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吉祥草乙酸乙酯提取物抗炎作用及机制研究



全 文 :书收稿日期:2012-08-22; 修订日期:2013-01-08
基金项目:国家自然科学基金( No. 21272136) ;
国家自然科学基金( No. 31070313) ;
湖北省教育厅自然科学基金资助项目( No. Q20111201)
作者简介:付雪娇( 1986-) ,女( 汉族) ,湖北宜昌人,现为三峡大学化学与
生命科学院在读研究生,主要从事天然产物药理研究工作.
* 通讯作者简介:陈剑锋( 1979-) ,男( 汉族) ,湖北宜昌人,现为三峡大学
副教授,博士学位,主要从事天然产物的药理研究与应用工作.
吉祥草乙酸乙酯提取物抗炎作用及机制研究
付雪娇,邹 坤,王桂萍,张 秀,陈剑锋*
(天然产物研究与利用湖北省重点实验室,三峡大学化学与生命科学学院,湖北 宜昌 443002)
摘要:目的 探讨吉祥草乙酸乙酯提取物及该部位分离得到的化合物 RCE - 4 的抗炎活性及机制。方法 采用细菌脂多
糖( LPS) 刺激经佛波酯( PMA) 诱导的人单核细胞 THP - 1 体外炎症模型检测其干预前后上清液中促炎细胞因子( IL -
1β、IL - 6 和 TNF - α) 的分泌量,角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型检测其肿胀抑制率,通过佐剂关节炎模型检测组织内和血
清中 NO的含量。结果 其能显著减少促炎因子的分泌量( P < 0. 001) ,抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀作用( P < 0. 05) ,减
少佐剂性关节炎模型组织内和血清中 NO的含量( P < 0. 01) ,并且抑制作用具有时间和剂量依赖性。结论 吉祥草乙酸
乙酯提取物及 RCE - 4 具有明显的抗炎活性,其作用机制可能与抑制促炎细胞因子和 NO的释放有关。
关键词:吉祥草; 抗炎活性; 促炎性细胞因子; RCE - 4
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2013. 04. 022
中图分类号:R284. 2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 04-0822-03
吉祥草 Reineckia carnea(Andr.)Kunth 为百合科铃兰族吉祥
草属多年生常绿草本植物,是我国苗族人民常用的一种重要中
药[1,2],具有祛风除湿,治疗类风湿性关节炎的功效。近年来,国
内外学者对于吉祥草的临床应用研究较多,但是对于吉祥草抗炎
活性有效部位的相关研究较少。本文首次通过细菌脂多糖
(LPS)刺激经佛波酯(PMA)诱导的人单核细胞 THP - 1 的体外
炎症模型,对吉祥草不同溶剂萃取部位进行体外抗炎作用的筛
选,确定吉祥草具抗炎作用的有效部位为乙酸乙酯部位,并利用
角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型和佐剂关节炎模型对乙酸乙酯提
取物进行体内抗炎活性研究,为吉祥草民间应用提供了理论依
据。
吉祥草乙酸乙酯部位分离得到的活性化合物(1β,3β,5β,
25S)- spirostan - 1,3 - diol1 -[α - L - rhamnopyranosyl -(1→2)
- β - D - xylopyranoside],命名为 RCE - 4,是 1983 由 K. Miyahara
等首次从万年青中分离得到,2008 年邱明华等[3]再次从吉祥草
中分离得到,本实验室也从吉祥草乙酸乙酯部位中分离到[4]。
分子式为 C38H62O12,结构见图 1。目前国内外尚未见到有关化合
物 RCE - 4 的抗炎活性报告,本文拟研究 RCE - 4 对一些促炎性
细胞因子,比如 IL - 6、IL - 1β和 TNF - α的抑制作用,从活性化
合物的层面研究吉祥草的抗炎作用。
图 1 RCE - 4 的化学结构
1 材料与仪器
1. 1 细胞 THP - 1 细胞购自中国科学院上海生命科学研究院细
胞资源中心(编号:TCHu 57) ,按推荐的方法保存、传代及培养。
1. 2 实验动物 昆明雄性小鼠,体质量 18 ~ 22 g;由华中科技大
学同济医学院实验动物学部提供,合格证号:SCXK(鄂)2004 -
2007。
1. 3 药物与试剂 佛波酯 PMA(CAS#16561 - 29 - 8)购自 Pro-
mega公司;脂多糖 LPS(from Escherichia coli 0111:B4)购自 Sigma
- Aldrich;人 IL - 1β ELISA检测试剂盒、人 IL - 6 ELISA 检测试
剂盒以及人 TNF - α ELISA 检测试剂盒购自达科为生物技术有
限公司;人 NO ELISA检测试剂盒购自上海信然生物技术有限公
司。角叉菜胶:Sigma产品;完全弗氏试剂(Sigma 公司) :溶液剂,
10mL /瓶;其它试剂均为分析纯。
1. 4 仪器 ELX800NB 酶标仪(BioTek) ;倒置显微镜(Olympus
