全 文 ：皮肤病与性病　2009年第 31卷　第 4期 论　著
【收稿日期】2009-08-04＊通讯作者
论　　著
含野生滇山茶花提取物医学护肤品辅助治疗干燥性皮炎临床观察
庞　勤 1 , 涂　颖 1 ,徐延华 1 ,王飞飞 2 ,高绍阳 2 ,何　黎1＊(1.昆明医学院第一附属医院皮肤科 , 云南　
昆明　650032;2.昆明滇虹制药有限公司 ,云南　昆明　650106)
摘要:目的　评价含野生滇山茶花提取物医学护肤品(商品名:滇虹润芙防干裂护肤品系列产品)辅助治疗干燥性皮炎的有效
性及安全性。方法　采用治疗前后对照的临床试验方法。经临床诊断及皮肤生理功能测试(水分 , 油脂含量)确诊 30名干燥
性皮炎患者 ,选择滇虹润芙防裂修复霜涂于患处(手或足部 2次 /d,连续使用 15天 , 对侧不使用任何产品。 采用无创性皮肤测
试。在治疗前 、治疗后 7天 、15天 、分别对受试者两侧皮肤进行皮肤生理功能测试 、皮损恢复情况 、受试者对该产品的满意度及
安全性进行评价。结果　观察病例 30例 , 治疗 15天后水分含量由治疗前 20.74±8.84提高到 30.46 ±7.19, 油脂含量由治疗
前 1.77±2.37提高到 7.59±8.38,治疗前后比较 , p<0.005,具有统计学意义。皮损干燥评分由治疗前 1.63±1.10降低到 0.
27±0.64;p<0.005,具有统计学意义;试验未出现任何不良反应。结论　滇虹润芙防干裂护肤品系列产品对干燥性皮炎有辅
助治疗作用 ,安全性好 , 值得临床推广应用。
关键词:干燥性皮炎;医学护肤品;野生滇山茶花提取物;治疗。
中图分类号:R758.1　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1310(2009)04-0001-03
ClinicalobserrationofmedicalskincareproductswiththeextractofCameliaReticulatainadjurantthera-
pyofdrydermatitis
PANGQin, TUYing, XUYan-hua, etal(ThefirstafiliatedhospitalofKunMingMedicalUniversity,Kunming,Yunnan, 650032China)
Abstract:Objective　ToevaluatetheefectivityandsecurityofmedicalskincareproductswiththeextractofCameliaReticulata(Trade
names:dihonanti-crackrepairprofessionalmatch)inadjuvanttherapyofdrydermatitis.Methiods　Multi-centerandrandomclinical
experimentalmethodsbeforeandaftercomparisonwereused.30patientswithdrywereadmittedingroupsforsubjectiveevaluation, clini-
caldiagnosis.ThecreamwiththeextractofCamelliaReticulatawasembrocatedonthehandorfootunilateraly, twiceperday, continued
for15daysandnon-invasiveskintestwasusedbefore, 7days, 15daysaftertherapy.Thephysiologicalfunctionsofpatient, skinrecover-
y, degreeofsatisfactionofpatientsandsecuritywerethentestedincomparisonwithtwosidesofbody.Results　After15daysoftreat-
ment, moisturelevelindrydermatitispatientswasincreasedfrom20.74±8.84 to30.46±7.19, oiltevelwasincreasedfrom1.77±2.
37to7.59±8.38 , p<0.005 , andtherewasasignificantlystatisticaldiference.Therewasnotanyadversereactionunderexamination.
Conclusions　Medicalskincareproductsdihonanti-crackrepairprofessionalmatchhadsafelytherapeuticeffecttodrydermatitis.Itwas
worthtopromotetheusage.
Keyword:Drydermatitis;Medicalskincareproducts;CameliaReticulata.
