全 文 :江西中医药2013年1月第1期总44卷第361期
●
Y8-@/¢
●
参薯来源于薯蓣科植物参薯Dioscorea alata L.
的干燥块茎。其块茎中含有薯蓣皂苷元、多糖、多
酚等多种成分。具有健脾、补肺、益精气、消肿、止
痛功效,主要用于脾虛久泻、肺虚喘咳、水肿、小便
不利、肾虚不固的遗精、尿频[1-2]。炒参薯炮制方法
收载于《江西省中药材标准》,但无饮片的质量控制
标准。为了有效控制炒参薯饮片的质量,课题组对
炒参薯饮片的含量测定方法进行了研究,采用紫外
分光光度法测定参薯多糖的含量,从而构建炒参薯
饮片质量标准规范体系,以便科学合理地控制炒参
薯饮片质量,为中医临床和开发应用提供参考。
1 仪器与试药
TU-1901双光束紫外-可见分光光度计(Win5
操作系统);百万分之一电子天平;RE-52A型旋转
蒸发仪。D-(+)无水葡萄糖对照品(中国药品生物
制品检定所,批号:110833-200503,供含量测定
用);硫酸为优级纯,水为三重蒸馏水,其他试剂为
分析纯。样品批号:0707025、0707007、0710009、
0710003、0707001、0802002。
2 含量测定[3-5]
2.1 对照品溶液的制备
精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对
照品 40 mg,置 50 mL量瓶中,加水使溶解并稀释至
刻度,摇匀,即得(每1 mL中含无水葡萄糖800 μg)。
2.2 标准曲线的制备
精密量取对照品溶液 0.5、1.0、2.0、2.5、4.0、5.0
mL,分别置 50 mL量瓶中,各加水稀释至刻度,摇
匀。分别精密量取 2 mL,置具塞试管中,各加入新
配制的 5%苯酚溶液 1.0 mL,混匀,迅速加入硫酸
7.0 mL,摇匀,放置15分钟,取出后置冷水浴中冷却
30分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫外-可见分
光光度法测定,在 490 nm的波长处测定吸光度,以
吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。
2.3 测定法
分别取炒参薯饮片细粉约 1.0 g,精密称定,置
水浴中加热回流两次,每次加80%乙醇100 mL,第1
次3小时,第2次2小时,滤过,残渣置水浴中加热回
流3次,每次加水100 mL,第1次3小时,第2、3次各
2小时,滤过,合并 3次滤液,减压浓缩至 30 mL,加
入 4倍量的无水乙醇,摇匀,静置过夜,溶液离心 5
分钟(3 500转/分),弃去上清液,残渣加 95%乙醇
10 mL洗涤,离心5分钟(3 500转/分),弃去上清液,
残渣加丙酮 10 mL洗涤,离心 5分钟(3 500转/分),
弃去上清液,残渣加水溶解并转移至 200 mL量瓶
中,加水至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液 5 mL
置 100 mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,测定,6
批样品测定结果见表1。
表1 参薯多糖含量测定结果
批号
0707025
0707007
0710009
0710003
0707001
0802002
参薯多糖含量(%)
28.00
23.5
32.40
24.64
26.60
27.9
3 方法学考察
3.1 测定波长的选择
炒参薯饮片含量测定方法研究
★ 田桂红 1 袁桂平 2(1.江西南华医药有限公司 南昌 330006;2.江西省食品药品检验所 南昌 330029)
摘要:目的:建立炒参薯饮片的含量测定方法。方法:采用紫外分光光度法测定参薯多糖的含量。结果:紫外分光光度法
测定出无水葡萄糖在8μg/mL-80μg/mL呈良好的线性关系,平均加样回收率为99.6%(RSD=1.4%)。结论:所建立的定量方
法专属性强,重复性好,可以作为炒参薯饮片的质量控制。
关键词:炒参薯饮片;参薯多糖;含量测定
中图分类号:R284.1 文献标识码:A
·· 65
JIANGXI JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
●
Y8-@/¢
●
征稿启事
《江西中医药》所设的重点栏目有《明医心鉴》、《滕王阁医话》等。《明医心鉴》以介绍名老中医经
