全 文 ：拉缘蝽为害对卵叶小蜡内含物含量的影响
张潮巨
(福建省光泽华桥国有林场 ,福建 光泽 354103)
摘要:通过对受拉缘蝽不同程度为害的卵叶小蜡叶片的单宁 、黄酮 、总酚含量的测定 , 结果表明:受害的卵叶小蜡叶片的单
宁含量随着拉缘蝽若 、成虫为害程度的加重而发生变化 ,在受害初期显著增加 , 但随着为害程度的加重 , 而呈逐渐下降的趋
势;受害卵叶小蜡叶片中黄酮含量随着受害程度的加剧 ,呈先上升 、而后再下降的特点;叶部总酚的含量随着受害程度的不
断加重 ,总酚的含量呈现上升的趋势。说明卵叶小蜡应激反应的过程是一种随着受害程度的不同而不断变化的动态过程。
关键词:拉缘蝽;卵叶小蜡;单宁;黄酮;总酚
中图分类号:S763.3　　　文献标识码:A　　　文章编号:1002-7351(2006)03-0060-05
A Study on the Harm to the Inclusions of Ligustrum sinense by Rhamnomia dubia
ZHANG Chao-ju
(Guangze Oversea National Forest Farm , Guangze , Fujian 354103 , China)
Abstract:Some inclusions(tannins , flavones , total phenols)in leaf of L igustrum sinense that have suffered different deg ree dam-
aged from Rhamnomia dubia were surv eyed.The results show ed tha t the content of tannins changed with being the damaged by
nymphs and adults of Rhamnomia dubia , which increased significantlyin the primary phase and descended g radually w ith dam-
aged.The content of flavones increased at first and descended later and the to tal phenols increased gradually only with dam-
aged.This indicates that stress reaction of Ligustrum sinense is a kind of dynamic process with different deg ree damaged.
Key words:Rhamnomia dubia;L igustrum sinense;tannin;flavone;total phenols
　　植物与植食性昆虫之间存在着复杂的协同进化关系 ,其中包括植物为抵抗昆虫的危害 ,在长期进化过
程中形成了自身的化学防御体系 ,其中起主导作用的是一些在代谢中派生出来的而与其本身生长发育几
乎无关的化学物质 ,被称为次生性物质或次级代谢物质 。这些化合物可以单一或协同对害虫起作用 ,影响
昆虫的生长 、发育 、行为和群体生物学 ,构成植物的抗虫性[ 1] 。
拉缘蝽[ Rhamnim ia dubia (Hsiao)]属半翅目 、缘蝽科 、拉缘蝽属 。国内仅有该虫成虫的形态特征描
述 、寄主及分布的记载 ,尚无其它的详细研究报道。近年来 ,拉缘蝽在南平为害卵叶小蜡(Ligustrum
sinense)较为严重 ,成虫和幼虫刺吸卵叶小蜡嫩芽和嫩梢 ,主要为害嫩梢顶芽下 2 ～ 3 cm 处 ,引起嫩梢顶芽
黄化 、卷曲 、枯萎 、死亡 ,造成树势衰弱 ,生长不良 ,严重影响了卵叶小蜡的观赏价值和绿化效果 。本文主要
报道了卵叶小蜡受拉缘蝽不同程度为害后单宁 、黄酮 、总酚含量变化的特点 。
1　材料与方法
1.1　样地的选择 、样品的采集及处理