CKX41) ;CO2 培养箱(Thermo 3111)。
2 方法
2. 1 吉祥草的提取物及 RCE - 4 的提取与分离 将吉祥草根茎
烘干粉碎(2. 5 kg) ,以 95%的乙醇加热回流提取 3 次,合并提取
液,浓缩成浸膏,加入适量的水溶解,分别以石油醚、乙酸乙酯、正
丁醇萃取,回收溶剂,得石油醚部位浸膏(20. 67 g)、乙酸乙酯部
位浸膏(52. 29 g)、正丁醇部位浸膏(95. 00 g)和水部位浸膏
(56. 34 g)。
取乙酸乙酯部位浸膏 30 g,经反复硅胶柱层析,分别以石油
醚 -乙酸乙酯,石油醚 -丙酮,氯仿 -甲醇梯度洗脱,以及 Sepha-
dexLH - 20 柱层析等方法,分离得到化合物 RCE - 4(10 mg) ,纯
度为 99. 6%。
2. 2 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的影响
2. 2. 1 对 THP - 1 细胞生长状况的影响 应用 MTT 法测定吉祥
草的提取物:石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位和
RCE - 4 对 THP - 1 细胞的细胞毒性。
2. 2. 2 吉祥草的提取物对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 分泌的影
响 将处于对数生长期的人单核细胞 THP - 1(2 × 105 个 /ml)接
种于 24 孔细胞培养板中(1ml /孔) ,12 h 后加入终浓度为 100
nmol /L的 PMA,继续培养 48h,待细胞贴壁后分别添加①空白
组,细胞培养孔中仅加入相同体积的完全培养基;②模型组,于细
胞培养孔中加入终浓度为 1μg /ml LPS;③加药组,于细胞培养孔
中加入终浓度为 1μg /ml LPS,分别加入石油醚提取物(20μg /
ml)、乙酸乙酯提取物(20μg /ml)、正丁醇提取物(20μg /ml)、水部
位提取物(20μg /ml) ;37℃,5% CO2 下培养 12 h 后收取细胞上
清,ELISA试剂盒检测 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α的含量并计算抑
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书制率。利用公式:抑制率(%)=(1 -待测组浓度 /模型组浓度)
× 100%。
2. 2. 3 不同作用时间,乙酸乙酯提取物对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF
- α分泌的影响 步骤同“2. 2. 2”,将加药组设计为:于细胞培养
孔中加入终浓度为 1μg /ml LPS 以及 20μg /ml 的乙酸乙酯提取
物;37℃,5% CO2 下培养不同时间后(2,4,8,12,24 h)收取细胞
上清。
2. 3 对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响 取 50 只昆明雄性小
鼠,称重,随机分成 5 组:空白对照组(生理盐水 0. 4 ml /只)、双
氯芬酸钠肠溶片组(30 mg /kg)、乙酸乙酯提取物高、中、低剂量组
(1 600,800,400 mg /kg)。每天给药一次,连续给药 3 d。末次给
药 0. 5h后于每只老鼠右足趾皮下注射 0. 1 ml 角叉菜胶,3 h 后
剪下其左右足,计算各组小鼠的足趾肿胀度。根据公式:肿胀度
(mg)=右足重量 -左足重量;抑制率(%)=(1 -给药组平均肿
胀度 /模型组平均肿胀度)× 100%。
2. 4 对小鼠佐剂性关节炎的影响 取 72 只昆明雄性小鼠,适应
性喂养 3 ~ 4 天,称重,随机分成 6 组:对照空白组(生理盐水 0. 4
ml /只)、模型对照组(生理盐水 0. 4ml /只)、乙酸乙酯提取物高、
中、低剂量组(1 600,800,400 mg /kg)。每天灌胃给药一次,每次
0. 4mL,连续 28 d。实验第四天开始造模,用 75%酒精对各小鼠
右足趾进行消毒,将 CFA0. 1ml /只注射于除空白对照组外的各右
足趾皮下,空白对照组小鼠则注射生理盐水 0. 1mL /只。禁食 24
h后,于造模后第 28 天称重,摘眼球取血处死小鼠,利用 ELISA
试剂盒检测小鼠血清中和致炎组织中 NO的含量。
2. 5 RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的影响
2. 5. 1 不同作用时间,RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 分
泌的影响 步骤同“2. 2. 2”,将加药组设计为于细胞培养孔中加
入终浓度为 1μg /ml LPS 以及 5μg /ml 的 RCE - 4;37℃,5% CO2
下培养不同时间后(2,4,8,12,24 h)收取细胞上清。
2. 5. 2 不同作用浓度,RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 分
