全 文 ：2012 年 1 月第 29 卷第 1 期
January 2012，Vol． 29，No． 1
·中药质量与控制·
收稿日期:2011 － 06 － 14
作者简介:卢海啸 (1974 －) ，男，博士研究生
通讯作者:高幼衡 (1956 －) ，男，教授，E-mail:gaoyouheng@ yahoo． com． cn
三桠苦叶的化学成分研究
卢海啸， 倪林， 李树华， 张丽媛， 高幼衡
(广州中医药大学中药学院，广东广州 510006)
摘要:【目的】研究三桠苦叶丙酮部位的化学成分。【方法】应用多种色谱方法进行分离和纯化，并利用核磁共振等方法解
析化合物结构。【结果】从三桠苦叶丙酮部位中分离得到 10 个化合物，鉴定了 7 个化合物，它们的结构分别被鉴定为山奈
酚 (Ⅰ) ，槲皮素 (Ⅱ) ，胡萝卜苷 (Ⅲ) ，异鼠李素 (Ⅳ) ，山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷 (Ⅴ) ，山奈酚-3-O-β-D-葡萄
吡喃糖醛酸苷 (Ⅵ) ，3，5，4’-三羟基-8，3’-二甲氧基-7-异戊烯氧基黄酮 (Ⅶ)。【结论】化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅵ为首次从
该属植物中分离得到。
关键词:三桠苦叶 /分离和提纯;三桠苦叶 /化学;核磁共振
中图分类号:R284. 2 文献标志码:A 文章编码:1007 － 3213 (2011)01 － 0056 － 04
三桠苦 ［Melicope ptelefolia (Champ． ex Benth．)
Hartley］ 为 芸 香 科 (Rutaeeae ) 蜜 茱 荑 属
(Melicope)植物。又名:三丫苦、三叉虎等［1］，其
茎、叶入药，性苦、寒，归心、肝经，有清热解
毒、祛风除湿、消肿止痛等功效［2］。三桠苦在岭南
是作为药食同用的一种植物，为广东凉茶中原料药
之一［3］。三桠苦己广泛应用于包括三九胃泰、三九
感冒灵等多种中成药中。现代药理研究表明:三桠
苦有抑菌、抗炎、镇痛、抗氧化、抗癌等作
用［4 － 5］。前期研究已从三桠苦茎、叶的石油醚部位
和乙酸乙酯部位中分离出了 4 个生物碱［6，7］、8 个
黄酮类化合物［8］、1 个香豆素［9］等化学成分。为了
进一步完善三桠苦药材的质量控制研究，同时也为
制定其质量控制标准提供科学依据，本研究对三桠
苦叶丙酮部位进行了系统的化学成分研究，现报道
如下。
1 仪器与试药
1. 1 仪器 Bruker AVANCE AV 400 型超导脉冲傅
里叶变换核磁共振谱仪 ［瑞士 Bruker 公司，溶剂
为氘代二甲亚砜-D6 (DMSO-d6) ］;WQF-410 型红
外光谱仪 (美国热电公司;KBr 压片) ;X-5 显微
熔点测定仪 (北京泰克仪器有限公司) ，温度计未
校正;RE-2000 旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器
厂) ;SB25-12DT超声波清洗机 (宁波新芝生物科
技股份有限公司)。
1. 2 试剂与药材 柱层析硅胶 (200-300 目)和
硅胶 GF-254 薄层层析硅胶均由青岛海洋化工厂分
厂生产;Sephadex LH-20 (Pharmacia) ，ODS-A 反
相填料 (北京绿百草科技发展有限公司) ;三氯甲
烷、甲醇、硫酸、乙醇等试剂均为分析纯。三桠苦
叶于 2008 年 6 月采自广州从化良口镇，经广州中
医药大学中药学院潘超美教授鉴定为芸香科植物三
桠 苦 ［Melicope pteleifolia (Champ. ex Benth．)
Hartley］，植物标本存放于广州中医药大学中药学
院中药化学研究室。
2 方法与结果
2. 1 提取与分离 取三桠苦叶丙酮部位 300 g，经
硅胶柱层析分离，氯仿 ∶ 甲醇 ∶ 水梯度洗脱 (体积
比为 10∶ 0∶ 0 ～ 0∶ 10∶ 0. 1) ，合并相同流分，得 Fra．
1 ～ 9。将 Fra． 2 进行硅胶柱层析分离，得到化合物
Ⅰ (654. 4 mg)、Ⅲ (20 mg)、Ⅳ (505 mg)及一
种混合黄色针状结晶，再将这种黄色混合结晶经反
相 C18 (ODS)柱分离，得到化合物Ⅶ (15 mg)。
将 Fra． 5 经 Sephadex LH-20 柱层析分离，得到化合
物 Ⅴ (3. 6 mg)、Ⅱ (30 mg)。将 Fra. 7 经
Sephadex LH-20 柱层析分离，得到化合物Ⅵ (30. 6
65
广州中医药大学学报
Journal of Guangzhou University of Traditional Chinese Medicine
第 1 期
mg)。
2. 2 结构鉴定 化合物Ⅰ:黄色粉末 (氯仿—甲
醇) ，熔点 (mp)233 ℃ ～ 235 ℃。盐酸—镁粉反
应阳性 (+) ，Molish 反应 (－) ，提示为黄酮类
化合物。核磁共振氢谱 (1H-NMR) (DMSO-d6，
400 MHz)的化学位移值 (δ) (ppm)如下:12. 49
(1H，s) ，10. 79 (1H，s) ，10. 11 (1H，s) ，9. 40
(1H，s) ，8. 05 (2H，dd，J = 2. 0，7. 2 Hz) ，6. 93
(2H，dd，J = 2. 0，7. 2 Hz) ，6. 44 (1H，d，J = 2. 0
Hz) ，6. 19 (1H，d，J = 2. 0 Hz)。核磁共振碳谱
(13 C-NMR) (DMSO-d6，100 MHz)δ (ppm) :
