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大叶秦艽花与麻花秦艽花抗炎镇痛作用的研究



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大叶秦艽花与麻花秦艽花抗炎镇痛作用的研究
张新新,贾 娜,孙 琛,赵文娜,孙文基*(西北大学,陕西省生物医药重点实验室,西安 710069)
摘要:目的 研究大叶秦艽花与麻花秦艽花的抗炎镇痛作用。方法 采用二甲苯所致小鼠耳肿胀和大鼠角叉菜胶足趾肿胀模
型,研究大叶秦艽花与麻花秦艽花的抗炎作用;采用热板法、醋酸扭体法、光照甩尾法,研究大叶秦艽与麻花秦艽的镇痛作用。结
果 大叶秦艽、麻花秦艽能减轻二甲苯所致小鼠耳肿胀的体积和大鼠角叉菜胶足趾肿胀率;提高热板法引起小鼠的痛阈值及延
长光电甩尾法所致的潜伏期;显著地减少醋酸引起的扭体次数。结论 大叶秦艽花与麻花秦艽花具有较好的抗炎、镇痛作用。
关键词:大叶秦艽;麻花秦艽;抗炎;镇痛
doi:10.3969/j.issn.1004-2407.2012.04.022
中图分类号:R965   文献标志码:A   文章编号:1004-2407(2012)04-0341-03
Anti-inflammatory and analgesic activity of G.macrophylla Pal flower and G.
straminea Maxim flower
ZHANG Xinxin,JIA Na,SUN Chen,ZHAO Wenna,SUN Wenji*(Biomedicine Key Laboratory of Shaanxi Province,Northwest
University,Xi′an 710069,China)
Abstract:Objective To investigate the anti-inflammatory and analgesic activity of G.macrophylla Pal flower and G.straminea
Maxim flower.Methods Dimethyl benzene(DB)-induced mouse ear edema model and carrageenin-induced rat paw edema model
were employed for the anti-inflammatory activity experiment.The experiment for analgesic activity was done by using hot plate
test,photoelectricity-induced swinging tails test and acetic acid-induced writhing method.Results G.macrophylla Pal large doses
and G.straminea Maxim large doses showed an obvious inhibitory effect against DB-induced mouse ear edema volume,and they
showed an obvious analgesic effect against carrageenin-induced rat paw edema rat a few hours after oral administration.G.macro-
phylla Pal large doses and G.straminea Maxim large doses notably raised the pain threshold in the mice stimulated by hot plate
and photoelectricity.G.macrophylla Pal large doses and G.straminea Maxim large doses greatly reduced the number of acid-in-
duced writhing.Conclusion The result suggests G.macrophyllaPal flower and G.straminea Maxim flower have potential anti-in-
flammatory and analgesic activity.
Key words:G.macrophylla Pal;G.straminea Maxim;anti-inflammatory;analgesic
作者简介:张新新,男,硕士研究生
*通信作者:孙文基,男,教授,博士生导师
  大叶秦艽(G.macrophylla Pal)与麻花秦艽
(G.straminea Maxim)是龙胆科(Gentianaceae)龙胆
属(Gentiana L.)秦艽组(Sect Aptera Kusnez)的植
物[1]。本组植物约20种,分布于欧亚大陆中部,我国
至少有16种,主要在地势偏高的西北地区,以川西和
藏东为中心[2-4]。《中国药典》一部(2005年版)收载
大叶秦艽 (G.macrophylla Pal)、粗茎秦艽 (G.
