全 文 ：华西药学杂志
W C J·P S 2013，28(3)∶238 ～ 240
基金项目:中国博士后基金面上项目(2011M500898) ;黄山学院博士启动基金项目(2012xkjq002) ;黄山学院大学生创新基金项目
(2012xdkj017)
作者简介:周婧，女，从事天然产物活性研究工作。Email:15212592216@ 163． com
* 通信作者(Correspondent author) ，Email:bsfhs@ yahoo． cn
野生柳叶蜡梅叶挥发油成分的 GC － MS分析及其抗氧化活性
周 婧，钱 超，宋莹莹，张艳敏，毕淑峰*
(黄山学院生命与环境学院，安徽 黄山 245041)
摘要:目的 研究野生柳叶蜡梅挥发油的化学成分及其抗氧化活性。方法 利用 GC － MS 分析挥发油的化学成分，测定各
成分的相对含量;以分光光度法测定 2%挥发油对 ABTS自由基和亚硝酸钠的清除能力。结果 从挥发油中共鉴定了 62 个化
合物，占挥发油总量的 83． 13%。2%挥发油对 ABTS自由基有一定的清除作用，但低于 0． 5 mg·mL －1的 Vit C;对亚硝酸钠的清
除作用高于 0． 5 mg·mL －1的芦丁。结论 柳叶蜡梅挥发油以单萜、倍半萜为主，具有较好的抗氧化活性。
关键词:柳叶蜡梅;挥发油;气质联用;抗氧化活性
中图分类号:Ｒ914 文献标志码:A 文章编号:1006 － 0103(2013)03 － 0238 － 03
Study on chemical constituents of volatile oil from leaf of wild Chimonanthus salicifolicus with
GC －MS analysis and their antioxidant activity
ZHOU Jing，QIAN Chao，SONG Ying － ying，ZHANG Yan － min，BI Shu － feng*
(College of Life and Environment Science，Huangshan University，Huangshan，Anhui，245041 P． Ｒ． China)
Abstract:OBJECTIVE To study chemical constituents of volatile oil from leaf of wild Chimonanthus salicifolicus and their antioxi-
dant activity．METHODS The volatile oil from Chimonanthus saslicifolicus was analyzed by GC － MS and the relative contents of these
components were determined with peak area normalization method． The scavenging capacity against ABTS free radical and sodium nitrite of
2% volatile oil was measured with spectrophotometer． ＲESULTS Sixty － two compounds，which occupied 83． 13% of total constituents，
were identified． The scavenging capacity against ABTS free radical of 2% volatile oil was lower than that of 0． 5 mg·mL －1 Vit C，while the
scavenging capacity against sodium nitrite of 2% volatile oil was higher than that of 0． 5 mg·mL －1 Ｒutin． CONCLUSION The volatile
oil from leaf of wild Chimonanthus salicifolicus was mainly composed of monoterpene and sesquiterpene and has antioxidant activity．
Key words:Chimonanthus saslicifolicus;Volatile oil;GC － MS;Antioxidant activity