卵叶小蜡叶片采自福建农林大学南平校区的校园内 ,分别采摘被拉缘蝽严重为害后枯死的卵叶小蜡
叶片 、轻度为害后萎焉的叶片 、以及未受害的叶片各 250 g ,分袋包装并贴上标签 。
1.2　卵叶小蜡样本的预处理
分别将不同类型叶片置于 80℃烘箱内干燥 12 h ,取出后用粉碎机充分粉碎 ,过 40目筛。将所得的叶
片粉末放入干燥器内待测 。
　收稿日期:2006-03-28
　基金项目:福建省南平市科技局资助项目 。
　作者简介:张潮巨(1965-), 男 ,福建云霄人 , 福建省光泽华桥国有林场高级工程师 ,从事森林保护与营林技术管理工作。
第 33 卷 第 3 期
2 0 0 6 年 9 月
福 建 林 业 科 技
Jour of Fujian Forestry Sci and Tech
Vol.33　No.3
Sep., 2 0 0 6
DOI :10.13428/j.cnki.f jlk.2006.03.014
1.3　测定方法[ 2 ～ 8]
1.3.1　单宁的测定
1)药剂的配制:a钨酸盐磷钼酸溶液:称取 50 g 的钨酸钠 ,10 g 磷钼酸和 25 mL85%磷酸 ,并加水 38
mL 到 250 mL 锥形瓶中 。瓶口塞一带长玻璃管的橡皮塞 ,置沸水浴上加热回流2 h。冷却后用 500 mL 容
量瓶定容 。b饱和碳酸钠溶液:称取 200 g 碳酸钠 ,加 500 mL 水到 1 000 mL 的容量瓶中 ,充分摇动促其
溶解 ,然后定容 。储于带橡皮塞的瓶中备用。 c单宁标准溶液:称取单宁 1.0 g ,溶于水中 ,于 1 000 mL 容
量瓶中稀释至刻度 ,摇匀 。从中吸取 10 mL ,再稀释至 1 000 mL ,摇匀 。此液每 1 mL 相当于 0.01 mg 单
宁。
2)测定步骤:a试样的提取:称取试样 1.0 g ,放入 100 mL 容量瓶中加水 80 mL ,摇匀 ,置 80 ℃水浴上
提取 30 min ,每隔约 10 min摇匀 1次 。然后迅速置冷水浴中冷却 ,后定容至刻度 ,摇匀 ,过滤 。若滤液不
清亮 ,再过滤一次。 b样液的测定:吸取滤液 1 mL 到 100 mL 的锥形瓶中 ,加水 49 mL 稀释 ,然后加 2 mL
钨酸盐磷钼酸溶液 ,摇匀 ,5 min后加 10 mL饱和碳酸钠溶液 ,摇匀 ,溶液即显蓝。放置 30 min ,用分光光
度计于 700 nm(1 cm比色皿)处测定其光密度 。同时以蒸馏水作空白调零。
3)标准曲线的绘制:吸取含单宁 0.01 mg·mL-1的标准溶液 0 mL 、1 mL 、3 mL 、5 mL 、10 mL 、15 mL ,
分别放入 100 mL 比色管中 ,用水稀释至 50 mL ,以下按测定试样步骤进行显色比色。以光密度为纵坐
标 ,绘制标准曲线。
4)结果计算:
　　单宁/ %= G×F
W ×1 000×100
式中:G 为由标准曲线查得的单宁的质量/μg;W 为相当于 1 mL 滤液中的试样烘干重/g;F 为单宁纯度
系数 。其值为去水分和杂质后纯单宁所占的数量 。如纯单宁含量为 81.6%,则 F 值为 0.816 。
1.3.2　黄酮的测定
1)方法:乙醇浸提法 。
2)试剂的配置:a70%的配置:量取 70 mL 的 95%的乙醇 ,加蒸馏水至 95 mL。 b1%AlCl3 的配制:
称取 1.809 g AlCl3晶体溶于 100 mL的蒸馏水中 。
3)实验步骤:a称样提取:用 100 mL的锥形瓶称取 1 g 样品 ,加入 70%乙醇 100 mL 浸泡过夜 。次日
在沸水浴中回流提取 10 min ,冷却 ,过滤。后用蒸馏水定容到 100 mL。 b比色:量取 1 mL 定容后的黄酮
提取液到试管中 ,加入 10%AlCl3 9 mL ,静置 10 min后 ,用 1 cm 比色皿在 721型分光光度计上(波长 420
nm)测定其吸光度。
4)结果计算:
　　黄酮含量/mg·g-1= W ×L 1
L 2×M ×m
式中:M 为试样量/g;W 为芦丁量/mg;m 为试样干物率/ %;L 1 为总试样液量/mL;L 2 为所取试样液量/