crassicaulis Duthieex Burkil)、麻花秦艽(G.stra-
minea Maxim)和达乌里秦艽(G.dahurica Fisch)等
4种作为中药秦艽的植物基原。秦艽是重要的传统
中药之一,始载于《神农本草经》,列为中品,性味苦、
平,微寒,归胃、肝、胆经,可祛风湿、舒经络[5]、清虚
热、利湿退黄[6]。
1 仪器与材料
1.1 仪器 YLS-Q4耳肿打耳器、YLS-7B足趾容积
测量仪、YLS-6B智能热板仪、YLS-12A鼠尾光照测
痛仪(山东省医学科学院设备站);30μL移液器。
1.2 试药 二甲苯(天津市大茂化学仪器供应站);
角叉菜胶混悬液(和光纯药工业株式会社);冰醋酸
(天津市科贸欧化学仪器供应站);阿司匹林(批号
070808,陕西白鹿原制药有限公司);大叶秦艽花和麻
花秦艽花提取物:大叶秦艽花购自陕西陇县,麻花秦
艽花购自青海西宁,二者用粉碎机磨成粉末。室温
下,将处理好的药材用体积分数75%的乙醇回流提
取,直到药材无色。用旋转蒸发仪将获得的乙醇提取
液在50℃和减压的条件下浓缩,用冻干机冻干,得到
大叶秦艽提取物286.1g,产率为28.05%,麻花秦艽
提取物380.3g,产率为25.35%。
1.3 实验动物 健康ICR品系小白鼠,雌性,112
只,体质量18~22g,购自西安交通大学医学院实验
动物中心,合格证号:医动字第08-004号;健康SD品
系雄性大白鼠80只,体质量200~220g,购自西安交
通大学医学院实验动物中心,合格证号:医动字第
08-005号,室温20~25℃,相对湿度为38%~41%,
人工照明,明暗各12h,供固体饲料和自来水,自由
摄食饮水,良好通风。每周打扫室内卫生2次,保持
室内没有明显的氨臭味。
2 方法
2.1 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物的抗炎实验
2.1.1 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物对二甲苯所
致小鼠耳肿胀的影响 取雌性小鼠112只,随机分成
8组,每组14只。给药1d1次,每次每只小鼠给药
0.6mL,连续给药6d。分别灌胃给予下列药物。空
白对照组(NC):自来水0.6mL/只;阳性对照组:阿
司匹林200mg·kg-1;给药组:大叶秦艽大剂量3.37
g·kg-1;大叶秦艽中剂量1.68g·kg-1;大叶秦艽小
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剂量0.84g·kg-1;麻花秦艽大剂量3.04g·kg-1;麻
花秦艽中剂量1.52g·kg-1;麻花秦艽小剂量0.76
g·kg-1。末次给药40min后于右耳廓正、反两面均
匀涂抹二甲苯20μL/只,15min后脱颈处死,沿耳廓
基线剪下两耳,以8mm直径打孔器打下耳片,分别称
质量。以两耳片质量之差为肿胀度,并求出抑制率。抑
制率=[(对照组肿胀度平均值-给药组肿胀度平均
值)/对照组肿胀度平均值]×100%。
2.1.2 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物对大鼠角叉菜
胶足趾肿胀的影响 取雄性大鼠80只,随机分成8组,
每组10只。给药1d1次,每次每只大鼠给药容积10
mL·kg-1,连续7d,分别灌胃给予下列药物。空白对照
组:自来水;阳性对照组:阿司匹林200mg·kg;给药组:
大叶秦艽大剂量2.81g·kg-1,大叶秦艽中剂量1.40g
·kg-1,大叶秦艽小剂量0.70g·kg-1;麻花秦艽大
剂量2.54g·kg-1,麻花秦艽中剂量1.27g·kg-1,
麻花秦艽小剂量0.63g·kg-1。末次给药后,先用
YLS-7B足趾容积测量仪测定其右足体积,作为给药
前体积V0,立即在右足掌皮下注射10g·L-1角叉菜
胶0.1mL。在给药后1,2,3,4,5和6h分别测定其
右足体积Vs,并计算肿胀率。肿胀率=[(Vs-V0)/
V0]×100%。
2.2 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物的镇痛实验
2.2.1 小鼠热板法痛阈时间的测定 选取(55±0.5)
℃热板上筛选合格雌性小白鼠(5s<舔后足时间<30
s)96只,按痛阈值随机分成8组,每组12只。给药1d
1次,连续给药7d。分别灌胃给予的药物和药物的各
组剂量同2.1.1项下。末次给药45,90和120min后
分别测定小鼠舔后足的时间(大于60s以60s计)。
2.2.2 醋酸扭体法小鼠扭体次数的测定 选取雌性
小鼠112只,随机分成8组,每组14只。给药1d1
次,连续给药7d。分别灌胃给予的药物和药物的各组
剂量同2.1.1项下。末次给药后45min腹腔注射7
mL·L-1冰醋酸10mL·kg-1,记录注射后20min
内的扭体次数。
2.2.3 光照甩尾法测定小鼠甩尾潜伏期 选取雌性
小鼠112只,随机分成8组,每组14只。给药1d1
次,连续给药7d。分别灌胃给予的药物和药物的各
组剂量同2.1.1。于末次给药45min后测定小鼠甩
尾时间(2s<甩尾时间<16s为合格数据)。
