全 文 ：真 菌 学 报 1 3 ( 4 ) : 2 7 3一 2 1 8, 1 9 9 4
A e t口 从 y c o lo g i e a S i n i e a
大型真菌冬菇 10 3 工业发酵产物及生物活性的研究
李玉萍 赵 路 费学谦
(中国林科院亚林所
柳 世 儒
(河南开封制药厂
浙江富阳 3 1 14 0 0 )
程 秀 河
开封 4 7 , 0 0 3 )
摘要 本研究表明大型真菌冬菇 1 0 3 F l o“ “ 11” a “ e l“ ` i户e` ( C u r , · , F r · ) s i n g一 1 0 3 1 业发
酵性能良好 , 具备生产周期短 、 产量高 、 产物种类多等特点 , 发酵时间 72 一% 小时 , 在深层
发酵培养基中 , 每升可形成 9一 1 59 干菌丝体 ; 菌丝体的稠密度为每升含有 40 一 4 29 干物质。
并能产生多种功能的生理活性物质。 从菌丝体和发酵液中分析出 16 种氨基酸 、 “ 种微量 元
素 、 4 种维生素 、其中包括脂溶性维生素 E 醋酸酮 、 “ E 、 K , 和水溶性维生素 B : 此外还提取出
具有抗菌活性和免疫功能的粗多糖和菌丝干粉 (包括菌丝的提取液) , 它们在抗菌活性方面对
大肠杆菌 ( E : e人e r i c h a c o li ) ; 八叠球菌 ( s a r ` i , a l a : e r ) ; 枯草杆菌 ( B a c i l l o s s “ b: 111 , ) ; 油
桐炭疽菌 ( oC “ 。 。 , , i `加。 sP . c 一 8 3 7一 1 ) 显示出不同程度的抗菌活性。 在促进免疫 功 能 方
面 , 可促进小鼠吞噬鸡红血球功能和促进体液免疫小鼠溶血空斑的形成 , 菌丝干粉经小鼠急
性毒性 L D , .测定表明 ,小鼠以 g5 /k g 剂量为最高档剂 ,给药后未见死亡 , 故 1 03 菌丝干粉对
小鼠的最大安全量为 g5 /kg 以上 。
关键词 大型真菌冬菇 1 0 3 , 工业发酵产物 ,生物活性
冬菇 1 03 系我所 自采分离的一株新菌株 ,具有生长快 ,适应性强的特点 , 经实验室小
试发酵研究证明它能产生多种生理活性物质。 我们对该菌株采用工业发酵所取得的产物
进行了较系统的研究 。 为了今后对该菌株的工业利用提供可能和重要的技术参数 , 现将
其研究结果报道如下 :
1 材料和方法
1
.
1 菌株来派
本所自采分离的冬菇 1 0 3 号 , F l a m o u l i , a “ 。 l“ , i , e s ( c u r ` · : F r ) s i n g一 1 0 3。
1
.
2 培并甚
斜面培养基采用 P D A , 发酵培养基为本所筛选的 P一 9 号 , 成分 (% )为 : 葡萄塘 4 , 蛋白陈 0 . 4 ,
( N H
。
)
: 5 0 ; 0
.
1 , K H : p o ; 0
.
3 , M g s o 二 7 H : 0 o . x , , B : 0 . 0 1 , 消沫油 (玉米油 ) 0 . 2一 0 . 2 , p H , . 5一 6 . 0。
1
.
3 培养条件
培养温度 1 9一 2 3℃ p H S一 6 ,种子罐 1 0 0 L ,投料定容 7 5 L ,发酵罐 2 0 0 0 L ,投料定容 1 2 0 o L , 搅拌速
度 3 o r / m i n ,罐压 0 . 4一 0 . s k g / c m Z ,通气量 l : 0 · 5一 1 : 0 · 8 ( v / v ) 分发酵时间 7 2一 9 6小时 。
1
.
4 几种发醉产物的提取及测定方法
1
. 峪 . 1 粗多糖 : 菌丝体经水浸提 , 乙醇沉析然后冰冻干燥后即得粗多糖测试样品 。 收率为 2 . 16 % 。
1 9 9 3一 0 3一 2 2 收稿。
中国林科院自然科学基金资助项目。 于 1夕8 , 年 12 月 2 8 日通过技术成果鉴定 。
DOI : 10. 13346 /j . mycosystema . 1994. 04. 008
真 菌 学 报 3 1卷
1
.