CLC number:Ｒ914 Document code:A Article ID:1006 － 0103(2013)03 － 0238 － 03
柳叶腊梅 Chimonanthus salicifolicus Hu 为腊梅
科腊梅属半常绿灌木，为中国特有植物。柳叶蜡梅
是畲族民间应用最广的草药之一［1］，用柳叶腊梅叶
制成的香风茶、石凉茶具有祛风散寒的功效，对防
治感冒、喉咙肿痛、肠胃不适、慢性气管炎等有较好
的疗效［2］。柳叶蜡梅叶揉碎即有浓郁的香味，含丰
富的挥发性成分，曾研究人工种植栽培柳叶蜡梅叶
挥发油化学成分［3 － 4］，但对柳叶蜡梅挥发油活性的
研究报道较少。现对黄山市野生柳叶蜡梅叶挥发油
进行 GC － MS 分析，并以清除 2，2 －连氮基 －双 －
(3 －乙基苯并噻唑啉 － 6 －磺酸)二铵盐(ABTS)自
由基和亚硝酸钠评价挥发油的抗氧化活性，为柳叶
蜡梅的药理研究及资源开发提供依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试药
HP7890 － 5975C气相色谱 －质谱联用仪(美国
Agilent) ;UV754 紫外可见分光光度计(上海精密科
学仪器有限公司)。2，2 －联氮基 －双 －(3 －乙基
苯并噻唑啉 － 6 － 磺酸)二氨盐(ABTS，Ｒegal Bio-
technology Company) ;其余试剂为分析纯;野生柳叶
蜡梅叶(采自安徽省黄山市齐云山山区)。
1． 2 方法与结果
1． 2． 1 超声波辅助法提取挥发油 精确称取粉碎
后的样品 30 g置于烧瓶中，加 210 mL 去离子水，超
声 1 h，用挥发油提取器按水蒸气蒸馏法提取 6 h，得
到具有浓郁香味的淡黄色透明油状物，用无水硫酸
钠干燥，提取率为 1． 09%。用无水乙醇将挥发油稀
释成体积分数 2%的样品，用于抗氧化活性测试。
1． 2． 2 GC － MS 分析条件 选用 HP － 5 MS 弹性
石英毛细管柱(30 m × 0． 25 mm，0． 25 μm) ;高纯氦
气为载气，体积流量为 1． 0 mL·min －1，分流比为
40∶1;进样口温度为 250 ℃;进样量为 0． 5 μL，色
DOI:10.13375/j.cnki.wcjps.2013.03.013
谱柱初始温度为 50 ℃，以 10 ℃·min －1升至 260 ℃，
保持 5 min。电子轰击(EI)离子源，电子能量 70
eV，扫描质量数范围 m/z 35 ～ 450，质谱数据库
NIST08。总离子图见图 1。
图 1 野生柳叶蜡梅叶挥发油的总离子图
Fig 1 Total ion chromatogram of volatile oil from leaf of wild
Chimonanthus salicifolicus
1． 2． 3 GC －MS 分析结果 按设定的 GC － MS 条
件对柳叶蜡梅挥发油进行分析，经 NIST08 谱库检
索、质谱分析和文献比对，确定挥发油的化学成分，
并用面积归一化法计算各组分的相对质量分数。从
挥发油中总分离并初步鉴定了 62 个化合物，占全部
峰面积的 83． 13%，结果见表 1。挥发油中含量较高
的化合物为桉树脑(28． 46%)、龙脑(7． 46%)、α －
蒎烯(4． 07%)、δ － 杜松烯(4. 04%)、α － 萜品醇
(4． 02%)、大根香叶烯 D(3. 89%)、α － 毕橙茄醇
(3． 73%)、Borneol(2. 99%)、β －石竹烯(2． 83%)、
3，7，11，11 － tetramethylbicyclo［8． 1． 0］2，6 － undeca-
diene(2． 47%)、莰烯(1． 88%)、苎烯(1． 59%)、
(+)－ 4 － Carene(1． 51%)、α －水芹烯(1． 46%)、
β －蒎烯(1. 26%)、α －月桂烯(1． 18%)、α －石竹
烯(1. 09%) ，这 17 个主要化合物占全部峰面积的
73. 93%。表明挥发油的主要成分为单萜、倍半萜及
其含氧衍生物，而脂肪酸类成分很少。
表 1 野生柳叶蜡梅叶挥发油的成分及相对含量
Table 1 Constituents and their relative contents in the volatile oil of leaf of wild Chimonanthus salicifolicus
Peak No． 化学成分 相对含量 /%
1 3 －甲基丁醛 0． 01
2 2 －乙基呋喃 0． 01
3 2 －己烯醛 0． 01
4 teresantanane 0． 04
5 3 －崖柏烯 0． 04
6 α －蒎烯 4． 07
