全 文 ：木香马兜铃与七味红花殊胜丸中马兜铃酸 A测定研究
魏玉海， 王慧春， 刘亚蓉， 刘海青， 韩晓萍， 宋 霞
(青海省药品检验所，青海 西宁 810016)
收稿日期:2011-07-05
基金项目:国家药典委员会药品标准提高项目(700)
作者简介:魏玉海(1980—) ，男，硕士，从事中藏药分析研究工作。
摘要:目的 建立 HPLC法测定木香马兜铃及七味红花殊胜丸中马兜铃酸 A。方法 采用 HPLC 法，Sunfire-ODS C18(5
μm，250 mm ×4． 6 mm)色谱柱;流动相为乙腈 － 0． 05%磷酸溶液(45 ∶ 55) ;检测波长为 322 nm。结果 马兜铃酸 A 在
0． 014 8 ～ 0． 294 μg(r = 0． 999 9)的范围内线性关系良好;平均回收率为 98． 9%，RSD为 1． 0%。结论 本法操作简便，准
确性、重复性好，可用于木香马兜铃与七味红花殊胜丸中马兜铃酸 A的测定。
关键词:七味红花殊胜丸;木香马兜铃;马兜铃酸 A
中图分类号:R 284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)12-2186-03
七味红花殊胜丸为藏医传统名方，藏文名“苦空确屯日
布”，由红花、天竺黄、獐牙菜、诃子、麻黄、木香马兜铃、五脉
绿绒蒿七味藏药材组成。具有清热消炎、保肝退黄。用于新
旧肝病，劳伤引起的肝血增盛，肝肿大，巩膜黄染，食欲不
振［1-2］。木香马兜铃为马兜铃科植物木香马兜铃 Aristolochia
moupinensis Franch．的干燥茎及根茎［3-5］。陈娅娟等［6］、周娜
等［7］、姚冬琴等［8］均分别报道了马兜铃酸 A 的肾毒性及其
机制，因此有必要对含马兜铃酸 A 的木香马兜铃及其制剂
七味红花殊胜丸中的马兜铃酸 A 量进行测定。本实验建立
了测定七味红花殊胜丸及木香马兜铃中马兜铃酸 A 的测定
方法，该方法能够准确的测定木香马兜铃与七味红花殊胜丸
中马兜铃酸 A。
1 仪器与试药
Waters2695 型高效液相色谱仪，Waters2998 二极管阵列
检测器，Empower化学工作站(美国 Waters 公司) ;电子天平
(METTLER AB204-S，瑞士 METTLER 公司) ;电子天平
(METTLER TOLEDO，瑞士 METTLER 公司) ;超声波清洗器
(B2500s-MT，上海必能信超声波清洗仪有限公司)。
马兜铃酸 A对照品(110746-200204)购自中国药品生物
制品检定所;甲醇、乙腈均为色谱纯，其余试剂为分析纯，水
为超纯水。七味红花殊胜丸样品、木香马兜及处方中相应药
材由两家不同药厂提供，5 批七味红花殊胜丸批号分别为:
06343A、09177A、090401、090701、100501。
2 方法与结果
2． 1 色谱条件 Sunfire-ODS C18柱(5 μm，250 mm × 4． 6
mm) ;柱温 30 ℃室温;流动相为乙腈-0． 05%磷酸溶液(45 ∶
55) (按此比例混合后 pH大于 3) ;体积流量 1 mL /min;检测
波长为 322 nm。
2． 2 对照品溶液的制备 精密称取马兜铃酸 A 对照品
7． 40 mg，置 100 mL 量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，取 2 mL置 10 mL量瓶中，加甲醇至刻度摇匀，即得，马兜
铃酸 A对照品溶液质量浓度为 14． 8 μg /mL。
2． 3 供试品溶液的制备
2． 3． 1 七味红花殊胜丸供试品溶液制备 取本品中粉约 1
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%甲醇 25 mL，摇
匀，超声处理(功率 250 W，频率 50 kHz)40 min，取出，过滤，
同时用少量 70%甲醇冲洗药渣，并入滤液，滤液蒸干，残渣
加 25 mL水使溶解，水液用 6 mol /L盐酸调 pH 值至 1，用三
氯甲烷萃取 4 次(每次 20 mL) ，合并三氯甲烷，蒸干，残渣用
甲醇溶解并转移至 25 mL量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，
滤过，取续滤液，即得。