4
·
2蛋白质 :采用等电点法 , 将蛋白质从发酵液中析出结晶 。 洗涤结晶后于 60 一 80 ℃ 烘干粉碎过
6 0 目筛 。
1
.
4
.
3 菌丝干粉 : 放罐后离心过滤 。 60 一 80 ℃ 烘干粉碎过 60 目筛 。
粗多糖的糖含量及糖类组成 : 采用 W at e r s 2 4 型高效液相色谱仪 ( H P L C ) 测试 , 总糖和还原塘
(以转化糖计 ) ;元素分析 : 采用 2 4 0 C 元素分析仪测试 ;氨基酸: 采用元 w at e r s 24 4 型 H P L c 测试 ;
微量元素 : 采用 A A 一 67 。 原子吸收仪火焰 (石墨炉 )分析法 ; 维生素采用 H P L C 侧试 ;抗菌活性采用常
规琼脂平板培养法测定 ;毒性和免疫功能按药理常规进行 ` ’ 一 ` ’ 。
2 结果与分析
.2 1 工业深层发酵过程中 , 中间分析项 目如下 :
2
.
1
.
1 p H 值
声 是影响酶活性的重要因素 , 困 的变化又是菌体代谢状况的综合反映 。 为了 使
发酵过程中 p H 值控制在适合菌丝生长和有用物质合成的范围内 , 以利于各类酶活性的
充分发挥 , 须及时测试和用氨水调节发酵液的 p H 值 , 使终点不低于 斗为宜 。 深层发酵
时间 p H 值测定结果见表 1 。
表 1 深层发酵期间 p H 值测定结果
T a b l e 1 C h a n g e s o f p H d
u r i n g d e e p 王e r m e n t a t i o n
P H 值
~ ~ ~ 一 ~ ~一 ~ - - ~
发酵时间
菌 种
C u l t u r e
冬菇 1 0 3
F l a仍价 “ 11” a , 心 l“ 不i P“ 1 0 3
0 14 3 6
2
.
1
.
2 糖含量 、 氨基氮 、 菌丝湿重
深层发酵期间分析测定发酵液中糖氮消耗和变化 , 及菌丝浓度 ,直接反映菌体的代谢
状况和生长规律 。 结果见表 2 (总塘和还原糖的数值是指过滤后的发酵液中测得 ) 。
T a b l e
表 2 深层发酵期间发酵液分析测定结果
T e s t o f f e r m e n t a t i o n l i q u o r d u r i n g d e e p f e r m e n t a t i o n
发酵时间 (小时 )
F e r m e n t a t i o n
总 糖
(% )
T o t a l s u g a r
3
。
1 5 8
3
.
62 2
2
。
7 2 4
3
.
3 3 2
2
。
2 3 2
2
.
4 6 4
还 原 糖
(% )
R e d u c i n g s u g a r
氨 基 氮
( m g /m l )
菌丝湿重
(% )
A m i n o n i t r o g e n
F e r s h w e i g h t o f
t 1 1】l e
一 . . d . .白 . . . .
h y P h a
2
。
8 4 0
3
,
4 2 0
2
。
4 3 4
3
. 斗2 0
2
。
6 3 6
2
。
6 9 6
0
.
0 8 1 2
0
.
0 7 7 0
0
。
0 6 4 4
0
。
0 6 7 2
0
。
0 4 3 4
0
。
0 4 4 3
7
。
5
4
。
0
ǎ”ù乙.。口,ù6,j
,几凡jUZgūO
由表 1 和表 2 的中间分析项目结果可以看出当菌丝湿重不再增加 , 糖氮含量不呈现
回升现象 , p H 值下降至 4时 , 约培养发酵 86 小时左右即可适时放罐终止培养。
.2 2 工业深层发醉过程中几种产物的检测与分析
李玉萍等 :大型真菌冬菇 1 03 工业发酵产物及生物活性的研究
2
.
2
.
1 粗多糖的理化性质
粗多糖在空气中极易吸水潮解 ,溶于水不溶于其它有机溶剂 , 水溶液呈棕黄色透明 ,
p H S
.