泌的影响 步骤同“2. 2. 2”项,将加药组设计为于细胞培养孔中
加入终浓度为 1μg /ml LPS 以及不同浓度的 RCE - 4(2,5,8
μmol /L) ;37℃,5%CO2 下培养。12 h 后收取细胞上清液,ELISA
试剂盒检测 IL - 1β和 IL - 6 的含量。按以上方法,8 h后收取细
胞上清液检测 TNF - α的含量。
2. 6 统计学处理 应用 GraphPad Prism5. 0 软件进行图表绘制和
统计分析。数据用 珋x ± s表示,组间差异用单因素方差分析,多样
本均数间每两个均数的比较采用 t 检验,P < 0. 05 为差异具有统
计学意义。
3 结果
3. 1 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的影响
3. 1. 1 吉祥草的提取物对 THP - 1 细胞生长状况的影响 如表 1
所示,石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、水部位对经佛波酯
(PMA)诱导的 THP -1细胞毒性。当各部分药物溶度在 20μg /ml
时对细胞生长抑制率较小,故药物作用浓度选择 20μg /ml。
表 1 吉祥草提取物对 THP - 1 细胞生长的抑制率
组别 50 μg·ml -1 20 μg·ml -1 10 μg·ml -1
石油醚部位组 21. 23 10. 24 5. 43
乙酸乙酯部位组 68. 85 13. 95 8. 22
正丁醇部位组 56. 78 20. 34 5. 43
水部位组 22. 89 12. 78 6. 52
3. 1. 2 吉祥草的提取物对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 分泌的影
响 如表 2 所示,LPS 刺激的模型组的 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α
的分泌量较空白组显著增大;乙酸乙酯部位和正丁醇部位对 IL
- 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的有明显的抑制作用(P < 0. 001) ,
并且乙酸乙酯部位的作用更明显,故对其进行药物作用时间梯度
的体外抗炎活性评价。
表 2 吉祥草的提取物对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α
含量变化的影响(珋x ± s) pg·ml - 1
组别 IL - 1β IL - 6 TNF - α
空白组 123. 23 ±12. 45*** 97. 98 ±9. 78*** 342. 56 ±20. 45***
模型组 3897. 45 ±123. 56 4453. 21 ±132. 76 6078. 34 ±98. 87
石油醚部位组 4076. 56 ±120. 57 4321. 78 ±89. 98 5732. 56 ±156. 89
乙酸乙酯部位组 2345. 89 ±108. 45*** 3214. 65 ±176. 56*** 3108. 89 ±156. 98***
正丁醇部位组 2987. 56 ±130. 82*** 3678. 98 ±145. 98*** 4659. 78 ±157. 98***
水部位组 3543. 78 ±78. 34 3543. 78 ±145. 78 5864. 89 ±172. 34
与模型组相比,***P <0. 001,含量极显著的减少;n =3
3. 1. 3 不同作用时间,乙酸乙酯提取物对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF
- α分泌的影响 加入 20 μg /ml 的乙酸乙酯提取物后,于 37℃,
5%CO2 下培养 2,4,8,12,24 h 后收取细胞上清。每个时间段设
3 个复孔。结果如图 2 ~ 4 所示,随着 LPS 刺激时间的延长,IL -
1β、IL - 6 和 TNF - α的分泌量逐渐增大,TNF - α的分泌量在 8h
时达到顶峰,IL - 1β和 IL - 6 在 12 h 时达到顶峰。与模型组相
比,20 μg /ml的乙酸乙酯提取物能的显著抑制 IL - 1β、IL - 6 和
TNF - α的分泌(P﹤ 0. 001) ,并且随着作用时间的延长,分泌量
逐渐减少。作用 24h 后,乙酸乙酯提取物对 IL - 1β、IL - 6 和
TNF - α的抑制率分别为:48. 55%,40. 98%和 60. 23%。
与模型组比,***P﹤ 0. 001
图 2 20μg /ml的乙酸乙酯提取物作用不同时间(4 ~ 24 h)
对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的影响
3. 2 对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响 如表 3 所示,与模型组
比较,乙酸乙酯提取物各剂量均有抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀
