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令论 著令
峨眉唐松草碱对离体大鼠心肌
缺血再灌注损伤的保护作用 ’
刘 红 ` 贾菊芳 胡本容 钱家庆
( 同济医科大学药理教研室 汉 。 4 3 0 0 3。 )
提要 峨眉唐松草碱 ( m e t h o x y a d i a n t i f o l i n e s 卜m o l / L ) 显 著降
低大白鼠离体灌流心脏缺血再灌注损伤所致心室纤颤的发生率 、 延长窦性
心律时间 、 减少心肌细胞 中乳酸脱氮酶的释放及丙二醛的生成 , 显示其具
有保护 心肌及抑制脂质过乳化作用 , 效果与维拉帕米近似 。
关键词 峨 眉唐松草碱 大鼠心肌缺血 再灌注 心律失常 乳酸脱氮
酶 维拉帕米
占十山个卜盆.去甲.小空了孟宁土书.
峨眉唐松草碱 ( m e t h o x y a d i a n t i一
fo n
n e M A F ) 系毛食科植物峨眉唐松草
( T h
a l i e t r u 二 o m e i e n s e W . T
.
W
a n g )
根茎中提出的生物碱。 我室 已证明其具有
降低大鼠心房收缩性 、 兴奋性 、 自律性 、
延长不应期 〔 ` j ; 扩张冠状血管 、 增 加 心
肌营养性血流量 〔 艺 ’ 和在整体大鼠抗 实验
性心律失常作用 〔 . ’ 。 本文主要研究M A F
对离体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作
用 。
材料与方法
药品 由北京中国预防医学科学院劳
动卫生与职业病研究所提供 。 维 拉 帕 米
( V e r a p a m i l V e r ) 系天津和平制药 厂
出品 ( 批号 5 0 0 6 1 7 )
方法 按文献 〔 ` ’ 所述方法 , 实验 用
S p r a q u e 一D a w l e y 大鼠 , 古、 体重 2 3 0士
2 4 9 ( 云士 S D ) 。 戊 巴 比 妥 钠 ( 3 0m g /
k g
,
i p )迅速取出心脏 , 浸入到冰冷 的氧
饱和的K r e b s 一 H e n s e l e i t溶 液 中分离主
动脉 ,棍入主动脉导管联于 L a n郎 。 d o r f f
灌注装里上 , 灌注压用恒流泵控制 在 9 . 5
.卫生部经费资助题
1朔北恩施医专药理教研室 4 4 500 0
k P a 左右 , 灌注液用 K r e b s一 H e n s e l e i t
溶液 , 其组成是 ( m m o l ) : N a C I 1 1 5 ;
K C 1 4
.
7 ; C a C I 2
.
5 2 ; M g S O ` 1
.
6 4 ;
K H
Z P O 一 1
.
2 5 ; g l
u e o s e 5
.
5 5 ; S o d i u m
一p 了r u v a t e 2 . 0 ; N a H C 0 s 2 4 . 5 8 ; p H
7
.
4 , 用滤纸滤过后 , 按文献 〔 . ’ 介绍的密
闭给氧法 : 即实验前 , 先将灌流瓶完全充
满灌注液 , 通过一橡皮塞插进一 根 玻 璃
管 , 并与充满 95 物 O : + 5 肠 C O : 混合 气
体的无弹性球胆相连 , 然后打开灌流瓶的
流出管 , 让灌流液流出 2 0 ~ 3 0 m l 随 着
灌流液的流出 , 球胆内的混合气体便进入
灌流瓶中 , 再夹住流出管 , 然后 振 摇 10
m in 待灌流液与混合气充分混匀后密闭使
用 。 整个灌流系统温度控制在 3 7士 。 . 1℃ ,
心脏灌流平衡l o m i 二后 , 于萄。耳铸水平 , 在左心耳与肺动脉圆锥之间进针犷用
` 卜丝线结扎左冠状动拯造成心肌缺血 , 、 缺血
灌注 10 m饭后 , 剪断结扎线 , 再 灌 住 20
m i n
, 整个灌流过程中 , 铂金 电极的两极
分别置于心脏表面的左上角及右下角 , 记
录 I 导联心 电图 , 计算再灌注后 3 m in 内
心律失常的发生率并分别收集平衡期 5 、
i o m i n
, 结扎期 5 、 i o m i n , 再灌 期 3 、
.
3 3 8
.