0 , a 一蔡酚反应为阳性 (有紫红色环产生 ) , 粗多糖中的糖含量及水溶性糖类的组成见
表 3 。
T a b l e
表 3 1 0 3 菌粗多糖中纯枪含盆及糖类组成
C o n r e n t s a n d c o m p o m e n t s o f s u g a r s i n c r u d e P o l y s a e e h a r i d e
f r o m F l a m仍 “ l滚” a ` e l“ 了i P e , 10 3
总 糖 l 还原搪 可溶性糖类的组成 (% )
寡 糖 蔗 糖 葡萄搪 半乳糖 甘露糖 果 糖
o l i g o s a c c h a r i l e S u c r o s e G l u c o s e G l a c t o s e M a n n o s e F r u e t o s e
1 6
。
3 0 1
。
4 3 1
。
2 8 1 8
。
75 0
。
0 8 1
。
7 0 0
。
1 2
6
.
1 1 8 9
。
29
C o m P o n e n t s o f w a t e r s o l u b l e s u g a r
粗多糖的紫外吸收光谱在
有蘑菇酸可溶性核昔酸成分 。
2 0 0 , 2 6 0n m 处有明显的吸收峰 (见图 l ) , 表明粗多糖中含
粗多糖经红外光谱扫描表现出多糖特征吸
收 : 3 3 9 0 e m 一 ` 、 2 9 3 0 c m 一 , 、 1 6 2 5e m 一 , 、 1 4 1 0 e m 一`
(见图 2 )
.2 2
.
2
. 蛋白粉 5 号的理化性质
蛋白粉 5 号为该菌产生的菌体外蛋白 , 在
p H 5
.
71 时从发酵液中提取 ,经烘干 , 粉碎过筛
后为灰白色粉末 ,有肉香味 ,溶于水时形成亲水
的胶体溶液 , 荀三酮反应为阳性 , 有兰紫色出
现 。 用酸水解后生成 14 种氨基酸 ,其中组成基
木稳定。 见表 4 。
蛋白粉 5 号中经分析粗蛋 白为 25 . 08 外 ,全
氮为 .4 01 务。 由表 5 可看出蛋白粉 5 号中必需
氨基酸含量占总氨基酸的 30 . 7并 , 其中亮氨酸
和赖氨酸的含量较大。 现代医学证明赖氨酸能
促进儿童的生长发育 , 而稻米和小麦等谷物中
赖氨酸比较缺乏 。
关于蛋白粉 5 号的紫外光谱吸收峰为 : 2 0
n m
、
2 3 o n m
、
2 8 o n m (以乙醇为参比 ) 见图 3 。
蛋 白粉 5 号 红 外 光谱 : 3 2 5 0 c m 一 ` 、 2 9 2 0
心 m 一 1、 2 3 2 0 c m 一 1 、 17 5 0 e m 一 1、 1 6 3 0 e m 一 1 、 1 4 7 0 c m 一 1、
图 1 10 3 粗多糖紫外光谱 (水 )
F i g
.
1 U l t r a v io l e t a b s o r P t i o n s p o e
-
t r o m e t r y o f e r u d e p o l y s a c e h a r id e
f r o m F l a 脚份 u l蓄称 a 夕 亡 l u 若i P ` 5 10 3
14 4 o e m 一 `
、
1 0 0 o c m 一 ` (见图 4 ) 。
蛋白粉 5 号经元素分析 : W T 并C 1 3 . 6 1 , H 6 . 0 6 、 N 3 . 7 5 。
2
.
.2 3 氨基酸
276 真 菌 学 报 13 卷
66
.
66
习
扛一二一 、 一 \ 一……一丫, /一 / ` / \ ’ \ 、一了林一{
七一一 ~一万,一一一一 - -一一- 一一浏乙仁泪 玉弓O已 弓3 n J 二03
图 2 10 3 菌粗多糖江外光谱
F ig
.
2 I n f r a r e d s p e e t r u m o f C r u d e p o l y s a c c五 a r i d e f r o m F l a 脚 m o l i n a o e z“ ,矛户。 5 20 3
表 4 蛋白粉一 5 号中氨基酸的含量及组成
T a b l e 4 C o n t e n t s a
l飞` 1 c o m P o n e n t s o f a m i n o a c i d s i n P r o t e i n P o w d e r N o
. 弓
文号英符氨基酸名称
N a m e
含量 ( g / 20 0 9 )
C o o t
o n t s
组 成 (% )
C o m P o n e n t s一一一- ~ ~ ~ ~ , 尸~ ~ ~ -一一 — — 上、—— 1一 .- 一一一一一一 ~ `~~ ~ , . . ~~ , ` . ~ J ~ , . . ~ ~州 . 3 。 5一,O产ú一jt了1.6头一.34卜一必需氨基酸
E s s e n t i a l
a m i n o a e i d s
异亮氨酸
亮氨酸
赖氨酸
蛋氨酸
苯丙氨酸
撷氨酸
酪氨酸
色氨酸
苏氨酸
合计 (% )
T o t a l ( % )
1l e
L e u
L y s
M
e t
P h e
V a l
T y r
T r P
T 五 r
0
.
