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不同光质对毛地黄叶愈伤组织培养的影响



全 文 :19 9 4 牛弟 6 期 生韧字余志 息弟 6 2期
不纂光质砂嘎地黄吟愈嘟瓤织婚髓的影响
毛学文 陈 荃 连仲毅 袁惠君
(甘肃天水师专生物 系 , 7 4 1 0 0 1 )
摘要 : 本文通过五 种不同光质诱导毛地黄 叶愈伤 组 分光光度计在 53 5 n m 处比色测得次生代谢产
织的生长和继代培养 , 20 天后测定 不同光质诱导的愈伤 组 物强心昔 。
织 中次生代谢产物的含量 ,进 一步探 讨植物组织培养中光 质 实验结果
的调控作 用 · 1 . 不同光质对毛地黄次生代谢产物含量
关键词 : 光质 次生代谢产物 毛地黄
已知光质会影响植物组织培养过程 中器
官的发生和对愈伤组织的诱导 , 但光质对离体
培养中次生代谢产物的影响未见正式报道 。本
实验以不同的培养基组成 (包括有机成分及激
素配 比 )和光质对毛地黄叶组织进行 了诱导培
养 . 以探讨光质对毛地黄离体培养中强心昔含
量的影响 。
材料和方法
本实验以毛地黄叶为外植体 ,基本培养基
是附加有不同浓度的激素含量的 M S 培养基 ,
起始 p H 值为 5 . 8 , 培养温度 25 士 Z C , 接种后
置 于不同波长的红光 ( 6 3 2 , l m ) 、 绿光 ( 5 2 o n m )
蓝光 ( 4 5 5n m )黄光 ( 5 8 0 n m )和冷白荧光下进
行光照培养 , 每天光照 10 一 12 小时 。 继代一
次 , 2。 天后测定强心昔含量 。
培养基为 :
M S 一 1 M S十 6一 B A O . 5 + 2 . 4一 D 0 . 5
M S 一 2 M S十 6一 B A O . 5十 2 . 4一 D I . 0
M S 一 3 M S + 6一 B A I . 0 + 2 . 4一 D I . 0
M S 一 4 M S 十 6一 B A O . 1十 2 . 4一 D L O
M S 一 5 M S+ 6一 B A O . 5 + 2 . 4一 D O . l
将充分干燥的愈伤组织研碎后 ,放入索氏
提取器中 、 加入一定量的 8( J编乙醇 ,于 85 ℃的
水浴 中 进 行 液 固 萃取 l() 小时 , 提 取 液 加
P b (A
、 沉淀以沉淀色 素及杂质 , 再加 N a : 5 0 、
济液沉淀过觉 丹 ,离心弃去 沉淀 , 上清液经 3 .
三 二硝墓灰 狡和 N a O H 溶液显色 , 用 7 4
的影响
不同光质的处理 ,愈伤组织的生长量和强
心着的积累差异比较大 ,接种 后的前 4 天 、 愈
伤组织的外表无 明显变化 、 处 于静止状态 , 增
重较平稳 , 生长量以白光处理 的最高 , 红光处
理 的最低 ,接种 10 天后 , 愈伤组织急剧分裂 ,
鲜重剧增 、 外表明显看到体积增大 , 20 天后愈
伤组织分裂逐渐下降 ,增重又趋于平稳 , 以白
光为基准看 ,蓝光对细胞的生长和强心昔的积
累均有明显的促进作用 ,绿光 、 黄光次之 , 红光
则有抑制作用 , 如图 1 。
ù一一一
ǎ ,、比尸-澎扮
图 1 . 愈伤组织 中强心昔含 t 与光质的效应
1
. 蓝光 2 . 绿光 3 . 黄光 4 . 红光 5 . 白光 6 . 黑暗
2
. 同一光质 , 不同浓度的激素配 比 对毛
地黄次生代谢产物含量的影响
在同一光质中 , 由于激素浓度配 比的不同
对强心昔含量的影响也不同 , 就蓝光来说 ,它
对强心昔的形成有明显的促进作用 ,但因激素
浓度配比不同 , 促进作用也有区别 , 在 6一 BA
为 0 · s m g / 12 . 4 一 D 为 1 . o m g / l 时强心昔积累
的促进作用最大 ,在 6一 B A 为 0 . l m g I/ 2 . 4一 D
19 9 4 年第 6 期 生物学杂志 总第 6 2期
为 1 . Om g / l 时 ,则抑制强心昔的形成 。 绿光和
黄光促进作用的最佳激素浓度分别是 6 一
BA I
.
o m g / 12
.
4