5
、
1 0
、
20 m ni 的冠脉流出液 , 用光电比
。.仍9-H甘NTù:价-H。妈
TgO-H鸽
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OT仍
舞铭姗蕊很
色法 仁 . ’ 测定各时间内流出液中乳酸 脱 氢
酶 ( L D H ) 的含量 , 同时记录各时 间 组
的冠脉灌注压 、 心 电图 。 所试药物于结扎
冠脉前 5 m i n , 由灌注液中给予并持续至
实验结束 。
结 果
1 从 A F对离体大鼠心脏 缺 血一再
灌注时冠脉灌注压和心率的影响 对照组
离体大鼠心脏 , 冠脉结扎后 , 可致冠脉压
突然上升 , 随之冠脉流量也显著减少 , 在
冠脉持续闭塞阶段 , 冠脉灌注压维持在一
个较高水平 ( 比结扎前升高 1 . 3 ~ 2 . 67
k P a )
, 结扎线松开再灌注时 , 冠脉灌注
压迅速 下降并恢复至结扎前水平 , 与对照
组比较 , M A F 组及 V er 组 , 在给 药 后 5
m i n
、 结扎后 5 m i n 及 l o m i n , 其灌 注 压
下降值均有显著差异 ( P < 0 . 05 , 见 图
1 )
, 结果表明M A F及 V e r 均有显 著 降
低冠脉灌注压作用 , 可能由于扩张冠脉 、
减少冠脉 阻力作用 。 此外 , 与对 照 组 比
较 , 两药的减慢心率作用也显著 ( 见 表
1 )
。
…9+lT卜工:69-H们N
O9-H的N
, “ , ` l 几 L, 冉滋 不r
l ;
.— M A F组 5 尸 m川 I一 ` \尸 e r红1 1尸 m o l l卜 -一 对照组
ǎ娜奴翻厄盆侧班砚眨权坪收润à
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脚
次 昌 日
3 }) 4日
吕.0è于”侧
翻尔
时 间 ( 也 i n )
图 I M人F 对离体大眼缺血口再滋注心脏冠脉灌
注压的影响 ( 圈中各点为里土 SD , * 为与对 照 组 比
P < 0
.
05
, 对照组 n 二 26 , 其余均为 n o 10 ) 幕
2 林 A F对大鼠离体心脏 缺 血一再
339
21815晗96,
ǎ曰、口。Tà啊侧城睦盈盔斑解
滋注损伤性心律失常的影响 ( 见表 2 )
再灌注 3 m纽内、 对照组心室纤颤的发 生
率为 8 . 5肠 , 窦性节律持续时间为 90 . 5士
1 6
.
5 (
s
) (
豆士 S D ) , 给药后 , 室颤发生率
降为零 , 同时使窦性节律时间显著延长 。
3 从 A F对离体大鼠心脏缺血 再 灌
时 L O H释放最的影响 心肌细胞 损 伤 时
L D H从心肌细胞中释放 , 在对照 组 , 取
结扎 10 m i n , 再灌注 20 m i n 内的流出液 ,
测定 L D H含量 , 发现 L D H释放量在冠脉
结扎后 5 m in 时即明显增加 , ( 与平衡期
比较 P < 0 . 0 5 ) , 而在再灌注 3 m i红时 ,
L D H释放量达到高峰 ( 与平 衡 期 比 较
P < 。 . 0 0 1 , n 二 10 ) 。 冠脉结扎时间长短
与L D H释放量是平行的 , 结扎时间愈长 ,
L D H释放量愈多 ( 见图 2 ) 。 选结 扎 冠
脉 l o m in 的模型观察药物作用 , 于结扎 冠
脉前 s m in 分别给予M A F S “ m ol / L 及
v er 1 o m 。 1/ L其结果显 示 : 两 药 均 使
L D H释放明显减少 , 且释放高峰后移 (由
再灌注期 3 m i n移至 s m i n ) ( 见图 3 ) ,
两组峰值与对照组比较 , 统计学上有明显
差异 ( P < 0 . 0 0 1 , n = 1 0 ) , 说 明 M A F
和 V e r能显著抑制大鼠心脏缺血一再灌注
损伤时 L D H释放 。
4 从 A F对离体大鼠心脏缺 血 再灌
注时流出液中从 O A生成的影响 实验中 、
分别留取各实验组平衡期 10 !n in 、 冠脉 结
扎期 10 m i n 、 再灌注期 3 m in 时的冠脉 流
出液 , 按 T B A比色法 〔 , ’ 测定心肌脂质过
IU 夕( l
结扎冠脉时间 (垃坛 )
图 2 离体大鼠冠脉结扎时间与流出液中 L D H 释
放里的关系 ( 图中各点为又土 SD , 数字为 n )
* P < 0
.
