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银丝草菇孢子萌发的活性



全 文 :银丝草菇饱子萌发的活性
S
.
W
.
Ch执和张树庭
( 香港中文大学生物 系 )
真菌抱子在释放后处于休眠状态 , 这期间生长
发育暂停 ( hT e v e l e i n 等 1 9 8 4 ) . s u s s m a n ( 1 9 6 6 )
发现有两种休眠 : 外来休眠是由于不适当的化学和
物理环境引起 ,外加碳或氮源通常是以诱导萌发 , 如
毛霉 、 酵母均属此类 ; 在另一些真菌中休眠是抱 子
的一种固有特性 , 此种抱子即使在适宜于生长和繁
殖的基质中也不会萌发 , 因此称 固有休眠 . V a n
加 r e er ( 1 9 8 6 ) 对须霉已作了详细的研究 .然而证据
表明 ,毛霉、 酵母和须霉 (hT ve e ze饭等 10 5 4 , v o n
L ae er 1 9 8 6 )中仅为抱子荫发活性的一般机理 .对前
两种真菌的基质中外加葡萄糖 , 并用热冲击 (热剧
变 )处理或在基质中外加一元致酸 ,使得环腺普酸水
平暂眯升高 ( D e w e : ch i n等 1 9 5 4 ; ) , 接着就 激 发
了贮存物质的转化 , 主要是海藻糖 , 通过与环腺着
酸有关的磷酸化作用来调节海藻糖酶 ( hT ve e le in
等1 9 5 4 ; V a n L a e r e 1 9 s 6 ) , 而巧 e v e l e i n ( 1 9 s 4 b ) 提
出一些真菌可能另有一种海藻搪酶 , 一种水解或 习}三
调节酶 . 其中被酶解的海藻箱在细胞质内 , 而海藻
糖酶与细胞壁相联 . 加热或其它一些物理的活化 方
法 ,可能使原生质隔膜的渗透性提高 ( G r进 i川 9即 ,
T h e v el ie n等 19 8 4 .) ` · ` -
除双抱蘑菇外 , 在食用菌中类似详细的研究还
未做过 。 怎样使抱子萌发是自然育种研究中关键!的
问题 . 在蘑菇业中 , 娘丝草菇据说是很有前途的食
用菌 , 本研究就是用一简便迅速的方法使饱子低萌
发率 ( o ~ 2 3肠 )提高 .
水中 , 用最佳温度的热冲击处瑰后气!限泡处理, 时间从 10 分钟至2 4小时 。 经上述方法处理后 , 将大 约
30 。 个抱子均匀地放在培养皿内 , 每 处理重复 2次 .
芽管出现是萌发的依据 。
将泡子贮存半年以上后 , 发现即使经处理其萌
发率仍然很低 。笔者还从试验中得出 ,萌发越早的抱
子会出现更多的萌芽幼体 。 因此可做一试验来测定 。
由生长旺盛菌丝所分泌的易挥发物质是否能促进抱
子萌发 ?用一塑料盒将两培养皿装在一起 , 下面的 ’培
养皿申是了日龄菌丝体 , 上面的培荞皿里是抱子 . 并
以另一盒中下层培养皿里只装纯琼脂基质作对 照 .
还将抱子撒在含有活性炭作为吸收材料的 培 养 皿
中 . 以上各处理重复2次 。
· 为检验 CO :是否是促进袍子蕊发的主要因素 , 进
一步做了下列试验 . 将装抱子的后养皿放在含 C仇
的培养箱中 , 通入不同浓度的混合气休 , 空气 , C q
分别为5 , 1 、 1 : 1 、 1 : 5 。 另将含饱子的结养皿放 入
装有氢氧化钾颗粒的袋中 , 用来吸收放出的 C O 2 .
