全 文 ：山香圆总黄酮体外对大鼠佐剂性关节炎免疫功能的影响
张　磊 1 ,李　俊1 ,余世春 2 ,金　涌 1 ,吕雄文1 ,彭　磊 1
(1.安徽医科大学药学院 , 安徽 合肥　230032;2.安徽省安泰医药生物技术有限责任公司 ,安徽 合肥　230061)
收稿日期:2006 - 08 - 14,修回日期:2006 - 10 - 16
基金项目:安徽医科大学科学技术研究基金资助项目(No 200419)
作者单位:张　磊(1972 - ),女 , 博士生 , 讲师 ,研究方向:抗炎免疫
药理学 , Tel:0551-5161115-890, E-m ail:zhanglei7202@ ya-
hoo. com. cn;
李　俊(1960 -),男 ,博士 ,教授 ,博士生导师 ,研究方向:
抗炎免疫药理学 、药代动力学 , 通讯作者 , Tel:0551-
5161001, E-m ai l:amu icp lj@m ai.l h .f ah. cn
中国图书分类号:R-332;R 282. 71;R 392.12;R 363-332;
R 684.302. 2;R 684.305. 31
文献标识码:A 文章编号:1001 -1978(2007)01 - 0106 -05
摘要:目的　观察山香圆总黄酮 ( to ta l flavono ids o f turpinia
arguta seen, TFS)体外对佐剂性关节炎 (adjuvant a rthritis,
AA)大鼠免疫功能的影响。方法　选择健康♂SD大鼠 , 采
用弗氏完全佐剂( freunds com plete adjuvant, FCA)诱导 AA大
鼠模型:将同一批号的的卡介苗 80℃水浴 1 h灭活 , 用灭菌
液体石蜡配成 10 g L - 1的乳剂。 d 28处死大鼠 , 取 AA大
鼠的免疫细胞(脾细胞和腹腔巨噬细胞)体外给药培养并检
测一些免疫指标:细胞增殖法检测 ConA、LPS诱导的大鼠脾
淋巴细胞增殖反应及 IL-1、 IL-2的分泌水平;放免法检测
PGE
2
水平。结果　与正常组相比 , AA大鼠 ConA、LPS诱导
的脾淋巴细胞增殖功能低下 , 脾淋巴细胞产生的 IL-2活性
下降 , LPS诱导的大鼠腹腔巨噬细胞产生的 IL-1、 PGE2水平
明显升高。 TFS(10- 8 ～ 10 - 4) m g L - 1可纠正 AA大鼠低下
的脾淋巴细胞增殖反应和脾细胞 IL-2的产生 , 降低 AA大鼠
腹腔巨噬细胞产生过高的 IL-1和 PGE
2
。结论　山香圆总黄
酮对 AA大鼠的异常免疫功能具有调节作用。
关键词:山香圆;关节炎;佐剂性关节炎;免疫功能
　　类风湿性关节炎 (rheuma to id arthritis, RA)是一
种以关节滑膜炎症为主要病理表现的慢性 、系统性
和破坏性的自身免疫性关节疾病[ 1] ,以多个关节疼
痛 、肿胀和功能障碍为主要特征。佐剂性关节炎
(ad juvant a rthritis, AA)大鼠模型为类风湿性关节炎
的动物模型 ,其组织病理学改变与 RA类似 ,免疫学
改变与 RA也有平行关系 [ 2] ,是研究 RA及评价防
治药物的常用动物模型之一。本课题组前期已从山
香圆中分离提取得到山香圆总黄酮 ( to tal flavonoids
of turpinia arguta seen, TFS),并通过初步的药理实验
确定 TFS为山香圆的有效部位 , 同时发现 TFS对
AA大鼠的原发性及继发炎症均有较好的治疗作
用 ,而且对继发性病变以多发性关节炎为特征的慢
性周身炎症也有明显的改善作用 [ 3] 。
为进一步探讨 TFS对大鼠佐剂性关节炎发挥
治疗作用的可能环节及机制 ,本文采用佐剂性关节
炎大鼠的免疫细胞体外给药培养的方法 ,观察 TFS
对 AA大鼠脾淋巴细胞增殖 、脾细胞产生的 IL-2及
