全 文 ：收稿日期:2002-03-21
作者简介:陈贤兴(1958-), 男 ,浙江温州人 , 温州师范学院高级实验师 ,主要从事植物资源的开发及遗传毒理研究。
文章编号:1004-3918(2002)03-0260-03
白背三七草的诱变及抗诱变作用的初步研究
陈贤兴
(温州师范学院生物与环境科学系 , 浙江 温州　325003)
摘　要:以蚕豆根尖为材料 , 以微核为指标 ,以环磷酰胺为诱变剂 ,研究了白背三七草(Gynura divaricata)提取液的
致畸性及对环磷酰胺诱发的蚕豆根尖细胞微核的修复作用。结果表明:白背三七草水提取液对蚕豆根尖
细胞的微核率没有影响;而对环磷酰胺诱发的微核率则有抑制作用 , 其微核率从 41.6±5.32 降至 2.2±
2.17 ,提示这种植物具有一定的抗癌作用。
关键词:白背三七草;致畸性;抗诱变
中图分类号:Q319.33　　　文献标识码:A
白背三七草(Gynura divaricata (Linn.)DC.)为菊科三七草属多年生草本植物 ,分布于我国南部和西
南部;其根及根茎味甘 、性凉 ,有清热 、凉血 、散瘀消肿之功效 ,用于咳嗽痰喘 、肺痈 、崩漏 、烫伤 、跌打损伤 、刀
伤出血等症;而茎叶味咸 、微辛 、性凉 、有消热 、舒筋及止血 、祛瘀的作用 ,用于顿咳 、风湿性关节痛 、骨折 、创伤
出血 、痈肿疮疥等症[ 1] ;在民间则作为抗癌草药来应用;而白背三七草的诱变及抗诱变作用尚未见研究报
导。
1　材料与方法
1.1　材料与药品
蚕豆购于华中师范大学生命科学学院;环磷酰胺由上海华联制药有限公司生产;白背三七草采于温州市
区。
卡诺氏固定液:冰醋酸:无水乙醇(1:3)。解离液:95%乙醇:浓盐酸(1:1)。
改良苯酚品红:按文献[ 2]中配制。其他化学药品为实验常规药品 ,均为分析纯 。
1.2　提取液的制备
将新鲜的白背三七草称取 200g ,切成小段 ,放在 800ml的烧杯中 ,加蒸馏水 500ml ,充分浸泡 ,然后用电
炉直火加热煎煮 ,煮沸后维持 1h ,过滤置冰箱中 4℃保存备用。
1.3　方法
将蚕豆用自来水浸泡一天使种皮松软 ,然后放入垫有湿滤纸的白瓷盘中 ,上覆盖湿纱布 ,于 25℃恒温箱
中培养 ,每天换水一次 ,待根尖长到 1-2cm时 ,即可使用。
1.3.1　白背三七草水提取物的诱变作用
用蒸馏水将白背三七草提取液配制成 0.008g/ml、0.04g/ml、0.2g/ml、1g/ml、5g/ml。将准备好的蚕豆
萌发种子分别用这五种浓度的白背三七草提取液处理 4h ,用蒸馏水冲洗干净后 ,恢复生长 24h[ 5] 。剪取约
0.5-1cm 长根尖分别放入卡诺氏固定液中 24h ,然后将根尖分别放于 95%、85%、75%乙醇中处理 10分钟 ,
后保存于 70%乙醇中备用。
1.3.2　白背三七草水提取物的抗诱变作用
将准备好的蚕豆萌发种子在 0.2μg/ml的环磷酰胺中处理 4h ,用蒸馏水反复冲洗净药物 ,恢复生长 4h
后 ,再分别用 1.3.1中的五种浓度的白背三七草提取液处理 4h ,用蒸馏水冲洗干净后 ,恢复生长 24h[ 3] 。剪
取约 0.5-1cm 长根尖分别放入卡诺氏固定液中 24h ,其余步骤同上。
1.3.3　制片将根尖水洗后 ,置于载玻片上 ,滴加解离液 ,解离 5-10min ,然后用蒸馏水洗净 ,捣碎 ,滴加改良
苯酚品红染液 20min左右 ,盖上盖玻片 ,压片镜检 ,统计微核数 。
第 20 卷　第 3 期
2002 年 6 月 　　　　　　　　　　　　
河　南　科　学
HENAN　SCIENCE　　　　　　　　　　　　Vol.20　No.3June.2002
DOI :10.13537/j.issn.1004-3918.2002.03.011
2　结果
2.1　白背三七草的水提取物的诱变作用
将不同浓度的白背三七草的水提取液分别处理蚕豆萌发种子的根尖后 ,统计根尖细胞的微核数 ,结果见
表 1。
表 1　不同浓度的白背三七草水提取液的诱变作用
Table 1　The Mutagenic of dif ferent concesnt rat ion of the estract from Gynura divarica ta
组别 观察细胞数 1000PCE微核率 微核率‰(x±s) t 值
0.008g/ml白背三七草 5000 7 6 4 3 6 5.2±1.64 0.78
0.04g/ml白背三七草 5000 6 7 8 4 5 6±1.58 0
0.2g/ml白背三七草 5000 4 3 5 8 4 4.8±1.92 1.08
1g/ml白背三七草 5000 6 7 7 8 6 6.8±0.84 1
5g/ml白背三七草 5000 8 0 4 5 6 4.6±2.97 0.93
阳性对照组 5000 35 37 40 45 50 41.4±6.11
0.2μg/m l的环磷酰胺
阴性对照组(蒸馏水) 5000 4 5 7 6 8 6±1.58
从表 1中可看出不同浓度的白背三七草提取液处理的蚕豆根尖细胞微核率均与阴性对照组间无显著差
异(p>0.05),上述结果说明这五种浓度的白背三七草无致突变性。
2.2　白背三七草水提取物的抗诱变作用
不同浓度的白背三七草的水提取液分别处理经环磷酰胺诱发的蚕豆种子根尖 ,然后统计其细胞的微核
数 ,结果见表 2。
表 2　不同浓度的白背三七草水提取液对微核的修复作用
Table 2　The repai ring ef fect of the extrat from dif ferent concent ration of Gynura divarica ta
组别 观察细胞数 1000PCE微核率 微核率‰(x±s) t 值