2.3 统计学处理 所有资料数据先进行组间Lev-
ene′s方差齐性检验,然后采用独立样本t检验方法进
行均值显著性统计,其结果以珔x±s表示,以P<0.05
判定有统计学意义。
3 结果
3.1 抗炎实验
3.1.1 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物对二甲苯所
致小鼠耳肿胀的影响 大叶秦艽与麻花秦艽大、中剂
量组、阳性对照阿司匹林组,与空白对照组相比,均能
显著地减少二甲苯所致耳肿胀度,与对照组(174.6%)
相比肿胀度抑制率分别为48.37%,50.07%,40.45%,
42.34%和67.28%。见表1。
表1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响(珔x±s,n=14)
Tab.1Effect of mouse ear edema model induced by dimethyl
benzene(珔x±s,n=14)
组别 剂量/g·kg-1 肿胀度/mg 抑制率/%
对照组 20.57±3.76
大叶秦艽小剂量组 0.84  11.06±4.04** 46.23
大叶秦艽中剂量组 1.68  10.62±4.01** 48.37
大叶秦艽大剂量组 3.37  10.27±4.04** 50.07
麻花秦艽小剂量组 0.76  12.21±3.07** 40.64
麻花秦艽中剂量组 1.52  12.25±4.14** 40.45
麻花秦艽大剂量组 3.04  11.86±3.41** 42.34
阿司匹林组 0.20  6.73±3.41** 67.28
 注:组间进行t检验;与水对照组相比*P<0.05,**P<0.01
3.1.2 大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物对大鼠角叉
菜胶足趾肿胀的影响 与对照组比,大叶秦艽大剂量
在给药1,4,5和6h后能明显减少足趾肿胀率,中剂
量和小剂量在给药1,2,3,4,5和6h后能明显减少
足趾肿胀率。麻花秦艽大剂量在给药2,3,4,5和6h
后能明显减少足趾肿胀率,中剂量和小剂量在给药
4,5和6h后能明显减少足趾肿胀率。表明大叶秦
艽与麻花秦艽随剂量增大,其药效持续时间延长。阳
性对照阿司匹林组在给药1~4h后非常显著地减少
足趾肿胀率。见表2。
表2 对角叉菜胶致大鼠足趾肿胀的影响(珔x±s,n=10)
Tab.2Effect of rat paw edema model induced by carrageenin(珔x±s,n=10)
组别    剂量/g·kg-1
肿胀率/%
1h 2h 3h 4h 5h 6h
对照组 57±14.7  87±23.9  80±17.7  68±16.4  59±17.6  48±17.0
大叶秦艽小剂量组 0.70  35±15.1** 47±20.2** 43±17.2** 26±14.2** 19±12.7** 37±13.8
大叶秦艽中剂量组 1.40  36±15.2* 45±11.8** 41±15.1** 29±17.3** 20±12.1** 15±11.8**
大叶秦艽大剂量组 2.81  37±21.2* 88±24.6  62±21.9  44±21.7* 38±13.0* 14±9.9**
麻花秦艽小剂量组 0.63  50±23.2  70±17.7  62±19.1  40±13.3** 32±11.1** 25±10.8**
麻花秦艽中剂量组 1.27  52±24.4  72±26.7  65±21.9  43±20.0* 33±16.8** 20±17.8**
麻花秦艽大剂量组 2.54  55±15.8  65±18.2* 61±16.7* 45±14.8** 36±7.9** 23±14.1**
阿司匹林组 0.20  17±9** 23±13.3** 32±19.5** 44±21.0* 44±19.8  36±17.9
 注:组间进行t检验;与水对照组相比*P<0.05,**P<0.01
243 西北药学杂志 2012年7月 第27卷 第4期
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3.2 镇痛实验
3.2.1 小鼠热板法痛阈时间的测定 大叶秦艽大、
中、小剂量组,麻花秦艽大、中、小剂量组,阳性对照阿
司匹林组的痛阈时间均比水对照组的痛阈时间长。
在45min各组的痛阈时间要比90和120min各组
的痛阈时间短,而90min各组的痛阈时间总体要比
120min各组的痛阈时间长,所以各给药组分别在
45,90和120min同时与对照组相比。见表3。
表3 对小鼠热板法痛阈值的影响(珔x±s,n=12)
Tab.3Effect of mouse analgesic activity by hot plate test(珔x±s,
n=12)
组别 剂量/g·kg-1
痛阈时间/s
45min  90min  120min
对照组 15±8  17±12  19±14
大叶秦艽小剂量组 0.84  16±7  21±9  20±9
大叶秦艽中剂量组 1.68  18±11  23±14  22±16