1 0乡2
0
.
1 94 0
0
.
17 6 4
0
.
1 0亏l
0
.
1 3 4 5
0
.
0弓0 4
0
0
;;:;: 3 0 。 7
非必需氨基酸
N o n e s s e n t i a l
a m i n o a e i d s
丙氨酸
精氨酸
夭门冬氨酸
谷氨酸
甘氨酸
组氨酸
丝氨酸
合计 (% )
T o t a l( % )
A l a
A
r g
A s P
G l u
G ly
H 15
S e r
0
.
1夕6 2
0
.
1咚6 1
0
.
3 15 9
0
.
3 1 1 2
0
.
1 4 7 2
O
。
8 0 9 6
0
.
1 , 2 1
2
.
0 58 3
岁 . 9
4
。
9
1 0
。
6
1 0
。 多
4
。
9
2 7
。
2
5
.
1
6 9
。
1
该菌工业深层发酵 ,产生的菌丝体和发酵液 , 经液相色谱 ( H P L C ) 检测 , 共检测 出
16 种氨基酸。 (表 5 ) o
表 5 中氨基酸的组成由直接分析氨基酸含量 (菌丝体 g八 0 9 干样 ) 、 (发酵液 m g /
z o o m l ) 换算而得 。
氨基酸是一类人体重要的营养成分 , 除具有营养作用外 , 还具有一定的生理活性 , 由
于真菌合成的氨基酸均为具有生理 活性的 L 一型氨基酸 , 此点又优于化学方法合成的氨基
酸 。
4 期 李玉萍等 : 大型真菌冬菇 103 工业发酵产物及生物活性的研究 27 7
I
200 场毛0 3日日O 万0 00 I日0口 百l 口O 〕`6
图 3 蛋白粉 5号紫外光谱 (乙醇 )
F i g
.
3 U l tr a v i o l e ts Pc e tr o g r a m o f
p r o t ei np o wd er N o
.
5(
eo t ho l )
图 4 蛋白粉 5号红外光谱图
F i g
.
4 I nf r a r ed s P e e tr u m o f p r o t ei n
p o wd r eN o
.
5
表 5
T a l b e, C o n P o n e n t s
10 3 菌丝体和发醉液中氮签酸的组成
o f a m i n o a e id s i n h y Ph a a n d f e r m e n t a t i o n l吞q u o r o f
F l a房 m “ 11” a 夕口 l“ r i P` 5 10 3
氨基酸名称 英 文 菌丝体氨基酸组成 (% ) 发酵液氨基酸组成 (肠 )
N a m e 符 号 H y h h a F e r m e n t a t i o n l i q n o r
必需氨基酸 异亮氨酸 I l e 3 . 8 0 。 7
E s s e n t i a l 亮氨酸 L e u 7 。 2 3 。 8
a m i n o a c i d s 赖氨酸 L y s 6 。 9 4 。 5
蛋氨酸 M e t 2 。 1 2 。 认
苯丙氨酸 P h e 3 。 6 l 。 7
撷氨酸 V a l 5 。 , l 。 3
酩氨酸 T y r 3 。 3 3 . 1
色氨酸 T r P 心。 7 2 。 9
苏氨酸 T h r 3 7 。 l Z D。 7
合计 (% )
T o t a l (% )
非必需氨基酸 丙氨酸 A l a 7 。 2 6。 3
N o n e s s e n t i a l 精氨酸 A r g 7。 l 2 。 6
a m i n o a c i d s 天门冬氨酸 A s p 9 。 2 2 。 9
谷氨酸 G l u 1 0 。 9 4 。 5
甘氨酸 G l y 5 。 4 1 。 2
组氨酸 H 1 5 1 7。 6 6 0 。 0
丝氨酸 S e r 5 。 5 l 。 8
合计 (% ) 6 2 。 9 7 9 。 3
T o t a l (% )
.2 .2 4
. 微量元素
经测试该菌丝体中分析出的 14 种微量元素 , (见表 6 ) 。
其中有 8 种必需微量元素 : 钙 、 钻 、 铬 、铜 、 铁 、 镁 、 锰 、 锌。 在 8种必需元素中 , 以铁 、
镁 、钙 、 锌含量最丰富 ,而有害元素砷 、 汞含量甚微 , 远远低于国家食品卫生规定的含量标
7 2 8真 菌 学 报 13 卷
表 6 103 菌丝体中微盆元紊的含最 (胖 g厂 ml )
T al b e6 Co n tn e tso f tr a e e el em en tsi n hy p ha eo f Fl a m优 “ l i f a n el u ti P es0 13
分析元素
E l em . n ts
含 量
Co n t en ts
分析元素
E l em en ts
含 鼠 量
Co n tn e t
s
分析元素
E l em n e ts
含
Co n tn er s
r C znu Pl g3 3
8
.
