全 文 ：北方园艺２０１５（１１）：１３３～１３７ ·食用菌·
第一作者简介：杨静（１９８８－），女，贵州施秉人，硕士研究生，研究方
向为食用菌。Ｅ－ｍａｉｌ：３６４４１５２０９＠ｑｑ．ｃｏｍ．
责任作者：朱国胜（１９７１－），男，博士，研究员，硕士生导师，研究方
向为食药用菌及中药材。Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｎｄｘｌｃｇ＠１６３．ｃｏｍ．
基金项目：贵州省优秀青年科技人才培养对象专项资助项目（黔
科合人字（２０１１）３５号）；贵州省科技计划资助项目（黔科合院所创
能（２０１０）４００２）；中央补助地方科技基础条件专项基金资助项目
（黔科条中补地（２０１０）４００２）；贵州省中药现代化科技产业研究开
发专项资助项目（黔科合中药字［２０１１］５０３５号）；贵州省农业科学
院研究生创新基金资助项目（黔农科合（创新基金）２０１１０１６号）；
贵州省农业科学院专项资助项目（黔农科院院专项［２０１２］０２０
号）；贵州省中药现代化科技产业研究开发专项资助项目（黔科合
成字［２０１３］５０１７号）；贵州省中药现代化科技产业研究开发专项
资助项目（黔科合ＳＹ字〔２０１４〕３０３４－４号）；贵州省农业科学院专
项资助项目（黔农科院院专项［２０１４］０３５号）；贵州省科技计划资
助项目（黔科合农Ｇ字［２０１４］４００２）；贵州省科研机构服务企业行
动计划资助项目（黔科合服企［２０１４］４００６号）。
收稿日期：２０１５－０１－１９
ＤＯＩ：１０．１１９３７／ｂｆｙｙ．２０１５１１０３３
不同蜜环菌菌株对木质纤维素利用率研究
杨 静１，２，桂 阳２，３，黄 万 兵２，杨 梅１，２，朱 国 胜２，３，刘 朝 贵１
（１．西南大学 园艺园林学院，重庆４００７１６；２．贵州省现代中药材研究所，贵州 贵阳５５０００６；
３．贵州省农业生物技术重点实验室，贵州 贵阳５５０００６）
摘 要：以蜜环菌菌株为试材，通过测定２个生长时期８株蜜环菌木质纤维素利用率、生长速
度、胞外酶活性，分析三者之间的相关性，揭示不同蜜环菌降解利用基质的差异和规律。结果表
明：培养２０ｄ时，菌株ＫＹ４的木质纤维素利用率都高于其它菌株；培养４０ｄ时，菌株ＫＹ５的木质
纤维素总利用率最高；２个生长期生长速度最快的都是菌株ＤＪ１；通过差值分析，４０ｄ时纤维素酶
活性大于２０ｄ，２０ｄ时漆酶活性大于４０ｄ，半纤维素酶活性变化无规律；Ａ．ｍｅｌｅａ、Ａ．ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ纤
维素利用率与纤维素酶活性呈正相关，Ａ．ｇａｌｉｃａ纤维素利用率与纤维素酶活性呈负相关。
关键词：蜜环菌；木质纤维素；生长速度；胞外酶；相关性
中图分类号：Ｓ ５６７．３＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１５）１１－０１３３－０５
蜜环菌是一种在夏、秋季发生，能兼性寄生于多种
木本、草本植物的药食用菌，隶属于真菌界，担子菌门，
伞菌纲，伞菌目，膨瑚菌科，蜜环菌属［１－３］，是仅有的几个
具有菌索的种类之一，俗称榛蘑［４］。已报道的蜜环菌生
物种有３６种，我国记载１５种，主要分布于黑龙江、吉林、
辽宁、河南、河北、山西、山东、甘肃、陕西、青海、新疆、四
川、安徽、福建、浙江、湖南、湖北、云南、贵州、广西、海南、
内蒙古、西藏及台湾等省区［５］。
蜜环菌是一种药食兼用菌，美味可口，且子实体、菌
丝、菌索都可入药，国外最早报道蜜环菌可以引起多种
针叶树和阔叶树根腐病，其寄主植物多达３００属，但并非
完全致病，相反有些被蜜环菌侵染的植物生长旺盛，有
的必须有该菌侵染，植物才能正常生长发育。例如中药
天麻和猪苓必须依靠蜜环菌浸染提供营养才能生长繁
殖，因此，引起国内外学者对该菌研究的极大兴趣［６－８］。
木质纤维素是由木质素、纤维素和半纤维素构成的高分
子复合物，是植物细胞壁主要结构框架［９］。这些物质不
能直接被蜜环菌细胞吸收，首先必须分泌能降解这些高
分子物质的胞外酶，将其分解成可溶于水易被吸收的小
分子物质，并吸收转化为自身营养物质，满足自身生长
发育的需要［１０］。胞外酶是指一类在细胞内合成而在细
胞外起作用的酶。包括位于细胞外表面或细胞外质空
间的酶，也指释放入培养基的酶［１１］。胞外酶活性的存在
