kg1 次。免疫第 4d 后 , 摘除
眼球取血 ,测定各组血清溶血素(OD)值 , 结果见表 5。
表 5 DMYR对免疫功能低下小鼠溶血素生成的影响
组别　　　 剂量(g/ kg)
动物数
(只)
溶血素　　
(OD , x±s)　
对照组 - 10 0.344±0.109＊＊
环磷酰胺(cy) - 10 0.297±0.113
左旋咪唑+cy 0.05 10 0.423±0.070＊＊
DMYR+cy 0.1 10 0.417±0.107＊
DMYR+cy 0.05 10 0.398±0.082＊
　　与环磷酰胺比较＊P<0.05 , ＊＊P<0.01
3　讨论　现代医学认为 , CCL4进入肝细胞后 , 经还原活化产
生自由基 ,通过脂质过氧化物的破坏 ,使线粒体膜脂质溶解 ,
影响线粒体结构和功能 ,使酶蛋白合成减少 , 造成酶的破坏 ,
因而影响代谢功能和能量的生成 ,致使肝细胞变性坏死。而
D-Gla为肝细胞的磷酸嘧啶核苷的干扰剂 , 可造成肝弥漫性
坏死和炎症 , 与临床病毒性肝炎的肝脏病理变化极为相
似[ 9] 。DMYR大小剂量组均能显著地抑制 CCL4和 D-Gla所
致急性肝损伤小鼠血清中 ALT、AST 和 T-BIL的升高 , 减轻
肝组织的病理损害程度 ,其改善肝功能可能与抗氧化作用有
关[ 10] 。 ANIT 主要是损害肝内胆管上皮细胞 , 产生胆汁郁积
性黄疸 , 出现高胆红素症和胆汁分泌减少 ,因此 ,治疗黄疸与
胆汁的排泄 , 尤其是与胆红素排泄有着密切的关系 , DMYR
能降低ANIT所致胆红素和 ALT 的升高 ,显示有一定的退黄
作用 。
另外 , DMYR可促进单核巨噬细胞的吞噬作用和提高溶
血素含量 ,显示其可增强小鼠非特异性免疫功能和免疫功能
低下小鼠体液免疫功能 , 因而起到保肝作用。 以上结果为
DMYR的临床应用提供了有力的科学依据。
(国家中医药管理局中医药科学技术研究基金资助项
目 , 国中医药科 00-O1L(M);广西青年科学基金资助项目 ,
桂科青0007025)
　　参考文献
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版社 , 1997;788
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1974:203
3　覃洁萍 ,许学健 ,李剑江.广西瑶族藤茶化学成份的研究.天然
产物研究与开发 1997;9(4):41
4　钟正贤 ,覃洁萍 ,周桂芬,等.广西瑶族藤茶中双氢杨梅树皮素的
药理研究.中国民族医药杂志 1998;7(3):42
5　钟正贤 ,覃洁萍 ,陈学芬,等.双氢杨梅树皮素对链脲霉素所致糖
尿病大鼠的降血糖作用.广西科学 2000;7(3):203
6　韩公羽 ,沈企华 ,编著.植物药有效成分的研究与开发.杭州:杭
州大学出版社 ,1991:94～ 102
7　郭建生 ,吴勇军 ,王小娟,等.摄生肝泰胶囊对肝损伤动物治疗作
用的实验研究.中药新药与临床药理 1999;10(2):87
8　施顺清 ,任建伟 ,李健 ,等.虎杖 、小田基黄煎剂的动物实验.中
成药研究 1983;6:36
9　李仪奎.中药药理实验方法学.上海:上海科学技术出版社 ,
1999:158～ 463
10　钟正贤 ,陈学芬 , 周桂芬.广西产藤茶总黄酮的药理研究.广西
科学 1999;6(3):216
(收稿:2001-06-02)
运 脾 止 痛 汤 治 疗 小 儿 功 能 性 再 发 性 腹 痛 4 8 例
徐凤琴　吴　茜　(黑龙江中医药大学·哈尔滨 150040)
1　一般资料　本组 48例均为门诊患儿 ,其中男 26例 ,女 22例;年龄
最小者 2.5岁 ,最大者 11岁;病程最短者半年 , 最长者 3年。诊断标
准:①小儿突然发作阵发性腹痛 ,以脐周围疼痛为主 , 过去有同样发
作史。 ②每次发作时间长短不一 ,从数分钟到数十分钟 ,时痛时止。
③疼痛程度轻 、重不等 ,发作时全腹触痛 , 间歇时腹部柔软 , 未见异
常。 ④排除器质性病变。
2　治疗方法　白术 10g 、白芍 10g 、党参 15g、桂枝 7.5g、干姜 5g 、陈皮
7.5g 、焦楂 10g 、香附 10g 、大枣 5枚 、甘草 7.5g ,每 d1剂 , 水煎分 3～ 4
次口服 , 7d为 1个疗程 ,以 2个疗程为限。
3　治疗结果
3.1　疗效标准　治愈:腹痛消失 ,半年内无复发;有效:腹痛消失或
明显减轻 ,但时有复发;无效:腹痛未见减轻。
3.2　治疗结果　本组病例治愈 27例 ,有效 17例 , 无效 4例 , 总有效
率 92%。
4　体会　小儿功能性再发性腹痛 ,是以脾胃运化功能失常为主要病
机。小儿脏腑娇嫩 、形气未充 , 脾胃薄弱 、经脉未盛。易为内外因素
所干扰。多数小儿喜食生冷 ,感受寒邪 ,久致脾胃虚寒 , 运化无力 ,中
焦受阻 ,不通则痛。方中白术 、党参健脾益气。桂枝 、干姜温通经脉。
白芍和营敛阴 ,缓急止痛。陈皮 、焦楂理气开胃 ,香附行气止痛。甘
草 、大枣温中止痛 ,全方共奏温运脾阳 、散寒止痛之功。脾阳得以温
运而腹痛自止。在治疗期间 ,嘱患儿调节饮食 ,忌食生冷 ,加强锻炼 ,
以防复发。 (收稿:2001-08-01)
·156· 　　　　　　　　中国中医药科技 2002 年第 9卷第 3 期
can accelerate the grastrointestinal movement of the patients with slow gastrointestinal motion , apparently stimulate action on defecation.
Conclusion:The therapeutic efficiency of this method in the treatment of gastrointestinal disturbance after abdominal operation is apparent and
safe.
EFFECT OF TONGMAI I ON THE PROLIFERATION OF VASCULAR SMOOTH
MUSCLE CELL IN SPONTANEOUSLY HYPERTENSIVE RATS
Zhang Yong-feng ,et al