2． 3． 2 木香马兜铃供试品溶液制备 取本品中粉约 0． 5 g，
精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入 70%甲醇 50 mL，摇
匀，超声处理(功率 250 W，频率 50 kHz)40 min，取出，滤过，
取续滤液，即得。
2． 4 阴性对照溶液的制备 按处方比例称取除去木香马兜
铃药材的其他药材适量，依照上述供试品溶液的制备方法，
制成阴性对照溶液。
2． 5 系统适应性试验 在上述色谱条件下，精密吸取供试
品溶液、对照品溶液、阴性对照溶液各 10 μL，分别注入液相
色谱仪。供试品色谱图中，在与对照品色谱图相应保留时间
上，有相同的色谱峰，而阴性对照在此无干扰，阴性色谱图见
图 1。
2． 6 马兜铃酸 A 峰的证明 为进一步证明供试品中所检
测的色谱峰为马兜铃酸 A的色谱峰，在提取色谱峰的同时，
用二极管阵列检测器同时进行了光谱扫描，结果对照品与供
试品相同的保留时间主峰的最大吸收分别均为:225、249、
322、394 nm，而在与对照品与供试品相同保留时间的主峰处
及前后均无相应光谱图，证明了样品中所测得主峰为马兜铃
酸 A的峰。
6812
2011 年 12 月
第 33 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2011
Vol． 33 No． 12
图 1 阴性对照、对照品、样品 HPLC色谱图
A．阴性对照 B．对照品 C．木香马兜铃药材供试品 D．七味红花殊胜丸供试品
2． 7 线性关系考察 按上述色谱条件，分别将上述马兜铃
酸 A对照品溶液(14． 8 μg /mL) ，稀释成 0． 74、2． 96、5． 92、
8． 88、11． 84、14． 8 μg /mL的溶液，分别精密吸取各对照品溶
液 20 μL，注入液相色谱仪，测得峰面积。以峰面积(Y)为纵
坐标，马兜铃酸 A对照品进样量(X)为横坐标，绘制标准曲
线，计算得回归方程:Y = 5． 02 × 106 × X － 368 × 10，
r = 0． 999 9。试验结果表明在 0． 014 8 μg ～ 0． 294 μg的范围
内，马兜铃酸 A进样量与峰面积值呈良好的线性关系。
2． 8 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液(14． 8 μg /
mL) ，连续进样 6 次，每次进样体积为 10 μL，测得马兜铃酸
A峰面积 RSD为 0． 26%。结果表明精密度良好。
2． 9 稳定性试验 取批号为 06343A 的七味红花殊胜丸样
品，按供试品制备项下的方法制成供试品溶液，按上述色谱
条件分别于 0，2，4，6，8，12 h注入液相色谱仪，每次进样体积
为 10 μL，测定峰面积，按马兜铃酸 A 峰面积计算 RSD 为
1． 2%(n = 6)。结果表明:供试品中马兜铃酸 A在 12 h内稳
定性良好。
2． 10 重复性试验 取批号为 06343A的七味红花殊胜丸样
品 5 份，按供试品制备项下的方法制成供试品溶液，每份样
品进 2 针，每次进样体积为 10 μL，在上述色谱条件下，测定
马兜铃酸 A，按马兜铃酸 A 峰面积计算 RSD 为 1． 1%(n =
6)。结果表明供试品重现性良好。
2． 11 加样回收率试验 取已知马兜铃酸 A 量样品(批号
06343A，0． 384 8 mg /g)0． 5 g，精密称定共 9 份，平均分为 3
组，依次加入马兜铃酸 A 对照品溶液(0． 074 mg /mL)2 mL、
2． 5 mL、3 mL，按供试品溶液方法制成所需溶液。依法测定，
计算收率。结果见表 1，回收率为 98． 9%，RSD为 1． 0%。
表 1 回收率试验结果
样品取样
量 / g
原有量
/mg
标准品加
入量 /mg
测得总量
/mg
回收率
/%
平均回收
率 /%
RSD
/%
0． 501 2 0． 192 9 0． 148 0． 338 7 98． 54
0． 500 7 0． 192 7 0． 148 0． 339 7 99． 35
0． 513 4 0． 197 6 0． 148 0． 341 6 97． 34
0． 511 7 0． 196 9 0． 185 0． 382 1 100． 12
0． 502 8 0． 193 5 0． 185 0． 376 0 98． 66 98． 9 1． 0