146. 76 (C-2) ，135. 61 (C-3) ，175. 86 (C-4) ，
115. 39 (C-5) ，98. 15 (C-6) ，163. 84 (C-7) ，
93. 43 (C-8) ，156. 13 (C-9) ，103. 00 (C-10) ，
121. 62 (C-1) ，129. 46 (C-2) ，115. 39 (C-3) ，
159. 14 (C-4) ，115. 39 (C-5) ，129. 46 (C-6)。
以上数据与文献 ［10］中山奈酚一致，故鉴定为
山奈酚。
化合物Ⅱ:黄色粉末，熔点 314 ℃ ～ 316 ℃。
盐酸—镁粉反应阳性 (+) ，Molish 反应 (－) ，
提示为黄酮类化合物。1H-NMR (DMSO-d6，400
MHz)δ (ppm) :12. 49 (1H， s) ，10. 79 (1H，
s) ，10. 11 (1H，s) ，9. 40 (1H，s) ，8. 05 (2H，
dd，J = 2. 0，7. 2 Hz) ，6. 93 (2H，dd，J = 2. 0，7. 2
Hz) ，6. 44 (1H，d，J = 2. 0 Hz) ，6. 19 (1H，d，J
= 2. 0 Hz)。 13C-NMR (DMSO-d6，100 MHz) δ
(ppm) :146. 76 (C-2) ，135. 61 (C-3) ，175. 86
(C-4) ，115. 39 (C-5) ，98. 15 (C-6) ，163. 84 (C-
7) ，93. 43 (C-8) ，156. 13 (C-9) ，103. 00 (C-
10) ，121. 62 (C-1) ，129. 46 (C-2) ，115. 39 (C-
3) ，159. 14 (C-4) ，115. 39 (C-5) ，129. 46 (C-
6)。以上数据与文献 ［11］中槲皮素一致，故鉴
定为槲皮素。
化合物Ⅲ:白色粉末 (甲醇) ，Liebermann-
Burchard反应及 Molish反应均显阳性，薄层色谱硫
酸乙醇显色为紫红色。与胡萝卜苷对照品共薄层，
在 3 种不同的展开系统中相对迁移率 (Rf)值及
显色均一致，且红外光谱与胡萝卜苷标准红外光谱
对照一致，故鉴定该化合物为胡萝卜苷。
化合物Ⅳ:黄色针晶 (甲醇) ，熔点 269 ℃。
盐酸—镁粉反应阳性 (+) ，Molish 反应 (－) ，
提示为黄酮类化合物。1H-NMR (DMSO-d6，400
MHz)δ (ppm) :6. 21 ppm (1H，d，J = 2. 0Hz) ，
6. 49 ppm (1H，d，J = 2. 0 Hz) ，7. 77 ppm (1H，
d，J = 2. 4 Hz) ，6. 96 ppm (1H，d，J = 8. 4 Hz) ，
7. 70 ppm (1H，dd，J = 8. 4 Hz，2. 0 Hz) ，3. 86
ppm (3H，s)。13 C-NMR (DMSO-d6，100 MHz) δ
(ppm) :147. 30 (C-2) ，135. 76 (C-3) ，175. 81
(C-4) ，156. 10 (C-5) ，98. 15 (C-6) ，163. 85
(C-7) ，93. 54 (C-8) ，160. 62 (C-9) ，102. 97
(C-10) ，121. 92 (C-1) ，115. 47 (C-2) ，146. 56
(C-3) ，148. 73 (C-4) ，111. 62 (C-5) ，121. 65
(C-6) ，55. 7 (3-OMe)。以上数据与文献 ［12］
中异鼠李素一致，故鉴定为异鼠李素。
化合物Ⅴ:黄色粉末 (甲醇) ，熔点 229 ℃ ～
231 ℃。盐酸—镁粉反应阳性 (+) ，Molish 反应
(+) ，提示为黄酮苷类化合物。1H-NMR (DMSO-
d6，400 MHz) δ (ppm) :6. 2 (1H，d，J = 2. 0
Hz) ，6. 43 (1H，d，J = 2. 0 Hz) ，8. 07 (1H，dd，
J = 2. 0 Hz，7. 2 Hz) ，6. 86 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，
7. 0 Hz) ，6. 86 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，7. 0 Hz) ，
8. 07 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，7. 2 Hz) ，5. 35 (1H，
d，J = 7. 6 Hz) ，12. 60 (1H，s) ，10. 87 (1H，s) ，
10. 17 (1H，s)。13 C-NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ
(ppm) :156. 3 (C-2) ，133. 2 (C-3) ，177. 5 (C-
4) ，161. 2 (C-5) ，98. 7 (C-6) ，164. 1 (C-7) ，
93. 6 (C-8) ，156. 3 (C-9) ，103. 9 (C-10) ，120. 8
(C-1) ，130. 9 (C-2) ，115. 0 (C-3) ，159. 9 (C-
4) ，115. 0 (C-5) ，130. 9 (C-6) ，101. 6 (C-1) ，
75. 8 (C-2) ，73. 0 (C-3) ，71. 2 (C-4) ，67. 8
(C-5) ，60. 2 (C-6)。以上数据与文献 ［12］中