作用,剂量在 400 mg /kg 时,抑制率可达 38. 12%(P < 0. 05) ,在
800 mg /kg和 1 600 mg /kg时,抑制率相差不大,分别为:60. 82%
和 61. 34%(P < 0. 01) ,说明吉祥草乙酸乙酯提取物的抗炎活性
存在一定的剂量依耐性,在低剂量范围类,随着浓度的增加其抗
炎活性有所增加,但剂量增加到一定值时,抗炎活性达到坪值。
3. 3 对小鼠佐剂性关节炎的影响 如表 4 所示,佐剂性关节炎模
型组小鼠关节组织内和血清中 NO含量较正常对照组明显升高,
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 4 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 4 期
书这与有关文献报道的结果相符[5],NO参与佐剂性关节炎发病的
病理性损伤过程。乙酸乙酯提取物各剂量组关节组织和血清中
NO含量较模型组明显下降(P < 0. 01) ,表明其对小鼠关节组织
内和血清中 NO生成有抑制作用。
表 3 乙酸乙酯提取物对角叉菜胶致小鼠足趾肿胀的影响(珋x ± s)
组别 剂量 /mg·kg - 1 肿胀度 /mg 抑制率(%)
模型组 - 90. 21 ± 2. 65 -
双氯芬酸钠肠溶片组 30. 00 27. 86 ± 8. 01** 69. 11
乙酸乙酯提取物低剂量组 400. 00 55. 84 ± 1. 76* 38. 12
乙酸乙酯提取物中剂量组 800. 00 35. 34 ± 1. 89** 60. 82
乙酸乙酯提取物高剂量组 1600. 00 34. 87 ± 2. 31** 61. 34
与模型组比较,**P <0. 01;与模型组比较,* P <0. 05
表 4 组织和血清中 NO含量变化的影响(珋x ± s)
组别 剂量 /mg·kg - 1 组织 /μmol·L -1血清 /μmol·L -1
空白组 - 3. 076 ± 0. 51** 2. 55 ± 0. 31**
模型组 - 13. 01 ± 2. 01 10. 23 ± 1. 23
双氯芬酸钠肠溶片组 30. 00 5. 76 ± 1. 01** 5. 06 ± 0. 91**
乙酸乙酯提取物低剂量组 400. 00 8. 28 ± 1. 06** 7. 21 ± 1. 21**
乙酸乙酯提取物中剂量组 800. 00 7. 34 ± 0. 89** 6. 92 ± 0. 41**
乙酸乙酯提取物高剂量组 1600. 00 7. 02 ± 1. 31** 6. 32 ± 0. 61**
与模型组比较,**P <0. 01;n =5
3. 4 RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的影响
3. 4. 1 RCE - 4 对 THP - 1 细胞生长状况的影响 由表 5 所示,
10 ~ 30 μmol /L的 RCE - 4 对 THP - 1 细胞的生长有明显的抑制
作用(P < 0. 001)。2 ~ 8 μmol /L的 RCE - 4 对 THP - 1 细胞的抑
制作用较弱。故“2. 5. 1”实验中 RCE - 4 的浓度选择 5μmol /L,
故 RCE - 4 的低中高剂量组分别选择:2μmol /L,5μmol /L,
8μmol /L。
同时可见 RCE - 4 有明显的抗肿瘤活性,本实验室也对其进
行了抗肿瘤活性评价,其中 Ca Ski 细胞的 IC50为 3. 71μmol /L,
CNE2 细胞的 IC50为 6. 63 μmol /L,RCE - 4 的抗肿瘤活性和抗炎
活性之间的关系值得深入研究。
3. 4. 2 不同作用时间,RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 分
泌的影响 加入 5μmol /L 的 RCE - 4,于 37℃,5% CO2 下培养 2,
4,8,12,24 h后收取细胞上清。每个时间段设 3 个复孔。结果如
图 3 所示,随着 LPS 刺激时间的延长,IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α
的分泌量逐渐增大,TNF - α的分泌量在 8 h时达到顶峰,IL - 1β
和 IL - 6 在 12h时达到顶峰。与模型组相比,5 μmol /L的 RCE -
4 能的显著抑制 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 的分泌(P ﹤ 0. 001) ,
对 TNF - α的抑制作用达到 60%以上。作用 24 h后,RCE - 4 对
IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 的抑制率分别为:37. 42%,35. 27%和
60. 23%。
3. 4. 3 不同浓度的 RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α分泌的
影响 加入不同浓度的 RCE - 4(2μmol /L、5μmol /L、8μmol /L) ,每