0． 497 1 0． 191 3 0． 185 0． 371 5 97． 40
0． 500 9 0． 192 7 0． 222 0． 411 8 98． 69
0． 523 4 0． 201 4 0． 222 0． 423 9 100． 21
0． 513 5 0． 197 6 0． 222 0． 418 2 99． 35
2． 12 样品测定 分别取七味红花殊胜丸与木香马兜铃药
材，按照上述 2． 3 项下七味红花殊胜丸与木香马兜铃供试品
溶液的制备方法，分别制备七味红花殊胜丸与木香马兜铃的
供试品溶液，并按上述 2． 1 项下色谱条件进行测定，测得两
批次木香马兜铃药材(样品 1、样品 2)及 5 批次七味红花殊
胜丸(06343A、09177A、090401、090701、100501)中马兜铃酸
A量结果见表 2。
表 2 木香马兜铃与七味红花殊胜丸中马兜铃酸 A
批号 马兜铃酸 A /% 平均含有量 /%
木香马兜铃 样品 1 1． 312 1． 13
样品 2 0． 954
七味红花殊胜丸 06343A 0． 038 5 0． 03
09177A 0． 037 2
090401 0． 024 1
090701 0． 026 9
100501 0． 028 1
3 讨论
3． 1 检测波长的选择 以二极管阵列检测器对马兜铃酸 A
(质量浓度为 0． 0148 mg /mL)在 200 ～ 400 nm 进行紫外扫
描，在 225、249、322、394 nm处分别均有最大吸收，通过试验
发现 225 nm 处为末端吸收，因此在色谱图上反应出杂质峰
面积较高，在 394 nm 长波长处，选择 394 nm 的为检测波长
时测得马兜铃酸 A主峰面积有所降低，参考文献［9-10］及实
际测得色谱峰情况，认为在选择 322 nm 波长为检测波长为
最适条件，不过以 225、249、394 nm 为检测波长时也可以进
行测定。
3． 2 流动相的选择 分别考察了乙腈-水、甲醇-水、乙腈 －
0． 05%磷酸溶液、甲醇 0． 05% 磷酸溶液，结果用乙腈 －
0． 05%磷酸溶液(45 ∶ 55)时的分离效果良好［11-13］，0． 05%磷
酸溶液 pH约为 2． 5，当与乙腈按上述比例混合后，pH 大于
3，对普通色谱柱有较好耐用性。
3． 3 供试品提取方式的选择 在供试品的提取过程中选择
了回流、超声、索氏提取的方法，结果对于七味红花殊胜丸供
试品溶液制备在超声处理后，用三氯甲烷从酸水液中提取，
所得样品回收率高，且杂质无干扰［11-14］;对于木香马兜铃供
试品溶液制备经过超声处理便可进样，分离良好，杂质峰无
干扰。
3． 4 5 批次七味红花殊胜丸马兜铃酸 A 的平均质量分数为
7812
2011 年 12 月
第 33 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2011
Vol． 33 No． 12
0． 03%，两批木香马兜铃药材中平均质量分数为 1． 13%。谭
睿等测得二十五味松石胶囊中马兜铃酸 A 平均质量分数为
0． 03 μg /g［9］，陈燕等测得二十五味绿绒蒿丸中马兜铃酸 A
平均质量分数为 0． 11 mg /丸［10］。英锡相等［15］、周跃华
等［16］、韩娜等［17］、刘丽芳等［18］等均测定了部分含马兜铃酸
A的药材及成药，而谭睿等［9］、陈燕等［10］测定了含木香马兜
铃药材成药中的马兜铃酸 A，但均未见直接测定木香马兜铃
药材中马兜铃酸 A的报道。《中国药典》2010 年版一部细辛
中所含马兜铃酸 A质量分数限度为不得过 0． 001%［11］，我们
所测成药与药材中的马兜铃酸 A 均高于此限度。根据文献
报道与本实验中测得的部分含木香马兜铃的藏成药中马兜
铃酸 A的含量比较高，考虑到马兜铃酸 A 的肾毒性，在临床
使用含木香马兜铃药材成药过程中，长期服用或不同年龄阶
段的患者要慎重服用，对于藏成药中马兜铃酸 A的含有量较
高的，考虑替换处方中木香马兜铃药材。
参考文献:
［1］ 中华人民共和国卫生部． 卫生部药品标准:藏药第一册［S］．
北京:人民卫生出版社，1995:221．
［2］ 青海省药品检验所． 青海省藏药标准［S］． 青海:青海省卫生
厅印制，1992:112．