腹腔巨噬细胞产生 IL-1、PGE2的影响 。为将 TFS开
发为治疗 RA及其他炎症性疾病的有效药物提供理
论依据和研究基础 。
1　材料与方法
1. 1　药物　TFS棕黄色粉末 ,总黄酮含量 70%,安
徽省安泰医药生物技术有限责任公司提供 ,其可溶
于水中 ,溶后的颜色为黄色 ,临用前将其研细后溶于
RPM I 1640培养基中。山香圆(sacien te, SAC),江西
山香药业有限公司产品 ,批号 9906263,临用前将其
研细后溶于 RPM I1640培养基中。 Lef活性代谢物 ,
美国欣凯公司上海代表处提供 ,批号 980816,临用
前溶于 RPM I 1640培养基中。医用卡介苗 (BCG)
为卫生部上海生物制品研究所产品 ,批号 990901。
RPM I 1640培养粉 ,美国 S igm a公司产品 ,应用液中
加 25 mmo l L- 1 HEPES, 2 nmo l L- 1 L-谷氨酰胺 ,
50 μmo l L -1二巯基乙醇 , 105 IU L- 1青霉素 、100
mg L - 1链霉素 , 1 mmo l L- 1丙酮酸钠和 10%小牛
血清 , pH 7.4。小牛血清 ,用前 56℃ 30 m in灭活。
ConA、LPS ,美国 S igma公司产品 ,用生理盐水或 RP-
M I 1640培养液配制应用浓度 ,经 0.2 μm微孔滤膜
过滤除菌 ,置 - 20℃冰箱保存备用 。 [ 3H ] -TdR,中
国原子能科学研究院同位素研究所产品 , 37×103
MBq L- 1临用前以无菌生理盐水配成 370 ×103
kBq L -1应用液 。
1. 2　仪器 　SW-C J-IF型超净工作台 ,江苏苏净集
团苏州安泰空气技术有限公司产品。N apco-6100型
细胞培养箱 ,美国杜邦公司产品。 FJ-2107型液体闪
烁计数仪 ,西安 262厂产品 。高速冷冻离心机 ,湖南
离心机厂产品 。
1. 3　动物　Sprague-Daw iey(SD)大鼠 ,体重 (180 ±
20) g, ♂。 C57BL /6J小鼠 ,体重(18±2)g, ♂, 6 ～ 8
周龄 。均由安徽医科大学实验动物中心提供 。
106 中国药理学通报　Ch inese Pharm acological Bu lletin　2007 Jan;23(1):106 ～ 10
1. 4　方法
1. 4. 1　模型制备 [ 4] 　将同一批号的的卡介苗 80℃
水浴 1 h灭活 ,用灭菌液体石蜡配成 10 g L- 1的乳
剂 ,充分研磨混匀即成弗氏完全佐剂 ( freunds com-
plete adjuvant, FCA)。放置 4℃冰箱保存备用 ,使用
前摇匀 。用 V olume meter测定致炎前大鼠左 、右后
踝关节以下容积 (m l),然后于每鼠左后足趾皮内注
射 0.1m l FCA致炎 ,正常对照组注射 0.1 m l PBS。
1. 4. 2　CoA、LPS诱导大鼠脾淋巴细胞增殖 [ 5] 　造
模后 d 28处死大鼠 ,用 RPM I 1640制备大鼠脾细胞
悬液(1×1010 L -1), 96孔培养板上 ,每孔加入 100
μl脾细胞悬液 (终浓度为 5 ×109 L -1), 50 μl的
ConA(终浓度为 3 mg L -1)或 LPS(终浓度为 6 mg
L -1), 50 μl不同浓度的 TFS,终容积为 200 μl,各
设 5个复孔 ,置 37℃、5% CO 2培养箱培养 48 h ,终
止培养前 6 h,加入 20 μl[ 3H ] -TdR(1 ×104 Bq
wa ll
-1),用多头细胞收集器收集细胞于纤维滤纸
上 ,液闪仪测定 cpm值 。
1. 4. 3　 IL-2的产生与检测[ 6] 　造模后 d 28处死大
鼠 ,用 RPM I 1640制备大鼠脾细胞悬液 (1×1010
L