是食用菌对培养基降解利用的前提，分析木质纤维素利
用率与酶活的关系，有助于深入了解栽培基质的降解规
律，以及菌株在生长过程中利用栽培基质的规律。该研
究通过对２个生长时期的８株蜜环菌木质纤维素利用
率测定，以及与生长速度和对应酶活性的相关性分析，
探索不同蜜环菌生物种之间的差异以及蜜环菌降解利
用木质纤维素的规律。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试菌株是贵州省现代中药材研究所重点实验室
分离保存的蜜环菌，详见表１。
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·食用菌· 北方园艺２０１５（１１）：１３３～１３７
表１ 供试菌株信息
Ｔａｂｌｅ １ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｓｔｅｄ ｓｔｒａｉｎｓ
菌株 种名 采集点 分离来源
Ｓｔｒａｉｎｓ Ｓｐｅｃｉｅｓ Ｃｏｌｅｃｔｉｏｎ ｓｉｔｅ Ｓｏｕｒｃｅ
ＫＹ４ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｍｅｌｌｅａ 开阳县Ｋａｉｙａｎｇ 子实体Ｆｒｕｉｔ ｂｏｄｙ
ＨＺ２ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ 赫章县Ｈｅｚｈａｎｇ 菌索Ｒｈｉｚｏｍｏｒｐｈ
ＫＹ５ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｍｅｌｌｅａ 开阳县Ｋａｉｙａｎｇ 子实体Ｆｒｕｉｔ ｂｏｄｙ
ＤＪ５ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｇａｌｌｉｃａ 德江县Ｄｅｊｉａｎｇ 菌丝 Ｍｙｃｅｌｉａ
ＳＢ４ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ 施秉县Ｓｈｉｂｉｎｇ 菌索Ｒｈｉｚｏｍｏｒｐｈ
ＬＳ３ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｇａｌｌｉｃａ 雷山县Ｌｅｉｓｈａｎ 子实体Ｒｒｕｉｔ ｂｏｄｙ
ＳＹ１ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ ｍｅｌｌｅａ 绥阳县Ｓｕｉｙａｎｇ 菌索Ｒｈｉｚｏｍｏｒｐｈ
培养基：７０％杂木屑，１７％麦麸，１０％玉米面，１％蔗
糖，０．３％磷酸二氢钾，０．２％硫酸镁，０．５％石灰，１．０％石
膏，料水比１∶１．３。
ＤＮＳ试剂：参照国家标准ＧＢ／Ｔ ２３８８１－２００９［１２］配
置。中性试剂：将１８．６１ｇ ＥＤＴＡ（乙二胺四乙酸二钠）和
６．８１ｇ硼砂放入烧杯中加水２５０ｍＬ，加热使之溶解；
将３０ｇ十二烷基硫酸钠和１０ｍＬ乙二醇乙醚溶液，用
２００ｍＬ水加热溶解，并于上液；将４．５６ｇ磷酸氢二钠溶
于１５０ｍＬ热水中，并于上液；将上面混合溶液冷却至室
温，用磷酸调节混合液ｐＨ至６．９～７．１，然后转至１Ｌ容
量瓶中定容（如溶液有沉淀产生，需在使用前加热到
６０℃是沉淀溶解）。２Ｍ盐酸溶液［１３］：１６７ｍＬ浓盐酸（比
重１．１９）用蒸馏水定容至１Ｌ。７２％硫酸溶液：６６５ｍＬ
９８％浓硫酸（比重１．８４）加入３００ｍＬ水中，冷至２０℃，补
加水至１Ｌ。地衣酚试剂［１３］：０．１ｇ ＦｅＣｌ３，溶于１００ｍＬ
３７％的浓盐酸中，之后加入０．２ｇ地衣酚，现用现配。蒽
酮试剂：０．２ｇ蒽酮溶于１００ｍＬ浓硫酸（分析纯，比重
１．８４）中，用时现配。
１．２ 试验方法
１．２．１ 样品准备 在２个生长期（２０、４０ｄ）进行取样，
分成２份，一份用于胞外酶活性测定，另一份磨碎后用
于测定木质纤维素的利用率。
１．２．２ 粗酶液的提取 取三级菌种１０ｇ加水至５０ｍＬ，
２５℃浸提４ｈ，１０ ０００ｒ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，吸取上层清液
即可。
１．３ 项目测定
１．３．１ 纤维素、半纤维素、木质素的含量测定 参照徐
文玉等［１４］方法测定和计算。
１．３．２ 蜜环菌胞外酶活性测定 纤维素酶、木聚糖酶和