0 4
6 2 8
。
0 0
1
.
86
0
。
7 4
Mg
M
n
K
As
P b
6 1 1 7
。
0 0
1 7
。
9 0
10 86 9
。
0 0
0
。
0 9 9
3
.
6
1 26
。
6
4
.
21
3 0
。
9 0
1 29
。
0
0
。
0 2 8
c aF eNio
准 。 铅含量略高些但比双抱蘑菇干制品平均为 5. 5林 g /ml ( 2.0一 1 .3 5件 g /ml )的含量还低 。
2
.
2
.
5维生素
该菌丝体经测试检出 4种维生素 ,其 中脂溶性维生素 E 醋酸醋 、 a E 、 K ; 和水溶性维生
素 B Z。 (见表 7 ) 。
表 7
T a b l e 7 C o n t e n t s o f
10 3 菌丝体维生紊种类及含量
V l t a l】1 1 n s i n h y P h a e o f F l a m 脚 u l i n a 夕亡 l u z i P` 5 1 0 3
维生素
V i t a m i n s
E 醋酸酉旨
E
一 a c e t a t e
a E K
- B :
含
( m g八 0 09 )量C o n t e n t s 3 3 7 2 3
.
6 0
.
4 6 3
.
3 3
脂溶性维生素 E 在其它大型真菌中较少出现。 维生素 E (又称生育酚 ) , 可作营养增
补剂 ;抗氧化剂 。 缺乏时可导致受精卵发育不 良、 红血球寿命缩短和易衰老等 〔习。
.2 3 工业发酵过程中几种产物生物活性的测定
2
.
3
.
1 抗菌活性的测定
将菌丝干粉 ;菌丝提取物 ;粗多糖为抗原 , 用病原菌八叠球菌 ( s 。 : : i仰 l “ t 。 。 ) 大肠
表 8 1 0 3 菌工业发酵几种产物的抗菌活性
T
a
b l e 8 B a c t e r i o s t a t i e a e t i v i t i e s o f s e v e r
己
1 i n d u s t r i a l P r o d u c t s f r o m
F l a 琳琳 u l派” 。 公 e l“ 才派P ` 5 10 3
重复次数产 物 名 称
P r o d u e t s
试验菌抑菌圈直径 ( m m )
e x p e r i m e n t a l b a c t e r i a B a c t e r i o s t u t i e e i r e l e d i a m e t e r ( m m )
T i m e s 八叠球菌
r e P e a t e d
枯草杆菌
B a c i l l“ s
S a r c i n a l “ t己 a } ` u b r i l i s
大肠杆菌
E ` c h e r i c h i a
c o l i
油桐炭疽菌
C o l l` r o t r i c 人“ 脚
s p
.
C 8 3 7 1
菌丝提取物
(滤纸片直径 7 m m )
E x t e r c t o f h y p h a e (巾7 m m )
3 8 ~ 1 3 14 ~ 15 2 2 ~ 3 5 2 0~ 2 2
菌丝干粉
(直径 4一 6 m m )
D r y p o w d e r o f 五y p h a e (功4一 6 m m )
3 7 ~ 1 2 1 0 ~ 1 3
粗 多 糖
(直径 3一 s m m )
C r u d e p o l y s a e c h a r i d e (价3一 s m m )
3 1 0~ 1 3 9 ~ 1 4
李玉萍等 : 大型真菌冬菇 1 03工业发酵产物及生物活性的研究
杆菌 ( Es c人e r i ch ia ` 011) ;枯草杆菌 ( 丑a c i l l“ 5 s ub r i l i, ) ; 油桐炭疽病菌 ( C o l l o t o t r i c h u m
却 · 。 一 8 3 7一 l) 为试验菌 。 然后将菌丝千粉和粗多糖直接接人预先 已混有病原菌的 平 皿
中 , (接人直径分别为 4一 6m m ;3 一 s m m ) ,菌丝提取液用纸片法接人琼脂平板上 。 以观察
抑菌圈的有无或大小 。 (见表 8 ) 。
2
.