- 1),在 24孔培养板上 ,每孔加 0.5m l脾细胞悬液
(终浓度为 5×109 L -1), 0.25 m l ConA(终浓度为
3 mg L- 1), 0.25 m l不同浓度的 TFS ,置 37℃、5%
CO2培养箱中 ,培养 24 h,离心 (2 000 r m in-1 , 10
m in),收集上清 , - 20℃保存 。
参照文献制备 ConA活化的小鼠脾细胞 ,用以
检测 IL-2的活性 。在 96孔培养板 ,每孔加入 100μl
活化的小鼠脾细胞悬液 (终浓度为 5 ×109 L -1),
不同稀释度的 IL-2待测上清 , 每稀释度设 5个复
孔 ,置 37℃、5% CO 2培养箱培养 48 h ,终止培养前
6 h,加入 20 μl [ 3H ] -TdR(1 ×104Bq wall-1),用
多头细胞收集器收集细胞于纤维滤纸上 ,液闪仪测
定 cpm值 。
1. 4. 4　 IL-1的产生与测定[ 6] 　造模后 d 28处死大
鼠 ,用 RPM I-1640制备大鼠腹腔巨噬细胞悬液(2×
10
9 L -1)于 24孔培养板上 ,每孔加 1 m l腹腔巨噬
细胞悬液 ,置 37℃、5% CO2培养箱培养 2 h,弃去上
清液 ,并用 5%NBS-DuLbeccos液洗 3遍 ,除去非粘
附细胞 ,获单层巨噬细胞。然后每孔加入 LPS 0.75
m l(终浓度为 6 mg L- 1),不同浓度的 TFS 0.25
m l,置 37℃、5% CO2培养箱培养 48 h,收集上清(含
IL-1活性 ), - 20℃保存待测。
IL-1的检测采用 ConA诱导小鼠胸腺淋巴细胞
[ 3H ] -TdR参入法 , C57 BL /6J小鼠处死后无菌取胸
腺 ,用 RPM I 1640培养液制备胸腺细胞悬液 (2 ×
10
10 L- 1)。于 96孔培养板上 ,每孔加 100 μl不同
稀释度的待测上清 , 50 μl胸腺细胞悬液及 50 μl
C onA(终浓度为 3 mg L - 1),每个稀释度设 5个复
孔 ,置 37℃、5% CO2培养箱培养 48 h,终止培养前
6 h,加入 20 μl [ 3H ] -TdR(1×104 Bq wall-1),用
多头细胞收集器收集细胞于纤维滤纸上 ,液闪仪测
定 cpm值。
1. 4. 5　PGE2的检测　造模后 d 28处死大鼠 ,常规
制备大鼠腹腔巨噬细胞悬液 (1 ×109 L - 1),每管
加 0.5 m l PMΥ悬液(终浓度 5×108 L -1), 0.5 m l
不同浓度的药物 , 37℃水浴振荡 20 m in,加入 1 μl
A23187(1μmo l L -1)振荡 5m in,加 1 mo l L- 1 HC l
酸化至 pH =3,取出 200 μl, - 20℃保存待测 。采用
125Ⅰ-PGE2方免药盒按说明进行测定。
1. 4. 6　浓度设置 　山香圆总黄酮设 5个浓度
(10- 4、10-5 、10- 6 、10-7 、10- 8 mg L -1),阳性对照
药:山香圆 10-4 mg L -1 , A 771726 27 mg L - 1。
1. 5　统计学处理　结果以 –x ±s表示 ,各组均数之
间比较采用 SPSS 11.5统计软件进行方差分析及
Student t检验。
2　结果
2. 1　TFS体外给药对 AA大鼠脾淋巴细胞增殖反
应的影响　致炎后 d 28处死动物 ,用 ConA或 LPS
诱导 AA大鼠脾淋巴细胞增殖 ,与不同浓度的药物
体外培养 48 h。结果见 Tab 1, ConA、LPS诱导的 AA
大鼠脾淋巴细胞增殖反应明显低于正常对照组 (P
<0.01),而 TFS(10- 4 、10- 5 mg L - 1)体外给药可
促进 AA大鼠低下的脾淋巴细胞活性恢复 。提示 ,
TFS对 AA大鼠脾细胞增殖反应有正向调节作用。