　　干燥性皮炎是一种常见的皮肤病 , 常常在秋冬等空气干
燥的季节出现 ,气候干燥 , 皮脂腺 、汗腺分泌功能较差 ,皮肤缺
乏滋润 ,经皮流失水分增加 , 皮肤易干燥 ,脱屑。年龄 , 职业如
经常洗手 ,接触洗涤剂上述症状更易出现。市面上有许多这
类型的产品 ,但滇虹润芙防干裂护肤品系列是完全采用云贵
高原特有的野生滇山茶花提取物应用先进的生产工艺加入尿
素 ,维生素 E的医学护肤品 , 因此 , 有必要对含滇山茶花精华
油的医学护肤品(滇虹润芙防干裂护肤品系列产品)评估其
辅助治疗干燥性皮炎的有效性及安全性。
1　对象与方法
1.1　对象　志愿受试者 30例 , 女性 , 年龄为 29 ～ 70岁。自
愿签署知情同意书 ,临床表现为手 、足易出现干燥 、脱屑 、皲裂
客观症状 ,或瘙痒 、刺痛 、紧绷感等主观症状。无创性皮肤生
理功能测试:水份 <35%, 油脂含量 <60% 。
1.2　方法　采用治疗前后自身对照的临床试验。
1.2.1　主要测试产品　滇虹润芙防裂修复霜。
1.2.2　使用方法　受试者外用滇虹润芙防裂修复霜 , 每位受
试者将其涂于手或足干裂部位 , 2次 /d, 对照侧不做任何处
理。使用前 、使用 7天后 、 15天后 , 3次随访复诊。使用期间
不得更换产品。
1.3　效果评价
1.3.1　疗效评价
1.3.1.1　皮肤生物学的定量评价　对皮肤含水量 、皮肤油脂
量检测评价。所有检测均在温度 23 ～ 25℃, 湿度为 50% ～
60%的室内进行 , 运用德国 CK公司无创性皮肤测试仪检测
各项指标 ,每次在同样部位均测量 3次 , 取平均值。
1.3.1.2　皮损改善评价　医师根据患者皮肤情况进行评价 ,
并按以下标准计分:0分:光滑 , 无干燥 、皲裂现象;1分:中度
干燥 、轻微分布均匀的脱屑 , 但不是广泛存在 ,而且鳞屑细小 ,
揭不起来。 2分:中度干燥 、有片状脱屑及细小裂隙 , 裂隙长
度不超过 1厘米 , 深度仅在表皮。 3分:重度干燥 、有片状脱
屑 , 鳞屑周边翘起 , 皮肤表面角化伴裂隙 , 裂隙长度在 1cm-
2cm, 深度在表皮 ,伴疼痛。 4分:极重度干燥 , 有大片脱屑 , 广
泛分离的鳞屑周边裂隙长度在 1cm-2cm,深度在表皮下层 ,
伴疼痛 。
1.3.2　患者对产品满意度的评估　问诊医师及患者分别对
产品色泽 、质地 、使用舒适感 、滋润及湿润程度按优 、良 、中 、差
4级标准进行评价。
1.3.3　安全性评价　在复诊时对受试者进行不良反应评价 ,
询问受试者靶部位原症状是否加重或出现新的皮损 , 如:刺
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论　著 JDermatologyandVenereology, Dec2009, Vol.31, No.4
痛 、红 、瘙痒等症状及是否妨碍日常生活 , 进行评分和记录:重
度 ,不良反应妨碍日常活动 , 受试者自觉症状显著 , 不能忍受 ,
需要停用;中度 , 不良反应妨碍日常生活 , 受试者自觉症状明
显 ,但可忍受 , 无须停用受试产品;轻度 , 易耐受不良反应 ,受
试者偶尔能感受到;无不良反应。
对出现不良反应的受试者 ,医师对其进行人体斑贴试验 ,
以确定不良反应和试验产品的因果关系。负责医师认为受试
者不适合继续试验 ,或受试者要求停止 ,即停止该受试者的试
验 ,并记录停止原因和时间。
1.4　统计学分析　按意向性治疗原则, 全分析集方法收集数
据,运用 spss11.5软件进行计算统计 ,对结果进行方差及秩和检
验, p<0.05认为具有统计学意义,对定量数据进行描述性分析。
2　结果
2.1　一般情况　30例受试者 , 均完成了 15天的临床试验 , 3
例因故退出 ,补做 3例 , 并完成 30例完整临床观察记录。