mL。
5)标准曲线的测定:吸取含芦丁 0.01 mg·mL-1的标准溶液 0 mL 、1 mL 、3 mL 、5 mL 、10 mL 、15 mL ,
分别放入 100 mL 比色管中 ,用水稀释至 50 mL 。以光密度为纵坐标 ,绘制标准曲线。
1.3.3　总酚的测定
1)测定方法:Folin-酚法 。
2)药剂的配制:aFolin试剂:称取 100 g 钨酸钠 , 20 g 磷钼酸和 50 mL 85 %的磷酸 ,溶于 750 mL 蒸
馏水中 ,加热煮沸回流 2 h ,冷却并稀释至 1 L。 b碳酸钠溶液:称取 75 g 碳酸钠 ,加 500 mL 水到 1 000
mL 的容量瓶中 ,充分摇动促其溶解 ,然后定容 。储于带橡皮塞的瓶中备用。 c单宁酸标准溶液:称取单
宁酸 1.0 g ,溶于水中 ,于 1 000 mL容量瓶中稀释至刻度 ,摇匀 。从中吸取 10 mL ,再稀释至 1 000 mL ,摇
匀。此液每 1 mL 相当于 0.01 mg 单宁酸 。
3)测定步骤:a试样的提取:准确称取 2.000 g 样品 ,滤纸包好 ,放入索氏提取器中 ,加 50 %甲醇 100
·61·第 3 期 张潮巨:拉缘蝽为害对卵叶小蜡内含物含量的影响
mL , 85 ℃下回流提取 8 h ,提取液过滤后 ,在 90 ℃水浴条件下浓缩至果汁状(约 10 mL),将浓缩液移入分
液漏斗 ,加蒸馏水 35 mL ,再加氯仿 50 mL ,震荡 10 min ,静置分层 ,弃去氯仿层 ,收集水层(约 45 mL),用
甲醇定容至 50 mL ,摇匀 ,装瓶待测。 b样液的测定:吸取上述待测液 0.5 mL 于 50 mL 锥形瓶中 ,加入
2.5 mL Folin试剂 , 5 min后加入 2 mL Na2CO3(75 g·L -1),在水浴 50 ℃下保持 5 min ,冷却后 ,用分光光
度计于 760 nm 处测定其吸光度 ,参比为空白试剂。
4)标准曲线的绘制:吸取含单宁酸 0.01 mg·mL-1的标准溶液 0 mL 、1 mL 、3 mL 、5 mL 、10 mL 、15
mL ,分别放入 100 mL 比色管中 ,用水稀释至 50 mL ,以下按测定试样步骤进行显色比色。以光密度为纵
坐标 ,绘制标准曲线 。
5)结果计算:
　　单宁酸/ %= G
W ×1 000×100
式中:G 为由标准曲线查得的单宁酸的毫克数/mg;W 为相当于 1 mL 滤液中的试样烘干重/g 。
2　结果与分析
2.1　不同受害程度叶片中单宁含量的变化特点
不同受害程度叶片中单宁含量见表 1和图 1 。
从图 1可以看出 ,叶部单宁含量在受害初期显著增
加 ,但随着为害程度的加重 ,而呈逐渐下降的趋势 。
表 1　不同受害程度叶片中单宁含量的测定
受害程度 第 1次测量 第 2次测量 第 3次测量 平均值
未受害 19.937 19.964 18.864 19.588
轻度受害 20.121 20.728 20.728 20.525
严重受害 19.587 18.918 19.201 19.236
＊:单位:mg·g -1。
图 1　不同受害程度叶片的单宁含量
　　将不同受害程度叶片中单宁含量的测定结果经方差分析
得表 2。从表中可以看出 ,不同受害程度叶片中单宁含量差
异是显著的。
2.2　不同受害程度叶片中黄酮含量的变化
黄酮为植物次生性代谢产物 ,被认为是在植物组织受到
损伤时形成的 ,对昆虫有防御作用 ,或在于影响它们的行为和
代谢 ,使之发生忌避和拒食 ,或在于破坏正常的代谢过程 ,引
起中毒甚至死亡 。研究结果表明(表 3 ,图 2), 叶部中黄酮含
量随着受害程度的加剧 ,呈先上升 ,而后再下降的特点 。叶部黄酮含量的波动变化 ,说明了受害程度的强
弱对叶部的黄酮含量变化有影响。
表 2　单因素方差分析
差异源 平方和 自由度 均方 F值 P-value F crit
组间 2.6658 2 1.3329 6.3515 0.0330 5.1433
组内 1.2592 6 0.2099