(Shenzhen Red Cross Hospital , Shenzhen 518035)
Objective:To study the effect of tongmai I , a compound prescription of Chinese herbs , on proliferation of vascular smooth muscle cell in SHR.
Method:Observing the effect of tongmai I on the growth , proliferation and ultrastruction of VSMC by [ 3H] thymidine incorporation , electronic mi-
croscopy and cell count methcds.
Result:Tongmai I could significantly decrease the 3H TdR incorporation of VSMC , inhibit the growth of VSMC and promote the changes of ultra-
structure of VSMC in SHR.
Conclusion:Tongmai I could inhibit the proliferation of VSMC
EFFECT OF BUSHEN INFUSION ON LIPOMETABOLISM AND CONTENT
OF NO OF RABBIT WITHMESPGN
Jia Xiu-qin ,et al
(The Second People s Hospital of Shenzhen City , Shenzhen 518035)
　　Objective:To investigate the effects of bushen infusion on the levels of blood-lipid(serum total cholesterol/ TC , triglyceride/TG , low density
lipoprotein cholesterol/ LDL , high density lipoprotein/HDL), renal and serum nitric oxide(NO)amounts in rabbit with mesangial proliferative glomeru-
lonephritis(MesPGN).
Methods:Changes of indexes , including qualitative examination of urinary protein in 24 hour, renal function(urea nitrogen/BUN , plasma creati-
nine/ Scr), the levels of blood-lipid , renal and serum NO amounts , and morphological observation ,were observed.
Results:Bushen infusion could reduce the quantity of urinary protein obviously , increase the amounts of renal and serum NO , and decrease the
levers of TG and LDL(at 8 week).The pathologic changes were abated significantly in the rabbits feeded by Bushen infusion.
Conclusion:Bushen infusion may be helpful for preventing the development of MesPGN.
EXPERIMENTAL STUDY ON THE PROTECTIVE EFFECT OF DIHYDROMYRICETIN
FROM GUANGXI AMPELOPSIS GROSSEPENTATA ON LIVER
Zhong Zheng-xian ,et al
(Guangxi Institute of Traditional Chinese Medical and Pharmaceutical Sciences , Nanning 530022)
　　Objective:To study the protective effect of dihydromyricetin form Guangxi ampelopsis grossepentate(DMYR)on liver.
Method:Mouse model with acute liver injury were induced by CCl4 , D-Gla and ANIT , Observing the protecting liver , and the immunoehance-
ment of DMYR by assay of mononuclear macrophage phagoytosis and hemolysin formation in mouse with immunodecreasment.
Results:DMYR could significantly reduced ALT、AST activities and T-BIL contents in serum of acute liver injury models induced by CCl4 , D-
Gla and ANIT, lightening denaturation and necrosis of liver tissue , and increasing mononuclear macrophage phagocytosis and hemolysin contents.
Conclusion:DMYR could protecte liver , redue enzyme activity , eliminating jaundice and increasing immunological function.