2.2　疗效评价
2.2.1　皮肤生物学的定量评价
2.2.1.1　治疗前后不同时间段水分比较
表 1 30例受试者治疗侧皮肤水分各参数值观察 n=30, p<0.05
n 水分(均数 ±标准差)
治疗前 30 20.74±8.84
治疗 7天 30 26.58±5.58
治疗 15天 30 30.46±7.19
总 90 25.93±8.37
表 2 30例受试者对照侧侧皮肤水分各参数值观察 n=30 , p<0.05
n 水分(均数 ±标准差)
治疗前 30 20.21±8.87
治疗 7天 30 20.48±8.77
治疗 15天 30 20.48±8.57
总 90 20.29±8.64
　　对表 1和表 2分别做方差分析 , 得出;表 1治疗侧 p<
0.001,有统计学意义 , 即使用前后有差别。由表 2得到 p>
0.05不具统计学意义 , 即排除了季节变换 , 自行修复等因素
对该试验的影响。
2.2.1.2　治疗前后不同时间段油脂比较
表 3　30例受试者治疗侧皮肤油脂
各参数值观察 n=30 , p<0.05
n 油脂(均数 ±标准差)
治疗前 30 1.77±2.37
治疗 7天 30 5.10±6.13
治疗 15天 30 7.57±8.38
表 4　30例受试者对照侧皮肤油脂
各参数值观察 n=30 , p<0.05
n 油脂(均数 ±标准差
治疗前 30 1.83±2.19
治疗 7天 30 1.76±1.86
治疗 15天 30 1.63±1.42
　　对表 3, 表 4做秩和检验得到表 3:p<0.05有统计学意
义 ,即使用前后有差别。表 4, p>0.05不具统计学意义 , 即排
除了季节变换 ,自行修复等因素对该试验的影响
2.2.1.3　皮损干燥程度改善情况　医生临床评价 30例受试
者 ,治疗前 , 皮损干燥程度评分 1.63±1.10;治疗 7天 ,皮损干
燥程度评分 0.60±0.86;治疗 15天 ,皮损干燥程度评分 0.27
±0.64。 p<0.001,具有统计学意义。
2.2.2　受试者自评结果　受试者中 60%认为产品质地为
优 , 26.67%认为质地良好 , 13.3%认为质地一般。 66.67%
认为色泽优 , 70%认为滋润程度明显改善 , 43.33%认为干燥
程度明显改善。
2.2.3　产品安全性评估　治疗前后均未发生不良反应 , 无脱
落病例 。整个研究过程未发生与该试验产品相关的不良反应
事件。
3　讨论
皮肤出现干燥 ,鳞屑 , 甚至皲裂 , 是非常常见的一种皮肤
损害 , 尤其干性皮肤的人患病率较高 , 与内外多种因素分别或
共同作用有关。外界因素如日光 、空气干燥 , 季节变换 , 工作
环境 , 接触洗涤用品等都可能损伤皮肤角质层 , 导致皮肤屏障
功能破坏 ,皮肤抵御外界刺激的能力下降 , 皮肤经皮水分流失
也相应增加 ,内因如随着年龄增长 , 皮脂腺汗腺萎缩 , 功能减
退导致皮脂腺 ,汗腺分泌减少。因此 , 皮肤缺水。少油脂 , 出
现干燥 、脱屑 ,甚至皲裂等症状 , 皮肤屏障受损。在本次实验
中 , 受试者皮肤水分 、油脂含量低于正常水平 ,均说明干燥性
皮炎的皮肤屏障功能受损 ,与文献报道相符。
干燥性皮炎治疗及护理的目的在于:保湿 , 增加皮肤含水
量 , 恢复皮肤屏障功能 ,提高皮肤耐受性 ,因此 , 所采用的护肤
品应该具有保湿 、温和 , 含油脂成分较多的无刺激的营养型美
容品。
该医学护肤品辅助所含的主要有效成分为野生滇山茶花
提取的精华油和尿素及维生素 E, 其中 ,野生滇山茶花提取物
即山茶油 ,是我国特有的木本油脂 , 富含不饱和脂肪酸高达
85%-97%,还含有茶皂素 , 茶多酚 , 鱼鲨烯等。茶油内服具
有降压 ,降脂 ,软化血管等作用。茶油与皮肤的亲和性好 , 有
较好的渗透性。其中的茶皂素是优良的天然表面活性剂 , 具