漆酶活力测定以及活力单位分别参考文献［１５－１９］的
方法。
１．３．３ 纤维素利用率计算方法 纤维素利用率（％）＝
（Ａ－Ｂ）／Ａ×％，Ａ是培养菌丝之前杂木屑中纤维素含
量，Ｂ是培养菌丝之后杂木屑中纤维素含量，半纤维素
和木质素、木质纤维素总利用率计算方法同纤维素。
１．４ 数据分析
试验数据采用Ｅｘｃｅｌ ２００７进行整理和计算，ＳＰＳＳ
１７．０检测显著性。采用Ｐｅａｒｓｏｎ相关对木质纤维素与其
对应胞外酶活、菌丝生长速度的相关性进行分析。
２ 结果与分析
２．１ 不同蜜环菌菌株菌丝生长速度分析
由表２可知，菌株ＤＪ１的生长速度在２０ｄ和４０ｄ
都是最快的，分别达到０．３７５００ｃｍ／ｄ和０．４３４２９ｃｍ／ｄ，
与其它菌株之间存在显著性差异；菌株ＳＢ４在２０ｄ和
４０ｄ的生长速度最慢，分别只有 ０．１０３３３ｃｍ／ｄ和
０．１１１４３ｃｍ／ｄ，显著低于其它菌株。通过差值比较发现
菌株ＨＺ２和ＫＹ５最小，为负值，分别为－０．００４ｃｍ／ｄ和
－０．０１２ｃｍ／ｄ，菌株ＳＹ１和ＫＹ４ ２个时期生长速度差值
最大，分别是０．０６１ｃｍ／ｄ和０．０６９ｃｍ／ｄ。
表２ 不同菌株生长速度比较
Ｔａｂｌｅ ２ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｃｍ／ｄ
菌株编号 ｄ２０ ｄ４０ 差值
Ｓｔｒａｉｎｓ ２０ｄａｙｓ ４０ｄａｙｓ Ｄ－Ｖａｌｕｅ
ＫＹ４ ０．２７８３３ｅ ０．３４７６２ｄ ０．０６９ｂ
ＨＺ２ ０．１９１６７ｃ ０．１８７６２ｂ －０．００４ａ
ＫＹ５ ０．１３３３３ａｂ ０．１２０９５ａ －０．０１２ａ
ＤＪ１ ０．３７５００ｇ ０．４３４２９ｅ ０．０５９０ｂ
ＤＪ５ ０．１４８３３ｂ ０．１７８１０ｂ ０．０３０ａｂ
ＳＢ４ ０．１０３３３ａ ０．１１１４３ａ ０．００８ａ
ＬＳ３ ０．２４０００ｄ ０．２９８１０ｃ ０．０５８ｂ
ＳＹ１ ０．３１５００ｆ ０．３７６１９ｄ ０．０６１ｂ
注：ｄ２０为培养２０ｄ时测定的生长速度，ｄ４０为培养４０ｄ时测定的生长速度。
Ｎｏｔｅ：ｄ２０ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ２０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ，ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ｇｒｏｗｔｈ
ｒａｔｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ４０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ．
２．２ 不同蜜环菌菌株胞外酶活性差异性比较
由表３可知，２０ｄ时纤维素酶活性最高的是菌株
ＤＪ５，达到３４１．９６Ｕ／Ｌ，菌株ＫＹ４最低仅有６９．６６Ｕ／Ｌ，
木聚糖酶活性最高的菌株是ＤＪ１，达到３ ８１２．９０Ｕ／Ｌ；菌
株ＳＢ４在菌丝生长期木聚糖酶活性都较低于其它菌株。
漆酶活性最高的菌株是ＨＺ２，最低的是菌株ＳＹ１。培养
４０ｄ时菌株ＨＺ２的纤维素酶和木聚糖酶活性都最大，漆
酶活性在４０ｄ时８个菌株之间没有显著性差异；通过２
个时期酶活性的差值比较显示菌株ＬＳ３的纤维素酶活
力提高最多，菌株ＤＪ５提高最少，木聚糖酶活力提高最
大的是菌株ＨＺ２，提升最少的是菌株ＤＪ１，漆酶差值均为
负的，最大的是菌株ＳＹ１，最小的为菌株ＳＢ４，分别是
－２．７９和－２９．１６。通过极差比较显示在２个生长期极
差最大的均是木聚糖酶活性，极差最小的均是漆酶
活性。
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北方园艺２０１５（１１）：１３３～１３７ ·食用菌·
表３ 不同菌株在固体培养基纤维素酶、木聚糖酶、漆酶活性差异
Ｔａｂｌｅ ３ Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｔｒａｉｎｓ ｃｅｌｕｌａｓｅ，ｘｙｌａｎａｓｅ，ｌａｃｃａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｉｎ ｓｏｌｉｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｍｅｄｉｕｍ
