全 文 ：液 体培养蜜环菌对碳氮源 的
利 用 试 验
谭周进 ’ 谢达平 , 李文革 2
( 1 湖南农业大学 ;2 湖南省原子能研究所 ,长沙 4 10 1 2 a)
天麻为兰科天麻属植物天麻的根茎 。 (本草纲目》
谓天麻 “ 治语多恍惚 , 善惊失忘 ” 。 我国古代医学家均认
为天麻有广泛的治疗功效 , 是镇痉熄风 , 治疗痛栩惊悸
的重要药物 。天麻需与蜜环菌共生 , 没有蜜环菌共生 ,
天麻早期就不能生长发育 。近年来研究证明 , 蜜环菌的
固体培养物和发酵液都具有与天麻相似的药理作用和
临床功效 。 由于野生天麻较难得 , 人工栽培天麻周期较
长 , 因此 , 寻求天麻的替代物— 蜜环菌发醉物很有意义 。本文就蜜环菌液体发酵对碳氮源的利用特性进行
了报道 , 为蜜环菌深层发酵的进一步研究提供依据 。
1 材料与方法
1
.
1 供试菌种 蜜环菌从湖南农业大学食用菌研究
所购得 。
1
.
2 培养基 ① P D A 斜面 ;②种子培养基 (% ) : 蔗搪
2
. 葡萄 糖 1 , 黄 豆饼粉 1 , 酵母 汁 1 , M gs q · 7 zH o
0
.
0 7 5
,
K H
Z P O ; 0
.
1 5
, 水 i 00 0m L , p H 自然 。 1 2 1 ,C 灭菌
30分钟 ;③发酵培养基 : M gOS 。 · 7 2H 0 0 . 07 5 , K浅 p o .
0
.
1 5
, 碳源 2 , 氮源 i , p H 自然 。 1 2 1 ,C灭菌 3 o m in 。
1
.
3 碳源对蜜环菌菌丝生长的影响 发酵培养基中
以 N线 C I为氮源 , 分别以大米粉 、 玉米粉 、 红薯粉 、 可
溶性淀粉 、 c M C 一 N a( 梭甲基纤维素钠 ) 、 蔗糖为碳源 ,
2 5 o m L 三角瓶中每瓶装 1 0 o m L , 接种量 5% , 1 2 0 r pm ,
2 7℃下培养 4 天 。各 3 个重复 。
1
.
4 氮源对蜜环菌菌丝生长的影响 发酵培养基 中
以大米粉为碳源 (煮沸 , 加糖化酶糖化 s m in) , 分别以
K N q
、
N执 cl 、 黄豆饼粉 、 献皮 、 尿素为氮源 , 250 m L
三角瓶中每瓶装 l o o m L , 接种量 5 % , 1 2 o r p m , 2 7℃ 下
培养 4 天 。 各 3 个重复 。
1
.
5 菌丝干孟测定 将一定体积的发酵液菌丝体蒸
干收集菌丝 , 在 8 0 一 9 0℃ 下供干至衡重 , 并 以同体积
培养液蒸干烘至衡重作空 白对照 。
2 结果与讨论
不同碳氮源对菌丝生长的影响结果见表 1。 由表 1
可见 , 蜜环菌能以大米粉 、 玉米粉 、 红薯粉 、 可溶性淀
粉 、 C M C 一 N a 、 蔗糖为碳源 ,但无论是生长速率还是菌
丝得率 , 都以红薯粉为最好 。将摇瓶发醉液静置培养一
段时间后 , 发酵液都变成固体状 , 但红 薯粉发醉液的
农 1 不同碳 、氮源对 , 环菌菌丝生长的形响《单位 : f L )
碳 源 大米粉 玉米粉 红薯粉 可溶性淀粉 C M C一 N a 蔗褚
菌丝干重 6 . 2 1 3 . 2 15 . 4 5 . 8 5 . 9 10 . 8
氮 源 K N仇 N H’ a 黄豆饼粉 数皮 尿萦
菌丝干 ! 9 . 5 1 3 . 8 1 1 . 7 1 2 . 1 0 . 9
固化速度和程度都最好 , 玉米粉 、 蔗糖 、 大米粉 、 可溶性
淀粉的次之 , C M C 一 N a 的最差 。可见蜜环菌对所用培
养基成分的转化率是很高的 。
蜜环菌能以 K N仇 、 N H ; cl 、 黄豆饼粉 ,狱皮为氮
源 ,但以 N 城 cl 为氮源时 , 生长速率和菌丝得率都最
高 , 荃本上不能以尿紊为氮源 。 静里培养 12 天和 20 天
后观察 , N珍 cl 发酵液在 12 天和 20 天时的固化程度
基本一致 , 且为所有氮源发醉液中最好的。 K N仇 、 黄
豆饼粉 、数皮的发醉液静置培养 2 0 天比 12 天的固化 `
程度好 。尿家发醉液长期静里培养时 , 基本没有多大变
化 。试验也证明 , 蜜环菌在液体摇瓶培养过程中 , 能产
生色素和香味物质 , 并且产色家多少和香味物质的多
少都与培养荃的碳源和氮源种类有关 。色素的化学成
分及香味的组成有待进一步研究 。 蜜环菌液体培养时
的碳源和氮源可用一些廉价易得的农作物产品来进
行 , 可为蜜环菌深层发醉在原料上提供更可靠的依据 。
生要参考文献 3 篇 (略 )
,
司` 甘` 甲二 , 丫` , 魂 . , 产` , 魂 , 魂 , 砚 , 洲` 弓 r , , r ` . 碑 户 , 魂 , r ` , 曲嘴尸乞 , 魂 , 几 , 确 , r出
平 菇 菌 料混 合 装 袋 发 菌 法
目前 , 平菇发醉料都是采用一层料一层菌种装袋
法 , 1天装不了多少袋 。笔者采用菌料混合装袋法 , 既
提高装袋效率 , 又有利于发菌 。具体操作如下 :
装袋以前利用空闲的时间 ,先把塑料袋用麻包针
在袅的每头离袋 口 6c m 左右处 , 平行袋 口均匀的扎 5
个孔 , 如果把袋撑开就是每头 10 个孔 , 有利菌丝的生
长呼吸用 , 只要能扎通几十个袋一起扎相当快 。然后把
袋的一头用细绳绑好备用 。将发醉好的料摊开 . 根据经
验算好所需菌种 , 等料凉到适温时 ,把菌种册散撤到料
的表面 , 再将凉好的料和菌种混匀装袋 , 装满袋后把另
一头绑好 。
采用这种混合装袋法 , 只管把袋装满 . 不管层的高
低与播种 , 速度比较快 , 1 个 人可顶 2 、 3 个人 , 如有装
袋机还可用装袋机装 。袋装好后根据气温排袋单层 、 双
层或多层发菌 , 以后也不必再扎孔 , 菌丝满袋比层播还
提前几天 。 出菇时 , 把菌袋按出菇的要求排放好 , 剪下
袋的扎头使扎口处的料外露一小部分 。剪好后喷雾水
开始出菇管理 。这样出菇的地方把袋顶起 , 容易长出 ,
不 出菇的地方袋还贴在料上保水分 。笔者每次发酵料
50 0 kg 左右 , 采用此法共投料 s 00 gk , 只有个别的袋有
一小片坏 。大家不妨先少量的试一试 。
河 南伊川 县 白元 乡白元村 23 组 什社平