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墓头回对HL-60细胞诱导分化作用的实验研究



全 文 :1(尧珍 年第 6卷 6期 中国中医药科技 4 15
数为 18 . 2 d。
4 体会 心脏神经官能症 ,属中医 “ 郁证 ” 、 “ 心悸 ” 、 “ 胸痹 ” 等
范畴 ,先贤对此病证 , 多有论及 。 清代医家王清任提出 了致病
之由是由血府血痕 , 创制了血府逐痕 汤 , 活血 化佼 , 行之有效 ,
少则一 、 二付 , 多则十余付。 笔者受此启发 ,结合临床实践 , 认
为心脏神经官能症 , 其病机 主要是血行痕滞 。 心 主血脉 . 全 身
的血 , 都在脉中运行 ,依赖于心脏的搏动而输送到全身 , 发挥其
濡养作用 。 血 、气贵流通不息 , 若血行察滞 ,心失其职 , 诸症 蜂
起 。 可见 ,血行癖滞是本病发生之关键 , 故当活血化寮为法 , 方
由血府逐淤汤加半夏 . 莲子心 而成 。 方用 当归 、 川 芍 、 赤芍 、 桃
仁 、 红花活血祛痕 ;牛膝通血 脉 , 祛痕血并引痕血下行 , 为方中
主要组成部分 。 气能行血 ,血的循环 ,有赖肺气的敷布 , 肝气的
疏泄 , 即所谓 “气行则血行 ” , 故配柴胡疏 肝解郁 、升达清 阳 ;配
桔梗 , 权壳开胸行气 , 使气行则血行 。 生地黄凉血清热 , 配当归
又能养血润燥 ,使祛痕而不伤阴血 。 用半夏除痰湿 , 通阴阳 , 使
心中之阳渐渐潜藏于 阴 , 而有利 于阴阳协调 。 莲子心 清心 安
神 ,甘草调和诸药 。 全方共凑活血化窟 , 行气祛痰 , 清心安神之
功 .故获 良效 。 另外 , 在 运用本方治疗的同时 , 应注 意精神调
治 ,而有利于病人的完全康复 。
( 1侧列) 年 6 月 10 日收稿 )
墓 头 田 对 H L 一 6 0 佃 胞 诱 导 今 化 作 用 的 实 脸 研 究
万增智 杨文华 史哲新 杨学爽 尹新中 藏力学 王 熠
(天津中医学院第一附属 医院 · 天津 3 0 193 )
1 材料和方法
1
.
1 墓头回 购自河北省 , 品种未鉴定 。
1
.
2 墓头回水煎液的制备 取墓头 回生品 50 9 , 粉碎 , 加蒸馏
水 叹幻而 , 浸泡 30 inI n 后 , 10 ℃水浴蒸 发 , 收集上清液 , 共提取 2
次 ,合并提 取液 . 1以” q ll n , 离 心 20 而 n , 再次 10 ℃水浴蒸 发至
5伍n l , 该药液浓度为 10 % , 高压灭菌后备用 。
1
.
3 细胞与细胞培养 IH 』 一印 细胞引 自中国医学科学院血液
学研究所 , 培养液为 RP M卜 16 10 ( GI BCO 产 品 ) , 加人 巧% 胎牛
血清 , 在含 5% C仇 的 37 ℃温箱内传代培养 。
1
.
4 细胞生长曲 线的测定 收集对数期细胞 ,浓度 为 2 x l了 /
耐 加于 24 孔塑料培养板 中 ( 1问 /孔 ) , 实验组分别加人 l m叮闹 ,
51 们留ml . s m g/ n l l 墓头回水煎液各 1耐 , 每一浓度 6 个孔 , 对照组
加人同体积的培养 液 , 置 5% C仇 , 37 ℃温 箱中培 养 6t1 , 每 日计
数 1次 。
1
.
5 细胞形态学改变 细胞培养 及药物处理同前 。 细 胞培养
第 s d ,收集细胞 , 离心涂片 , 瑞氏染色 , 油镜下观察细胞形 态学
改变 。
1
.