Tab 1　E ffeces o f TFS on splenocyte lymphocy tes prol ifera tion
in AA ra ts in vitro(–x±s, n=5)
G roup
Dose /
mg L- 1 C onA /cpm ×10
4 LPS /cpm ×104
Norm al - 7. 23±0. 46** 7. 23±0. 46 　
AA - 5. 04±0. 44△△ 5. 04±0. 44△△
AA+TSF 10 - 4 6. 94±0. 30** 7. 12±0. 59**
10 - 5 6. 70±0. 33** 6. 69±0. 53**
10 - 6 5. 85±0. 45△△ 6. 00±0. 37**△△
10 - 7 5. 39±0. 54△△ 5. 62±0. 97△
10 - 8 4. 92±0. 41△△ 5. 06±0. 96△△
AA +SAC 10 - 4 3. 54±0. 31**△△ 5. 78±0. 60△△
AA +A771726 27 3. 60±0. 41**△△ 5. 72±0. 62△△
△P<0. 05, △△P<0. 01 vs norm al group;**P<0. 01 vsm odel group
2. 2　TFS体外给药对 AA大鼠 IL-1、 IL-2活性的
影响　采用 LPS诱导 AA大鼠腹腔巨噬细胞检测
107 中国药理学通报　ChinesePharmacolog ica l Bulletin　2007 Jan;23(1)
IL-1水平 ,同时采用 ConA诱导大鼠脾细胞检测 IL-
2水平。结果见 F ig 1、2, AA大鼠腹腔巨噬细胞产
生的 IL-1水平明显高于正常对照组 (P <0.01),
TFS(10- 6 mg L -1)可降低 AA大鼠 PMΥ过高的
IL-1产生;AA大鼠脾淋巴细胞产生的 IL-2水平明
显低于正常对照组 (P <0.01), TFS(10- 4 、10-5 、
10
- 6 、10- 7、10- 8 mg L -1)可使 AA大鼠脾淋巴细
胞低下的 IL-2产生恢复接近正常。
F ig 1　E ffects o f TFS on IL-1 syn thesis from peritonea l
macrophages in AA rats in vitro(–x±s, n=5)
△△P <0. 01 vs norma l group;*P<0. 05, **P<0.01 vsm ode l group
F ig 2　Effects of TFS on IL-2 synthesis from splenocy tes
in AA rats in vitro(–x±s, n=5)
△△P <0. 01 vs norm a lg roup;**P<0. 01 vsm odel group
2. 3　TFS体外给药对 AA大鼠腹腔巨噬细胞产生
PGE2的影响　采用放免法检测 AA大鼠腹腔巨噬
细胞产生 PGE2水平 。结果见 Tab 2, AA大鼠腹腔
巨噬细胞 PGE2 水平明显高于正常对照组 (P <
0.01), TFS(10-4 、10- 5、10- 6、10-7 、10-8 、10-9 mg
L
- 1)可明显降低对经 A 23187 (1 μmo l L -1)诱导的
AA大鼠 PMΥ过高的 PGE2产生。
Tab 2　Effects of TFS on PGE2 production in AA
rats in vitro(–x±s, n=8)
G roup
Concen tration /
m g L- 1 PGE2 /ng L
- 1
Norm al - 0. 71±0. 02
AA - 2. 79±0. 04△△
AA+TFS 10 - 4 1. 87±0. 03**
10 - 5 1. 92±0. 06**