大叶秦艽大剂量组 3.37  20±11  26±12* 25±11*
麻花秦艽小剂量组 0.76  16±14  18±10  18±12
麻花秦艽中剂量组 1.52  18±12  19±17  19±16
麻花秦艽大剂量组 3.04  22±5* 22±7* 22±6*
阿司匹林组 0.20  23±17* 28±4* 26±14*
 注:组间进行t检验;与水对照组相比*P<0.05,**P<0.01
3.2.2 醋酸扭体法小鼠扭体次数的测定 与水对照
组相比(58.42次),阳性对照阿司匹林组在20min
内扭体次数为11.85次,有极强的镇痛作用。大叶秦
艽大、中剂量组均能减少扭体次数,分别为29.80和
40.23次。麻花秦艽大剂量组也能减少扭体次数,为
26.57次。大叶秦艽大剂量组和麻花秦艽大剂量组
效果显著,有比较强的镇痛作用。见表4。
表4 对小鼠醋酸扭体法扭体次数的影响(珔x±s,n=14)
Tab.4Effect of mouse analgesic activity by acetic acid-induced
writhing method(珔x±s,n=14)
组别 剂量/g·kg-1 扭体次数/次 抑制率/%
对照组 58±15
大叶秦艽小剂量组 0.84  30±20** 48.27
大叶秦艽中剂量组 1.68  40±21  31.03
大叶秦艽大剂量组 3.37  30±14** 48.27
麻花秦艽小剂量组 0.76  32±14** 44.82
麻花秦艽中剂量组 1.52  36±16** 37.93
麻花秦艽大剂量组 3.04  27±18** 53.45
阿司匹林组 0.20  12±15** 79.31
 注:组间进行t检验;与水对照组相比*P<0.05,**P<0.01
3.2.3 光照甩尾法小鼠甩尾潜伏期的测定 与对照
组相比较,大叶秦艽大、中、小剂量组,麻花秦艽大、
中、小剂量组和阳性对照阿司匹林组都能延长光照甩
尾的潜伏时间(P<0.05)。阿司匹林组延长时间的
效果最显著,大叶秦艽与麻花秦艽大剂量组延长时间
的效果要比中、小剂量组效果显著。见表5。
表5 对小鼠光照甩尾法甩尾时间的影响(珔x±s,n=14)
Tab.5Effect of mouse analgesic activity by photoelectricity-in-
duced swinging tails test(珔x±s,n=14)
组别 剂量/g·kg-1 光照甩尾时间/s
水对照组 7.55±3.14
大叶秦艽小剂量组 0.84  12.33±4.14**
大叶秦艽中剂量组 1.68  11.58±4.40**
大叶秦艽大剂量组 3.37  13.36±5.02**
麻花秦艽小剂量组 0.76  11.09±3.57*
麻花秦艽中剂量组 1.52  14.83±4.62**
麻花秦艽大剂量组 3.04  14.90±3.68**
阿司匹林组 0.20  15.07±2.49**
 注:组间进行t检验;与水对照组相比*P<0.05,**P<0.01
4 讨论
实验结果表明,大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物
能显著性地减少二甲苯所致小鼠耳肿胀度、角叉菜胶
所致大鼠的足肿胀率,证明它们具有良好的抗急性炎
症作用。在镇痛实验中,大叶秦艽花与麻花秦艽花提
取物能增加热板痛阈时间、显著性地减少醋酸引起的
扭体次数和延长光电甩尾的潜伏时间,这表明大叶秦
艽花与麻花秦艽花提取物有镇痛作用。在抗炎镇痛
实验中,实验结果有时并不满足量效关系,原因可能
是药物吸收不完全在短时间内并没有发挥药效。另
一个可能的原因是在实验过程中,随着时间的延长,
老鼠产生疲劳,致使老鼠对热、疼痛的敏感性降低,从
而给实验结果带来偏差。
大叶秦艽花与麻花秦艽花提取物具有显著的抗
炎和镇痛作用,藏人常用麻花秦艽的花,中原常用大
叶秦艽的花和根。由于两者有着相似的药理和药效
作用,因此它们的花可以互相代替。本实验可以为扩
大药用资源提供证据。对于只需要秦艽的根不需要
秦艽的花的药农来说,可以对花进行再利用。既可以
节约药用资源,又能获得利润,达到一举两得的目的。
参考文献:
[1] Ho TN,Liu SW,Lu XF.A phylogenetic analysis of Gen-
tiana(Gentianaceae)[J].Acta Phytotaxonomica Sin,
1996,34(5):505-506.
[2] 马毓泉,夏光成,肖培根.中国龙胆属秦艽组的分类研究
[J].内蒙古大学学报:自然科学版,1964(1):33-51.
[3] 何廷农,刘尚武,吴庆如.中国植物志:第62卷[M].北
京:科学出版社,1988:72-75.
[4] 中国科学院青藏高原综合科学考察队.西藏植物志:第
1卷[M].北京:科学出版社,1986:906.
[5] 中华本草编委会.中华本草:第17卷[M].上海:上海科
学技术出版社,1999:231-233.
[6] 巨丽红,张建怀.健胃康颗粒剂抗炎镇痛作用的研究
[J].西北药学杂志,2010,25(3):197-198.
(收稿日期:2011-11-25)
343西北药学杂志 2012年7月 第27卷 第4期