山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷一致，故鉴定为山
奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷。
化合物Ⅵ:黄色粉末 (甲醇) ，熔点 234 ℃ ～
235 ℃。盐酸—镁粉反应阳性 (+) ，Molish 反应
(+) ，提示为黄酮苷类化合物。1H-NMR (DMSO-
d6，400 MHz) δ (ppm) :6. 21 (1H，d，J = 2. 0
Hz) ，6. 43 (1H，d，J = 2. 0 Hz) ，8. 04 (1H，dd，
J = 2. 0 Hz，6. 8 Hz) ，6. 88 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，
6. 8 Hz) ，6. 88 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，6. 8 Hz) ，
8. 04 (1H，dd，J = 2. 0 Hz，6. 8 Hz) ，5. 49 (1H，
d，J = 7. 4 Hz) ，12. 53 (1H，s) ，10. 99 (1H，s) ，
10. 27 (1H，s)。13 C-NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ
(ppm) :156. 3 (C-2) ，132. 9 (C-3) ，177. 2 (C-
4) ，161. 1 (C-5) ，98. 8 (C-6) ，164. 3 (C-7) ，
93. 7 (C-8) ，156. 3 (C-9) ，103. 8 (C-10) ，120. 5
75卢海啸，等． 三桠苦叶的化学成分研究
2012 年第 29 卷
(C-1) ，130. 9 (C-2) ，115. 1 (C-3) ，160. 1 (C-
4) ，115. 1 (C-5) ，130. 9 (C-6) ，101. 0 (C-1) ，
73. 9 (C-2) ，73. 9 (C-3) ，71. 5 (C-4) ，75. 7
(C-5) ，170. 1 (C-6)。以上数据与文献 ［13］
中山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖醛酸苷一致，故鉴
定为山奈酚-3-O-β-D-葡萄吡喃糖醛酸苷。
化合物Ⅶ:黄色针晶 (氯仿) ，熔点 204℃ ～
206 ℃。盐酸—镁粉反应阳性 (+) ，Molish 反应
(－) ，提示为黄酮类化合物。1H-NMR (DMSO-d6，
400 MHz)δ (ppm) :6. 587 (1H，s) ，7. 71 (1H，
dd，J = 2. 4 Hz，8. 8 Hz) ，7. 12 (1H，d，J = 8. 8
Hz) ，7. 71 (1H，dd，J = 2. 4 Hz，8. 8 Hz) ，4. 69
(2H，d，J = 6. 8 Hz) ，5. 487 (1H，t，J = 6. 7 Hz) ，
1. 784 (3H，s) ，1. 756 (3H，s) ，3. 815 (3H，s) ，
3. 845 (3H，s)。13 C-NMR (DMSO-d6，100 MHz)δ
(ppm) :146. 2 (C-2) ，136. 1 (C-3) ，176. 3 (C-
4) ，155. 6 (C-5) ，96. 2 (C-6) ，157. 0 (C-7) ，
128. 5 (C-8) ，147. 7 (C-9) ，103. 3 (C-10) ，
119. 1 (C-1) ，111. 9 (C-2) ，146. 6 (C-3) ，
149. 5 (C-4) ，114. 4 (C-5) ，123. 48 (C-6) ，
119. 7 (C-1) ，65. 7 (C-2) ，138. 3 (C-3) ，
25. 4 (C-4) ，18. 0 (C-5) ，55. 6 (3-OMe) ，
60. 9 (8-OMe)。以上数据与文献 ［14］中 3，5，4-
三羟基-8，3-二甲氧基-7-异戊烯氧基黄酮一致，故
鉴定为 3，5，4-三羟基-8，3-二甲氧基-7-异戊烯氧基
黄酮。
3 讨论
本研究从三桠苦叶丙酮部位中分离得到山奈酚
等一系列黄酮醇类化学成分，这些化学成分多数具
有显著的生物活性。山奈酚、槲皮素、异鼠李素能
通过抑制一氧化氮合成蛋白和 mRNA 的表达，而
产生显著的抗炎活性［15］。山奈酚还具有显著的抗
菌活性［16］，在抗病毒方面，山奈酚在非细胞毒性
浓度能呈浓度依懒性抑制 HepG2 2·2·15 细胞株
HBsAg及 HBeAg 抗原的分泌，且比阳性对照药拉
米夫定的效果还要好［17］。槲皮素可通过抑制肿瘤
血管生成和转移等多种途径来发挥其抗肿瘤的作
用［18 － 19］。以上化合物活性的研究表明:本研究分
离得到的山奈酚、槲皮素、异鼠李素等化合物的生
物活性与三桠苦在临床上的应用一致，说明山奈酚
等化合物可能为三桠苦的活性成分。
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Effect of Temperature and Humidity on Laboratory Animal Welfare
DONG Haoran， WANG Xiao， SANG Chuanlan， CHEN Jia， CHEN Yuan