菌株
Ｓｔｒａｉｎｓ
纤维素酶Ｃｅｌｕｌａｓｅ／（Ｕ·Ｌ－１）
ｄ２０ ｄ４０
纤维素酶差值
Ｄ－ｖａｌｕｅ ｏｆ ｃｅｌｕｌａｓｅ
木聚糖酶Ｘｙｌａｎａｓｅ／（Ｕ·Ｌ－１）
ｄ２０ ｄ４０
木聚糖酶差值
Ｄ－ｖａｌｕｅ ｏｆ ｘｙｌａｎａｓｅ
漆酶Ｌａｃｃａｓｅ／（Ｕ·Ｌ－１）
ｄ２０ ｄ４０
漆酶差值
Ｄ－ｖａｌｕｅ ｏｆ ｌａｃｃａｓｅ
ＫＹ４ ６９．６６ａ ６３１．３８ａｂ ５６１．７３ｂｃ ３ ３１７．３４ｂ ２ １６７．４１ａｂ －１ １４９．９３ａ １６．８５ａ ６．７４ａ －１０．１１ｂ
ＨＺ２ ２７４．８３ｃｂ ７８０．５５ｃ ５０５．７２ｂｃ １ １１２．４６ａ ３ ３６７．７６ｂ ２ ２５５．３０ｂ ３７．７４ｂ ９．６６ａ －２８．０８ａ
ＫＹ５ ２８７．４８ｂｃ ６５６．４２ａｂ ３６８．９４ａｂ ２ ４００．３９ａｂ １ ６７３．２４ａｂ －７２７．１５ａ １９．５７ａ ７．０９ａ －１２．４８ｂ
ＤＪ１ １３４．５３ａｂ ５１９．９０ａ ３８５．３７ａｂ ３ ８１２．９０ｂ ２ １００．１８ａｂ －１ ７１２．７１ａ ２０．４４ａ １０．９３ａ －９．５１ｂ
ＤＪ５ ３４１．９６ｃ ５７６．７０ａ ２３４．７３ａ １ ２３５．３５ａ １ ７１０．０９ａｂ ４７４．７４ａｂ １６．１６ａ １０．７２ａ －５．４４ｂ
ＳＢ４ ２３０．５３ａｂｃ ７４１．５５ｂ ５１１．０２ｂｃ ９６７．８３ａ １ ３８３．８３ａ ４１６．００ａｂ ３５．５６ｂ ６．３９ａ －２９．１６ａ
ＬＳ３ １１０．９１ａｂ ７６９．２２ｃ ６５８．３０ｃ ２ ５３６．３８ａｂ ２ ６７７．９２ａｂ １４１．５４ａｂ １４．２３ａ ８．１３ａ －６．０９ｂ
ＳＹ１ ８０．２１ａ ５９０．４９ａｂ ５１０．２９ｂｃ １ ０９８．７３ａ １ ８８４．０１ａｂ ７８５．２８ａｂ １３．８１ａ １１．０２ａ －２．７９ｂ
极差（Ｒａｎｇｅ） ２７２．３０ ２６０．６５ ２ ８４５．０７ １ ９８３．９３ ２３．９３ ４．６３
注：ｄ２０为培养２０ｄ时测定的胞外酶活性，ｄ４０为培养４０ｄ时测定的胞外酶活性。不同小写字母代表Ｐ＜０．０５水平差异显著性，下同。
Ｎｏｔｅ：ｄ２０ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ ｅｎｚｙｍｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ２０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ，ｄ４０ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ ｅｎｚｙｍｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ４０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ．Ｖａｌｕｅｓ ｆｏｌｏｗｅｄ ｂｙ ｔｈｅ
ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｌｅｔｔｅｒｓ ａｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ ａｔ Ｐ＜０．０５，ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
２．３ 不同菌株间木质纤维素利用率的变化
由表４可以看出，在显著水平α＝０．０５下，培养２０ｄ
时菌株ＫＹ４的纤维素、半纤维和木质素利用率都高于
其它菌株，分别是２４．０６％、３１．４８％、８７．６５％，纤维素和
半纤维素利用率最小的菌株分别是菌株ＳＢ４和菌株
ＫＹ５，木质素利用率最小的是菌株ＤＪ５；４０ｄ时，纤维素
与半纤维素利用率最大的是菌株ＫＹ５，分别是４１．４３％
和６９．３１％，木质素利用率最大的是菌株ＳＢ４和Ｄ Ｊ１，纤
维素和半纤维素利用率最小的是菌株ＤＪ１，木质素利用
率最小的是菌株ＤＪ５和菌株ＳＹ１。对于总利用率的分
析得出培养２０ｄ时菌株ＫＹ４对于木质纤维素的总利用
率显著高于其它菌株，在４０ｄ时发现８个菌株之间对于
总的木质纤维素利用率不存在显著性差异；通过２个时