3
.
2
. 免疫功能测定
2
.
3
.
2
.
1 小鼠吞噬功能测定
取昆明种小 鼠 19 一 2 1 9 ,雄性 ,每组 8 只 , 分别给予各组药物后测定各组药物对小鼠
吞鸡红血球的影响。 结果见表 9
表 9 冬菇 103 工业发醉的几种产物对小鼠吞噬功能的影响
T a b l e 9 E f f e e t s o f s e v e r a l i n d u s t r i a l f e r m e n t e t i o n P r o d u e t s o f
F l a m 份“ l f n a 扩亡 l u t i P日 5 1 0 3 t o P h a g o c y t o s i s o f m i e e
产物名称 给药途径 吞噬百分数 (% ) 吞噬指数 P 值
P r o d u c t s M e d i c a t i o n r o u t e X 士 S D X 土 S D V a l u e
P h a g o e v t i e P h a g o e y r i e o f P
P e r c e n t i n d e x
10 3 粗多糖 1 0 0 m g / k g P o X 6 2 9 . 8土 6 . 0 2 0 . 6 0十 0 . 19 < 0 。 0 1
C r u d e P o l y s a c e h a r i d e 2 0 0m g / k g P
o 火 6 3 4 . 4士 3 , 4 0 . 9 8士 0 . 0 6 < 0 . 0 1
103 粗多塘
C r u d e P o l y s a c e h a r i d e
10 3 菌丝干粉 0 . 2 59 / k g P o 丫 6 18 . 6土斗 . 3 0 . 3 0土 0 . 0 9 < 0 。 0 1
H y P h a P o w d e r 0
.
5 9 / k g P o x 6 2 0
·
6士 1 . 2 9 0 . 2 6土 0 . 0 6 < 0 . 0 1
10 3 菌丝干粉
H y P h a P o w d e r
蛋白粉 5 号 10 0 m g / k g P o 火 6 2 2 · 6土4 · 3 0 · 2 6土 0 . 0 5 < 0 。 0 5
P r o t e i n P o w d e r N o
.
5 2 0 0 m g / k g P
o 火 6 …” ” 土 ” ’ 0 . 1 4士 0 . 0 2 > 0 . 1蛋白粉 , 号
P r o t e i n P o w d e r N o
.
5
粗碱 7号 (胺 ) 1 0 0 m g / k g P o 丫 6 11 . 2+ 2 . 6 0 . 2 8+ 0 。 05 > 0 . 1
A I k a l i n e p r o t e i n (
a m i n e ) 2 0 0 0 9 / k g P
o 火 6 1 4 . 6士 3 , 8 0 。 1 8十 0 。 02 > 0 . 1
粗碱 7 号 (胺 )
A I k a l i n e p r o t e i n (
a m i n e )
对 照 C K N S 只 6 1 2 . 5士 1 . 9 0 . 2 5土 0 . 0 5
以上结果说明该菌能促进小鼠的吞噬鸡红血球功能 , 以 1 03 粗多糖最好 。 有显著性
统计意义 。 以下次序分别为 103 粗多糖 > 1 03 菌丝干粉 , 而蛋白粉 5 号和粗碱均无促 进
作用。
2
.
3
.
2
.
2 小鼠溶血空斑 ( P F C ) 形成试验
取昆明小鼠雌性 19 一 2 19 ,每组 8 只 , 分别给各组药物 , 给药第 4 天用 2 x l少m l 羊
红血球 ( 。 . 4 m l/ 只小鼠 )免疫 i( )P , 10 天后测定小鼠空斑形成试验 。 结果见表 10 。
以上结果说明该菌对体液免疫小鼠溶血空斑形成有促进作用 , 其 次序 是 1 03 粗 多
糖 > 103 菌丝体 , 而蛋白粉 5 号和粗碱 7 号均无促进作用 。
2
.
3
.
2
.