D l
.
o m g / l 和 6一 B A o . l m g /
12
.
4

D l
.
Om g l/ 时 ,抑制作用的激素浓度分别
为 6 一 B A O . 5 :二 g / 12 . 4一 D O . l m g / l 和 6一 B A I .
o m g l/ .2 4

D l
.
Om g l/
, 而红光在几种激素浓度
配比中除 6一 B A o . sm g / 12 , 4一 D m g / l 时略有促
进作用外 .均丧现 为抑制作用 ,如图 2 。
尹、 尸气 , 声、 Z ,丫声 、尸、 声、 人之浪
、 ó了、,.ó .`产;
厂. ,尹`户,.. 、、`: !
、 和 !又
· 实验报告 ·
牛建宝口 服液对大鼠血
有由基代谢的影响
汪远金 何革非 白玫 许金林
(安徽中医学院生化教研室 , 合肥 23 003 8)
李中南
(安徽中医学院药理教研室 )
. 声 ` 了 。 、 声 、 甲产 丫气丫 . 了六 丫 . r 声 ` 声 ` . , 声 丫力 尸 . 声 , 声 .’ , `
尹咬夕、`、了丫`.、、K户人`、丈,人卜叹;、办
图 2 . 不 l司激素水平 下光质对强 心昔含址的影响
讨论
关于光质对植物组织培养物的诱导 、增殖
和器官的发生的作用已有许多报道 ,我们的实
验结果表明 ,光质对植物次生代谢产物的含量
也有明显的影响 , 不同的光质作用不同 , 同一
光质不同激素浓度的配 比作用也不同 , 蓝光 、
绿光 、黄光对细胞的生长和强心普的积累均有
促进作用 ,红光则有抑制作用 。 每种光质对不
同浓度的激素配比的培养基中的愈伤组织影
响差异很大 ,它们都有最佳的配 比浓度 , 只有
选择适当的浓度才能获得 比较多的强心昔 。
倪德祥等在《光质与培养基器官发生的交
互作用 》的一文中 , 指出蓝光 、绿光 、 黄光对芽
的诱导有促进作用 ,而 红光有抑制作用 ,这与
我们的实验结果一致
. 考文献
[ 1〕倪翻禅 , 《植物生理学报 》 , 19 8 7 . 4 , 3 5 7一 3 6 4
〔2〕倪抽禅 , 《复且大学学报》 , 2 98 5 , 咯: ` 7 4一 4 7 7
【3〕《中草药有效成分的研究 》 . 人民卫 生出版社 , 2 07 一
2 1 ( )
〔们《从毛地黄愈伤组织中橄取总昔的研究 》 , 《生物学杂
志 》 , 9 3 , 2 , 1 5一 1 7
键宝 口服液 由牛鞭 、 构祀 、 桂圆等多种天然
中药研制而成 , 具有滋阳补肾 、 防老补体 等功
能 。 本文进一步观察了键宝 口 服液对大 鼠血
中 L P O 、 SO D 的影响 , 以探讨键宝 门 服 液强
肾壮阳 、 延缓衰老的机制 。
材料与方法
一 、 实验动物分组与给药方法 本实验选
用 w i , t o r 大 鼠 , 雌雄各半 , 由安徽中医学院动
物室提供 , 40 只大 鼠随机均分成 4 组 : 生理盆
水对照组 、 还梢煎组 (由上海黄山制药厂提供 ,
批号 9 1 10 05 ) 、 键宝高剂量组和低剂 境组 。 补
组分别灌胃还精 煎 6 m l / k g 、键宝 低剂 峨 纸
6 n 飞` / k g 和键宝高剂量 x g . z m l / k g , 每日 一 次 ,
连续 14 天后处死 。
二 、样品收集 实验动物用 ] %戊巴比妥
纳腹腔注射麻醉后 , 腹主动脉抽血 , 肝 素抗凝
后取全血 Mfj SO D ,分离 血浆测 I J I,( ) `
三 、 测定方法 SO D NIJ 定 : 参考连苯叹 酚
法 , ’ 。 L P O 测定 : 参与大石诚子法 , ’ 。
实验结果
一 、 键宝口服液对大鼠血 s( 助 活力的影
响 由表 1 可见 , 键宝 门服液不同剂量组 均
显著提高 SO D 活 力 (P < 0 . 01 ) , 与还精煎组
(P < 0
.
05 )相比 , 键宝 口服液提高 SO D 活 力
更加显著 。
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