期差值的比较发现菌株 ＫＹ５、ＤＪ５的差值最大，菌株
ＫＹ４、ＤＪ１的差值最小。对于木质纤维素消耗总量差值
大的菌株在前期消耗较小在后期消耗较大，差值小的则
相反。通过对不同菌株的木材利用率比较，结合材料分
析得到蜜环菌菌丝生长期发现Ａ．ｍｅｌｅａ对于纤维素和
半纤维素利用率较高于Ａ．ｃｅｐｓｔｉｐｅｓ和Ａ．ｇａｌｉｃａ，Ａ．ｃｅ－
ｐｉｓｔｉｐｅｓ和Ａ．ｇａｌｉｃａ在木质素利用率上高于Ａ．ｍｅｌｅａ。
表４ 蜜环菌纤维素、半纤维素、木质素利用率
Ｔａｂｌｅ ４ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｕｌｏｓｅ，ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ ａｎｄ ｌｉｇｎｉｎ ｉｎ Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ
菌株
Ｓｔｒａｉｎｓ
纤维素利用率
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｃｅｌｕｌｏｓｅ／％
半纤维素利用率
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ／％
木质素利用率
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｉｎ／％
木质纤维总利用率
Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｏｔａｌ／％
ｄ２０ ｄ４０ ｄ２０ ｄ４０ ｄ２０ ｄ４０ ｄ２０ ｄ４０
总量差值
Ｄ－Ｖａｌｕｅ ｏｆ
ｔｏｔａｌ
ＫＹ４ ２４．０６ｆ ４０．４３ｃ ３１．４８ｄ ５９．８１ｂｃ ８７．６５ｆ ８７．６６ａｂ ７１．７０ｄ ７７．２４ａ ５．５４ａ
ＨＺ２ １８．４０ｅ ３３．８０ｂｃ ２４．８０ｂｃ ６７．２９ｃ ８０．９４ｅ ８６．２７ａｂ ６５．７２ｃ ７５．６８ａ ９．９７ａ
ＫＹ５ １７．３６ｄｅ ４１．４３ｃ １７．５０ａ ６９．３１ｃ １９．１６ｃ ８７．５４ａｂ １７．８３ｂ ７８．１１ａ ６０．２９ｂ
ＤＪ１ １２．８５ｂｃ ２０．５５ａｂ １９．８２ａｂｃ ３８．５２ａ ８３．１０ｅ ８９．４１ｂ ６５．４７ｃ ７３．４３ａ ７．９７ａ
ＤＪ５ １０．８１ａｂ ３４．７５ｂｃ １８．５８ａｂ ５９．７３ｂｃ ３．８５ａ ８２．９１ａ ７．７１ａ ７２．７３ａ ６５．０２ｂ
ＳＢ４ ７．８２ａ １５．６６ａ ２４．０８ｂｃ ４３．８３ａｂ ２０．６６ｃｄ ８９．９７ｂ １８．２１ｂ ７３．４３ａ ５５．２２ｂ
ＬＳ３ １４．４６ｃｄ ３１．９６ｂｃ ３１．８８ｄ ４７．５７ａｂ １２．０２ｂ ８７．３３ａｂ １０．４８ａ ６６．２６ａ ５５．７８ｂ
ＳＹ１ １３．４７ｂｃ ３７．３４ｂｃ １８．０７ａｂ ４３．８３ａｂ １６．７１ｃ ８２．５２ａ １６．４４ｂ ７１．６２ａ ５５．１７ｂ
注：ｄ２０为培养２０ｄ时测定的木质纤维素利用率，ｄ４０为培养４０ｄ时测定的木质纤维素利用率。
Ｎｏｔｅ：ｄ２０ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ２０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ，ｄ４０ｄｅｆｉｎｅｄ ａｓ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ４０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｕｌｔｕｒｅ．
２．４ 不同菌株木质纤维素利用率与对应固体基质胞外
酶活性、生长速度的相关性分析
由表５～７可知，不同菌株木质纤维素利用率与对应
固体基质胞外酶活性、生长速度的相关性，菌株ＫＹ４纤维
素利用率与纤维素酶活性、生长速度三者之间的相关性呈
正相关；菌株ＳＢ４木质素利用率与漆酶活性、生长速度之
间呈负相关；菌株ＤＪ１木质素利用率与生长速度呈正相
关，而与漆酶活性呈负相关，漆酶活性与生长速度呈负
相关；菌株ＫＹ５木质素利用率与生长速度呈负相关，与
漆酶活性呈正相关，漆酶活性与生长速度也呈负相关。