［3］ 左振常，叶宝林，尕布藏，等．中国藏药［M］．上海:上海科技出
版社，1990:307-312．
［4］ 青海省卫生厅．六省区藏药标准［S］． 青海:青海省人民出版
社出版，1979:14．
［5］ 丘华兴，林有润，等．中国植物志:第 24 卷［M］． 北京:科学出
版社，1998:213-215．
［6］ 陈娅娟，吴俏银，叶兰慧，等．马兜铃酸毒理研究进展［J］．广东
药学院学报，2003，19(2) :156-158．
［7］ 周 娜，李晓玫．马兜铃酸肾病研究的新进展［J］． 药物不良
反应杂志，2007，9(1) :1-6．
［8］ 姚冬琴，张的凤，张金莲．马兜铃肾病的研究［J］．江西中医药，
2010，41(332) :60-62．
［9］ 谭 睿，杨金敏，刘 静，等． HPLC 法测定二十五味松石胶囊
中马兜铃酸的含量［J］．学术动态，2005(1) :23-26．
［10］ 陈 燕，黄志芳，刘玉红，等．二十五味绿绒蒿丸中马兜铃酸 A
的分析［J］．药物分析杂志，2009，29(2) :1458-1461．
［11］ 张 萍，冉海琳，肖新月，等． 细辛类植物中马兜铃酸 A 的定
性及定量分析［J］．药物分析杂志，2006，26(6) :811-814．
［12］ 吴艳蓉，王宇杰，孙启时． 辽细辛果实中马兜铃酸 A的含量测
定［J］．沈阳药科大学学报，2007，24(5) :288-291．
［13］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:2010 年版一部［S］．
北京:中国医药科技出版社，2010:214-215．
［14］ 李 琳，王智民，高慧敏，等．含马兜铃酸类中药材中马兜铃总
酸的含量［J］． 中国实验方剂学杂志，2006，12(2) :11-13．
［15］ 英锡相，袁昌鲁，曲贤广，等． 11 种中药材及 3 种中成药马兜
铃酸的含量测定［J］．辽宁中医杂志，2003，30(5) :404．
［16］ 周跃华，周 娟，黄莎莎，等． 部分马兜科药材中马兜铃酸 A
的含量测定究［J］． 药物分析杂志，2008，28(7) :1075-1080．
［17］ 韩 娜，路金才，毕开顺，等． RP-HPLC 法测定 14 种中药材中
马兜铃酸 A 的含量［J］． 沈阳药科大学学报，2008，25(2) :
115-118．
［18］ 刘丽芳，曹素萍，及 莹，等．中药材及中成药中马兜铃酸类成
分的定性、定量分析［J］． 中成药，2005，27(8) :938-941．
气相色谱法测定艾纳香中左旋龙脑的研究
夏稷子1， 彭金咏2， 赵 智3， 安 军1
(1． 贵州省黔南州药品检验所，贵州 都匀 558000;2． 大连医科大学药学院，辽宁 大连 116400;3． 贵州省黔
南州食品药品监督管理局，贵州 都匀 558000)
收稿日期:2011-06-29
基金项目:贵州省黔南州科技局资助项目(黔南科合 2010 药字 01 号)
作者简介:夏稷子(1964—) ，女，副主任药师，从事药品检验工作。Tel:13885440999，E-mail:jizixia@ yeah． net．
摘要:目的 建立气相色谱法测定艾纳香药材中左旋龙脑。方法 以水杨酸甲酯为内标物，采用 PEG20M(10%)填充柱
(2 m × 3 mm ×2 μm) ，FID检测器;气化温度 180 ℃;柱温 150 ℃;检测器温度 200 ℃;进样量为 1 μL。结果 左旋龙脑
在 0． 312 ～ 10． 000 mg /mL范围内与峰面积比值的线性关系良好，平均回收率为100． 9%，RSD为 2． 2%。结论 本方法
简便、准确、可用于艾纳香药材的质量评价。
关键词:艾纳香;GC;左旋龙脑
中图分类号:R 284． 1 文献标志码:B 文章编号:1001-1528(2011)12-2188-03
艾纳香为菊科艾纳香属植物艾纳香 Blumea balsamifera
(L．)DC．的新鲜或干燥地上部分，临床上用于风寒感冒、寒
湿泻痢、风湿痹通、跌打伤痛等，具有开窍醒神、清热止痛的
功效［1］，收载于《贵州省中药材、民族药材质量标准》2003 年
8812
2011 年 12 月
第 33 卷 第 12 期
中 成 药
Chinese Traditional Patent Medicine
December 2011
Vol． 33 No． 12