0.2μg/m l环磷酰胺+ 5000 5 9 15 12 10 10.2±3.70 10.83＊＊＊
0.008g/ml白背三七草
0.2μg/m l环磷酰胺+ 5000 9 3 6 11 10 7.8±3.27 12.1＊＊＊
0.04g/ml白背三七草
0.2μg/m l环磷酰胺+ 5000 8 4 3 5 4 4.8±1.92 14.5＊＊＊
0.2g/ml白背三七草
0.2μg/m l环磷酰胺+ 5000 3 4 6 3 5 4.2±1.30 15.26＊＊＊
1g/ml白背三七草
0.2μg/m l环磷酰胺+ 5000 1 6 2 1 1 2.2±2.17 15.33＊＊＊
5g/ml白背三七草
阳性对照组 5000 39 40 36 43 50 41.6±5.32
(0.2μg/m l的环磷酰胺)
阴性对照组(蒸馏水) 5000 3 5 4 6 7 5±3.08
注:与环磷酰胺阳性对照组相比。 ＊＊＊表示 p<0.001
从表 2中可看出 0.008g/ml 、0.04g/ml、0.2g/ml 、1g/ml、5g/ml白背三七草水提取液均能使环磷酰胺诱
发的蚕豆根尖细胞的微核率显著下降。分别使其微核率从 41.6±5.32降至 10.2±3.70(p<0.001),7.8±
3.27(p<0.001),4.8±1.92(p<0.001),4.2±1.30(p<0.001),2.2±2.17(p<0.001)。上述结果说明这五
种浓度的白背三七草提取液对环磷酰胺诱发的微核有明显的修复作用 ,且这种修复作用表现出明显的剂量
效应 ,即白背三七草提取液的浓度越大 ,对由环磷酰胺引起的微核的修复作用就越强 。环磷酰胺阳性对照组
的微核率与阴性对照组的微核率相比都有明显的差异(p<0.001)。说明本实验系统是可靠的 。
3　讨论
　　从本次实验的结果来看白背三七草的水提取物对由环磷酰胺诱发的微核具有修复作用 ,据有关资料显
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示 ,对于微核的产生 ,可能直接与 DNA 作用引起其断裂 ,也有可能通过诱发自由基反应 ,从而干扰 DNA 、蛋
白质合成或 RNA转录 ,导致使与染色体运动有关的物质不能形成 ,由此形成染色体畸变[ 4] 。据此推断 ,白
背三七草水提取物处理蚕豆根尖细胞后 ,其抗诱变作用的可能机理 ,推测除了其可以促进细胞新陈代谢 ,增
加受损细胞的修复能力外 ,也可能直接阻止环磷酰胺与 DNA作用 ,或可能参与影响机体内的一些代谢系
统 ,通过某种途径去除自由基 ,从而抑制微核的产生 ,值得进一步研究 。
关于白背三七草的水提取物中的有效成分还需要进一步仔细分析 ,目前有关白背三七草的化学成分不
很清楚 ,因此还不能直接解释白背三七草的水提取物降低环磷酰胺所致的微核率下降 ,也有待进一步研究 ,
本实验只能认为是水提取物中的有效成分所引起的 ,但具体的机制还有待探索 。
参考文献:
[ 1] 　刘娟 , 宗希明 ,崔书文.中国菊科药用植物化学成分及开发利用[ M] .哈尔滨:东北林业大学出版社 , 1997 , 52-153.
[ 2] 　刘祖洞 , 江绍慧.遗传学实验[ M] .北京:高等教育出版社.
[ 3] 　李宏.AOT 、CTAB 诱发蚕豆根尖细胞异常的研究[ M] .实验科学与技术.成都:电子科技大学出版社 , 1995.第 13 辑:52
-58.
[ 4] 　赵吉平 , 王桂英 ,刘芳.8-羟基喹啉诱发蚕豆根尖细胞异常性研究[ J] .遗传 , 1991 , 13(6):5-10.
A study primary on the mutagenic and anti-mutagenic effect
of water extracted material from Gynura divaricata
CHEN Xian-xing
(Department of Biological & Environmental S cience , Wenzhou Teacher` s College , Wenzhou 325003 , China)
Abstract:In the experiment on the mutageresis of the ext ract from Gynura divaricata and the effect on the root
tip cells of Vacia faba , the Vacia faba was conducted as material , the micronucleirate rate as the guide lines of
aberration , and the cyclophos phanrde as the mutagens.The results show Gynura divaricata no teratgenetic ef-
fect., the plant tends to reduce the micronuclei rate significantly .The value declined from 41.6±5.32 to 2.2±
2.17 respectively .It can be concluded that the plant has the anti-carcinogenesis ef fects.
Key words:Gynura divaricata;mutagenic;anti-mutagenic
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