验和中医临证心得为主,重点刊载中医关于疑难病的诊疗经验,要求观点、方法新,经验独到。《滕王
阁医话》主要反映中医教学、科研、临床的一得之见,要求以小见大,有感而文,语言生动流畅,可读性
强,富于知识性、趣味性。
取按含量测定方法项下制备的对照品溶液
(800 μg/mL)和供试品溶液按标准曲线的制备方法
于显色后在 550-450 nm的波长范围内进行光谱扫
描,结果对照品溶液与供试品溶液均在490±2 nm的
波长处有最大吸收。故选择 490 nm的波长作为检
测波长。
3.2 耐用性试验
精密称取样品约1.0 g,按含量测定方法项下制
备供试品溶液,分别采用 3种不同厂家的分光光度
计进行测定,结果参薯多糖在不同仪器上测得含量
无显著差异。
3.3 线性关系的考察
精密量取含量测定方法项下的对照品溶液
(800 μg/mL)制备 40 μg/mL的对照品溶液 0.5、1.0、
2.0、2.5、4.0、5.0 mL,分别置50 mL量瓶中,各加水稀
释至刻度,摇匀。分别精密量取 2 mL,置具塞试管
中,各加入新配制的5%苯酚溶液1.0 mL,混匀,迅速
加入硫酸7.0 mL,摇匀,放置15分钟,取出后置冷水
浴中冷却 30分钟,取出,以相应试剂为空白,照紫
外-可见分光光度法测定,在 490 nm的波长处测定
吸光度,以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标
准曲线,得线性方程为 Y=0.0123X-0.0282,r=0.999
6。结果表明D-(+)无水葡萄糖浓度在8-80 μg/mL
呈良好的线性关系。
3.4 精密度试验
取含量测定方法项下的对照品溶液制备40 μg/
mL的对照品溶液,显色后依法测定吸光度,其平均
值为0.458(n=5),结果RSD为1.2%。
3.5 重现性试验
取同一批号样品,按含量测定方法项下方法平
行制备供试品溶液 5份,测得含量的平均值为
20.92%,RSD为1.3%,表明本法重现性良好。
3.6 稳定性试验
取按含量测定方法项下方法制备的对照品溶
液(40 μg/mL)与供试品溶液,按标准曲线的绘制方
法,分别在不同时间测定吸光度,每隔 30分钟测定
一次吸光度,结果在 24小时内样品溶液稳定(RSD
为0.6%)。
3.7 回收率试验
采用加样回收率测定法,精密称取已测定含量
的同一批号样品6份,分别加入对照品溶液(40 μg/
mL)1 mL,依法测定,结果回收率为 99.4%、99.1%、
97.9%、101.6%、100.05%、102.0%,平均回收率
99.6%,RSD=1.4%。
4 讨论
4.1 本文建立炒参薯饮片含量测定有效控制方法,
为科学合理管理参薯炮制品质量,提高参薯炮制品
的生产加工、资源利用和临床合理应用提供科学依
据。
4.2 采用苯酚-硫酸法测定炒参薯中多糖的含量[6],
并参照有关文献[7],表明试验苯酚溶液的浓度,硫酸
的用量,反应温度及时间对实验结果的影响较显
著。同时,课题组对苯酚溶液的浓度、硫酸的用量、
反应温度及时间进行单因素考察,结果显示苯酚溶
液的浓度、硫酸的用量、反应温度及时间分别为
5%、7.0 mL、室温及15分钟较适宜。经方法学考察,
线性关系良好,精密度、稳定性、重现性的RSD均在
2%以内,回收率在 97%-102%之间,且 RSD=1.4。
说明该法操作简单、灵敏度高、准确、可靠,可以很
好地控制炒参薯饮片的质量
参考文献
[1]江西省卫生厅编. 江西省中药材标准(1996年版)[S]. 南昌:江西
科学技术出版社,1996:142.
[2]中国医学科学院药物研究所编. 中药志(第2册)[M]. 北京:人民
卫生出版社,1981:248.
[3]董群,等. 改良的苯酚-硫酸法测定多糖和寡糖含量的研究[J].中
国药学杂志,1996,31(9):505.
[4]贡济宇. 酚硫酸法测定灵芝多糖含量的实验研究[J].长春中医学
报,2002,1(18):45.
[5]徐斌等. 改良苯酚-硫酸法测定苦瓜多糖含量[J].食品科技,2005
(7):79.
[6]姜芳婷,等.山药及其同属植物参薯中多糖含量的测定[J]. ,
2005,15(3):47.
[7]罗毅等.苯酚-硫酸法测定多糖含量显色方式的优选[J].制剂与
工艺,2005,12(1):45.
(收稿日期:2012-10-17)
·· 66