二 、 结 果
拒抱子在三种基质试验中的萌发率均很低 。 热
冲击 、 浸泡和挥发物质三种物理处理的效果见下图 。
从热冲击处理的曲线中看到 , 萌发是从 2 天后开始
的 , 因此在下面的各处理中 ,萌发率是在 3或 5天后计
算的 。 加热到35 ℃维持10 分钟并浸泡 l天是很有效的
处理方法 ( 25 帕 ) . 在 35 ℃下浸泡30 、 60 分钟的得到
相似结果 。 在双层培养皿叠放的试验中 , 上层放抱
子 . 下层是 7日龄菌丝 , 其效果最佳 , 但萌发率仍低
于 50 帕 。 在放有活性炭的培养皿中 , 抱子没有萌发 。
在CO ,浓度高的培养箱中 , 萌发率下降或役有萌发 。
放在含有氢氧化钾颗粒袋中的饱子 , 作为对照与放
在CO ,中有类似的萌发率 .
一 、 材料和方法
从普通的子实体 ( v o一 1 菌株 ) 用一无菌滤纸
收集抱子 . 抱子放在硅胶袋中 ,贮存温度 4 ℃用琼脂
来作几种培养墓 : 麦芽汁琼脂培养基 、 蔗糖完全 琼
脂培养基 ( R a p o r 和M加 , 19 5 8 ) 和马铃薯葡萄墉
琼脂培养基 . 在这些培养基中于 28 ℃黑暗下 , 萌发
率很低 , 在火后的研究中 , 仪用蘑菇完全基质 . 用
热冲击和浸泡来作试验 , 以未经处理的抱子作对照 .
热冲击处理的温度范围 肠 、 70 ℃ , 间隔为 5 ℃ , 时
间均为 1。分钟 . 浸泡处理的温度保持在30 ℃ , 而时间
1“ 2天 . 首先将带有袍子的滤纸条放入 10 m l 蒸馏
三 、 讨 论
银丝草菇抱子萌发率很低 , 这与 E il 。 七t和hC a -
il e n ( 1 9 8 5 ) 得到的结论一致 。 在基质中的碳氮源
不会使抱子萌发更多 . 因而它是固有型休 眠 . 物理
处理 : 热冲击和浸泡能使抱子萌发率 有 所增 加 .
这些处理可能会提高抱子质膜的渗透能力 , 这样基
质就能更易接近非 调 节 海 藻糖 酶 ( T h eY’ el ie n
1 9 8 4 b )
,或者可能提高抱子内水分的有效率和迁移
率 ,这样各种代谢途径中的酶得到了活化 ( V a n L a -
e r e等 1 9 8 7 ) 。 , ,
在本研究中发现由活菌丝体分泌出的挥发性物
质会促进袍子萌发。 热冲击和浸泡对其亲缘种草稍
一1 0一
起培养 讨银丝草菇抱于的萌岌是一神简单迅 J主的
方嗯i 。 随着萌发宝她提严: , 对其子梅i步行分析就能揭
示银丝草亥加习有种系统 .
屠 薇 摘 译 自 《 么I u s h ,· o o m n e w s l -
e t t e r f o r t h e t r o p l e s 》 V o l . 7 , N o .
2 , 1 9 8 7 , P
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℃ 10分钟
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10分钟
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嘴步薄产峨、
( A )热冲击处理 ( l1) 浸 池处理
+
未天`.口人.二月孟泡℃
钟时
a . 对照
七、 飞O分
e 3 0分
d
.
6 0分
e

2列 、
日_
价和漫雌处理 ( l ) 》粉 发物质
银丝革菇菌株V 。 一 1担抱子萌发
抱子的萌火 ·匕了f倪进作用 , 能促进燕密度饱子的 萌
发 (ch a n g 等 1 9 8钓 热冲击处理的毛凡铆七生长的生
理最佳温度要高 。 布成砰呀个种均为初级 日 宗 配 合
(hC an g 等 1 97 1 ; hC il 等 19 8了) , 可能与双抱蘑 菇
调节抱子萌发的机理 一 ;网 J
我们知道 , 双饱洛菇菌丝休分沁出的且 戍唆是
作为抱子萌发的自健进剂 , 而 C0 2 作为自抑 制剂
( L
o s e l l 9 8 4R o “ t ; 等 29 7 6 、 z , 7 9 ) . c o : 固定后形成草酞
乙醋 ,而草酸乙脂是种唬泊酸脱氢酶的抑制剂 , 一 种
三叛酸循环酶 . 所以在高浓度 C仇下 , 休眠的抱子保
持很低的代谢水不 。 当异戍酸进入抱子后转变成 -
种 CO Z受体 , 并使 C O , 固定形成乙酞辅酶 A . 这样
珑拍酸脱氢酶不被抑回, 贮存的物质海藻糖被塘 酵
解并被移人的三佼峻循环酶分解 . 随着 代谢 活 力
的增加 , 抱子活化并萌发 . 这种用某种刺激荫发 的
方法有保留价值 , 它是提高异核体形成的一种方 法 。
由于出现多种有机体 ,竞争激烈 ,呼吸的产物 CO :分
抑制抱子的萌发 . 两种挥发气体异戍酸和 CO ,之间
的微妙平衡来调节泡子的萌发 .
