全 文 :第 9 2卷
9 0年
第 3期
5月
厦门大学学报 (自然科学树 Vo 9 2 1No _ 3
Jo u ra nlo fXi a m七 nU u lc v招i ty N (a tu a rl女i e e e n) 19 9 0
令研究简报令
甜菊糖试总贰量的快速测定①
黄海水 林 静
〔化 学 系)
甜菊糖武 (s tc vio si dc) 作为一种低热量 , 安全无毒性的天然甜味剂在国内外己引起了广泛的
兴趣 , 作为丰要甜味成分的甜菊糖贰的含量测定是重要课题之一 本文中介绍 了在酸性条件下
甜菊糖 试与葱酮反应后 , 在分光光度仪上以最大吸收波长 4 , 。 娜 比色测定的方法 . 同以前提出
的各种恻定方法 [` 一娜比 , 具有操作方便 , 方法快捷 、 灵敏 . 精密度较高等优点 . 适合在一般实验
室使用 .
1 方法原理 `
甜菊掩林在酸性葱酮试剂中定量水解成葡萄德 后者与葱酮反应 , 在乙醇介质中生成黄色
络合物 , 在波长 4 5 o m 处有最大吸收 . 以不同浓度的葡萄糖溶液作出工作曲线 , 乘上一个校 正
系数后 , 即可直接得到祥品中总糖贰的含量 .
2 仪器和药品
72 型分光光度仪 , 硫酸 ,夕 , % 乙醇
惠酮试剂 , 0 一琢 慈酮溶于50 回机硫酵电 」标准曲绎 .琳称取“ 定量的葡萄糖 , 配制一系列不同浓度的标准液 ,分别加人 , .0 “ m ’葱酮试剂 , 沸水加热 10 m坛 , 冷却后用乙醇稀释定容 · 以慈酮 / 乙醇液为参比在波长 4 5 n m 处
进行测定 . 绘出吸光度对浓度的放线 ; . “ ”
3 甜菊糖试的含摄测定
取一定量样品液 , 代替荀萄糖标准液按上述方法比色测定 , 从曲线中找出相应的点 , 计算公
式如下 :
总斌;含量% 二 生作曲线上相应的含量
0
.
72 3
吸光度 D 与加热时间 t 的关系 取葡萄够液 、 甜菊糖欢液分别与蕙酮试剂反应 , 发现
葡萄糖最长加热时间是 ,。 m in , .甜菊糖试最长加热时间是 11 m i。 .
葡萄糖在不同波长下的吸收 取 。 . 50 而 葡萄糖溶液与葱酮试剂在同样条件下反应
后 , 在不同波长下比色测定 , 确定最适吸收波长为 445 n m .
葱酮试剂量与吸光度 D 的关系 取 .0 50 耐 葡萄糖液 (2 m g / m l) , 移人不同里 的葱
酮试剂分别进行反应后 , 以 10 0 1葱酮为参比 , 在 4 4 5 n m 处侧定吸光度 , 得 F ig . l . 在实验中 , 随
着葱酮量的增大 , 溶液逐渐呈绿色 . 慈酮为 找 m l 时 , 有 4 5 和 640 n m 两个吸收波长 . 所以 , 在
本实验中 , 葱酮试剂量不 可超过 9 m l .
线性范围 取不间量的葡萄糖液分别与 5 . 0 ml 葱酮试剂反应后 ,在 4 45 n m 处测吸光度 ,
①飞9 8 9刃 4 一 2咋收列 * 有机专业 81 级毕业生潘伟涛参加部分实验工作
第 3 期 黄海水等 : 甜菊糖拭总轼量的快速测定 , 3 5 5 ·
实验结某表明 , 在这个波长 , 葡萄糖浓度在 13 一 82 解g / m l 范围内与吸光度呈线性关系 .
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v i e lr 习基于 1 m o l 甜菊糖贰水解
生成 3 nr ol 葡萄糖 ,认为在用水解定量法
进行分析时 ,校正系数理论值应为 0 . 61 .我
们采用不同的甜菊糖贰标准样 品测定 ,发
现校正系数为 .0 723 原因 可能是多种糖武岁知菠 的混合物 ,其中有些糖贰含有多于三个分
子的葡萄糖 ,因而校正系数比理论值为高 .
葡萄糖与葱酮试剂反应形成的黄色络合物稳定 , 重现性好 , 所 以在经常测定的场合中 , 可以
用同一工作曲线 , 测定更快速 .
影响本反应的主要因素是加热时间、 酸度及温度 . 氨水 , , 氧化物和氯化物等物质也会显著
地影响反应叹
参 考 文 献
l 坂本 , 药学杂志 (于了) , 1 97 5 , 9 5 (12 ) : 1 50 7 ~ 1 5 1 1
国外氏学参考资料 . 药物学分册 , 19 7 , 17 3
2 韦业成 . 食品科学 , 19朴 , 7 : 2S ~ 27
3 H抢 s h im o t o Y o he i . J hC
r o m 口艺。雳r , 19 7 8 , 16 1 : 3 ~ 5
4
.
A h l: c d M S
.
J 以 : o n ; a z o g r , 19 8 2 , 2 3 6( 2 ) : 52 3一 52 6 ; 2 4 5 (3 ): 3 7 3 ~ 3 76
5 M
e 艺iv c r J J xE 尸 B o r
,
1 97 9
,
30 ( 1 17 ) : 80 5一 8 10
6 T cr v e lg a n W E
.
B io c为亡脚 .J 1 9 52 , 5 0 : 29 8 ~ 3 0 3
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