全 文 ：地肤子皂苷抗变态反应作用及其量效关系的研究
刘建萍 1, 2 , 刘仲华 1 , 由宝昌2 , 陈　暄 3 , 黎星辉 1, 3
(1.湖南农业大学 /茶学教育部重点实验室 ,湖南长沙 410128;2.中国农业大学烟台校区 ,山东烟台 264670;
3.南京农业大学中药材研究所 ,江苏南京 210095)
　　摘要:4-AP致小鼠过敏性皮肤瘙痒模型和组胺致小鼠足肿胀试验 , 结果表明 ,地肤子总皂苷抗 4-AP致小
鼠过敏性皮肤瘙痒和组胺所致小鼠足肿胀 , 地肤子皂苷 32 mg/kg剂量表现出药效 , 随着灌胃剂量的增大 ,其抗变
态反应作用也逐步增大 , 150mg/kg剂量几近完全抑制变态反应。地肤子总皂苷抑制速发型变态反应 , 其作用机
制可能与稳定肥大细胞膜 、减少组胺的释放及对抗过敏介质的致炎作用有关 ,而且其抗变态反应作用具有量效关
系 , 32 mg/kg为其有效阈剂量 , 150mg/kg为其良效剂量。
　　关键词:地肤子皂苷;抗变态反应作用;量效关系;速发型变态反应
　　中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1302(2007)05-0177-02
收稿日期:2007-04-18
基金项目:国家科技支撑计划项目(编号:2006BAD06B01);湖南省
重点科技项目(编号:02NKY2002)。
作者简介:刘建萍(1962—),女 , 山东烟台人 , 副教授 , 博士生 , 主要
从事植物组培及天然产物化学的研究。
通讯作者:黎星辉。 Tel:(025)84395182;E-mail:lxhhqw@ 126.
com。
　　地肤子为藜科一年生草本植物地肤 [ Kochia
scoparia(L.)Schrad]的果实 ,具有清热利湿 、祛风
止痒 、利尿等功效 。其药理作用研究表明 ,地肤子水
提物有抑制单核巨噬系统的吞噬功能及迟发型超敏
反应(DTH),其抑制 DTH的作用机制可能与它对单
核巨噬系统的吞噬功能的抑制有关 [ 1] 。 70%醇提
物浓度依赖性抑制大鼠腹腔肥大细胞释放组胺 ,对
5-HT所致豚鼠回肠收缩亦具有一定的抑制作用 。
地肤子醇提物及其总皂苷均能抑制 DTH效应相的
早期和后期反应 ,且对早期反应的作用强于对后期
反应[ 2] 。本试验通过 4 -AP致小鼠过敏性皮肤瘙
痒模型和组胺致小鼠足肿胀试验 ,进一步研究地肤
子皂苷抗变态反应的药理作用 ,并对地肤子总皂苷
的量效关系进行探索 ,找出抗变态反应作用的有效
阈剂量和良效剂量 ,为地肤子皂苷的研发利用奠定
基础。
1　材料与方法
1.1　试验材料 、试剂及仪器
材料:地肤子购自亳州市凯利中药饮片有限公
司 ,经山东中医药专科学校药植鉴定教研室鉴定 。
动物:昆明种小鼠 ,雌雄各半 ,体重 14±2 g/只 ,购自
烟台大学药学院实验动物室 。试剂:95%乙醇 、正丁
醇 、石油醚 、4-氨基吡啶(4-AP),均为分析纯;组
胺(上海蓝季科技发展有限公司),批号为 070106;
马来酸氯苯那敏片(山东省莒南制药厂),批号为
000004。仪器:旋转浓缩仪 (上海亚荣生化仪器
厂)、AB2O4 B型电子分析天平(瑞士梅特勒公司)、
上海比信能超声波清洗器 、千分卡尺。
1.2　试验方法
1.2.1　地肤子总皂苷的制备　地肤子粗粉分别用
95%和 70%乙醇各回流提取 2次 ,每次 4 h。提取
液 3 000r/min离心 15 min,上清液减压浓缩至无醇
味。加入适量蒸馏水 ,于 10 ℃下放置 24 h, 再以
3 000r/min离心 15 min,上清液用石油醚萃取脱脂
后 ,用水饱和正丁醇萃取 ,回收正丁醇得总皂苷。
1.2.2　小鼠过敏性皮肤瘙痒试验[ 3] 　小鼠 60只 ,
雌雄各半 ,体重 14±2 g/只 ,随机分为 6组 ,每组 10
只。禁食 4 h后按以下组分别灌胃给药 0.2ml:(1)
空白对照组 ,双蒸水;(2)极低剂量组 , 1.5 mg/kg皂
苷溶液;(3)低剂量组 , 2.25mg/kg皂苷溶液;(4)中
低剂量组 , 3 mg/kg皂苷溶液;(5)中剂量组 , 7
mg/kg皂苷溶液;(6)高剂量组 , 10.5 mg/kg皂苷溶
液。灌胃 1 h后在小鼠背部一侧皮下注射 0.2
mg/kg的 4-氨基吡啶(4-AP)溶液 ,每只小鼠注射
0.1 ml。立即以秒表计时 , 分别记录每只小鼠 10
min内扭头舔给药部位的次数 (以连续舔体至出现
短暂停顿 ,作舔体 1次计算),试验数据进行 t测验。
舔体次数比空白对照组显著减少则有药效 ,舔体次
—177—江苏农业科学　2007年第 5期DOI :10.15889/j.issn.1002-1302.2007.05.073