7 莰烯 1． 88
8 冬青油烯 0． 58
9 β －蒎烯 1． 26
10 α －月桂烯 1． 18
11 α －水芹烯 1． 46
12 α －萜品烯 0． 06
13 邻异丙基甲苯 0． 36
14 D －柠檬烯 1． 59
15 桉树脑 28． 46
16 罗勒烯 0． 61
17 δ － terpinene 0． 12
18 萜品油烯 0． 08
19 α －芳樟醇 0． 17
20 E － p － menth － 2 － en － 1 － ol 0． 03
21 龙脑 7． 46
22 borneol 2． 99
23 4 －萜品醇 0． 43
24 α －萜品醇 4． 02
25 2，3 －二氢苯并呋喃 0． 03
26 2 － oxabicyclo［2． 2． 2］octan － 6 －
one，1，3，3 － trimethyl
0． 06
27 4，6，6 －三甲基二环
［3． 1． 1］庚 － 3 －烯 － 2 －酮
0． 03
28 Z － 3，7 －二甲基 － 2，6 －辛二烯醛 0． 12
29 香叶醇 0． 14
30 柠檬醛 0． 13
31 乙酸龙脑酯 0． 65
32 4 －乙烯基 － 2 －甲氧基苯酚 0． 04
33 pseudolimonen 0． 62
34 甘香烯 0． 04
35 (+)－ 4 － carene 1． 51
36 5 －甲基 － 2 －(1 －甲基乙烯基)－
4 －己烯 － 1 －醇乙酸酯
0． 18
Peak No． 化学成分 相对含量 /%
37 β －荜澄茄油烯 0． 05
38 β －大马烯酮 0． 01
39 β －波旁烯 0． 03
40 β －榄香烯 0． 17
41 α －香柑油烯 0． 25
42 1，7 － dimethyl － 7 －(4 － methyl － 3 －
pentenyl)－ tricyclo ［2． 2． 1． 0(2，6) ］
heptane
0． 61
43 β －石竹烯 2． 83
44 α －愈创木烯 0． 03
45 (+)－香橙烯 0． 31
46 (E)－ β －金合欢烯 0． 16
47 α －石竹烯 1． 09
48 (3aS，3bＲ，4S，7Ｒ，7aＲ)－ 7 － methyl － 3 －
methylidene －4 －(propan －2 － yl)octahydro
－1H － cyclopenta［1，3］cyclopropa［1，2］
benzene
0． 06
49 1，2，4a，5，6，8a － hexahydro － 4，7 － dime-
thyl － 1 －(1 － methylethyl)naphthalene
0． 21
50 大根香叶烯 D 3． 89
51 3，7，11，11 － tetramethylbicyclo［8． 1． 0］
2，6 － undecadiene
2． 47
52 (－)－ δ －杜松烯 0． 50
53 δ －杜松烯 4． 04
54 1，6 － dimethyl － 4 －(1 － methylethyl)－
(1，2，3，4，4a，7)hexahydronaphthalene
0． 14
55 α －衣兰油烯 0． 11
56 α －榄香油醇 0． 24
57 1，2，3，5，6，7，8，8a － octahydro － 1 －
methyl － 6 － methylene － 4 －(1 － methyle-
thyl)naphthalene
0． 92
58 4，5 － epoxy － 4，11，11 － trimethyl － 8 －
methylenebicyclo(7． 2． 0)undecane
0． 30
59 α －毕橙茄醇 3． 73
60 eudesma － 3，7(11)－ diene 0． 16
61 1 －(1，3a，4，5，6，7 － hexahydro － 4 － hy-
droxy － 3，8 － dimethylazulen － 5 － yl)
ethanone
0． 08
62 顺 －角鲨烯 0． 27
〗
932第 3 期 周 婧，等。野生柳叶蜡梅叶挥发油成分的 GC － MS分析及其抗氧化活性
1． 2． 4 挥发油对 ABTS 自由基清除作用的测定
采用文献方法［5］，并做改进，分别以不同体积 2%挥
发油和 0． 50 mg·mL －1 Vit C 为测试样品和阳性对
照。将等量的 7 mmol·L －1ABTS溶液与 2． 45 mmol·
L －1过硫酸钾混合使之反应，置暗处 12 ～ 16 h。用甲
醇将 ABTS 自由基溶液稀释至其在 734 nm 处吸光