表５ 木质纤维素利用率与生长速度的相关性
Ｔａｂｌｅ ５ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌ
ＫＹ４ ＨＺ２ ＫＹ５ ＤＪ１ ＤＪ５ ＳＢ４ ＬＳ３ ＳＹ１
纤维素Ｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．９８５＊＊ ０．７２０ －０．９１９＊＊ ０．６１４ －０．３７６ －０．８００ ０．０８１ ０．９４７＊＊
半纤维素 Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．９６３＊＊ ０．８０９ －０．９９４＊＊ －０．０１３ －０．４４６ －０．９２１＊＊ －０．０４４ ０．９４７＊＊
木质素Ｌｉｇｎｉｎ －０．０００ ０．９７６＊＊ －０．９９８＊＊ ０．９６９＊＊ －０．５５８ －０．９９４＊＊ ０．３０７ ０．９９４＊＊
注：＊在０．０５水平（双侧）上显著相关；＊＊在０．０１水平（双侧）上显著相关。下同。
Ｎｏｔｅ：＊ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｔ ｔｈｅ ０．０５ｌｅｖｅｌ；＊＊ｒｅｐｒｅｓｅｎｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ａｔ ｔｈｅ ０．０１ｌｅｖｅｌ．Ｔｈｅ ｓａｍｅ ｂｅｌｏｗ．
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·食用菌· 北方园艺２０１５（１１）：１３３～１３７
表６ 木质纤维素利用率与对应固体基质胞外酶活性的相关性
Ｔａｂｌｅ ６ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｓ ｂｅｔｗｅｅｎ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ ａｎｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ ｅｎｚｙｍｅ ｉｎ ｓｏｌｉｄ ｍａｔｒｉｘ
ＫＹ４ ＨＺ２ ＫＹ５ ＤＪ１ ＤＪ５ ＳＢ４ ＬＳ３ ＳＹ１
纤维素Ｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．９６１＊＊ ０．７８２ ０．７７０ ０．６３０ ０．９７４＊＊ ０．７８６ ０．８００ ０．９７７＊＊
半纤维素 Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ －０．８０２ ０．６９８ －０．４７３ ０．１９９ ０．９０７＊ ０．３９６ ０．２２３ ０．６１２
木质素Ｌｉｇｎｉｎ ０．４５７ －０．７３０ ０．９６１＊＊ －０．８９９＊ －０．８２３＊ －０．８１８＊ －０．９２０＊＊ －０．５５９
表７ 纤维素酶、木聚糖酶、漆酶活性与生长速度的相关性
Ｔａｂｌｅ ７ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｃｅｌｕｌａｓｅ，ｘｙｌａｎａｓｅ，ｌａｃｃａｓｅ ａｎｄ ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ
ＫＹ４ ＨＺ２ ＫＹ５ ＤＪ１ ＤＪ５ ＳＢ４ ＬＳ３ ＳＹ１
纤维素酶Ｃｅｌｕｌａｓｅ ０．９９０＊＊ ０．９０３＊ －０．８７２＊ ０．９７１＊＊ －０．２００ －０．８３２＊ ０．３３３ ０．９７９＊＊
木聚糖酶Ｘｙｌａｎａｓｅ －０．９１５＊ ０．７７０ ０．５０５ －０．９１８＊＊ －０．１４１ －０．４０７ －０．０８３ ０．７１６
漆酶Ｌａｃｃａｓｅ －０．８４２＊ －０．８３２＊ ０．９６１＊＊ －０．８３６＊ ０．４８５ ０．７９８ －０．３６２ －０．５７９
２．５ 不同生物种木质纤维素利用率与对应固体基质胞
外酶活性、生长速度的相关性分析
表８表明，生物种Ａ．ｍｅｌｅａ纤维素利用率与纤维素
酶活性之间呈极显著正相关，相关系数为０．８３５，木质素
利用率与漆酶活性呈显著负相关，相关系数为－０．５３８；
生物种Ａ．ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ纤维素、半纤维素与其对应的酶活