总计 3.9250 8
表 3　不同受害程度下叶片中黄酮含量的测定 单位:mg·g-1
受害程度 第 1 次测量 第 2 次测量 第 3 次测量 平均值
未受害 47.046 46.752 46.948 46.916
轻度受害 49.786 49.508 49.450 49.581
严重受害 46.851 47.390 47.586 47.275
将不同受害程度叶片中黄酮含量的测定结果经方差分析得表 4 。从表中可以看出 ,不同受害程度叶
片中黄酮含量差异是显著的。
2.3　不同受害程度下叶片中总酚含量的变化
研究结果表明(表 5 ,图 3),在不同的受害程度情况下 ,叶部酚类物质含量随着受害程度的不断加重 ,
总酚的含量呈现上升的趋势。
·62· 福 建 林 业 科 技 第 33 卷
表 4　不同受害程度叶片中黄酮含量方差分析表
差异源 SS df MS F P-value F crit
组间 12.5539 2 6.2770 94.2304 2.94E-05 5.1433
组内 0.3997 6 0.0666
总计 12.9536 8
表 5　不同受害程度叶片总酚含量的测定 单位:mg·g-1
受害程度 第 1 次测量 第 2 次测量 第 3 次测量 平均值
未受害 17.279 16.911 17.785 17.325
轻度受害 18.153 17.739 17.923 17.938
严重受害 18.705 18.934 18.842 18.827
图 2　不同受害程度叶片的黄酮含量 图 3　不同受害程度叶片的总酚含量
将不同受害程度下叶片中总酚含量的测定结果经方差分析得表 6。从表中可以看出 ,不同受害程度
叶片中总酚含量差异是极显著的。
表 6　不同受害程度叶片总酚含量的方差分析表
差异源 SS df MS F P-value F crit
组间 3.4221 2 1.7111 20.6346 0.0021 5.1433
组内 0.4975 6 0.0829
总计 3.9197 8
3　结论与讨论
单宁是植物中一类重要的酚类化合物 ,它对昆虫的主要作用是干扰肠道消化和抑制酶的活性 ,可影响
昆虫对食物的消化和利用 ,而阻碍它们的生长发育 ,降低它们的繁殖力[ 7] 。研究表明 ,卵叶小蜡叶片中单
宁含量随着拉缘蝽为害程度的加重 ,不断变化 。呈现出单宁含量先增加 ,而后逐渐下降。
黄酮为植物次生性代谢产物 ,被认为是在植物组织受到损伤时形成的 ,对昆虫有防御作用 ,或在于影
响它们的行为和代谢 ,使之发生忌避和拒食 ,或在于破坏正常的代谢过程 ,引起中毒甚至死亡[ 8] 。研究表
明卵叶小蜡叶片中黄酮的含量随着受害程度的加剧 ,同样是先上升 ,而后再下降 。卵叶小蜡叶片中上述 2
种物质的波动变化 ,说明了受害程度的强弱对卵叶小蜡诱导化学物质变化有影响[ 10] ,次生代谢物质的合
成需要消耗能量和物质 ,必然影响主要代谢。这是被害叶枯黄 、枝干枯死直至植株枯死的原因之一 。
酚类是带羟基芳香环的衍生物 ,它们通过莽草酸代谢途径形成 ,可缩合成单宁和木质素 ,它的组成和
含量与抗虫性有密切的关系。卵叶小蜡叶部酚类物质含量随着受害程度的不断加重 ,总酚的含量呈现上
升的趋势 。
拉缘蝽主要刺吸取食植物嫩叶嫩枝的汁液 ,植物用于防御害虫危害的能量和物质是有限的 ,当超出了
卵叶小蜡应激反应的阈值时 ,就可以造成全株性的枯死[ 10 , 11] 。
·63·第 3 期 张潮巨:拉缘蝽为害对卵叶小蜡内含物含量的影响
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(上接第 46页)比中注意到适当提高 NAA的浓度 ,其上长出的根较其它培养基培养的苗木的根要粗壮一
些 ,这对于后期的移栽工作的顺利进行是有利的 。但也要充分考虑 6-BA 添加过多后 ,造成幼苗生长细
长 、玻璃化 ,这会给组培苗的良好生长带来不利的影响 。
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