10 - 6 2. 13±0. 05*
10 - 7 2. 01±0. 08**
10 - 8 2. 44±0. 10*
10 - 9 2. 34±0. 05*
AA +SAC 10 - 4 2. 02±0. 07**
A 771726 27 1. 51±0. 06**
△△P<0.01 vs norm al group;*P <0. 05, **P <0. 01 vs m odel group
3　讨论
RA患者均有机体免疫功能的紊乱 ,其中 Ts细
胞功能缺陷和单核巨噬细胞异常活化在关节炎发病
中占重要地位 [ 7] 。单核 -巨噬细胞的异常活化导
致 T细胞致分裂素反应降低是 RA病人或 AA大鼠
的共同免疫病理特征 ,而抑制脾细胞的 ConA增殖
反应与其产生大量的 NO和 PGE2等抑制性调质有
关。本研究发现 AA大鼠 ConA、LPS诱导的脾淋巴
细胞增殖功能低下 ,这与文献报道是一致的 [ 8] 。而
TFS(10-4 ～ 10-5 mg L - 1)可明显提高 AA大鼠低
下的脾淋巴细胞增殖反应 ,其是否是通过抑制 Ts功
能 ,改善 Th、Ts的比例平衡而恢复 AA大鼠的异常
免疫功能以及降低 NO和 PGE2生成还有待于进一
步研究。
RA病变中明显增高的炎性细胞因子主要是 IL-
1,其在 RA发生发展中是处于中心地位的促炎性因
子[ 9] 。 IL-1可通过激活单核巨噬细胞 、T、B淋巴细
胞 ,诱导细胞黏附分子 、化学趋化激素及其受体 、血
管生成素和炎症介质(如 PGE2、NO)等的释放 ,引起
RA患者病变关节典型的炎症 、疼痛 、肿胀等症
状[ 10] ;同时 IL-1通过诱导滑膜细胞增殖 ,增加软骨
细胞和滑膜细胞中 MMPs的含量 ,诱导 PGE2和胶
原酶产生 ,引起关节炎 、软骨组织破坏。另外 IL-1
还可激活 NF-κB受体 ,增强破骨细胞活性 ,介导骨
及软骨的破坏并妨碍其修复 ,加重关节损伤 [ 7, 11, 12] 。
IL-2是机体最重要 、最强有力的 T细胞生长因子 ,主
要由激活的 Th细胞分泌 , IL-2除了作为炎性因子损
伤关节滑膜外 ,也可能参与了免疫平衡紊乱的病理
过程 [ 7] 。 PGS特别是 E类 PG S在免疫调节中起重
要作用 , PGE2既是炎症介质 , 又是免疫调节物 ,在
RA发病中 PGE2是主要的炎性介质 ,起着介导疼
痛 、引起炎症反应 、促进骨质破坏 、刺激产生基质金
108 中国药理学通报　ChinesePharmacolog ica l Bulletin　2007 Jan;23(1)
属蛋白酶和抑制 T淋巴细胞凋亡等作用 [ 13] 。本实
验于致炎后 d 28处死动物 , 不同浓度的 TFS与
PMΥ或脾细胞体外培养发现 , TFS(10- 6 mg L - 1)
可降低 AA大鼠 PMΥ过高的 IL-1和 PGE2产生;而
TFS(10- 4 ～ 10- 8 mg L -1)可明显提高 AA大鼠脾
淋巴细胞低下的 IL-2水平 。提示 PMΥ可能是 TFS
发挥作用的一种靶细胞 , TFS通过抑制 PMΥ过高的
IL-1和 PGE2的产生 ,调节细胞因子网络的平衡发
挥对 AA大鼠的治疗作用 。
综上所述 , TFS可能会通过抑制腹腔巨噬细胞
过度分泌的细胞因子及炎症介质 ,改善 AA大鼠异
常的免疫功能 ,从而阻止 AA大鼠免疫病理的持续
和进展 。但机体是一有机整体 ,体内和体外是两种
不同的环境 ,需进一步结合体内研究以探讨 TFS的
实际作用。因此 ,我们将进一步在整体模型上探讨
TFS对 AA大鼠免疫功能的影响 ,这将为其开发成
新药提供理论和实验依据 。
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Effect of tota l flavono ids of turpinia arguta seen on