性呈显著正相关，相关系数分别为０．６７２、０．６９２，生长速
度与木质素利用率呈极显著负相关，相关系数是－０．９３６；
生物种Ａ．ｇａｌｉｃａ纤维素利用率与纤维素酶活性之间呈
极显著负相关，相关系数为０．７３８；其它相关系数都
较低。
表８ 不同生物种木质纤维素利用率与对应固体基质胞外酶活性，生长速的相关性
Ｔａｂｌｅ ８ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｉｃ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｐｅｃｉｅｓ ａｎｄ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ ｅｎｚｙｍｅ，ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ
生物种 纤维素酶 木聚糖酶 漆酶 生长速度
Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｐｅｃｉｅｓ Ｃｅｌｕｌａｓｅ Ｘｙｌａｎａｓｅ Ｌａｃｃａｓｅ Ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ
Ａｒｉｍｉｌｌａｒｉａ
ｍｅｌｌｅａ
纤维素Ｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．８３５＊＊ － － ０．２６６
半纤维素 Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ － －０．０７１ － ０．０３９
木质素Ｌｉｇｎｉｎ － － －０．５３８＊ ０．０３２
生长速度Ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ０．４３８ ０．０２９ －０．０８１ １．０００
Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ
ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ
纤维素Ｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．６７２＊ － － －０．４２６
半纤维素 Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ － ０．６９２＊ － －０．２５７
木质素Ｌｉｇｎｉｎ － － －０．５１４ －０．９３６＊＊
生长速度Ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ －０．４３９ －０．０８２ ０．３０３ １．０００
Ａｒｍｉｌｌａｒｉａ
ｇａｌｌｉｃａ
纤维素Ｃｅｌｕｌｏｓｅ ０．７３８＊＊ － － －０．０２８
半纤维素 Ｈｅｍｉｃｅｌｕｌｏｓｅ － －０．００１ － －０．３１４
木质素Ｌｉｇｎｉｎ － － －０．３１１ ０．３５０
生长速度Ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ ０．２０２ ０．０９７ －０．２９８ １．０００
３ 结论与讨论
该试验从８种不同蜜环菌菌株的木材利用率、生长
速度、３种胞外酶活性测定以及通过他们之间的相关性
分析得出，菌株ＳＹ１木质纤维素利用率都较低于其它菌
株，与生长速度的相关性较高，且呈正相关，但其生长速
度却仅次于菌株ＤＪ１，菌株ＳＹ１属于Ａ．ｍｅｌｅ生物种，具
有很强的侵染力，是多种林木的病原菌［４］，有可能菌株
ＳＹ１虽利用木质纤维素较低，但其转换为自身营养物质
的能力较高；在植物组织中木质素与半纤维素以共价键
形式结合，并将纤维素分子包埋其中，所以微生物需先
有效降解包裹在纤维素晶体外面的木质素以及半纤维
素，使纤维素易于降解［２０］，菌株ＤＪ１的生长速度都较高
于其它菌株，归类于Ａ．ｇａｌｉｃａ的菌株ＤＪ１木质素利用
率较高且与生长速度呈极显著正相关，Ａ．ｇａｌｉｃａ菌索粗
壮、发达，生长迅速，无寄生性，有利于天麻的栽培生
产［４］。Ｃｈａ等［２１］收集了一些来自天麻块茎和天麻生长