数越少则药效越强 ,根据不同组的舔体次数考察地
肤子总皂苷抗过敏的剂量药效关系。
1.2.3　组胺致小鼠足肿胀试验　小鼠 60只 ,雌雄
各半 ,体重 14±2 g/只 ,随机分为 6组 ,每组 10只 。
禁食 4h后按以下组分别灌胃给药 0.2 ml:(1)空白
对照组 ,双蒸水;(2)低剂量组 , 2.25 mg/kg的皂苷
溶液;(3)中低剂量组 , 3 mg/kg的皂苷溶液;(4)中
剂量组 , 7 mg/kg的皂苷溶液;(5)高剂量组 , 10.5
mg/kg的皂苷溶液;(6)氯苯那敏阳性对照组 , 0.28
mg/kg的氯苯那敏溶液 。灌胃 1 h后 ,小鼠右后跖
皮下注射(SC)0.25mg/kg的组胺生理盐水溶液 20
μl,分别于注射前及注射后 15min、60 min用千分卡
尺测定小鼠右后跖的厚度 ,以组胺注射前后的厚度
差表示肿胀度 ,试验数据进行 t测验 。
2　结果与分析
2.1　地肤子总皂苷抗 4-AP致过敏性皮肤瘙痒
作用
以小鼠过敏性皮肤瘙痒模型对不同剂量地肤子
皂苷进行药效试验 ,结果见表 1。
表 1　不同剂量的地肤子总皂苷抗 4-AP致过敏性皮肤瘙痒作用
组别 供试小鼠(只) 剂量(mg/kg) 舔体次数(x±s)
空白对照组 10 — 38.90±5.69
极低剂量组 10 21 36.40±5.58
低剂量组 10 32 27.90±5.10＊＊
中低剂量组 10 46 19.30±6.75＊＊
中剂量组 10 100 10.70±6.43＊＊
高剂量组 10 150 1.80±2.49＊＊
　　注:＊＊表示 P<0.01(与空白对照组比较)。
　　由表 1可见 ,极低剂量组小鼠舔体次数与空白
对照组没有显著差别 ,说明地肤子皂苷 21 mg/kg的
剂量未能表现出药效 。低剂量组 、中低剂量组 、中剂
量组 、高剂量组小鼠的舔体次数与空白对照组相比 ,
均有极显著的差别 ,并且舔体次数依次减少 ,说明
32 mg/kg剂量的总皂苷是抗过敏性瘙痒作用的有
效阈剂量。随着灌胃剂量的增大 ,抗过敏性瘙痒作
用也逐步增大。高剂量组小鼠的平均舔体次数接近
0,说明 150 mg/kg的灌胃剂量几乎达到了完全抗过
敏性瘙痒作用。
2.2　地肤子总皂苷抗组胺致小鼠足肿胀作用 [ 4]
以组胺致小鼠足肿胀模型对不同剂量地肤子总
皂苷进行药效试验 ,结果见表 2。
　　从表 2看出 ,地肤子总皂苷抗组胺所致小鼠足
肿胀 ,与空白对照组比较 ,低剂量组小鼠注射组胺
表 2　不同剂量的地肤子总皂苷对组胺致
小鼠足肿胀的影响(x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg)
足肿胀度(10-2 mm)
15min 60min
空白对照组 — 98.9±7.7 55.4±7.41
低剂量组 32 68.9±15.72＊＊ 43.5±9.7＊
中低剂量组 46 65.5±8.7＊＊ 34.4±12.5＊＊
中剂量组 100 52.9±7.3＊＊ 25.6±7.1＊＊
高剂量组 150 33.2±14.9＊＊ 7.9±8.9＊＊
氯苯那敏组 4 42.4±10.3＊＊ 20.9±6.2＊＊
　　注:＊表示P<0.05;＊＊表示 P<0.01(与空白对照组比较)。
15min后足肿胀度极显著减小 , 60min后显著减小;
中低剂量组到高剂量组小鼠注射组胺 15、 60 min
后 ,足肿胀度均极显著减小。随着皂苷灌胃剂量的
增大 ,其抑制足肿胀作用逐步增大 ,高剂量组小鼠注
射组胺后 ,足肿胀比氯苯那敏组程度轻 , 60min后肿
胀度很小 ,显示地肤子皂苷 150 mg/kg剂量几乎达
到完全抑制足肿胀作用 。这一试验结果与总皂苷抗
4-AP致过敏性皮肤瘙痒作用的试验结果 ,都说明
了地肤子总皂苷的抗过敏作用具有量效关系 , 32
mg/kg为其有效阈剂量 , 150mg/kg为其良效剂量。
3　讨论
4-AP能促进肥大细胞 (MC)释放组织胺;外
源组胺可诱导释放内源性组织胺这一过敏介质 ,引
起变态反应。地肤子总皂苷抗 4-AP致过敏性皮
肤瘙痒作用和抗组胺所致小鼠足肿胀 ,证实了总皂
苷为抑制速发型变态反应的有效成分 ,其作用机制
可能与稳定肥大细胞膜 、减少组胺的释放及对抗过
敏介质的致炎作用有关 。小鼠过敏性皮肤瘙痒试验
和组胺致小鼠足肿胀试验结果都显示 ,地肤子总皂
苷抗变态反应作用具有量效关系 , 32 mg/kg为其有
效阈剂量 , 150 mg/kg为其良效剂量。该结果为地
肤子总皂苷的开发利用提供了依据。
参考文献:
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—178— 江苏农业科学　2007年第 5期