0弓, 均与相邻左侧组比
产曰、no日à啊粗嘴谧城盔窿解
n甘4八曰口J、
.1
10 2 0
时 间 ( m 坛
图 3 M人 F对离体大鼠心脏流出液中乳酸脱氢 酶
含盆的影响(… …对照组 n 二 2 6 ; — M A F组 S私位0 1/ L组 n 二 10 ; 一△ . △ . V e r 1 p m o l / L组 n 二
10 ; 各点为又士 SD , . 为与对照组比 P < 0 .仍 )
氧化产物 M D A含量 , ( 结果见 图 4 ) 。
可 以看出 M A F和V e r均能显著减少 离 体
大鼠心脏缺血再灌注时M D A的生成 。
表 2 M A F 、 V et 对离体大鼠缺血一再灌注损伤心肌所致心律失常的影响 ( 又土 S D )
心律失常发生率 (% ,
V F PV F V T V P E
88
.
5 4 3
一
5 5 7
一
5 4 2
.
6
再灌注开始
V E发生时
(
s )
后
间 寒时性节律间
(
s
)
对 照 组 8。 6士 3 9 1土 1 6
心.数一、
峨眉唐松草碱组
5卜也 0 1 /L
1 32士 2 0二
维拉帕
1卜口 。赞 `。 1 6弓士 1 3二
V F二 室性纤颇
V T二室性心动过速
二 P < 0 . 01
PV F二持续性室性纤颇
V P E . 室性期前收范
… P < O . 0 1( 均为与对照组比较 )
3 4 0
口 对照组
圈 、 ’ e r组 l 尸`、 1 0 1/ l」
皿 认I A I户全11 5 产 ,, ,` , l · l 」
8604286,ù.1lh卜仪.0民
八曰、忿a二à姻如嫩日厌
二 0 l t E () I之
图 4 M人F对大鼠离体心脏缺血再滋注损伤 心脏
流出液中脂质过氧化产物丙二 醛 ( M D A ) 含
皿的影响
E ~ 平衡期 I Om扭 , O 二冠脉结 扎 期 1恤 i玛 R . 再
灌注 3 二坛 , 戈土 SD , 均为 n 二 6 , 与对照组 比 较
二 P ( 0 . 0 1 , 二 ’ P ( 0 . 00 1
讨 论
本实验证 明M A F S 卜m ol / L能 明 显
降低再灌注损伤性心律失常的发生率 , 延
一长窦性节律时间 、 显著 减 少 心 肌 细 胞
L D H释放及减少心肌脂质过氧化物 丙 二
醛 的生成 , 说 明M A F对离体大 鼠心脏 缺
血再灌注损伤有保护作用 。
关于再灌注损伤性心律失常的发生机
制 , 近年来国内外研究较多 , 但 说 法 不
一 。 心肌缺血和再灌注早期 , 缺血心肌细
胞上 a受体数目明显增多 〔 吕 ’ “ ’ , 缺 血 心
肌再灌时 , 胞外C a Z贡大量内流 , 引 起 心
肌钙超负荷 , 还可导致钙反常现象 〔 ` 。 口 ,
缺血心肌再灌时还可产生大量的自由基 ,
使膜发生脂质过氧化反应 〔 ” ’ , 以上这些
因素均能使心肌产生一系列损伤 , 如心律
失常、 L D H释放及 M D A 的生成等。
以往的研究证明 , M A F扩张冠状 动
脉 , 增加心肌营养性血流量的作用 , 可能
与拮抗 C a 要+ 及阻断 a 受体激动时 C a 名志内
流有关 。 本实验观察到M A F与维拉帕 米
类似 , 对离体大鼠心脏缺血再灌注性损伤
有保护作用 , 这也可能与其阻 C a 乞少内 流
及减弱 a受体激动作 用 有 关 〔 艺 ’ 。 胞 内
C a 艺+ 的增加 , 可激活黄嘿吟氧化酶 系 统
产生氧自由基 , M A F保护心肌的 作 用 ,
也可能与其阻断 C a Z少内流 , 使其再 灌 注
损伤时氧自由基产生减少有关 , 此方面机
制 , 尚待进一步研究 。
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拐 . C i r e u l a t io n R e s e a r c五一 主98 6 ; 弓8 ( 3 ) :
3 3 1
( 1 989 年 7月 3 0日收稿 ,
1 990年 6月14日修回 )
T H任 P R O T EC T IV E E F F〔 C T S O F 从 E T H O X YA D I A N T I F O L ! N E
O N T H E IS C H E从 ! A 一R E P ER F U S IO N IN D U C住D ! N J U R Y ! N
IS O L A T E D R A T 从 Y O C A R D ! U从
L i u H o
n g , J i a J往 f a n g , H u B e n r o 几` , Q i a n J i a q i n g
( D
. P t
.