区附近的蜜环菌菌株进行栽培试验和种类鉴定，结果表
明，Ａ．ｇａｌｉｃａ的共生效果相对要好一些。结合文献［２２］
发现ＤＪ１菌株对乌天麻、红天麻以及绿天麻具有促产作
用，有可能在蜜环菌生长初期对于木质素降解能力较高
的菌株可能较适于天麻共生。
漆酶差值均为负数，说明漆酶活性在前期较后期要
高，这一结论与焦迎春等［２３］的结果大体一致。不同菌株
的木质纤维素与其对应酶活性的相关性存在一定差异，
在半纤维素、木质素利用率与对应胞外酶活性分析中存
在负相关。可能由于分解半纤维素的酶包括木糖酶、阿
拉伯糖酶和甘露糖酶［２４］；木质素一般认为通过微生物分
泌的酚氧化酶和锰过氧化酶类来降解，可以通过测定多
酚氧化酶、愈创木酚酶、漆酶、木质素过氧化物酶和锰过
氧化物酶等酶的活性来衡量其对木质素的降解能力［２５］。
在２个生长期极差最大的都是木聚糖酶活性，极差最小
的都是漆酶活性，说明在酶活性测定中木聚糖酶活性变
６３１
北方园艺２０１５（１１）：１３３～１３７ ·食用菌·
异幅度最大，漆酶活性变异幅度最小，推测木聚糖酶在
蜜环菌菌丝生长期起主导作用。该试验只研究了木质
纤维素对应的一种胞外酶，若要了解其间真正的关系，
可能还需进一步对分解木质纤维素的整个酶系之间的
关系以及其对应酶系与分解基质的关系进行研究探讨，
才能找出二者之间存在的规律。
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ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ ｏｆ ｓｔｒａｉｎ ＫＹ４ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｏｔｈｅｒ ｓｔｒａｉｎｓ；ｃｕｌｔｉｖａｔｅ ４０ｄａｙｓ，ｔｏｔａｌ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ
ｏｆ ｓｔｒａｉｓ ＫＹ５ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ；ｔｈｅ ｆａｓｔｅｓｔ ｇｒｏｗｔｈ ｗａｓ ｓｔｒａｉｎｓ ｏｆ ＤＪ１ｄｕｒｉｎｇ ｔｗｏ ｇｒｏｗｉｎｇ ｐｅｒｉｏｄｓ；ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｅ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ
ａｎａｌｙｓｉｓ，４０ｄａｙｓ ｏｆ ｃｅｌｕｌａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ２０ｄａｙｓ，ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｈｅｍｉｃｅｌｕｌａｓｅ ｗａｓ ｂｉｇｇｅｒ ａｌｓｏ ｈａｄ ｓｍａｌ
ｃｈａｎｇｅ；Ａ．ｍｅｌｅａ，Ａ．ｃｅｐｉｓｔｉｐｅｓ ｃｅｌｕｌｏｓｅ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｅｌｕｌａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗｅｒｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ，Ａ．ｇａｌｉｃａ ｃｅｌｕｌｏｓｅ
ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｗａｓ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｃｅｌｕｌａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ．
Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｍｅｌｅａ；ｌｉｇｎｏｃｅｌｕｌｏｓｅ；ｇｒｏｗｔｈ ｒａｔｅ；ｅｘｔｒａｃｅｌｕｌａｒ ｅｎｚｙｍｅ；ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ
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