个浓度设 3 个复孔。结果表 6 所示,可见随着药物浓度的增大,
RCE - 4 对 THP - 1 细胞产生的 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α抑制率
也随之增大(P﹤ 0. 001)。当 RCE - 4 的浓度为 8μmol /L 时,IL
- 1β、IL - 6 和 TNF - α 的抑制率分别为:35. 52%、40. 33%和
57. 94%。
4 讨论
类风湿关节炎(RA)为慢性反复发作的自身免疫性关节疾
病,近年来,细胞因子(cytokine,CK)的介导作用日益受到重
视[6]。国内外研究表明:RA发病机制中居中心地位的促炎性细
胞因子 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 等在炎症部位的聚集,造成关
节外的损伤表现[7,8]。大量的研究表明,NO 作为一种重要炎症
介质直接参与炎症反应和关节损伤过程,体内 NO 异常升高,可
导致血管过度扩张;同时还可以促进 PGE - 2、MMP -2 和 IL - 1β
等炎症因子的释放,加重炎症反应[9]。临床上治疗 RA的药物主
要有:非甾体抗炎药(NSAIDs)、改变病情抗风湿药(DMARDs)、
糖,皮质激素(GS)、生物制剂。但是这些药物均有一定的副作
用,依从性较差,从而限制了这些药物的使用范围[10,11]。通过广
泛的临床观察发现,中医药疗法不仅可以提高临床疗效,而且能
够减轻西药的毒副反应,因而应用较为普遍。
与模型组比,***P﹤ 0. 001
图 3 5μmol /L的 RCE - 4 作用不同时间(4h ~ 24h)
对 IL - 1β、IL - 6、TNF - α分泌的影响
表 5 RCE - 4 对 THP - 1 细胞生长状况的影响(珋x ± s)
组别 OD值 抑制率(%)
正常细胞 1. 03 ± 0. 06 -
丝裂霉素(50μg /mL) 0. 02 ± 0. 07*** 97. 57
25μmol /L RCE - 4 0. 04 ± 0. 05*** 95. 82
20μmol /L RCE - 4 0. 20 ± 0. 02*** 80. 00
15μmol /L RCE - 4 0. 56 ± 0. 07*** 45. 33
10μmol /L RCE - 4 0. 80 ± 0. 04*** 21. 74
8μmol /L RCE - 4 0. 89 ± 0. 09** 12. 91
5μmol /L RCE - 4 0. 96 ± 0. 05 6. 60
2μmol /L RCE - 4 1. 02 ± 0. 06 0. 97
与正常细胞组比较,**P < 0. 01,***P < 0. 001;n = 6
表 6 不同浓度的 RCE - 4 对 IL - 1β、IL - 6
和 TNF - α的抑制率(珋x ± s)
组别 IL - 1β IL - 6 TNF - α
空白 143.29 ±12.78*** 123.87 ±39.78*** 287.43 ±20.65***
模型 4321.54 ±126.89 3987.98 ±139.56 6178.56 ±98.07
2μmol /LRCE -4 4076.56 ±120.76 3821.56 ±98.23 5832.43 ±87.21
5μmol /LRCE -4 3345.67 ±108.45*** 2865.65 ±123.56*** 3768.23 ±156.98***
8μmol /L RCE -4 2786.91 ±30.82*** 2378.85 ±98.34*** 2598.08 ±127.21***
与模型比较,***P﹤ 0. 001;n =3
吉祥草作为一种重要的中药,在民间应用疗效确切,《本草
纲目》、《中药大词典》中均有记载,具有祛风除湿的功效,可以减
轻类风湿性关节炎病人的病症。本文对吉祥草提取物进行体外
抗炎活性筛选,结果表明乙酸乙酯提取物能显著抑制促炎性细胞
因子 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α 的分泌并具有时间和剂量依耐
性;进而采用角叉菜胶致小鼠足趾肿胀模型,观察小鼠足趾肿胀
度,为其体内抗炎活性的研究奠定基础;通过佐剂性关节炎模型,
表明其可通过抑制 NO的生产来减轻 RA炎症病变程度。同时本
文还对 RCE - 4 进行了体外抗炎活性评价,其能显著抑制促炎性
细胞因子 IL - 1β、IL - 6 和 TNF - α的分泌。
本研究表明:吉祥草乙酸乙酯提取物及 RCE - 4 有显著的抗
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 4 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 4
书炎活性,抑制炎症反应过程中 IL - 1β、IL - 6、TNF - α和 NO的产
生是其发挥抗炎活性的重要原因之一。但其抑制 LPS 诱导炎症
因子和炎性表达的分子机制,RCE - 4 的体内抗炎活性研究以及
RCE - 4 明显的抗肿瘤活性和 TNF - α 抑制活性之间的联系,还
有待进一步研究。