3 1 03 菌丝干粉小鼠急性 L D S。 的测定
取上海医工院动物房饲养的昆明小鼠 ; 8一 2 0 9 雌雄各半 , 每组 ; 。 只 , 口服喂 1 0 3 菌
丝体各组剂量一次给药后观察一周测定急性 L D so
小鼠以 5 9 / k g 剂量为最高档剂 , 给药后未见死亡 , 故 1 03 菌丝千粉对小鼠的最大安
真 菌 学 报 1 3卷
表0 1
T abl e0 1
0 1 3菌工业发酵的几种产物对小鼠溶血空斑 ( PF C) 形成试验结果
E f fc et o s fi nd ust ri al fe rm en
0 1 3o n fo rm at io no f念p rod u et s fro m Fl a仍那“ 11刃 a口 口l ut i P口s y 51o s 5 Pt o s fmi c e
产物名称
Po rd uct s
给药途径
M ed i c at io n ro ut e
PF C数八o `细胞
F C Pu nm b e e e rl l
P
V al u e
值_
OfP
0 1 3粗多糖
Cu rd e Pol ys ae e h ard i e
0 1 3粗多糖
Cu rd e Pol ys ac e hr aid e
0 0 1mg /kg P
o 又 6
2 0 0mg /kg P
o X6
5 47
.
1土 6 3 .1
2 43
.
3士2 6 .6
<0
。
0 1
<0
.
0 1
10 3菌丝千粉
Hy P h aPow d e r
10 3菌丝千粉
Hy P h aPow d e r
0
.
2 9 5 /kg P
o 又 6
0
·
59 /kg P
o 丫 6
2 85
.
0 士 31 .1
0 5 3
.
0 土 41 .1
<0
.
0 1
<0
。
0 1
蛋白粉 5号
P rot ei n Pow d e rN o
.
蛋白粉 5号
Po rt ei n Pow d e rN o
.
100mg /kg P
o 又 6
2 0 0mg /kg Po 火 6
1 85
.
2 土斗 9 . 8
2 7 1
.
6士 47 .7 3
>0
.
1
粗碱 7号 (胺 )
A Ik al i n ep rot ei n (
a二i n e)粗碱 7号 (胺 )
A Ik al i n ep rot ei n (
ami n e)
对 照 CK
10 0mg /kg P
o 丫 6
Z o o mg /kg P
o 又 6
; ; ,
. 、 * 7 3 . 1
1
> 。 . ,
1 4 8
.
1士 12 . 9 > 0 。 1
1 8 1
.
6土 3 2 . 2 5
全量为 5 9 / k g 以上 。
3 综合利用前景
该菌经中国科学院微生物研究所卯晓岚先生鉴定为 lF o m m耐 i , 。 。 。 l “ ; i p 。 , 的一 个
新的地理菌株。 具有一定的新颖性 。 该菌株工业深层发酵性能良好 ,发酵周期短 , 产物种
类多 ,功能独特 ,表现在 :
3
.
1
.
1 菌丝体 中脂溶性维生素 E 含量高 ,而其它大型真菌中维生素 E 较少出现。
3
.
1
.
2 菌丝体和粗多糖在具有抗菌活性的同时还具有显著的免疫活性功能 , 而其它大型
真菌大多只显示一种生物活性 。
3
.
1
.
3 该菌丝干粉可直接显示抗菌活性和免疫功能 , 这样为直接利用菌丝体提供了可能
性 。 因而在生产时可减化工艺 , 降低成本 , 便于开发利用 。
鉴于上 述特点 ,今后可从以下两方面进行开发和利用 。
3
.
2
.
1 开发新型营养饮料 , 口服液和营养食品 。 可利用发酵液和菌丝体中含有多种人体
必需的氨基酸 、 蛋白质 、 维生素 、微量元素等营养成份 ,配制营养型饮料 , 口服液 ,和营养食
品添加剂 , 具有天然色 , 香味和多种营养成份 ,是较理想的营养佳品 。
3
.
2
.
