全 文 ：长寿花的组培快繁
吴丽芳 , 屈云慧 , 杨春梅　 (云南省农科院园艺所 , 昆明　650205)
1　材料和方法
1.1　取材
取幼嫩叶片或 1cm 的节段作为外殖体。
1.2　外殖体灭菌
将外殖体放入稀的洗衣粉水中漂洗 3～ 5 分钟 ,
然后用清水冲洗干净 , 再放入 0.1%～ 0.2%的 Hg-
Cl2 中灭菌 10 ～ 20 分钟 , 取出用无菌水漂洗 3 次 ,
接种于诱导培养基上。
1.3　培养基
用MS 作为基本培养基 , pH=5.8
诱导培养基:BA0.5 ～ 2mg/ L+NAA0.1～ 1mg/ L
增殖培养基:BA0.1 ～ 1mg/ L+NAA0.1mg/ L+
GA0.2mg/ L
生根培养基:1/2MS+NAA0.1 ～ 1mg/ L
1.4　培养条件
光照强度:1 000 ～ 2 000LX　培养温度:25 ～
28℃　光照时间:8～ 10小时
2　结果与讨论
2.1　外殖体灭菌及无菌系的建立
在试验中 , 不同的外殖体灭菌时间和浓度不
同。叶片在 0.1%的 HgCl2 中消毒 10分钟获得最佳
效果 , 成活率在 50%以上 , 而茎段由于组织较老 ,
在上述浓度下 , 几乎全部污染。而在 0.2%的 HgCl2
中灭菌 20分钟 , 效果最佳 , 无污染且成活的外殖
体在 30%以上 , 而叶片在 0.2%的 HgCl2 中 , 90%
以上的叶片死亡 , 可见对不同的外殖体应采用相应
的灭菌方法 , 只有在适宜的灭菌条件下 , 既杀死了
各种微生物 , 而对材料又损伤最小时才可能在外源
激素的作用下 , 迅速恢复分化及生长。 外殖体灭
菌 , 是组织快繁体系建立的第一步 , 也是非常关键
的一步 , 它直接关系组培技术的成败。
2.2　不定芽及愈伤组织的诱导
将灭菌后的外殖体接种在不同诱导培养基上 ,
在BA1.5mg/L+NAA0.4mg/L 时 , 20 天后 , 叶片基
部开始膨大并长出愈伤组织 , 也有部份叶片在切口
处直接产生不定芽 , 当将 BA 浓度降至 0.3 ～
0.5mg/ L时 , 可从愈伤组织上再分化出不定丛芽。
收稿日期:2000-10-15
茎段外殖体在接种后 10 天 , 腋芽开始萌芽 , 1 个月
后 , 叶腋处会继续长出不定丛芽 , 而且随 BA浓度
增高 , 丛芽数增加 , 当 BA 为 2mg/ L时 , 不定芽出
现明显的变异 , 茎秆变扁 , 叶片莲座状 , 在 BA0.5
～ 1mg/ L时 , 茎段产生的不定芽最好。
2.3　愈伤组织及不定芽的快速扩繁
将在诱导中产生的愈伤组织继续在 BA1.5mg/ L
+NAA0.4mg/L 下培养 , 可使愈伤组织不断增殖 ,
但较难分化出不定芽 , 在 BA0.3 ～ 0.5mg/ L 时 , 愈
伤组织则可很快分化出不定芽 , 将不定芽继代于增
殖培养基 , 结果在 BA0.5mg/ L +NAA0.1mg/ L +
GA0.2mg/L时 , 不定芽的增殖速度很快 , 月增殖率
达 6～ 8倍 , 且正常 , 无变异 , 长势良好 , 在继代
增殖阶段 , 加入适量 GA , 对不定芽的生长有明显
促进作用 , 但对愈伤组织及不定芽的分化有一定抑
制作用。通过愈伤组织及不定芽增殖 , 可明显提高
增殖速度 , 缩短组培生产时间。
2.4　组培苗生根
将在继代或诱导中直接产生的高 1 ～ 1.5cm 的
不定芽切下 , 转入 NAA0.1 ～ 1mg/ L的生根培养基
中 , 结果均会长根 , 只是长根时间及数量不尽相
同 , 通过比较 , 在NAA0.5mg/ L时 , 7天即可生根 ,
生根快 , 根数及粗度适量 , 根系良好 , 出苗成活率
高 , 长势快。
2.5　生根苗的过渡
将长根且苗高 2cm 左右的苗从培养基中取出 ,
轻轻洗去基部琼脂 , 注意不要伤根 , 并在 0.5%～
1%的多菌灵或甲基托布津溶液中消毒片刻 , 然后
移栽于珍珠岩∶红土∶腐殖土=1∶1∶1的混合基质中。
在移栽初期 , 注意遮阴 、 保湿;1 周后可适当减少
遮阴增加光照 , 2 周后可揭去遮盖物 , 但要注意避
免阳光直射以免引起叶片枯死或萎蔫 , 在此期间 ,
要加强叶面喷水 , 增加空气湿度 , 同时 5 ～ 7 天喷
施一次氮肥。1 个月后 , 苗高 4 ～ 5cm , 有 4 ～ 5 对
叶时 , 移入小盆定植 , 并加强肥水管理 , 注意摘
心 、 整形 , 半年后即可成形并开花。
参考文献:
〔1〕 　谭文澄 , 戴策刚.观赏植物组织培养技术 〔M〕.
北京:中国林业出版社 , 1991.
212001年第 4 期　　　　　　　　　　　　　　云南农业科技