参考文献:
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收稿日期:2012-09-26; 修订日期:2013-01-17
基金项目:河南省重大科技攻关项目( No. 0422031000) ; 国家“重大新药创制”科技重大专项项目( No. 2009ZX09103 - 324)
作者简介:张振强( 1971-) ,男( 汉族) ,河南伊川人,现任河南中医学院科研实验中心副教授,硕士研究生导师,博士学位,主要从事中西医结合脑病基
础与临床研究工作.
* 通讯作者简介:苗明三( 1964-) ,男( 汉族) ,河南新乡人,现任河南中医学院教授,博士学位,主要从事药理、中药药理教学与科研工作.
脑脉舒康胶囊对大鼠血瘀合并短暂性
脑缺血模型血一氧化氮及一氧化氮合酶的影响
张振强,白 明,汪保英,高小玲,宋军营,苗明三*
(河南中医学院,河南 郑州 450003)
摘要:目的 探讨脑脉舒康胶囊对大鼠血瘀合并短暂性脑缺血模型一氧化氮( NO) 及一氧化氮合酶( NOS) 的影响。方法
采用注射地塞米松复制血瘀模型,模型大鼠脑脉舒康胶囊连续灌服 10 d,于第 11 天给药后 1h,结扎大鼠两侧颈总动脉 30
min,制造大鼠血瘀合并脑缺血模型;检测脑匀浆液 NO 及 NOS 的含量。结果 脑脉舒康胶囊可以降低模型大鼠脑组织
NO及 NOS含量。结论 脑脉舒康胶囊可以明显抑制 NO及 NOS的表达,减轻组织结构及功能损伤。
关键词:脑脉舒康胶囊; 血瘀; 短暂性脑缺血; 一氧化氮; 一氧化合酶;
DOI标识:doi: 10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2013. 04. 023
中图分类号:R285. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 04-0825-02
Research of Naomaishukang Capsule on rat stasis model combined transient cerebral is-
chemia in nitric oxide and nitric oxide synthase
ZHANG Zheng-qiang,BAI Ming,WANG Bao-ying,GAO Xiao-ling,SONG Jun-ying,MIAO Ming-san*
( Henan College of TCM,Zhengzhou Henan 450003,China)
Abstract: Objective To study the effects of Naomaishukang Capsule on rat stasis model combined transient cerebral ischemia of
nitric oxide and nitric oxide synthase.Methods using injection of dexamethasone to replicate blood stasis model,model rats were
fed Naomaishukang Capsule for 10d,on the 11d,after the rats were fed drugs 1h,both sides of the common carotid artery of rats
were ligatured for 30 min to make cerebral ischemia model; rat brain tissue was homogenated,nitric oxide and nitric oxide synthase
content of brain homogenate were measured. Results Naomaishukang Capsule can can reduce the content of nitric oxide and nitric
oxide synthase of model rats. Conclusion Naomaishukang Capsule can significantly refrain the expression of nitric oxide and nitric
oxide synthase,and relieve the damage of issue structure and function greatly.
Key words: Naomaishukang Capsule; Blood stasis; Transient cerebral ischemia; Nitric oxide; Nitric oxide synthase
脑血管疾病是神经系统常见病和多发病,其中缺血性脑血管 病占所有脑血管病的 70%[1]。中医药在预防和治疗此类疾病中
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL. 24 NO. 4 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 4 期