度为 0． 70 ± 0． 02。将不同体积样品液加入 2 mL
ABTS自由基溶液中以稀释，6 min 后测量其在波长
734 nm的吸光度(Ai)、2 mL ABTS 自由基溶液与样
品体积相同甲醇混合后的吸光度(A0)、2 mL甲醇与
不同体积样品液的吸光度(Aj)。清除率 =［(A0 －
Ai + Aj)/A0］× 100%。ABTS 自由基清除法目前已
广泛用于测定生物样品的总抗氧化能力［6］。由图
2A可知:2%挥发油对 ABTS 有一定清除效果，随挥
发油体积的增加，清除率逐渐增加，两者间存在较好
的量效关系，挥发油样品量与清除率间的回归方程
为:Y = 0. 415X + 13． 813(r = 0． 9895) ，清除率为
50%时，样品量为 87． 17 μL。0． 5 mg·mL －1 Vit C
样品量也与清除率间存在较好的量效关系，但其清
除效果优于挥发油，清除率为 50% 时样品量为
28. 75 μL。
1． 2． 5 挥发油对亚硝酸钠清除作用的测定 以不
同体积 2%挥发油和 0． 5 mg·mL －1芦丁为测试样品
和阳性对照测定挥发油对亚硝酸钠的清除率。将
0． 5 mol·L －1柠檬酸钠 －盐酸缓冲液(pH3)5 mL，置
10 mL量瓶中，加入 1 mL 100 mg·L －1 NaNO2 溶液，
加入不同体积挥发油样品，用蒸馏水定容，于 37 ℃
下反应 1 h。取 1 mL 反应液于比色管中，加入
0. 4%对氨基苯磺酸溶液 2 mL 和 0． 2% N － 1 －萘
乙二胺盐酸盐 1 mL，摇匀放置 15 min 后，测定 540
nm的吸光度并计算清除率［7］。由图 2B 可知:2%
挥发油对亚硝酸钠具有明显的清除作用，当样品量
体积为 100 μL时，清除率达 72． 25%。当样品量较
少时，挥发油对亚硝酸钠的清除效果与 0． 5 mg·
mL －1的芦丁相当，但随着样品量的增多，挥发油的
清除效果优于芦丁，样品量越多，两者清除率的差距
越大。样品量与清除率的回归方程为:Y =
0． 887X － 12． 119 (r = 0. 9902) ，清除率为 50%时，挥
发油样品量为 70． 07 μL。
100
80
60
40
20
0
20 40 60 80 100
清
除
率
/%
挥发油
维生素 C
A B
挥发油
芦丁
20 40 60 80 100
80
60
40
20
0
清
除
率
/%
样品量/滋L
图 2 挥发油对 ABTS自由基(A)和亚硝酸钠(B)的清除作用
Fig 2 Scavenging capacity against ABTS·(A)and sodium nitrite
(B)of volatile oil
2 讨论
野生柳叶蜡梅叶挥发油的化学成分以萜类为
主，含量较高的成分(如桉树脑、龙脑、α －蒎烯、δ －
杜松烯、α －萜品醇)均具有应用价值。文中结果与
文献［3］差异较大，而与文献［4］有很大的相似，均鉴
定出了 α －蒎烯、莰烯、冬青油烯、α －萜品醇、D －
柠檬烯、乙酸龙脑酯、桉树脑、α －芳樟醇、大根香叶
烯 D等多种成分，但含量存在差异，这可能与样品
的采集时间、地点、处理方式等有关。2%柳叶蜡梅
叶挥发油就具有较好地清除 ABTS 自由基和亚硝酸
钠的活性，柳叶腊梅叶挥发油可进一步研发成天然
的抗氧化剂。
参考文献:
［1］ 方建新，程国栋． 柳叶蜡梅的特性及其在黄山市的分布与开
发利用现状［J］．安徽农业科学，2009，37(4) :1530 － 1531．
［2］ 李阳春，孙静芸，盛春，等．柳叶腊梅挥发油 GC指纹图谱研究
［J］．中成药，2008，30(8) :1190 － 1192．
［3］ 欧阳婷，麦曦，夏红英，等． 柳叶腊梅挥发油化学成分的 GC －
MS分析［J］．南昌大学学报:理科版，2010，34(1) :78 － 80．
［4］ 史小娟，潘心禾，张新凤，等． 柳叶蜡梅叶挥发性成分的提取
及 GC － MS分析［J］． 中国实验方剂学杂志，2011，17(9) :
129 － 132．
［5］ 杨少辉，宋英今，王洁华，等． 雪莲果体外抗氧化和自由基清
除能力［J］．食品科学，2010，31(17) :166 － 169．
［6］ 郑善元，陈填烽，郑文杰，等． 单丛茶水提物清除 DPPH 和
ABTS 自由基的光谱学研究［J］．光谱学与光谱分析，2010，30
(9) :2417 － 2423．
［7］ 陆占国，李伟，封丹． 莳萝籽精油成分及清除亚硝酸钠研究
［J］．天然产物研究与开发，2010，22:479 － 482．
收稿日期:2012 － 10 － 10
042 华 西 药 学 杂 志 第 28 卷