(Laboratory Animal Center，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006 Guangdong，China)
Abstract:Objective To investigate the effect of temperature and humidity on the laboratory animal welfare．
Methods KM mice were fed under the conditions of different temperature and humidity，and then we observed the
changes of blood routine parameters and serum biochemical indicators of KM mice． Results The results showed
that inappropriate temperature and humidity resulted in the changes of red blood cells count and hemoglobin level in
KM mice． Meanwhile，mean corpuscular hemoglobin (MCH)content and MCH concentration were increased，
serum levels of alanine aminotransferase (ALT) ，aspartate aminotransferase (AST)and albumin (ALB)were
increased，and serum creatinine，urea，uric acid and triglyceride levels and blood glucose were decreased．
Conclusion Inappropriate environment can cause certain damage to liver function of laboratory animal，resulting in
indigestion，malnutrition，anemia，and dehydration in laboratory animal． Therefore，environmental factors are
closely related to animal welfare．
Key words:ANIMAL WELFARE;TEMPERATURE;HUMIDITY;

MICE
(Continued from page 58)
Studies on Chemical Constituents of Leaves of Melicope pteleifolia
(Champ． ex Benth．)Hartley
LU Haixiao， NI Lin， LI Shuhua， ZHANG Liyuan， GAO Youheng
(School of Chinese Herbal Medicine，Guangzhou University of Chinese Medicine，Guangzhou 510006 Guangdong，China)
Abstract:Objective To study the chemical constituents of leaves of Melicope pteleifolia (Champ． ex Benth．)
Hartley． Methods The chemical constituents of leaves of Melicope pteleifolia were isolated and purified by
chromatography，and their structures were identified on the basis of nuclear magnetic resonance (NMR)
spectroscopic evidence． Results Ten constituents were obtained from the acetone-extracts of Melicope pteleifolia，
and seven constituents were identified as kaempferol (Ⅰ) ，quercetin (Ⅱ) ，daucosterol (Ⅲ) ，isorhamnetin
(Ⅳ) ，kaempferol-3-O-β-D-glucopyranoside (Ⅴ) ，kaempferol-3-O-β-D-4C1-galacturonopyranoside (Ⅵ) ，3，
5，4’-trihydroxy-8，3’-dimethoxy-7- (3-methylbut-2-enyloxy) flavone (Ⅶ)． Conclusion Constituents Ⅰ，
Ⅱ，Ⅳ，Ⅵ are obtained from Melicope pteleifolia for the first time．
Key words: LEAVES OF MELICOPE PTELEIFOLIA (CHAMP． EX BENTH．) HARTLEY / isolation ＆
purification;LEAVES OF MELICOPE PTELEIFOLIA (CHAMP． EX BENTH．) HARTLEY /
chemistry;NUCLEAR MAGNETIC RESONANCE
56董浩然，等． 温度、湿度对实验动物福利的影响