有乳化 , 分散 ,湿润等表面活性。茶多酚是一种天然的抗氧化
剂 , 可清除自由基 , 保护细胞膜结构 , 抑制组胺释放和细胞因
子生成 ,对抗细菌 、真菌感染 。促进角质细胞生长 , 维持细胞
增殖周期 ,并能有效防止紫外线对皮肤的损伤。 尿素是一种
很好的角质溶解剂 ,无毒 ,无刺激 , 无致菌性 , 能使角质溶解 ,
2
皮肤病与性病　2009年第 31卷　第 4期 论　著
降低皮肤阻力 ,增加皮肤水和作用 , 从而增强药物对皮肤的穿
透性。临床广泛用于治疗角化过度性疾病 , 手足癣 ,掌趾角化
等。维生素 E本身是良好的抗氧化剂 , 具有抗自由基链式反
应作用 ,从而阻止不饱和脂肪酸(亚油酸 , 花生四烯酸等)免
受氧化 ,破坏。维生素 E被皮肤吸收后 , 不仅能减少细胞膜
上脂质和脂蛋白的过氧化 , 保护细胞正常功能 , 还能锁住水
分 , 具有 “皮肤深层保湿剂”的美誉。
滇虹润芙防干裂护肤品系列产品精选海拔 2800m以上
云贵高原高寒地区特有的野生滇山茶花 ,应用先进医药科技 ,
加入尿素 , 维生素 E,配合其他养肤精华 , 深层调理皮肤 , 软化
角质 , 尤其对气候及季节变化所致的手 , 足 ,面部皮肤干燥 , 开
裂等症状有很好的修复效果。值得在临床中推广应用。
基金项目:云南省科技计划项目 (2007CA012)　＊昆医 2006级研究生;＊＊通讯作者:何黎 , E-mail:heli2662@yahoo.com.cn
【收稿日期】2009-06-18
毛囊各细胞体外的不同分离 、培养及其生物学特性
邓利丽 1.2▲ ,刘　玲 1 ,陈欣玥 1 ,何　黎 1▲▲(1.昆明医学院第一附属医院皮肤性病科 ,云南　昆明　650032;2.川北
医学院附属医院皮肤性病科 ,四川　南充　637000)
摘要:目的　进行毛囊各主要生长细胞的体外分离 、培养及生物学特性的观察。方法　对人头皮毛囊组织进行体外钝行分离 、
组织块法及酶消化来获得毛囊外根鞘细胞(ORSC)、毛乳头细胞(DPC)、毛囊真皮鞘细胞(DSC),利用不同的体外培养条件分别
对这三种细胞进行体外增殖培养 , 利用倒置显微镜及免疫组化的方法对细胞来源和生长特性进行观察。结果　组织块法培养
的上 、下段毛囊:上段毛囊来源的 ORSC增殖生长速度较下段毛囊 ORSC快;酶消化法分离得到的 ORSC, 利用 K-SFM培养液
进行培养 ,整体细胞生长呈典型的 “铺路石”样结构 , 可传 4代;酶消化法分离得到的 DSC, 利用 10% ～ 15%低糖培养液进行培
养 ,单个细胞生长状态呈长三角形 ,可传三代;经酶消化法 , 每 3cm×3cm大小的头皮可以获得约 500个完整毛乳头 , 利用 10%
～ 15%低糖培养液进行 DPC培养 , 细胞由毛乳头边缘向四周呈放射状生长 , 成功传代 8代 ,四代内的细胞 “聚集性”生长状态明
显。免疫组化细胞鉴定:ORSCCK19免疫组化染色呈阳性;DPC浆抗波形丝蛋白呈阳性显色;DSC胞漿内高表达波形丝蛋白。
结论　组织块法证明毛囊上段细胞生长情况更为活跃 , 再次验证毛囊干细胞可能存在于毛囊上段 “隆突部”的假说;经钝行分
离和酶消化法结合的方法来进行人头皮毛囊相关细胞的分离和培养 , 所获得三种细胞的细胞活性 、生长增殖情况均较好 , 细胞
鉴定证实细胞来源的可靠性。
关键词:细胞 , 毛囊;体外分离培养;生物特性;研究。
中图分类号:R334+.5;R322.99 +5　　文献标识码:A　　文章编号:1002-1310(2009)04-0003-04
Isolationandcultivationofthecelsofhairfoliclesinvitro, andobservationofthebiologicalcharacteristics
ofthem.