6 峭基四 氮吐蓝 ( N l汀 )还原能 力浏定 将 对数生 长期细胞
按 Z x l扩 / n’l 浓度分装于培养瓶内 , 每瓶 5间 . 梅组平行 2 瓶 , 给
药组加人 11 1 1州间 , 2 111州m1 , 4 111岁m1 浓度的药物各 1问 , 对照组加
人等体积的培养液 , 置 5% C姚 , 37 ℃温箱内培养 。 4h8 后 , 取各
组细胞离心 ,弃上清 ,每组加人 0 . 1% N仔 f 溶液 o . s ml , ’ rP A 溶液
20 而。 37 ℃温育 I卜, 再次离心 , 弃上 清 , 涂 片 , 瑞 氏 染色 , 计数
N盯 阳性细胞 。
1
.
7 吞噬能 力测 定 药物 处理 5d 后 , 收集细胞 , 采 用聚苯乙
烯颗粒法测吞噬功能 , 具体步骤参考韩锐主编的 《抗癌药物研
究与实验技术》一书 。
2 结果
2
.
1 墓头回对 LH 一 印 细胞增殖的影响 在对数生 长期细胞
悬液中加人不同剂量的墓头 回水煎液 , 作用不 同时间后 , 测其
细胞数 。 结果表明 : 墓头 回水煎液对 扭 J 一 印 细胞的增 殖有一
定抑制作用 ,且呈时间及浓度依赖性。
2
.
2 墓头回对 IL 一 印 细胞的诱导分化作用
.2 2
.
1 细胞形态学改变 未经墓头回处理的对 照组 细胞呈未
分化 的状态 , 细胞大 ,胞浆少 , 含有少量 嗜天育颗粒 . 细胞核大
而回 ,部分细胞有核仁 。 而墓头回各组细胞体增大 , 胞浆增 多 ,
核浆比例变小 。 细胞核 由圆形转变为不规则形状 , 少数细胞接
近或转变为杆状或分叶状 。
.2 .2 2 N盯 还原实验 墓 头回实验各组加药后第 5d , 该细 胞
的 N盯 还原能力提高 。 不同浓度 的墓头回对 LH 一 印 细胞 可产
生不同程度的 还原能 力 , 其还 原能力的强弱 与药物浓 度成正
比。 对照组呈阴性改变 。
2
.
2
.
3 吞噬功能 墓头回可提高吞噬功能 , 尤以 8n 斌ml 显著 。
表明墓头回能诱导 LH 一印 细胞向巨噬细胞分化 。
3 讨论 墓头 回为败酱科植物 , 为治疗白血病 的常用 中药 , 其
抗肿瘤作用国 外早有报道 川 。 国内研究表明 : 墓 头 回水提物
(5 n侧闹 )对急性粒细胞性白血病 ( M2 ) 和慢性粒细胞性 白血病
急粒变 ( c M I 一 )A 细胞有 明显杀灭作用 , 抑制率接近 10 % 21[ .
我们的实险也证明墓头 回对 LH 一印 细胞增殖有较明显的抑制
作用 ,且有明显的量效关系 。 墓头 回可 以诱导 LH 一 印 细 胞向
粒系和巨噬细胞分化 ,可提高细胞的吞噬率 。 这与以前的有关
报进相 一致 3[] 。 值得提出的是 , 在本实验 的完成过程中 , 多次
观察到 HL 一印 细胞发生细 胞肿胀 , 染色质浓缩或核碎裂的现
象 , 尤以核碎裂现象更为明显 . 提示墓头回可能具有促 进 ’ LH 一
印 细胞凋亡 的作用 , 其机理有待进 一步研究 。
参考文献
佐藤昭彦 ·东洋医学 ( 日 ) 197 9 ; 7( l ) : 12
孙万里 , 等 . 甘肃中医学院学报 1性月〕 ; 7( 3) : 34
张元杏 , 等 . 中西医结合杂志 1984 ; 4 ( 2) : or
( 1, ) 〕年 l 月 14 日收稿 )