P五. r . , T o 纽 g j i M . d主e a l U n i丫 . r s i t y’ H a 众k o u 4 3003 0 )
A b , t r a c t
M e t il o l y a d i a n t i f o l i n e ( M A F ) 15 a n e w a l k l o i d i s o l a t e d f r o m
拿鱼鲤墅逛 一兰夕连一里 2查一邃二期 · 341 -
绞股蓝总皂试对离体大鼠肝脏脂质过氧化
及膜流动性损伤的保护作用
李 林 , 邢善田 周金黄
( 军事医学科学院毒物药物研 究所 北京 1 0 0 8 5 0 )
钱`刃介兮作的乙W份乃引提要 在体外实验 中纹股蓝总皂武 ( G P ) 能抑制大鼠肝微拉体 自发 的
和 由 F e 么士一半耽 氛酸 、 V计 C 一 N A D P H和 C C I` 诱发 的脂 质过乳化 , 其作
用强 于人参总皂武 。 F e Z士一半脆氛酸导致 大 鼠杆微拉体 、 线拉休膜 流动性
降低 , 同时加入 G P 可防止膜 流动性的下 降。
关键词 绞股蓝总皂武 肝脏 脂质过氧化 膜 流动性
绞股蓝 ( G y n o s t e m m a p e n t a p h y 一 i左行了比较 。
ù介公6“刃`碑了从钱心认习巧
n u m M a ik n
。 ) 为葫芦科绞股蓝属植物 ,
在我国南方分布广泛 。 1 9 8 3年竹 本 常 松
等 t ’ 〕从绞股蓝中分离出 50 多种绞股 蓝 皂
试 , 并发现其中 4种与人参皂试的结构相
似 。 近年来 , 国内外学者对绞股蓝的药理
作用进行了较广泛研究 , 证实绞股蓝具有
抗肿瘤 、 增强免疫机能 、 降血脂 、 抑制血
小板聚集和血栓素A Z释放等作用 〔 2一 〕 ,
但对肝脏 的影响尚不清楚 。 为此 , 木实验
观察了绞股蓝总皂俄在体外对 F e Z士一半胧
氨酸等诱发肝微粒体脂质过氧化及生物膜
流动性损伤的保护作用 , 并与人参总皂试
峭匕京老年病医疗研究中心 1 000治
材料和方法
材料 绞股蓝总皂俄 ( G y p e n o s i d e s ,
G P )
、 人参总皂 试 ( G i n s e n o s i d e s ,
G S ) 由首都医学院药理学教研 室金 有豫
教授 惠赠 。
硫代巴比妥酸 ( T B A ) 、 还原 型 辅
酶 I ( N A D P H ) 、 1 , 6 一二苯基 一 1 ,
3
,
5 一 己三烯 ( D P H ) 为 S i g m a 公 司
产品 ; 半胧氨酸购自M e r o k公 司 ; 硫 酸
亚铁 、 四氯化碳 ( C C I` ) 为北京化 工 厂
产品 ; V 计 C 购自中国医药公司北京采购
供应站 ; 其它试剂为国产分析纯 。
动物 W i s t a r大鼠 , 早 , 体重 16 0~
T h
a
l i
e t r u m O m
e i e n e e W
.
T
.
W
a n g
.
D u r i n g 3 m i n r e p e r f u s i o n a f t e r 1 0
m i n o f e o r o n a r y l i g a t i
o n , M A F S 协m o l / L s i g o i f i e a n t ly d e e r e a s e d
t h e i n e i d e n e e o f 呈s o l a t e d r a t h e a r t s w i t h v e n t r i e u l a r a r r h y t h m i a s
( V F
a n d V T )
.
I t d e l
a y e d t h e o n s e t o f v e n t r i e u l
a r f i b r i l l
a t i o n a n d
s h o r t e n e d i t s d u r a t i o n a n d m a r k e d l了 p r o l o n g e d t h e t i m e o f n o r m a l
s全n u s r h y t h m . I t a t s o s i g n i f i e a n t l y d e e r e a s e d t h e r e l e a s e o f L D H
f r o m t h
e m y o e a r d i u m i n i s o l
a t e d r a t h e a r t s
.
I n a d d i t i o n
,
M A F S
卜m o l / L e o u l d d e e r e a s e t h e h e a r t r a t e a n d e o r o n a r y r e s i s t a n e e . T il e
r e s u l t
s s u g g e s t t il
a t M A F p o s s e s s e d p r o t 。吧毛呈v o e f f e e t s o n t h e r e p e r -
f u s i o n i n j u r 了 i n i s o l a t e d r a t h e a r t s .
K
e y w o r d s
: M e t五o x y a d i a n t i f o l i卫 e ; V o r . p a m i l ; M y o e a r d i u xn
i s e五e m i a a n d r e p e r f u s呈o n : A r r h v t五m i a , L 反 e t a t e d e h y d r o g e 几 a s e :
份i护l a P “ r o 不’ a e 冬