2 可开发成具有专用功能性保健药品 。 利用该菌具有生理活性物质的功能成份 , 研
制成颗粒 、 片剂和胶囊 、 冲剂等剂型 。 以达到提高人体免疫功能 ,防病和康复的 目的。
参 考 文 献
[ l ] 龚国华 ,韩绍英。 应用微生物 , 一9 8 8 , 3 : l一 6。
〔 Z J 黄文芳 ,李国盛 , 兵异龄。 食用菌 , 1 , 8 6 , 5 : ,一 6。
〔 3 〕 抗菌素生物理化特性编写组编 。 抗生素生物理化特性 , 第二分册。 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 81 。
嘴 期 李玉萍等 : 大型真菌冬菇 103 工业发酵产物及生物活性的研究 2 8 1
[ 4 ]翟永信 。 现代食品分析手册 。 北京 : 北京大学 出版社 , 1 9 8 8。 3 0 5一 3 4 2。
〔 5J 凌关庭 ,王亦云 , 唐达潮。 食品添加剂手册 , 上册 。 北京 : 化学工业出版社 , 1夕8夕。 15 一肠 。
S T U D I E S O N P R O D U C T S O F I N D U S T I A L F E R M E N T A T IO N
A N D T H E I R B IO L O G IC A L A C T IV I T Y O F
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L i Y u P i n g Z h
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e a p a e i t y o f i n d u s t r i a l f e r m e n t a t i o n
.
I t h a s t h e e h a r a e t e r i s t i e s o f s h o r t P r o d u c t i o n
e y c l e
,
h i g h y i e l d a n d a g r e a t v a r i e t y o f p r o d u c t s
.
T h e f e r m e n t a t i o n t im e 15 7 2一 9 6
h r s
.
t h e d e e p f e r m e n t a t i o n c u l t u r e c o u l d p r o d u e e g一 15 9 / L d r i e d m y e e l i u m ; T h e
d e n s i t y o f t h e m y e e l i u m 15 4 0一 4 2 9 / L d r i e d s u b s t a n c e s . A n d t h e y e a n p r o d u e e
s o m e s u b s t a n c e s h a v i n g a w id e v a r i e t y o f f u n e t i o n a n d p h y s i o l o g i c a l a c t i v i t y
.
F r o m
t址 叭y e e l i u m a n d t h e f e r m e n t a t i o n l i q u i d h a v e a n a l i z e d 1 6 d i f f e r e n t a m i n o a e i d s ,
1 4 : r a c e e l e m e n t s
,
4 k i n d s o f v i t a m i n s
,
i n c l u d i n g f a t s o l u b l e v i t a r m i n a E a n d w a t e r
s o l u b l e v i t a r m i n B
2
.
In a d d i t i o n t o t h e s e
,
T h e a u t h o r s a l s o e x t r a e t e d t h e e r u d e
p o l y s a c c h a r id e a n d l iq u i d w h i c h h a s a n t ib a c t e r i a l a e t i v i t y a n d im m u n e
`
f u n c t i o n
.
T h e y s h o w v a r i o u s d e g r e e o f a n t i b a e t e r i a l a c t i v i t y t o c o e e o b a e i l l u s ( E
s e h e r i c h a c 口 11)
,
s a r c i n a e ( S
a r ` i , a l u z e a )
, s u b t i l i n e ( B
a e i l l “ : s “ b t i l i s ) a n d t u n g t r e e a n t h r a c n o s e d i s e a s e
( C
o l l e t o , r i c无“ m s p · C 一 8 3 7一 1) . I n p r o m o t i o n o f i m m u n e f u e t i o n , t h e y 。 a n p r o m 。 t e
t h e f u n c t i o n o f t h e m o u s e e n g u l f i n g e o c k e r y t h r o e y t e t o f o r m a n d二户r o m p t e t h e m o u -
s e h a v i n g h u m o r a l im m u n i t y t o f o r m t h e h e m o l y t i o p l a q u e i n i t s b o d y
.
T h e a c u t e
t o x i e i t y o f d r i e d h y P h a p o w d e r t o t h e m o u s e
,
t e s t e d b y L D
, o , i n d i e a t e s t h a t a f t e r
g i v i n g t h e m e d i c i n e a t t h e d o s e o f 5 9 / k g
a s t il e m a x i m u m t h e d e a t h o f m o u s e h a s
n o t b e e n s e e n
.
T h e r e f o r e t h e m a x im u m s a f e d o s e o f d r i e d h y p h a p o w d e r 1 0 3 t o
m o u s e 15 a b o v e 5 9 / k g
·
K E Y W O R D S F l
a m 邢 u l i n a 夕 e l “ t i P。 ; 10 3 , I n d u s t r i a l f e r m e n t a t i o n , P r o d u e t s , B i o l o -
g i c a l a c t i v i t y