mi mune function in adjuvant arthritis rats in vitro
ZHANG Lei
1 , LI Jun1 , YU Shi-chun2 , JIN Yong1 , LÜX iong-wen1 , PENG Le i1
(1. School of Pharm acy, AnhuiM edica lUniversity, Hefei　230032, Ch ina;
2. Anhui AN-TECH Med icine and B iolog ica l Co, LTD , Hefei　230061, China)
Abstract:Ami 　To study the e ffec t o f the tota l fla-
vonoids of turpinia arguta seen (TFS) on immune
function of ra ts w ith ad juvan t a rthritis. Methods　Ad-
juvant arthritis (AA)was induced on d0 by in trade r-
ma l injection o f Complete Freund′s A djuvant (FCA),
containing 10 mg hea t-inactive BCG in 1m l paraffin
oi.l O n d 28 afte r immun ization, AA rats w ere killed
by cerv ical deco llation. Immune ce lls(sp lenocy tes and
pe ritonealmacrophages)were obta ined, then cu ltured
in v itrow ith TFS. Some immune indexes w ere detected
respectively such as the splenocy tes pro life ration and
the p roduc tions o f IL-1 and IL-2 w e re measu red by the
method of cell p ro life ra tion, the production o f prosta-
g landin E2 w as de te rm ined by radio immunoassay. Re-
su lts　Compared w ith norm al g roups, the response o f
splenocy tes to ConA and LPS w as lowe red, IL-2 syn-
109 中国药理学通报　ChinesePharmacolog ica l Bulletin　2007 Jan;23(1)
thesisw as dec reased , and IL-1 and PGE2 released from
PMΥwe re e levated. TFS (10-8 ～ 10- 4 mg L- 1) not
on ly increased splenocy tes proliferation, wh ich induced
by ConA and LPS, and IL-2 production of splenocy tes,
but also reduced the eleva ted p roduc tions o f IL-1 and
PGE2 released from peritoned macrophate in AA ra ts in
vitro. Conculsion　TFS cou ld ad just abnorm al im-
mune function in AA rats.
