全 文 ：　　　　 天然产物研究与开发　 　　　　　
Vo1.14　No.2 NATURAL PRODUCT RESEARCH AND DEVELOPMENT　 　　　
　
　
　
　
收稿日期:2001-11-05　　修回日期:2001-12-10
野甘菊中小白菊内酯的超临界流体色谱测定
郭亚东　吴双凤　李　
(昆明医学院药学院　昆明　650031)
摘　要　用超临界流体色谱法分析野甘菊中小白菊内酯时 ,具有很好的精密度和线性关系 , 其保留时间
和峰面积的相对标准偏差分别为 2.67%和 0.70%, 相关系数为 0.9996。样品经甲醇提取后直接进样分
析 ,并在 3 min 内完成 ,可用于快速检测。
关键词　超临界流体色谱;野甘菊;小白菊内酯
　　野甘菊又叫龙牙草(Tanacetum parthenium),
是一种菊科植物 ,可用于治疗周期性偏头痛和关节
炎 ,其主要活性成分为小白菊内酯 ,结构如图 1。它
不十分稳定 ,在放置过程中会分解 。对其含量测定
的方法有超临界流体萃取后气相色谱分析[ 1] 、逆流
色谱分析(DCCC)[ 2] 、薄层色谱分析[ 3] 和高效液相
色谱分析[ 4] 。这些方法在处理样品和分析测定时
操作较复杂 ,耗时长。本文采用溶剂提取样品后不
需再处理 ,直接进样做超临界流体色谱(SFC)分析 ,
具有操作简便 、分析速度快等优点 。
图 1　小白菊内酯结构图
Fig.1　Structure of parthenolide
1　实验方法和结果
1.1　试剂和标准
高效液相色谱级甲醇购自英国 Fisher 科技公
司 ,SFC级的二氧化碳购自英国氧气公司 ,标准品小
白菊内酯购自美国 Sigma公司 。
1.2　样品提取
取产自英国的野甘菊干燥叶 1 g ,加 10 ml 甲
醇 ,放置过夜 ,超声提取 10 min后过滤 ,得绿色提取
液 ,测定前置于冰箱中。
1.3　SFC设置
使用 Gilson Model SF3 超临界流体色谱仪 ,该
系统有一个主泵用于提供 CO2 ,一个副泵用于往流
动相中添加改性剂 ,色谱柱:Cyano 填充柱(250 ×
4.6 mm I.D ,5 μm 填充相),分析用柱温 50 ℃,压
力 20 MPa ,检测器是 Jasco 875-CE 型紫外检测器。
检测波长在 190 ～ 600 nm 间可调并带有高压样品
池 ,本文使用波长为 214 nm ,样品则通过带有 10 μl
进样阀的进样器注入色谱柱 。
1.4　实验条件的选择
使用超临界 CO2作流动相 ,为了得到更好的分
离效果 ,于流动相中加入甲醇作改性剂 ,当流动相流
速一定时 ,流动相中甲醇浓度增加 ,小白菊内酯的保
留时间缩短;当流动相的组成一定时 ,流动相的流速
增加 ,保留时间降低。如图 2和图 3所示 。
图 2　小白菊内酯标准品色谱图
Fig.2　Chromatograms for standard of par thenolide
流速(Speed of mobile):2.5 ml/min , 甲醇含量(Content of
methanol):a.5%, b.10%, c.15%
1.5　方法的可靠性研究
通过测定标准品的重现性来衡量精密度 ,当流
动相组成为 CO2/CH3OH(90∶10),流速为 3.0 ml/
min时 ,重复进样 10次 ,测定其保留时间和峰面积 ,
并计算其相对标准偏差(RSD),分别为 2.67%和
0.70%。
配制标准品溶液的浓度范围为 5 ～ 60 μg/ml ,
取 6个不同浓度的标准溶液 ,每个进样 3次 ,测定其
峰面积 , 用最小二乘法作峰面积对浓度的回归方程
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DOI :10.16333/j.1001-6880.2002.02.014
图 4　样品色谱图
Fig.4　Chromatog ram fo r sample
流动相(Mobi le):CO2/ CH3OH(90∶10), 流速(Speed of mobile)
3.0 ml/min)。箭头所指峰为小白菊内酯(The peak directed by
arrow is parthenolide)。
图 3　小白菊内酯标准品的色谱图
Fig.3　Chromatog rams for standard of parthenolide
流动相(Mobi le):CO2/ CH3OH(90∶10), 流速(Speed of mobile ,
ml/min):a.2.0 , b.2.5, c.3.0
并绘出标准曲线 , 其回归方程为:y =481.6x -
295.7 ,相关系数为 0.9996。
在所用实验条件下 ,该标准品的检出限大约为
1.5 μg/ml(信噪比为 3∶1)。
1.6　样品测定
取样品滤液用甲醇适当稀释后 ,进样分析 ,由图
4可见分离很好 ,重复进样 6次 ,计算样品中小白菊
内酯的含量为(均值±SD ,mg/g)4.52±0.34%。
2　讨论
2.1　用 SFC 测定野甘菊中小白菊内酯 ,具有分析
速度快 ,样品前处理简单 ,实验条件温和 ,分离效能
高等优点 ,在所用分析条件下 , 3 min 即可完成测
定 ,且共存组分不干扰测定。
2.2　在所用实验条件下测定 ,具有较好的重现性和
线性关系 ,并有较高的检出灵敏度。
参考文献
1　Roger M Smith and Burford M D , SFE and GC determina-
tion of the sesquiterpene lactone parthenolide in the medici-
nal herb feverfew.J.Chromatog r.A , 1992 , 627:255 ～ 261
2　Kery A , Turiak G and Tetenyi P , I solation of parthenolide
by droplet counter current chromatography.J.Chromatogr.
A , 1988 , 446:157 ～ 161
3　Bohlann F and Zdero I , Phytochemistry , 1982 , 21:2543
4　Ray J P , Levesque J and Pousset J L , Extraction and HPLC
methods for the r-lactones:parthenolide, mar rubin and
ar themisinin.J.Chroma tog r.A , 1992 , 605:124～ 128
DETERMINATION OF PARTHENOLIDE IN FEVERFEW USING
SUPERCRITICAL FLUID CHROMATOGRAPHY
GUO Ya-dong ,WU Shuang-feng , LI Fan
(Department of Pharmacy , Kunming Medical College , Kunming　650031 , China)
Abstract　Determination of parthenolide in feverfew by SFC was studied in this paper.The precision and lineari-
ty of the detecto r response were excellent , the RSD were 2.67% and 0.70% respectively for retention time and
peak area , the value of correlation coef fcient(r2)was 0.9996.The sample w as determined directly af ter it was ex-
tracted w ith CH3OH , and it was finished w ithin 3 minutes.This method could be used to analy se parthenolide in
feverfew rapidly.
Key words　SFC;Parthenolide;Feverfew
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