DENGLi-li1.2 , LIULing1 , CHENXin-yue1 , HELi1 , (1.DepartmentofDermatology, theFirstAffiliatedHospitalofKunmingMedi-
calUniversity, KunmingYunnan650032China;2.DepartmentofDermatology, AfiliatedHospitalofChuanbeiMedicalcolege, Nanchong637000China;)
Abstract:Objective　Toisolateandcultivatethemajorgrowthcellsofhairfolliclesinvitro, andobservethebiologicalcharacteristicsof
them.Methods　ApplicationBluntlineseparationinvitro.TissuecrawlingmethodandEnzymaticdigestionmethodwereusedtoobtain
ORSC、DPC、DSC, andcultivatingtheabovecelsbydiferentcultureconditionsinvitro.Invertedmicroscopeandimmunohistochemical
methodswereusedtoobservatethesourceofcelsandthegrowthcharacteristicsofthem.Results　Cultivationoftheupperandunderseg-
mentsofhairfoliclewasusedbyTissuecrawlingmethod:ORSCfromtheupperhairfoliclehadfastergrowthratethantheunder;Appli-
cationofEnzymaticdigestionmethodtogetORSCanduseK-SFMculturemediumtoculturecells.Theoveralcelsgrowthastypical
“cobblestone” -likestructurecanbesubculturedfor4generations.ApplicationofEnzymaticdigestionmethodtogetDSCanduse10%
～ 15% low-Sugarculturemediumtocultivatecells, singlecellgrowlikeLong-trianglecanbesubculturedfor3 generations.After
Enzymaticdigestionmethod, eachsizeof3 ×3cm2 scalpcangetabout500 dermalpapilatissues, theusageof10% ～ 15% low-Sugar
culturemediumtocultivateDPC, DPCgrowingRadiation-likefromtheedgeofthedermalpapilacanbesubculturedfor8generations,
atthesametime, “clustering” growthclearlycanbeseenwithinfourgenerationsofcells.Immunohistochemicalidentificationofcells:
ORSCCK19immunohistochemicalstainingpositive;DPCplasmaanti-vimentin-positivecolor;DSChighcytoplasmicexpressionofvi-
mentin.Conclusions　ByTissuecrawlingmethod, itwasprovedthatcellsfromtheupperhairfolliclehadmoreactivegrowth.Validating
thehypothesisthatthehairfoliclestemcellsmaybeintheupperhairfollicle“bulge” again.Applicationofthebluntlineseparationand
EnzymedigestionmethodtogethairfolliclerelativecelsfromhumanscalpThosethreetypesofcelsalareobtainedbettercelactivity,
growthandproliferation, celidentificationhasconfirmedthereliabilityofthesource.
Keywords:ORSC、DPC、DSC、Hairfolicle
　　以表皮角质形成细胞 、真皮成纤维细胞为种子细胞的商
品化组织工程皮肤(人工皮肤), 在临床上的应用已日渐广
泛。利用人工皮肤在体外进行临床移植 , 可以弥补表 、真皮细
胞数量的不足和细胞外基质缺乏等问题 , 从而帮助较小面积
创面的愈合 [ 1] 。但是遗憾的是 , 迄今为止的人工皮肤中均没
有毛囊等附属器 ,不具有排汗 , 分泌皮脂等功能 , 也没有体毛
的覆盖 ,这不仅影响机体的外在美观 , 而且还影响皮肤的生理
功能 , 所以对毛囊的主要细胞的体外分离培养研究 , 完善人工
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