Key words:turp inia a rgu ta seen;arth ritis;ad juvan t
arthritis;immune function
罗格列酮对大鼠脑缺血 /再灌注损伤的保护作用
欧阳昌汉 ,吴基良 ,贺震华 ,石振姣
(咸宁学院药理学教研室 , 湖北 咸宁　437100)
中国图书分类号:R-332;R 322.81;R 329. 24;R 743.310.22;
R 743.310. 53;R 977. 15;R 977.3
文献标识码:A 文章编号:1001-1978(2007)01 - 0110 -05
摘要:目的　探讨罗格列酮对局灶性脑缺血 /再灌注损伤的
保护作用及其机制。 方法　线栓法制备大鼠大脑中动脉局
灶性脑栓塞模型 , 缺血 2 h, 再灌注 24 h。评价神经功能状
态 , 测定脑梗死体积;分光光度法测定组织丙二醛 (MDA)和
一氧化氮(NO)含量以及一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧
化酶(SOD)和髓过氧化物酶(MPO)活性。免疫组化法测定
细胞间粘附分子-1( ICAM-1)表达 , HE染色观察组织病理学
改变。结果　罗格列酮能降低缺血再灌注后脑梗死体积 , 改
善神经功能状态 , 降低脑组织 MDA、NO含量 , 升高 SOD活性
并降低 NOS、M PO活性以及组织 ICAM-1表达 , 同时能减轻
脑组织病理学损害。结论　罗格列酮对大鼠脑缺血 /再灌注
损伤具有明显保护作用 , 其机制与其清除氧自由基和抗炎有
关。
关键词:罗格列酮;脑缺血;再灌注损伤
　　过氧化物酶体增殖激活型受体 γ(perox isome
pro life rator-ac tivated recep torγ, PPARγ)属于 Ⅱ型核
受体超家族成员 ,是一配体激活型转录调控因子 ,调
控多种基因的转录和表达 ,进而促进脂肪细胞分化
和参与脂肪酸代谢基因的调节。随着研究深入 ,近
年来研究发现 , 许多非脂肪组织中也有 PPARγ存
在 ,如心脏 、中性粒细胞 、血管平滑肌等 ,参与体内的
多种生理和病理过程 [ 1] 。动物实验表明 [ 2, 3] ,
收稿日期:2006 - 07 - 13,修回日期:2006 - 09 - 28
基金项目:湖北省自然科学基金资助项目(No 2006ABA332);湖北省
教育厅青年资助项目(No Q200628003)
作者简介:欧阳昌汉(1975 -),男 , 博士 , 讲师 ,研究方向:心脑血管
药理学 , E-m ail:ouych@yahoo. com. cn;
吴基良(1963 -),男 , 教授 , 研究方向:心脑血管药理学 ,
通讯作者 , Tel:0715-8269518, E-m ail:xyw jl@ 163. com
PPARγ选择性激动剂噻唑烷二酮类药物能够保护
缺血 /再灌注所致心肌 、肠以及肾脏损伤 ,对脑缺血 /
再灌注损伤的影响 ,国外已有报道 [ 4, 5] ,但其机制尚
未清楚。罗格列酮 (Rosig litazone, RSG)为一噻唑烷
二酮类药物 ,目前主要作为胰岛素增敏剂用于糖尿
病治疗。本文探讨了局灶性脑缺血 /再灌注时罗格
列酮对脑梗死体积的影响 ,观察其对缺血性脑损伤
是否也具有保护作用。同时 ,为了探讨罗格列酮的
神经保护机制 ,我们对组织抗氧化功能以及 ICAM-
1, NOS和炎性细胞浸润等进行了研究 。
1　材料与方法
1. 1　材料
1. 1. 1　实验动物　健康 W istar♂大鼠 ,体重 250 ～
280 g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提
供。
1. 1. 2　药品及试剂　马来酸罗格列酮 (商品名:文
迪雅 ,批号:05040062),葛兰素史克公司产品 ,临用
前以生理盐水配制成所需浓度;红四氮唑 (2, 3, 5-
Tripheny lte trazo lium ch lo ride, TTC),中国医药上海
化学试剂公司产品;超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化
氮(NO)、一氧化氮合酶 (NOS)、髓过氧化物酶
(MPO)试剂盒 ,南京生物工程研究所产品;ICAM-1
抗体 、SABC免疫组化试剂盒 , 武汉博士德公司产
品。
1. 1. 3　实验仪器　TGL-16G型离心机 (上海医用
离心机厂 )。 756MC型紫外分光光度计 (上海市第
三分析仪器厂 )。医学图像分析系统 (武汉千屏影
像技术公司)。
1. 2　方法
1. 2. 1　局灶性脑缺血 /再灌注模型制备 　参照
Longa等 [ 6]建立方法制备大鼠右侧大脑中动脉栓塞
(m iddle ce rebral arte ry occlusion, MCAO)模型 。主
110 中国药理学通报　Chinese Pharmacologica lB ulletin　2007 Jan;23(1):110 ～ 4