.简而言之 , 本研究发现同生长旺盛的菌丝体一
生麦粒不同配方制蘑菇种技术
钱玉夫
(浙江平阳农校 )
生麦制作法是指麦粒不经烧煮而制成的蘑菇菌
种 . 此法制作简便 ,制成的菌种生活力强 , 不徒长,
耐贮藏 , 技术掌握得当正品率可达95 肠以上 .
(一 )配方设计 : ①小麦 75 呱 , 腐熟干猪牛粪粉
15 肠 , 石膏 1 . 5 肠 , 石灰 1 . 5 、 2 . 5肠 , 草木灰 1 . 5 肠 ,
碧糠5肠 . ②小麦 75 肠 , 泥炭土粉 15 肠 ,碧糠 5肠 ,石膏
1
.
5帕 ,草木灰 1 . 5帕 , 石灰 1 . 5 、 2 . 5帕 . ⑧大麦80 肠 ,
泥炭土粉或腐熟干猪牛粪粉 1 5肠 , 石膏 1 . 5 肠 , 石灰
1
.
6 ~ 2
.
5肠 , 草木灰 1 . 5呱 . 三种配方含 水量 均为
40 、 46 肠 , 灭菌后 p H 6 . 8 ~ 7 . 2 .
(二 )麦拉处理 : 麦粒 哭袋容显 1邝即封口 , 每
袋约 1 2 . 5公斤 。 先置。 . 2 肠 漂白粉溶液中浸泡 (小
麦浸 2小时 ,大麦浸到、时 ;若不装袋各要多浸 1小时 ) ,
然后移入 3 、 5肠石 灰水中浸泡 (小麦浸 12小时 , 大
麦浸 15 小时 : 不袋袋的要多浸3小时 ) 浸至麦子饱
和 、色转红棕色为度 , 然后捞起沥滴多余 水分 .
(三 )配制方法 : 先将猪牛粪粉或泥炭土 粉 , 碧
糠等混合拌匀 (碧糠预先在 2肠石灰水中浸后沥滴水
分 )麦子先和石灰 、 石督 、 草木灰拌均匀 , 然后将所
有料混合拌匀装瓶 。
(四 )装瓶灭菌 : 每75 。克菌种瓶装 20 。 、 2 50 克
干麦子 , 装至瓶肩为宜 ,瓶肩以上也可用猪牛粪粉或
麦草拌湿封口 , 做成U型接种穴 . 按常规塞棉花塞 ,
高压 ( Z k g c/ m “ )灭菌 2小时 , 或常压灭菌 10 ℃保持
1 2 ” 1 4小时 .
(五 )接种培养 : 用高压灭菌 , 要待磅 针降 至
。 . 5以下时打开锅盖 , 烘千 3~ 4小后时取瓶 ; 常压
灭菌 , 要待灶温降至70 ℃ 以下开灶门 , 降温后出瓶 。
置通风清洁处 48 小时后方可接种 . 由于麦粒种菌丝
生活力旺盛 , 瓶内品温高 , 培养期间又是 7、 9月份高
温期 . 因此 ,培养时只准单瓶立地竖放 , 不可重叠 卧
放 ,并要保持室内通风 、 干燥 . 每周至少易检查一沈 ,
发现杂菌要及时处理 .
一不1一